（鲁京津琼）2020版高考生物总复习模块检测卷（五）教案.docx

模块检测卷(五)(时间：60分钟满分：100分)1.(5分)(2019中原名校质量考评)营养缺陷型菌株就是在人工诱变或自发突变后，微生物细胞代谢调节机制中的某些酶被破坏，使代谢过程中的某些合成反应不能进行的菌株。这种菌株能积累正常菌株不能积累的某些代谢中间产物，为工业生产提供大量的原料产物。以下是实验人员利用影印法初检氨基酸缺陷型菌株的过程。请回答下列问题：(1)过程的接种方法为_，与基本培养基(只含碳源、无机盐、水)相比，待测培养皿中的特有的成分有_。(2)进行过程培养时，应先将丝绒布转印至基本培养基上，原因是_。从_培养基上获得相应的营养缺陷型菌株。采用影印法培养的优点是_。(3)为了进一步完成对初检的营养缺陷型菌株的鉴定，实验人员进行了如下操作：用接种针挑取_(选填“菌落A”或“菌落B”)接种于盛有完全培养液的离心管中，28 振荡培养12天后，离心，取沉淀物用_洗涤3次，并制成菌悬液。吸取1 mL菌悬液加入无菌培养皿中，倾注15 mL融化并冷却至4550 的基本培养基，待其冷凝后用记号笔在皿底划分五个区域，标记为A、B、C、D、E。在划分的五个区域上放入少量分组的氨基酸粉末(如下表所示)，经培养后，观察生长圈出现的区域，从而确定属于何种氨基酸缺陷型。组别所含氨基酸A组氨酸苏氨酸谷氨酸天冬氨酸亮氨酸B精氨酸苏氨酸赖氨酸甲硫氨酸苯丙氨酸C酪氨酸谷氨酸赖氨酸色氨酸丙氨酸D甘氨酸天冬氨酸甲硫氨酸色氨酸丝氨酸E半胱氨酸亮氨酸苯丙氨酸丙氨酸丝氨酸在上述鉴定实验中，发现在培养基A、D区域出现生长圈，说明该营养缺陷型菌株属于_。解析(1)根据过程培养的效果图可以判断，该过程所采用的接种方法为稀释涂布平板法。图示为实验人员利用影印法初检氨基酸缺陷型菌株的过程，据此可知：与基本培养基(只含碳源、无机盐、水)相比，待测培养皿中的特有的成分有氨基酸。(2)为了防止将特定营养成分带入基本培养基，进行过程培养时，应先将丝绒布转印至基本培养基上。氨基酸缺陷型菌株只能在完全培养基或补充了相应的氨基酸的基本培养基中生长，因此应从题图中完全培养基上获得相应的营养缺陷型菌株。采用影印法培养的优点是同种菌株的接种位置相同。(3)为了进一步完成对初检的营养缺陷型菌株的鉴定，结合(2)的分析可知：用接种针挑取A菌种并培养；离心后菌株存在于沉淀物中，为了防止杂菌污染，需取沉淀物用无菌水洗涤3次，并制成菌悬液。表中信息显示：A、D区域含有、其他区域不含有的氨基酸是天冬氨酸，而实验结果只有A、D区域出现生长圈，说明营养缺陷型菌株属于天冬氨酸缺陷型。答案(1)稀释涂布平板法氨基酸(2)防止将特定营养成分带入培养基完全同种菌株的接种位置相同(3)菌落A无菌水天冬氨酸缺陷型2.(5分)(2019天津市质检)我国是世界上最大的苹果生产和消费国，苹果种植面积和产量均占世界总量的40%以上。苹果除可直接食用外，还可将其制成饮品，如苹果汁、苹果酒、苹果醋等。请回答下列问题：(1)日常生活中可直接用_法生产苹果汁，为了高效地去除苹果细胞的细胞壁，可用_酶处理苹果。(2)新鲜的苹果汁可发酵制成苹果酒，其原理是_；家庭制作葡萄酒时无须另外添加酵母菌，原因是_。(3)醋酸菌常用于苹果醋的制作，醋酸菌的呼吸作用类型为_。若想对醋酸菌进行计数，则应用_法在培养基上进行接种。如果每个平板均接种了0.1 mL稀释样品并进行培养，接种的4个平板上的菌落数分别是210、230、470、190，那么稀释样品中醋酸菌的数量为_个/mL。平板划线法一般不用于活菌计数的原因是_。答案(1)压榨果胶酶和纤维素(2)酵母菌无氧呼吸能够将葡萄糖转化为酒精葡萄皮上附有野生型的酵母菌(3)有氧呼吸稀释涂布平板2 100得到的菌落多数不是单一菌落，菌落数远小于活菌数(答“菌落连成片，无法计数”也可)3.(5分)(2019山东枣庄调研)自从法国科学家巴斯德证明食品发酵是由于微生物的作用以来，人们认识到微生物在发酵食品的加工中起着极其重要的作用，如今形形色色的发酵食品在食品业中占有重要的地位。