临床免疫学检验.ppt

临床免疫学实验诊断 (NO.2),第五节 肿瘤标志物检测,第六节 自身抗体检测,重要内容,如何选择和使用肿瘤标志物?,肿瘤标志物的定义?, 分类和指征? AFP、CEA、 PSA、CA15-3、 CA125、CA19-9、CA72-4、NSE,第五节 肿瘤标志物检测,肿瘤标志物(tumor marker)的定义?,在肿瘤发生和增殖过程中，由肿瘤细胞本身 合成、释放或者是由机体对肿瘤细胞反应而产 生的一类物质，反映肿瘤存在和生长的一类物 质,可存在于病人的血液、体液、组织或细胞中,高危人群中恶性肿瘤的早期检测 应用于初步诊断 应用于预后 治疗监测 肿瘤复发的早期检测,指征,Tumor markers are not suited for screening asymptomatic individuals because they have a too low organ and tumor specificity as well as a too low predictive value positive of a test.,Patients with a familiar tumor risk and symptomatic patients,甲胎蛋白 (alpha-fetoprotein,AFP),AFP是在胎儿早期由肝脏和卵黄囊合成的 一种血清糖蛋白，出生后AFP的合成受到抑制。,指征,AFP浓度检测对诊断肝细胞癌及滋养细胞恶性 肿瘤有重要的临床价值。,【 参考范围】,Serum 25g /L,【 临床意义 】,原发性肝细胞癌: 阳性率为67.8%74.4%，约50%的患者 AFP300g/L。 18%左右的原发性肝细胞癌患者AFP不升高。,其他恶性肿瘤：如胃癌、胰腺癌,良性疾病：病毒性肝炎、肝硬化时AFP也升高，通 常300g/L。,妊娠：34个月，AFP开始升高，78个月达高 峰，但多400g/L，分娩后3周回复正常。,生殖腺胚胎肿瘤:睾丸癌、卵巢癌、畸胎瘤等,癌胚抗原 (carcinoembryonic antigen,CEA),CEA是在胎儿早期由胃肠道及某些组织合成的 一种糖蛋白，妊娠6个月后含量逐渐下降，出生 后含量极低。CEA是一种广谱肿瘤标记物。,【 参考范围】,Serum 5g /L,【 临床意义 】,恶性肿瘤:胰腺癌、结肠癌、直肠癌、乳腺癌、胃 癌、肺癌等,良性疾病：结肠炎、胰腺炎、肝脏疾病等。,吸烟：CEA水平可升高，血清10g/L。,恶性肿瘤术后检测:直肠癌等,前列腺特异性抗原 Prostate Specific Antigen (PSA),【概述】 存在部位：前列腺腺管的上皮细胞中，血 清中含量极微。 用途：前列腺癌的辅助诊断。,血清中存在方式,t-PSA,F-PSA 20%,C-PSA 80%,【参考值】,t-PSA 4.0g/L f-PSA 0.8g/L,【临床意义】,1.前列腺癌诊断、判断病情变化和疗效的重要指标。,t-PSA4.0g/L判断为前列腺癌，灵敏度尚可， 特异性较差。,t-PSA,手术成功，恢复较好,或 肿瘤转移或复发,前列腺癌术后：,2.前列腺良性疾病：前列腺肥大、前列腺炎、肾脏和泌尿系统疾病，t-PSA一般在4.010.0g/L。 3.前列腺癌和前列腺良性疾病的鉴别诊断：,PSA 4.010.0g/L“诊断灰区” 多数患者不是前列腺癌,F/ T 比值,25%提示前列腺增生 10%25%前列腺癌诊断敏感性为90%,提高PSA 诊断前列腺癌的特异性,直肠指检、超生检查、前列腺活检,4.t-PSA+PAP：提高前列腺癌检出的阳性率 （5%的前列腺癌患者t-PSA正常）。 5.其他肿瘤：肾癌、膀胱癌、肾上腺癌、乳腺 癌等。 6.PSA检测，采集血液前禁止做前列腺按摩、肛门指诊、膀胱镜检查及前列腺手术。,cancer antigen 15-3 (CA15-3),CA15-3是转移性乳腺癌患者病程监测的有价 值的指标。由于CA15-3的检测对于局部病变的 临床敏度太低，而且在良性乳房疾病和其他器官 的癌症中也有相当数量的患者CA15-3水平升高， 因此并不适合作为筛查和诊断指标。,指征,乳腺癌患者治疗效果和病情监测。