生物：《检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质》课件(新人教版必修1).ppt

必修一实验二,检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质,一.实验原理： 某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。如： .还原性糖的鉴定： 还原性糖+ .脂肪的鉴定： 脂肪+ 脂肪+ .蛋白质的鉴定： 蛋白质+ 淀粉 +,斐林试剂,砖红色沉淀,苏丹,橘黄色,苏丹,红色,双缩脲试剂,紫色,碘,蓝色,二.目的要求： 尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质,四.实验过程:,1.还原糖的鉴定,三.材料用具:,略,含糖量较高的白色或近于白色的植物组织(排除色 素对显色的干扰)，苹果、梨最好 。,制备组织样液：,制浆：去皮、切块、研磨,过滤：（用单层纱布）,取液：（mL）,显色反应,说明苹果中含有还原糖。,溶液颜色由蓝色变成棕色再变成砖红色沉淀。,选材:,现象：,结论：,注意事项：,常见还原糖：葡萄糖、果糖、麦芽糖、半乳糖、乳糖,试剂：斐林试剂（由甲液和乙液组成） 甲液：0.1g/ml的NaOH； 乙液： 0.05g/ml的CuSO4 使用原则：现配现用，等量混合 条件：水浴加热（5065）,对试管中的溶液进行加热时，试管底部不要触及烧杯底部，另外，试管口不要朝向实验者，以免沸腾的溶液冲出试管，造成烫伤。,思考：为什么斐林试剂要现配现用？,富含脂肪的种子，理想材料花生，花生种子（浸泡h），去皮，将子叶削成薄片,制片：,选取最薄的薄片移至载玻片中央,在薄片上滴加苏丹(或苏丹) 染液2 3滴，染色 min,滴加体积分数为50%的酒精溶液12滴，洗去浮色 (多余的苏丹 ),吸去余液，滴1-2滴蒸馏水，盖上盖玻片，制成临时装片,显微镜观察：,先在低倍镜下找到已着色的薄片，后用高倍镜观察,现象：,有被染成橘黄色(或红色)的脂肪微粒,结论：,说明花生种子细胞中含有脂肪,2.脂肪的鉴定,取材：,脂肪的检测结果,注意事项：,切片要薄，如厚薄不均就会导致观察时有的地方清晰有的地方模糊。,酒精的作用是洗去浮色,需使用显微镜观察。,使用不同的染色剂染色时间不同，如用苏丹染色3min,如用苏丹染色1min。,思考：酒精洗去浮色的原理是什么？,选材与制备 组织样液：,富含蛋白质的生物组织，理想材料：黄豆组织样液（或鸡蛋蛋清稀释液）,黄豆浸泡 去皮切片研磨过滤滤液（如用蛋清要稀释10倍以上，否则实验后黏住试管壁不易洗净）,显色反应,mL组 织样液,双缩脲试剂 mL,现象：,无色,双缩脲试剂 滴,紫色,(创设碱性条件),(提供Cu2+),3.蛋白质的鉴定,颜色由无色变成紫色,结论：,黄豆组织样液中含有蛋白质,蛋白质的检测结果,用于蛋白质鉴定的蛋清必须稀释，以免 实验后粘住试管壁，不易洗刷,注意事项：,试剂：双缩脲试剂 A液：0.1g/ml的NaOH B液： 0.01g/ml的CuSO4 使用原则：先加A液1ml，再加B液34滴。,思考：,A液和B液为什么要强调添加顺序？为什么B液不能过量？, 鉴定前，留出一部分组织样液，以便对比,在蛋白质鉴定实验中，必须先加A液再加B液的原因是:,加入34滴B液而不能过量的原因是：,双缩脲试剂的作用原理是在碱性条件下与Cu离子发生紫色反应，先加A液是为了创造碱性环境。,过量的CuSO4和NaOH反应生成蓝色Cu(OH)2,掩盖生成的紫色物质。,斐林试剂与双缩脲试剂的比较：,A液:0.1g/mLNaOH B液:0.01g/mLCuSO4,甲液:0.1g/mLNaOH 乙液:0.05g/mLCuSO4,紫色物质生成,砖红色沉淀,先加A液，再加B液，不需加热,甲液与乙液先混再用，且现配现用，需加热,鉴定蛋白质,鉴定还原性糖,富