回答下列与微生物发酵、培养相关的问题：(1)果酒制作过程中严格控制发酵条件是保证发酵正常进行的关键，这直接关系到是否能得到质量高、产量多的理想产物，通常所指的发酵条件包括_(多选)。A.温度控制 B.溶氧控制C.pH控制 D.酶的控制(2)苹果酒在_(填微生物)的作用下，经过深层发酵可形成苹果醋。乳酸菌与酿制果醋的菌种在代谢方式上的主要区别是_。(3)制作泡菜的过程中，有机物的干重将_；泡菜坛内有机物的种类将_。(4)有位同学在家制作泡菜时，为避免杂菌污染而向泡菜坛中加入了青霉素，结果发酵失败，原因可能是_。(5)在充足的碳源、氮源、无机盐和水的条件下，乳酸菌仍不能正常生长，还需要在培养基中添加_。应用稀释涂布平板法分离乳酸菌时，涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行，但操作过程中一定要注意防火，不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中，其原因是_。解析(1)酵母菌发酵需要控制条件：温度1825 ；溶氧控制，即要先通气后密封；pH控制，偏酸性；利用酵母菌自身的酶进行发酵，不需要对酶进行控制。(2)苹果醋制备需要醋酸菌，乳酸菌是厌氧型细菌，醋酸菌是好氧型细菌。(3)制作泡菜的过程中，由于乳酸菌呼吸作用的消耗，有机物的干重将减少，但坛内有机物的种类将增加。(4)青霉素可以抑制几乎一切含有细胞壁的生物的生长繁殖，杀死乳酸菌，因此制作泡菜时加入了青霉素，会造成发酵失败。(5)在充足的碳源、氮源、无机盐和水的条件下，乳酸菌仍然不能正常生长，还需要在培养基中添加维生素；涂布平板操作过程中一定要注意防火，不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中，以免引燃其中的酒精。答案(1)ABC(2)醋酸菌乳酸菌是厌氧型细菌，醋酸菌是好氧型细菌(3)减少增加(4)青霉素杀死了乳酸菌(5)维生素避免(或防止)引燃烧杯中的酒精4.(5分)溶藻细菌对控制水华有非常重要的作用。研究人员从池塘中采集水样，加入到无菌锥形瓶中，用摇床在37 下振荡培养20 min，使其均匀分散成菌悬液，再通过分离、纯化、鉴定得到了溶藻细菌。回答下列问题：(1)分离前需用无菌移液管从菌悬液中吸取菌液1 mL，进行梯度稀释，其目的是_。再取每个稀释梯度的菌悬液0.1 mL用_法涂布到细菌固体培养基上，每个梯度做三组，37 恒温培养箱中培养，直至长出菌落。(2)若上述是将1 mL菌悬液梯度稀释106倍，再涂布接种到细菌固体培养基上，分别形成了260、280、380个菌落，则原菌悬液中每毫升有细菌_个，该方法所得测量值一般比实际值偏_，原因是_。(3)水华可为蓝藻暴发所致。研究人员尝试利用溶藻细菌限制蓝藻数量，相关实验的示意图如下。图中表示实验步骤。如果在步骤实验组的每个培养皿中做三个重复实验，可采取的做法是：_。为完善实验设计方案，应增设对照组，可采取的做法是：_。蓝藻通常呈蓝绿色，观察实验结果，发现培养皿中出现褪色空斑，说明蓝藻_。答案(1)使水样中的各种微生物细胞分散开来稀释涂布平板(2)2.7109低当两个或多个细胞连在一起时平板上观察到的只是一个菌落(3)在每个培养皿中，选择三个不同位置，各滴加等量菌液在每个培养皿中，选择三个不同位置，各滴加等量的、不含溶藻细菌的细菌培养液被溶藻细菌裂解(死亡)5.(5分)(2019河北衡水金卷)本草纲目拾遗中记述：“豆腐又名菽乳，以豆腐腌过酒糟或酱制者，味咸甘心。”回答下列问题：(1)在腐乳制作过程中，起主要作用的微生物是_，该种微生物的细胞中，含有RNA的细胞结构有_。(2)“味咸”是由于在制作过程中加入了盐，加盐的目的除了调味以外，还有_和_的作用。(3)“甘心”是指在多种微生物的共同作用下，普通豆腐转变成风味独特的腐乳。从豆腐到腐乳，豆腐中的成分会发生一定的变化，其中起主要作用的两种酶是_。