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文档简介

回 顾,2.1.2植物细胞工程的实际应用,一、植物繁殖的新途径:,1.微型繁殖: (1)微型繁殖技术:快速繁殖优良品种的植物组织培养技术 (2)特点:保持优良品种的遗传特性;高效快速地实现种苗的大量繁殖,2.作物脱毒: (1)材料: 无病毒的茎尖 (2)脱毒苗: 切取茎尖进行组织培养获得,3.人工种子: (1)特点:后代无性状分离;不受气候,季节和地域限制 (2)技术:植物组织培养. (3)结构:人工种皮、 胚乳、胚状体或不定芽或顶芽或腋芽.,二、作物新品种的培育:,1.单倍体育种: (1)方法:花药的离体培养;秋水仙素诱导 (2)优点:后代都是纯合体,稳定遗传;明显缩短育种年限,2.突变体的利用: (1)产生: 植物组织培养 (2)利用: 筛选对人们有利突变体,进而培育新品种,三、细胞产物的工厂化生产,1.种类:蛋白质,脂肪,糖类,药物,香料,生物碱等. 2.技术:植物的组织培养.,2.2 动物细胞工程,2.2.1 动物细胞培养和核移植技术,植物细胞工程常用的技术手段有哪些?,那么动物细胞常用的技术手段呢?,植物组织培养 植物体细胞杂交,问题探讨,动物细胞工程的技术手段,动物细胞培养、动物细胞核移植、 动物细胞融合、生产单克隆抗体等,动物细胞工程技术的基础,动物细胞培养,从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。,原理:,动物细胞培养,细胞增殖,动物胚胎或幼龄动物的组织、器官(取材),细胞悬液,10代细胞,传代培养,无限传代,单个细胞,加培养液,(分解细胞间的蛋白),过程:,动物组织细胞间隙中含有一定量蛋白质,细胞株和细胞系的区别:,1、遗传物质:不同,2、培养代数:不同,细胞株:10到40、50代的细胞, 遗传物质 没发生改变。,细胞系:超过50代的细胞,遗传物质发生 改变,可无限增殖。,原代培养: 传代培养:,原代培养与传代培养的区别,分装之前,10代以前,分装后继续培养,10代以后,1、无菌、无毒的环境:,动物细胞培养的条件,添加一定量的抗生素 定期更换培养液 培养液和培养器具无菌处理,动物细胞培养的条件,1、无菌、无毒的环境: 2、营养:,补充合成培养基中缺乏的物质,葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、促生长因子、动物血清、血浆等,培养基的不同是动物细胞培养和植物组织培养最重要的区别,动物细胞培养的条件,1、无菌、无毒的环境 2、营养 3、温度和PH,36.5 +0.5度 PH为7.2-7.4,动物细胞培养的条件,1、无菌、无毒的环境 2、营养 3、温度和PH 4、气体环境:,O2和CO2,(95%空气和5% CO2 ),2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织 做动物细胞培养材料?,1、较植物组培培养基有何独特之处?,独特之处有: 1、液体培养基. 2、成分中有动物血清等.,这些组织或器官上的细胞生命力旺盛,分裂能力强,3、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞?,防止细胞间接触抑制现象,使细胞与培养液更充分接触,4、动物细胞培养能否像绿色植物组织 培养那样最终培养成新个体?,不能,动物细胞培养只能使细胞数目增多,而不能发育成个体,5、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗?,能,6、动物细胞培养过程中特别要注意什么?,注意时间的控制,7、能够用胃蛋白酶代替胰蛋 白酶吗?为什么?,不能,因为两者的最适PH不同,而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近,动物细胞培养,植物组织培养,植物细胞的全能性,细胞株、细胞系,植物体或组织,快速繁殖、培育无病毒植株等,葡萄糖、动物血清,蔗糖、植物激素,液体培养基,固体培养基,细胞增殖,培养结果,培养目的,培养基特有成分,培养基性质,原理,(1)生产蛋白质生物制品:病毒疫苗、干扰素、 单克隆抗体等。 (2)培养健康细胞用于烧伤病人皮肤移植 (3)用于检测有毒物质 (4)用于生理、病理、药理等方面的研究,动物细胞培养的应用,如何使动物细胞的全能性表达出来?,利用动物细胞核移植技术,动物核移植:,将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体。分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植(难度高),用核移植的方法得到的动物。,克隆动物:,记一记,动物体细胞核移植技术,黑面绵羊去核卵母细胞,白面绵羊乳腺细胞核,重组细胞,动物细胞培养 (或早期胚胎培养),早期胚胎,胚胎移植,另一头绵羊的子宫,妊娠、出生,克隆羊多利,细胞核移植,1、卵母细胞为减数第二次分裂中期的次级卵 母细胞的原因?,细胞比较大,易操作;细胞质中含有使体细胞核全能性表达出来的物质,3、克隆过程运用的技术手段?,动物体细胞核移植、动物细胞培养和胚胎移植,4、多利的大部分性状与谁一样?,白面绵羊,5、结论?,高度分化的体细胞核具有全能性,克隆动物的研究意义,1.克隆动物作为生物反应器,生产医用蛋白 2.改良动物品种 3.作为异种移植的供体 4.保护濒危动物,体细胞核移植技术存在的问题,1.许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷,如体型过大,异常肥胖,发育困难,免疫失调等。 2.成功率非常低 3、克隆动物食品的安全性问题。,1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞( ) A细胞系 B细胞株 C原代细胞 D传代细胞,2、动物细胞工程技术的基础是 ( ) A.动物细胞融合 B.单克隆抗体 C.胚胎移植 D.动物细胞培养,A ),D,3.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于 A.培养基不同 B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行 C.动物细胞可以传代培养,而植物细胞不能 D.动物细胞能够大量培养,而植物细胞只能培养成植株。,A,教学反馈,4、一般说来,动物细胞体外培养需要满足以下条件( ),无毒的环境 无菌的环境 培养基需要加入血清 温度与动物体温相似 需要O2,不需要CO2 CO2能调节培养液PH,A、 B、 C、 D、 ,D,5、动物细胞培养的特点( ) 细胞贴壁 有丝分裂 细胞分化 接触抑制 减数分裂 原代培养一般传110代 A、 B、 C、 D、,A,7.动物细胞培养与植物细胞培养的重要 区别在于( ) A.培养基不同; B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行; C.动物细胞可以传代培养,而植物细胞不能; D.动物细胞能够大量培养,而植物细胞只能培养成 植株。,A,8.关于动物细胞培养的有关叙述,正确的是( ) A.细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡过程中 B.动物细胞培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、 无机盐、生长素和动物血清等 C.动物细胞培养的目的只是获得大量的细胞分泌蛋白 D.动物细胞培养前和培养过程中都要用胰蛋白酶处理,D,9.下列哪项不属于体细胞核移植技术的 应用( ) A.加速家畜遗传改良进程,促进优良畜群繁育 B.保护濒危物种 C.获得组织器官异体移植的供体 D.大量产生紫杉醇,D,10、下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此回答: (1)容器A中放置的是动物器官或 组织。它一般取自_。 (2)容器A中的动物器官或组织首先要进行的处理是 ,然后用_ 酶处理,这是为了使细胞分散开来,这样做的目的是 。,动物胚胎或幼龄动物,

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