,【 参考范围】,Serum 25000U /L,【 临床意义 】,乳腺癌 : 早期灵敏度(20%30%) 转移性乳腺癌(50%70%): 血清CA15-3的含量增高程度 与转移部位相关。 CA15-3+CEA: 可提高乳腺癌检出的灵敏度。,其他恶性肿瘤：如肺癌、肾癌、结肠癌、胰腺癌 卵巢癌、子宫颈癌、原发性肝癌,良性疾病：乳腺、肝脏、胃肠道、肺、卵巢等,血清避免污染：CA15-3对蛋白酶和神经酰胺酶很 敏感。,cancer antigen 125 (CA125),指征,绝对指征: -怀疑卵巢癌 -监测卵巢癌的治疗过程 相对指征: -在疑为胰腺癌病例中作为CA19-9之后 的诊断次选肿瘤标志物。,【 参考范围】,Serum 35000U /L,术前CA125测定： 卵巢上皮癌的CA125的术前水平与预后明显相关。,【 临床意义 】,卵巢癌:,原发性卵巢癌的发生率为15/100,000妇女/年。,疾病早期 肿瘤体积小 预示治疗效果佳 复发率低,疾病正在继续发展，化疗效果差,轻微升高,明显升高,良性疾病： 急性子宫附件炎(17-25%65U/ml) 宫外子宫内膜异位(30%35U/ml) 子宫内膜异位相关的囊肿 骨盆炎 腹膜炎(59%65U/ml) 胆囊炎,其他恶性肿瘤: 胰腺癌 45-79%(decision level 35U/ml) 乳腺癌 8-13%(decision level 35/65U/ml) 宫颈癌 13-54% %(decision level 35U/ml),CA19-9 (carbohydrate antigen 19-9 ),胃肠道癌相关抗原(Gastrointestinal cancer-associated antigen ,GICA),指征,绝对指征: -疑有胰腺癌、胆道癌 -上述癌症患者的病情监测 相对指征: -结直肠癌（CEA之后的次选肿瘤标志物） -卵巢癌（CA125 之后的次选肿瘤标志物） 诊断和病情监测。,【参考范围】,serum37000U /L,【临床意义】,肿瘤诊断:,结肠癌: 灵敏度 18%58%, CA19-9升高的幅度 依赖于肿瘤的面积。,胰腺癌: 灵敏度 70%95% 特异性 72%90%,胆道系统癌症: 灵敏度5579%,胃癌: 灵敏度 26%60%, CA19-9升高的幅度 依赖于肿瘤的面积。,良性疾病,胆囊炎, 阻塞性黄疸, 胆管结石, 急性胰腺炎，胆汁淤积性胆管炎，肝硬化，肝炎等。,鉴别诊断,In order to better differentiate pancreatic cancer from benign diseases, a cut-off value of 100U/ml is recommended as a cost-saving initial test, rather than sonography, in patients presenting with weight loss and abdominal pain. Using this approach, the clinical sensitivity for the diagnosis of cancer is 62% with a specificity of 97%.,carbohydrate antigen 72-4 (CA72-4),指征,绝对指征： -监测胃癌患者病程和疗效的首选肿瘤标志物， 可与次选标志物CA19-9或CEA联合使用。 相对指征： -作为粘蛋白型卵巢癌的次选肿瘤标志物。,【 临床意义 】,恶性肿瘤: 67%的卵巢癌，47%大肠癌， 45%的胃癌，40%乳腺癌， 42%胰腺癌。,CA72-4+CEA：提高胃癌诊断的敏感性和特异性。,良性疾病：正常人阳性率3.5%，良性胃肠道疾病 6.7%。,CA72-4+CA125:提高卵巢癌的检出率,神经原特异性烯醇化酶（NSE）,【概述】 ：肝脏、肾脏 ：骨骼肌和心肌 ：神经组织 五种同工酶：、 NSE: 与神经内分泌起源的肿瘤有关. 小细胞肺癌和神经母细胞瘤肿瘤标志物。 【参考值】 血清 15ug / L,同工酶,【临床意义】 1.小细胞肺癌与肺腺癌、肺鳞癌、大细胞肺癌的鉴别诊断。 2.检测小细胞肺癌放疗、化疗后的治疗效果。 