(4)有人发现，三天内腐乳发酵的效果越来越好，且随发酵时间呈直线上升关系，则无法确定发酵的最佳时间，若要确定最佳发酵时间，还要做的是_。答案(1)毛霉细胞核、线粒体和核糖体(2)析出豆腐中的水分，使豆腐变硬抑制微生物的生长(避免豆腐块腐败变质)(3)蛋白酶和脂肪酶(4)延长发酵时间，观察发酵效果，最好的发酵效果所对应的发酵时间即为最佳发酵时间6.(6分)(2019哈尔滨师大附中调研)随着我国人民生活水平的不断提高，葡萄酒作为一种具有降血脂、软化血管、护心养颜等功效的饮品，日益受到人们的青睐，甚至有很多家庭自制葡萄酒饮用。在葡萄酒自然发酵的过程中，起主要作用的是附着在葡萄皮表面的野生型酵母菌，而专业的葡萄酒酿造过程还涉及分离和纯化酵母菌。请结合所学知识，回答下列问题。(1)分离和纯化酵母菌涉及微生物接种，该过程要求对实验操作的空间、操作者的衣着和手都要进行_处理；对相关器皿、工具、培养基等要进行_处理。微生物接种最常用的方法为_(答出两点)。(2)葡萄酒酿造实验流程为：挑选葡萄冲洗榨汁酒精发酵果酒。冲洗过程往往先冲洗葡萄再去除枝梗，原因是_。其中的酒精发酵指的是酵母菌在无氧条件下进行无氧呼吸产生酒精的过程，该化学方程式为_。(3)生活中人们发现酒会变酸，而且表面会出现一层“膜”，该膜是_在液面大量繁殖而形成的。其最适的生长温度为_，用化学方程式来解释酒变酸的原因_。解析(1)为达到无菌操作，实验操作的空间、操作者的衣着和手都要用化学药剂或者紫外线等消毒处理，而相关器皿、工具、培养基等要高压蒸汽灭菌处理。接种最常用的方法就是课本所介绍的平板划线法和稀释涂布平板法。(2)如果先除枝硬，就很可能让葡萄出现破损，汁液流出，沾染杂菌，影响品质。(3)使酒变酸且在酒表面形成菌膜的微生物是醋酸菌，其最适生长温度为3035 。答案(1)消毒灭菌平板划线法和稀释涂布平板法(2)避免除去枝梗时葡萄出现破损，增加被杂菌污染的机会C6H12O62C2H5OH2CO2(3)醋酸菌3035 C2H5OHO2CH3COOHH2O7.(5分)(2019全国大联考)2018年1月25日，克隆猴“中中”和“华华”在中国诞生，并且登上了国际权威学术期刊细胞封面。下图表示克隆猴的基本过程，据图回答：(1)该实验过程涉及多种动物细胞工程技术，其中包括核移植技术。哺乳动物核移植技术可以分为体细胞核移植和_，前者的难度_(大于/小于)后者。(2)卵母细胞供体所提供的卵母细胞，一般要在体外培养到_期，再通过_去除卵母细胞中的核。(3)体细胞与去核卵母细胞融合后，经激活开始分裂得到克隆胚胎，再将胚胎移植入受体动物体内，对受体动物的要求为_且_的其他雌性动物。(4)若要提高胚胎的利用率，可以采取_的方法，如果此时胚胎处于囊胚期，则要注意的是_。解析(1)供核细胞分为体细胞和胚胎细胞，由于胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，而体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难。(2)在自然情况下，经排卵后，卵母细胞在输卵管中发育至减数第二次分裂中期，等待精子前来受精，此时的卵母细胞更成熟，且细胞核的位置靠近第一极体，可用显微操作仪，用吸管一并吸出。(3)哺乳动物发情排卵后，不管是否妊娠，在一段时间内，同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的，为供体的胚胎移入提供了相同的生理环境。(4)用分割针或分割刀片将早期胚胎切开，每一份都可发育成个体，从而提高了胚胎的利用率。对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。答案(1)胚胎细胞核移植大于(2)减数第二次分裂中显微操作(3)同种相同生理状态(4)胚胎分割要将内细胞团均分8.(7分)(2019安徽知名示范性高中联考)转基因猪在异种器官移植、生物反应器和疾病模型等方面有广泛应用。