GB-T5009.183-2003植物蛋白饮料中脲酶的定性测定.pdf

I C S 6 7 . 0 4 0C 5 3中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准G B / T 5 0 0 9 . 1 8 3 -2 0 0 3 部分代替 G B 1 6 3 2 2 -1 9 9 6植物蛋白饮料中腮酶的定性测定Qu a l i t a t i v e a n a l y s i s o f u r e a s e i n v e g e t a b l e p r o t e i n d r i n k i n g2 0 0 3 - 0 8 - 1 1 发布2 0 0 4 - 0 1 - 0 1实施中 华 人 民 共 和 国 卫 生 部众中 国 国 家 标 准 化 管 理 委 员 会 免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 标准最全面免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载G B / T 5 0 0 9 . 1 8 3 -2 0 0 3前 日 曰 本标准代替 G B 1 6 3 2 2 -1 9 9 6 植物蛋白饮料卫生标准 中附录 A 脉酶定性测定方法” 。 本标准由中华人民共和国卫生部提出并归F l , 本标准由辽宁省食品卫生监督检验所、 北京市食品卫生监督检验所、 天津市食品卫生监督检验所负责起草 。 本标准主要起草人 ： 王旭太 、 徐继康 、 杨 丘 芝 、 徐 留发 、 陆守政 。标准下载网()免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 标准最全面免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载G B / T 5 0 0 9 . 1 8 3 -2 0 0 3植物蛋白饮料 中腮酶的定性测定范围本标准规定了植物蛋白 饮料中 脉酶的定性测定方法。本标准适用于植物蛋白 饮料中脉酶的定性测定。2 原理 脉酶在适当的 p H和温度下催化尿素， 转化成碳酸钱 ， 碳酸铁在碱性条件下形成氢氧化钱 ， 再与纳氏试剂中的碘化钾汞复盐作用形成碘化双汞按 ， 如试样中脉酶活性消失， 上述反应即不发生。N H , C O N H , + 2 H 2 0 里 鳗 ( N H , ) 2 C O 3( NH, ） ： C 0 3 十2 Na O H - N a 2 C O3 +NH, OH2 K 2 H g l , 1 +3 K O H +N H 3 -N H , H g 2 0 I +7 K I +2 H 2 0 （ 黄棕 色沉淀 ）3 试剂3 . 1 1 尿素溶液。3 . 2 1 0 钨酸钠溶液。3 . 3 2 酒石酸钾钠溶液。3 . 4 5 硫酸。3 . 5 中性缓冲液： 取 0 . 0 6 7 m o l / L 磷酸氢二钠溶液 6 1 1 mL ， 加人 3 8 9 ml , 0 . 0 6 7 m o l / L磷酸二氢钾溶液混合均匀即可。3 . 5 . 1 0 . 0 6 7 m o l / L磷酸氢二钠溶液： 称取无水磷酸氢二钠 9 . 4 7 g 溶解于 1 0 0 0 m l 一 水中。3 . 5 . 2 0 . 0 6 7 m o l / L磷酸二氢钾溶液： 称取磷酸二氢钾 9 . 0 7 g 溶于 1 0 0 0 m L水中即成。3 . 6 纳氏试剂： 称取红色碘化汞（ H g l 2 5 5 g ， 碘化钾 4 1 . 2 5 g 溶于 2 5 0 m L水中， 溶解后， 倒入1 0 0 0 m L容量瓶中。再称取氢氧化钠 1 4 4 g ， 溶于 5 0 0 m L水中， 溶解并冷却后 ， 再缓慢地倒入以上 1 0 0 0 m L容量瓶中， 加水至刻度， 摇匀后倒入试剂瓶， 静止后用上清液。4 分析步骤4 . 1 取 1 0 mL比色管甲、 乙两支， 各加人 0 . 1 g 试样， 再各加 1 m l , 水， 振摇半分钟（ 约 1 0 0 次） ， 然后各加人中性缓冲液 1 ml-4 . 2 向上两管中的甲管（ 试样管） 中加人尿素溶液 1 m L ， 再 向乙管（ 空白对照管） 中加人 1 mL水， 将甲、 乙两管摇匀置于 4 0 水浴中保温 2 0 m i n ,4 . 3 从水浴中取出二管后 ， 各加 4 m l , 水， 摇匀再加 1 0 钨酸钠溶液 1 m L ， 摇匀 ， 再加 5 硫酸 1 m L ,摇匀过滤备用。4 . 4 取上述滤液 2 m L分别加人 2 5 m 1 ， 具塞纳氏比色管（ 配套管） 中， 再按下述步骤操作。4 . 4 . 1 各加水 1 5 m 1 . 后再加入 2 酒石酸钾钠 1 ml4 . 4 . 2 各加人纳氏试剂 2 m 1 一 后再加水至 2 5 m 1 . 刻度。4 . 5 摇匀后观察结果 （ 见表 D o标准下载网()免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 标准最全面免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载G B / T 5 0 0 9 . 1 8 3 -2 0 0 3表 1脉酶定性表示符号 显示情况 强阳性 一 斗 砖红色混浊或澄清液 次强阳性卡十 枯红色澄清液 阳性 十 深金 黄色 或黄 色 澄清液 弱阳性 十 淡黄色或微黄色