治疗有效 NSE降低至正常水平 复发 NSE增高比临床症状早412w 3.神经母细胞瘤和Wilms 瘤的鉴别诊断。 4.神经内分泌细胞肿瘤，如嗜铬细胞瘤、胰岛细胞瘤、甲状腺髓样癌、黑色素瘤等NSE也增高。 5.NSE存在于正常的RBC和PLT中。,如何选择肿瘤标志物,如何选择和使用自身抗体？,自身免疫性疾病(AID)的定义?,自身抗体的分类和临床意义？,第六节 自身抗体检测,自身免疫性疾病的定义,Autoimmune tolerance,destroy,Some reasons,Immune system,organ、 tissue 、cell,autoantibody,organ tissue cell,Autoimmune disease (AID),自身抗体的分类,抗细胞核抗体,抗细胞浆抗体,抗组织细胞抗体,其他自身抗体,器官特异性,非器官特异性,非器官特异性, 抗核抗体的定义,一般是指抗细胞核抗原成分的自身抗体的总称，是针对细胞核内DNA ,RNA,脱氧核糖核蛋白,可提取的核抗原等。主要存在于血清中，无器官及种属特异性。,是指抗细胞内所有抗原成分的自身抗体的 总称。对ANA的理解已不局限于核成分， 而是指抗核酸和核蛋白抗体的总称。,传统定义：,现代定义：,抗核抗体,Screening test,免疫荧光法 (IFA),DIFA,IIFA,抗核抗体的检测,HEP-2 cell,Liver cell of monkey,Liver cell of mouse,抗核抗体分类及荧光模型,1.抗细胞核抗体,2.抗细胞浆抗体,3.分裂期细胞阳性抗体,靶抗原,纺锤体,中心粒,中间体,IIF检测ANA荧光染色常见模型,IIF检测ANA荧光染色常见模型,IIF检测ANA荧光染色常见模型,欧蒙斑点法抗ENA谱载片,检测ANA谱欧蒙印迹法条膜,1.抗双链DNA抗体（Anti-DNA）检测,抗-dsDNA：细胞核中DNA 双股螺旋结构 抗-DNA 抗-ssDNA 抗Z-DNA抗体 【临床意义】 抗-dsDNA(+): 活动性 SLE (SLE活动的标志物)阳性率70% 90%,特异性95%,是SLE诊断的标准之一,是迄今为止参与SLE发病机制唯一的一种自身抗体。 类风湿、干燥综合征、药物诱导的SLE,2.抗-Sm抗体： 为SLE所特有，特异性99%，且能反应SLE的活动程度，但敏感性较低，仅为20%。与dsDNA联合检测可提高SLE诊断的阳性率。,3.抗U1-RNP: 抗核糖核蛋白抗体 MCTD：诊断该病的指标之一。 SLE： 30 40%的SLE 可检测出此抗体，并常与抗- Sm 相伴出现。,4.抗-SSA and 抗-SSB: 干燥综合征的标志性抗体 (80 % 90%)，多伴有 内脏损伤，发病早、病程长、腮腺病变重、多系统 受累，少数引起新生儿狼疮综合征（5% 10%）,5.抗-Scl-70: 进行性系统硬化症的标志性抗体（30%60%） 病程进展快、皮肤或内脏损伤严重,6.抗Jo-1: 该抗体对肌炎和间质性肺纤维化有高度特异性，抗体的 效价与疾病的活动性相关。 “Jo-1综合征” 多发性肌炎、 Jo-1抗体阳性及HLA-DR/-DRw52标志,抗线粒体抗体 anti-mitochondria antibody（AMA）,AMA: 抗线粒体内膜脂蛋白成分的抗体， 无器官和组织特异性，抗体主要是IgG. 检测：用大鼠的胃或肾皮质Hep-2做抗原基 质，目前发现9种AMA（M1M9）,【临床意义】 原发性胆汁性肝硬化与胆总管阻塞、肝 外胆管阻塞的鉴别诊断。 原发性胆汁性肝硬化,阴性,胆总管阻塞 肝外胆管阻塞,无症状90.5% 有症状92.5%,类风湿因子：是变性IgG刺激机体产生的一种自 身抗体，主要存在于类风湿关节 炎患者的血清和关节液内。 【参考值】速率散射比浊 :030U/L 【方法】 乳胶凝集法 (LA)-IgM 放射免疫法 -特殊试剂盒 ELISA-可区分不同类型的 RF 定量、灵敏、特异、简便 速率散射比浊法敏感、可自动化 不能区分不同类型的RF,类风湿因子（RF）,IgM IgG IgA IgD IgE,【临床意义】 1.类风湿性疾病: 阳性率7090% 类风湿性关节炎 (rheumatoid arthritis, RA) 2.其他自身免疫性疾病: SLE