下图为转基因猪的培育过程，请分析回答：(1)体外培养猪胎儿成纤维细胞，需定期更换培养液，防止_对细胞自身造成伤害。当细胞贴满瓶壁时，可分瓶进行_培养，让其继续增殖。通常选用10代以内的细胞进行核移植，目的是保持细胞正常的_。(2)为便于检测与筛选，用红色荧光蛋白基因作为_基因参与构建基因表达载体，将其导入猪胎儿成纤维细胞中，筛选发红色荧光的细胞与_期的去核卵母细胞融合，使供体核进入受体卵母细胞，利用物理或化学方法激活重组细胞，使其完成_形成重组胚胎。采用机械方法进行_使代孕猪产下同卵双胎或多胎。(3)与成年动物体细胞相比，用胚胎细胞克隆动物的成功率较高，原因是_。解析(1)在细胞培养过程中，培养基中的营养物质会逐渐被消耗，且离体的动物细胞代谢产生的废物会沉积在细胞培养液中，对细胞自身造成伤害，所以要定期更换培养液。原代培养时往往会出现接触抑制现象，当细胞贴满瓶壁时，要用胰蛋白酶等处理后分瓶进行传代培养，让细胞继续增殖。但细胞增殖代数过多，细胞可能会出现变异，为了保持正常的二倍体核型，往往选择10代以内的细胞。(2)从题干信息来看，红色荧光蛋白基因的表达产物可以用来筛选细胞，所以该基因起到了标记基因的作用，动物体细胞核移植往往要选处在减数第二次分裂中期的卵母细胞作为受体细胞；得到的重组细胞要完成细胞分裂和发育进程才能形成重组胚胎，但往往还需要借助物理、化学等技术手段；将重组细胞培育至早期胚胎时，若想获得多个胚胎可以对早期胚胎进行胚胎分割，之后再移植，进而获得同卵双胎或多胎。(3)胚胎细胞相对于成年动物体细胞的分化程度低，恢复其全能性相对容易，所以用胚胎细胞克隆动物的成功率较高。答案(1)细胞代谢产物积累传代二倍体核型(2)标记M(或减)中细胞分裂和发育进程胚胎分割(3)胚胎细胞的分化程度低于成年动物的体细胞，恢复其全能性相对容易9.(10分)(2019河北唐山市质检)乳腺炎和口蹄疫分别是由细菌和病毒引起的危害奶牛养殖业的两种严重疾病。研究者利用生物技术培育出转乳铁蛋白肽(抗细菌)基因和人干扰素(抗病毒)基因的双转基因奶牛新品种。下图1为基因表达载体，图2为培育流程。(1)培育双转基因奶牛涉及的生物技术有_(至少2项)。(2)牛乳铁蛋白肽基因能在转基因奶牛的乳腺细胞中表达，人干扰素基因则可在全身细胞表达，这与构建表达载体时_的选择有关。据图可知，干扰素基因与_基因可同时转录，基因工程过程中主要的工具酶有_。(3)将基因导入牛胎儿成纤维细胞前，需用_将其处理成单个细胞。成纤维细胞无法直接发育成个体，需要去核卵母细胞的细胞质诱导，以实现细胞核的_。(4)研究者利用_技术筛选出_(填“牛乳铁蛋白肽”或“干扰素”)基因成功表达的胚胎进行移植。解析(1)从图中分析，培育双转基因奶牛涉及的生物技术有基因工程、动物细胞培养，以及核移植和胚胎移植等。(2)基因在不同的细胞中选择性表达与启动子有关。分析图1，干扰素基因和新霉素抗性基因使用的启动子相同，因此二者可以同时转录。基因工程过程中主要的工具酶为限制酶和DNA连接酶。(3)用胰蛋白酶将动物组织处理成单个细胞。动物细胞核具有全能性。(4)人干扰素基因可在全身细胞中表达，因此研究者利用抗原抗体杂交技术筛选出干扰素基因成功表达的胚胎进行移植。答案(1)基因工程、动物细胞培养、核移植、胚胎移植(至少2项)(2)启动子新霉素抗性限制酶、DNA连接酶(3)胰蛋白酶全能性(4)抗原抗体杂交干扰素10.(8分)(2019西安市调研)利用某高致病性病毒特异性的VP40抗原蛋白来制备单克隆抗体的流程图如下，请回答：(1)过程利用质粒构建表达载体，质粒的来源主要是_，质粒能够在受体细胞中_，是其作为运载体的原因之一。(2)过程用Ca2处理大肠杆菌，使其处于_。在培养基中加入四环素，能获得含有目的基因的受体菌，原因是_。在分子水平上，可以利用_检测VP40基因是否进入大肠杆菌。(3)用特定的选择性培养基筛选出杂交瘤细胞。杂交瘤细胞的特点是_。