2型糖尿病人氧化应激状态的实验研究-硕士论文

天津医科大学 硕士学位论文 2型糖尿病人氧化应激状态的实验研究 姓名：单春艳 申请学位级别：硕士 专业：内科学（内分泌与代谢） 指导教师：郑少雄 2002.5.1 硕t ：q z 位论文 缩略词表 D M ( d i a b e t e sm e l l i t u s ) 糖尿病 S O D ( s u p e r o x i d e d i s m u t a s e )超氧化物歧化酶 G S H P X ( g l u t a t h i o n ep e r o x i d a s e ) M D A ( m a l o n d i a l d e h y d e ) T B A ( t h i o b a r b i t u r i ca c i d ) R O S ( r e a c t i v e o x y g e ns p e c i e s ) T A O S ( t o t a la n t i o x i d a n ts t a t u P K C ( p r o t e i n k i n a s eC ) C A T ( c a t a l a s e ) 谷胱苷肽过氧化物酶 丙二醛 硫巴比妥酸 活性氧 S ) 总抗氧化能力 蛋白激酶C 过氧化氢酶 V E G F ( v a s c u l a re n d o t h e l i a lg r o w t hf a c t o r ) B M I ( b o d y m a s si n d e x ) 衄管内皮生长因子 体重指数 目口岛国 晗鑫 坝l j 学位论文 2 型糖尿病人氧化应激状态的实验研究 摘要 l 近螳年来，越来越多的证j ) l f ：5 & ，J i ，i j 基反应和非酶糖基化可 能足糖球瘸及其并发症的t 琏受l l 鬃。! 驯糖尿病和抗氧化剂与自由基 之间的平衡失调有关。糖尿病忠抒体内 j 摹生成增加而清除自由 基系统明显受损。在漫长的， 二物进化过程中，机体为了防御新陈代 谢及其它生命活动中氧自蜒的损伤和破坏，组织和细胞中建立和 形成了一整套完善的抗氧化防御系统，如超氧化物歧化酶 ( S u p e r o x i d eD i s m u t a s e ，简称S O D ) 、谷胱苷肽过氧化物酶 ( G l u t a t h i o n eP e r o x i d a s e ，简称G S H P X ) ，它们在体内的变化对机体 的生长、发育、成熟、衰老和死I ：起着不可低估的生理或病理性的 调控作用。脂质过氧化物是 】所f 】t h 基产生的与糖尿病并发症的 发生有非常密切的关系。一种测定脂质过氧化物方便而敏感的方法 是定量测定他们的代谢终未产物一丙一醛( M D A ) 。关于2 型糖尿 瘸患者氧化应激状态的研究幽外在八十年代中期，国内在九十年代 中期就已丌始，测定血清、红细 矬巾的S O D 、G S H P X 、M D A 、总 抗氧化能力( T o t a lA n t i o x i d a n tS t a t u s T A O S ) 水平，但各研究结果 极不一致，有升高，降低，及厄变化等各种报道。其相关因素的研 、 究结果也不相一致，目前尚九统的定论。夕弓 t 。 耳的：f 2 型糖尿病患者体I 、j 氰化应激状态有着极其重大的意义， L 虽然研究众多但仍无明确结沦，迄待进一步研究。为此我们回顾以 f 、 往文献设计了此项研究般们测定恣肯i 寿中S O D ，G S H P X ，M D A ， T A O S 水平，臼设计了一项指标：抗氧化比值A O R = S O D M D A 。 硕I + 学位论文 目的是近一步明确2 型糖尿病患者的氧化应激状态以及其与并发症 的关系，为其作为早期诊断，预后及疗效指标应用于临床做一些初 步探索。 ， 方法：2 0 0 1 年 ：半年天津医科大学代谢病医院住院2 型糖尿病 忠暂1 7 4 私( W H O l 9 9 9 年糖尿病诊断分型标准) 。男9 4 名，女8 0 名，平均年龄5 5 3 4 1 2 2 2 。所有患者均除外下列疾病：急性心肌梗 塞，急、慢性，C 力衰竭，急、慢性心律失常，不稳定心绞痛，脑梗 塞、脑啦血急中# 期，肝、肾功能不令，急、慢性感染，肿瘤，结缔 组织病。除1 2 名新诊2 型糖尿病患者以反复酮症收住入院外，其他 患者均无酮症。诊断糖尿病4 i 到年患者为新诊糖尿病组( n = 5 6 ) ， 病程大于等于一年患者为长期糖尿病组( n = 1 1 6 ) 。按是否合并微血 管病变( 糖尿痫肾痫、糖尿病视网膜病变) 和大血管病变( 冠心病 一根据W H O 的“缺血性心脏瘸的命名及诊断标准”，陈旧脑梗塞、 脑出血一通过问珍、查体、可疑病人结合头颅C T 诊断，下肢动脉闭 塞性病变) 分为：微血管病变纽( n = 2 2 ) ，大血管病变组( n = 3 3 ) ， 大微虹管病变组( n = 7 4 ) ，无血管病变组( n - 1 1 ) 。