GBT5413.19-1997婴幼儿配方食品和乳粉游离生物素的测定.pdf

G B / T 5 4 1 3 - 1 9 - 1 9 9 7 前言 木标准等同采用美国公职分析化学师协会( AO A C) 方法。 木系列标准从实施之日 起， 代替G B 5 4 1 3 -8 5 . 木标准由中国轻工总会提出。 木标准由全国乳品标准化中心归日。 木标准负责起草单位: 国家乳制品质量监督检验中心。 木标准参加起草单位: 卫生部食品卫生监督检验所、 浙江省轻下业研究所、 哈尔滨森永乳品有限公 司、 雀巢( 中国) 投资服务有限公司。 木标准 主 要起 草人 : 张 玉杰 、 工 芸、 杨 金宝。 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 婴 幼 儿 配 方 食 品 和 乳 粉 G B / T 5 4 1 3 - 1 9 - 1 9 9 7 游 离 生 物 素 的 测 定 代 甘 CB 5 4 1 3 - 8 5 Mi l k p o w d e r a n d f o r m u la f o o d s f o r i n f a n t a n d y o u n g c h il d r e n - - i l e 亩 e r mi n a t i o n o f f r e e b i o n i n c o n 宜 e n t 1 范 围 木标准规定了用微生物法测定游离生物素的方法。 木标准适用于婴幼儿配方食品和乳粉中游离生物素的测定。 2 方 法原理 通过植物乳杆菌( 肠d 汉 . t。护 la: 勿，.) 生长情况来测定游离生物素含量。 3 试 剂、 菌种 和培 养基 所有试剂， 如未注明规格， 均指分析纯; 所有实验用水， 如未注明其他要求， 均指三级水。 3 . 1 生物素: 标准品。 3 . 2 乙醉: 体积分数为5 0 %. No-一到 1 2 3 4XM*,.L 5 5 5 5牛 羹 6 7 1 80 1 ) 试管 N o . 3 -7 中 加低浓 度标准济 液, N o . 8 - 1 0 中 加高 浓度标 准溶液。 沮 口 定液 按表 2 顺 序加 燕馏水 、 样品溶 液 和维 生素 B 12 测 定用 培养基 于培 养 管内 一 式三 份。 G B / T 5 4 1 1 1 9 - 1 9 9 7 表 2 6 . 4火菌 直接灭菌所有的试管， 制冷到培养温度或迅速放入施环水浴内， 以使颜色形成最浅。保证加热和制 冷条件均匀( 灭菌管数过多或距离太近， 在灭菌锅中都可产生不良影响) 。1 2 1 灭菌I O m in . 6 . 5 接 种 无菌地接种侮个管， 均加入一滴适当的接种物. 除二I I I ( 或三4 1 ) 中含有0 . O m L标准溶液 未接种空 白管) 以外。盖上盖， 充 分振荡混合所有管。 6 . 6 培 养 在2 8 -4 0 之间选祥一 个恒定温度( 士0 . 5 1C ) , 培养6 0 -7 2 h . 6 . 7 测定( 酸度法) 试管被任何外来微生物污染则测定无效。通过对侮个试管的视觉检六， 进行反应预测. 未接种管是 清的. 标准溶液和样品中应无其他微生物生长。 6 . 7 . 1 滴定 用N it , 6草阶蓝作指 J 剂， 用0 . I m - / L fAA化钠滴定1 4 个管中溶液. 或以p H 6 . 8为电位滴定终 点。 如果接种空白滴定反应等于或高于未接种空白 水平的1 . 5 M L. 则测定结果应忽略不计。通常标准溶 液在5 . O . L的反应等于0 . l m o l / L J E K化钠8 -1 2 . L的滴定度。 6 . 7 . 2 测p H俏 试管被任何外来微生物污染则测定无效. 通过对舟个试管的视觉检六 进行反应预测， 未接种管是清 的. 标准溶液和样品中应无其他微生物生长。 在培养之后读出管内容物的p H值， 近似到0 . O l p H谊单位。 7 分析 结果 表述 样IVI中生物素的含i t. ( P g / l o o g 或v g / 1 0 0 . L ) = 式中: X -梅毫升测定溶液中生物素含量的平 均价,