对杂交瘤细胞还需进行_培养和抗体检测，最终获得单克隆抗体。解析(1)质粒是细菌和酵母菌等生物中独立于染色体(或拟核)以外的双链环状DNA分子，具有自主复制能力。质粒能够在受体细胞中自我复制并且稳定存在，这是质粒作为运载体的原因之一。(2)采用Ca2处理大肠杆菌，可使其处于感受态(一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态)。因为质粒上有四环素抗性基因，所以在培养基中加入四环素，能筛选获得含有目的基因的受体菌。可采用DNA分子杂交技术(基因探针)检测VP40基因是否进入大肠杆菌。(3)杂交瘤细胞的特点是能无限增殖且能产生专一的抗体。对经选择培养的杂交瘤细胞，还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。最后，将杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖，最终从培养液或小鼠腹水中获得大量的单克隆抗体。答案(1)细菌、酵母菌等自我复制和稳定存在(2)感受态质粒上有四环素抗性基因(或“受体菌获得抗四环素的特性”)VP40基因探针(3)在体外培养条件下能无限增殖且能产生单一的抗体克隆化11.(7分)(2019山西晋中调研)为增加菊花的花色类型，研究者从其他植物的cDNA文库中提取出花色基因C(图1)，拟将其与质粒(图2)重组，再借助农杆菌导入菊花细胞中。图3从上到下依次表示EcoR、BamH和Sau3A三种限制酶的识别序列与切割位点。请分析回答：(1)利用PCR技术扩增目的基因C的原理是_。(2)图2所示质粒被_切割获得的产物可与图1所示基因C连接，理由是_。(3)经BamH处理后构建的重组质粒导入菊花细胞后，基因C不能表达，原因是质粒酶切部位的两端无_，导致基因C不能_。(4)在添加潮霉素的固体培养基上，_(填“能”或“不能”)筛选出含有插入基因C的重组质粒的农杆菌单菌落，原因是_。解析(1)利用PCR技术扩增目的基因c的原理是DNA双链复制。(2)据图3可知，由于BamH和Sau3A两种酶切割后产生的片段具有相同的黏性末端，因此图2所示质粒被BamH和EcoR切割获得的产物可与图1所示基因C连接。(3)据图可知，经BamH处理后构建的重组质粒导入菊花细胞后，基因C不能表达，原因是质粒酶切部位的两端无启动子和终止子，导致基因C不能转录。(4)由于含质粒的农杆菌和含重组质粒的农杆菌均含有潮霉素抗性基因，在含四环素的培养基上均能生长，所以在添加四环素的固体培养基上，不能筛选出含有插入基因C的重组质粒的农杆菌单菌落。答案(1)DNA双链复制(2)BamH和EcoRBamH和Sau3A两种酶切割后产生的片段具有相同的黏性末端(3)启动子和终止子转录(4)不能含质粒的农杆菌和含重组质粒的农杆菌均含有潮霉素抗性基因，在含潮霉素的培养基上均能生长12.(8分)(2018江苏无锡普通高中期末)重组人纤溶酶原激活剂(rhPA)是临床血栓疾病治疗的主要生物药品。家兔具有多胎、妊娠期短、繁殖快、全年多发情，产仔率高等优点，可以作为乳腺生物反应器批量生产药物。下图是利用转基因兔生产重组人纤溶酶原激活剂(rhPA)的过程，请据图回答。(1)构建rhPA基因表达载体需要用限制酶_切割质粒和目的基因，为获得乳腺特异性表达载体需用_酶切割重组质粒使之线性化。(2)对母兔注射_使其超速排卵，并与正常公兔配种。将乳腺特异性表达载体导入家兔受精卵中最有效的导入技术是_。(3)将受精卵置于37 的_的气体环境中培养一段时间后移植到代孕兔的输卵管中，代孕兔需经_处理。(4)子代兔需要经过筛选过程才能获得生产人纤溶酶原激活剂的生物反应器，原因有_、_。解析(1)分析图示可知：构建rhPA基因表达载体时，目的基因(rhPA基因)插入到了质粒上的Xho酶切位点的下方，说明是用限制酶Xho切割质粒和目的基因的。依据乳腺特异性表达载体的组成可知：为获得乳腺特异性表达载体，使重组质粒线性化，需用Sal和Not酶进行切割。