按一级亲属中是 否有糖尿病患者分为阳性家族史组( n = 9 0 ) 和阴性家族史组( n = 8 2 ) 。 按其2 4 小时尿微鞋臼蛋白排泄率U M A 分为正常自蛋白尿组一U M A 3 0 m e f l d ( n = 7 0 ) ，微量自蛋白尿组一3 0 m g ，d U M A 3 0 0 m e J d ( n - 7 6 ) ，l 际眯赞1 7 1 尿组一u N A 3 0 0 m g d ( n = 1 7 ) 。新诊糖尿病患 者根据有免酮癌分为酮症组( n = 1 2 ) 和非酮症组( n = 4 0 ) 。J 下常对照 组( n = 4 2 ) 束【，| 某高校教师血压 1 3 0 8 0 m m H g ，血脂F 常，无心、 脑血管疾病。受枪者隔夜窄腹瞅静脉血测定：血清甘油三脂( T G ) 、 胆阎醇( C H O ) 、低密度脂蛋臼( L D L ) 、高密度脂蛋白( H D L ) 、糖 硕士学位论文 化血红蛋白( H b A I c ) 、纤维蛋白元( F I B ) 、S O D 、M D A 、T A O S 、 G S H P X 。酮症入院患者，取m 时酮症仍存在。除酮症患者外，同时 行口服葡萄糖耐量试验及测定血清胰岛素和c 肽，酮症患者在酮症 纠J 下后测定。测定血压，体重指数( B M I ) ，留取2 4 小时尿液测定 尿微量白蛋白排泄率( U M A ) 。行双下肢血管彩超检查，行眼底摄 片检查。 结果：研究发现糖尿病组血清S O D 、T - A O S 、G S H P X 、S O D M D A 低于对照组，血清M D A 高于对照组。2 型糖尿病人S O D 与病程，年 龄，F P G ，U M A 、收缩压负相关；M D A 与年龄，病程，收缩压， F P G ，C H O ，L D L ，1 b A l c 正相关，与U M A 负相关，M D A 与S O D 负相关。G S H P X 与病程，年龄负相关，与S O D 正相关，与M D A 负相关；T A O S 与年龄，病程，F P G ，服7 5 9 葡萄糖2 小时后血糖， 胰岛素，H b A I c ，U M A 负相关，与S O D ，G S H P X 正相关，与M D A 负相关；抗氧化比值S O D M D A 与病程，年龄，F P G ，I t b A l c ，U M A 、 收缩压负相关，与S O D ，G S H P X ，T A O S 正相关，与M D A 负相 关。 萨常对照组，新发糖尿病组，长期糖尿病组，T A O S ，S O D M D A 逐渐降低，M D A 逐渐升高，但正常对照组与新发糖尿病组之间S O D 值差异无显著性，两组又高于长期糖尿病组；甚至新发糖尿病组 G S H P X 高于n ：常对照组，两组又高于长期糖尿病组。新发2 型糖 尿病患者，酮症组服7 5 9 葡萄糖2 小时后血糖和H b A l c 高于非酮症 组，胰岛素和C 肽低j ：非酮症组，S O D 和G S H P X 高于非酮症组， M D A 、T - A O S 、S O D M D A 值两组无差异。 2 型糖尿病患者， i 常白蛋白尿纽，微量自蛋白尿组，临床白蛋 硕上学位论文 白尿组S O D ，T A O S ，s 0 D ，M D A 逐渐降低，G S H P X 正常白蛋白 尿组高于其他两组，M D A 逐渐升高，临床白蛋白尿组血压明显高于 其它两组。 大微血管病变组S O D 、T A O S 、G S H P X 、S O D I V l D A 较之无血 管病变组明显降低；大血管病变组和无血管病变组S O D 、S O D l V I D A 无明显差异，高于其他两组，其他两组这两项指标无显著性差异； 无血管病变组，微血管病变纽大血管病变组，大微血管病变组 G S H P X 逐渐降低；微血管痫变组、大血管病变组、无血管病变组 T A O S 无显著性差异，高于大微血管病变组：M D A 除大微血管病变 组明显高于无血管病变组外，其他各组问无显著性差异。 2 型糖尿病患者，阳性家族史组和阴性家族史组之间S O D ， M D A ，T A O S ，G S H P X ，S O D M D A 值无差异。 另外，本研究尚有一些其他发现：2 型糖尿病人中，空腹血清胰 岛素，服7 5 9 葡萄糖2 小时后血清胰岛素，以及T G 与B I I I 正相关， H D L 、H B A l C 与B M I 负相关。说明在2 型糖尿病中B M I 是一个很重要 。 的因素。H ， 结论：机体的抗氧化状态与2 型糖尿病有着密不可分的关系。 糖尿病患者血清S O D 、T A O S 、( 跚卜P X 、S O D M D A 显著下降，M D A 显著 升高。几项指标均与病程、年龄相关。除G S H P X 外，其余几项指标 与F P G 和U M A 相关。M I ) A 与血脂关系密切。各项指标间也具有密切的 相关关系。但本研究尚不能明确其与疾病状念的直接因果关系及病 理机理。