(2)对母兔注射促性腺激素使其超数排卵，并与正常公兔配种。将乳腺特异性表达载体导入家兔受精卵中，常采用的最有效的导入技术是显微注射技术。(3)将受精卵置于37 的95%空气和5%CO2的气体环境中培养一段时间后，移植到经同期发情处理的代孕兔的子宫中，以使该受精卵继续发育为子代。(4)由于只有部分子代兔导入了人纤溶酶原激活剂基因，而且公兔不能表达人纤溶酶原激活剂，所以子代兔需要经过筛选过程才能获得生产人纤溶酶原激活剂的乳腺生物反应器。答案(1)XhoSal和Not(2)促性腺激素显微注射技术(3)95%空气和5%CO2同期发情 (4)只有部分子代兔导入了人纤溶酶原激活剂基因 公兔不能表达人纤溶酶原激活剂13.(8分)(2018四川南充高级中学检测)白菜、甘蓝均为二倍体，体细胞染色体数目分别为20、18。“白菜甘蓝”是用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长期短、耐热性强和易于储藏等优点。如图是“白菜甘蓝”的杂交过程示意图，回答下列问题：(1)为了得到原生质体需先用_和_来处理白菜细胞和甘蓝细胞。(2)诱导原生质体融合的方法有多种，常用的物理方法有_，融合完成的标志是_。由杂种细胞得到白菜甘蓝还需要经过组织培养技术，其中需要避光培养的步骤是_。(3)如图通过植物体细胞杂交技术获得的“白菜甘蓝”体细胞染色体数为_；通常情况下，白菜和甘蓝有性杂交是不能成功的，原因是_。若对白菜和甘蓝采用杂交育种方法能成功的话，得到的后代应含_条染色体。(4)植物体细胞杂交技术和传统杂交技术相比的优点是_。解析(1)植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，根据酶的专一性原理，可采用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。(2)诱导原生质体融合的方法包括：物理方法(离心、振动、电激)和化学方法(聚乙二醇)；融合完成的标志是再生出新的细胞壁；将杂种细胞培育成杂种植株还需要采用植物组织培养技术，包括脱分化和再分化两个阶段，其中脱分化过程要避光，再分化过程需光。(3)如图通过植物体细胞杂交技术获得的“白菜甘蓝”体细胞染色体数为201838；通常情况下，由于白菜和甘蓝之间存在生殖隔离，因此白菜和甘蓝有性杂交是不能成功的；若对白菜和甘蓝采用杂交育种方法能成功的话，得到的后代的体细胞染色体数应为19。(4)植物体细胞杂交技术最大的优点是可以克服远缘杂交不亲和的障碍，培育作物新品种。答案(1)纤维素酶果胶酶(2)离心、振动、电激再生出新的细胞壁脱分化(3)38存在生殖隔离19(4)克服远缘杂交不亲和的障碍，培育作物新品种14.(8分)(2018山东烟台一模)如图表示利用小鼠胚胎干细胞(ES细胞)做的研究，分析回答下列问题。(1)a过程表示基因工程，则其核心步骤是_。该过程所使用的工具酶有_。(2)b过程可增加ES细胞的数量，若想从早期胚胎中获得更多的ES细胞，可将早期胚胎培养至_(时)期。d过程移入的胚胎能够存活，是因为代孕子宫不会对其发生_。同时能与受体子宫建立正常的_联系。用肝癌细胞作抗原刺激B淋巴细胞，再将此淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后获得细胞代谢产物_，该产物与抗癌药物结合制成“生物导弹”，从而定向杀死小鼠体内的肝癌细胞。(3)上述研究过程中使用的技术有_(至少3个)。若要培养试管动物，除以上技术外，还需要运用_技术。解析(1)图中a表示将致癌基因导入小鼠的胚胎干细胞(基因工程)，b表示胚胎干细胞的体外培养，c表示利用早期胚胎培养技术获得早期胚胎，d表示胚胎移植技术，最终获得转基因小鼠。基因工程的核心步骤为基因表达载体的构建，该过程所使用的工具酶有限制酶和DNA连接酶。(2)通过胚胎干细胞的体外培养，可以获得更多的ES细胞，其采用的技术属于细胞工