本研究发现，发病初期S O D 值没有下降，而是与正常相差 不多，G S H P X 甚至上升，可能反映了一种代偿机制而非耗竭现象。 在发生酮症这种急性疾病状念时S O D 、G S H X 也是上升的。本研究 硕1 ：学位论文 同时发现糖尿病肾病、糖尿病血管病变与机体的抗氧化状态关系密 ， 切。( 选择家族史作为考虑指标，没能发现2 型糖尿病患者机体抗氧 化状念与遗传的关系。总之，关于2 型糖尿病患者机体抗氧化状念 的研究需要进行荟萃分析，需要将其作为干预指标进行长期 i 瞻“ ： 17 的临床研究，才能得到可靠结论。尼 ， ，t 关键词：2 型糖尿病S O DG S H P xM D A 总抗氧化能力 堡土兰堡堡兰 T h e s t u d yo f a n t i o x i d a n ts t a t u si np a t i e n t s w i t hT y p e2d i a b e t e sm e l l i t u s A b s t r a c t O x i i d a t i v es t r e s si sp o s t u l a t e dt Ob ei n c r e a s e di np a t i e n t s w i t hd i a b e t e sm e l l i t u s A c c u m u l a t i n ge v i d e n c es u g g e s t s t h a to x i d a t i v ec e l li n j u r yc a u s e db yf r e er a d i c a l sc o n t r i b u t e st o t h e d e v e l o p m e n t o fb o t h m a c r o a n g i o p a t h y 1 2 j a n d m i c r o a n g i o p a t h y 3 1o c c u r r i n g a s c o m p l i c a t i o n s o fd i a b e t e s m e l l i t u s D i a b e t e si Sw e l lk n o w nt oi n d u c ec h a n g e si n t h e t i s s u ec o n t e n ta n da c t i v i t yo fa n t i o x i d a n te n z y m e s 【4 1 1 5 iO n t h e o t h e r h a n d ，e x t r a c e l l u l l a r f l u i d sl a c k p r o t e c t i o nb y t h e a n t i o x i d a n t e n z y m e s b u tc o n t a i nv a r i o u sa n t i o x i d a n t s t h a t d e l a yo ri n h i b i tt h eo x i d a t i v ep r o c e s sb yt h e i rp r e s e n c ea t a m u c hl o w e rc o n c e n t r a t i o nt h a nt h a to fa no x i d i z a b l e s u b s t r a t e 6 1R e c e n ts t u d i e sh a v ed o c u m e n t e d t h a t h y p e r g l y c e m i a c a l lc a u s e g e n e r a t i o n o f o x y g e n r a d i c a l s ， i n c r e a s e do x i d a t i v es t r e s s a n da c c u m u l a t i o n o f l i p i d p e r o x i d a t i o np r o d u c t s ，s u c ha sm a l o n d i a l d e h y d e ( M D A ) i n t h eb l o o do fd i a b e t i ca n i m a l sa n dD a t i e n t s 【7 J1 8 1 T h e r e l a t i o n s h i pb e t w e e n o x i d a t i v es t r e s sa n dd i a b e t i c p a t i e n t si ss t i l ld e b a t e d T h i si sl a r g e l yd u e t ot h el a c ko f g o o d - 7 顺 学位论文 t o o l st oa s s a yt h el e v e lo fo x i d a t i v es t r e s s W eh a v em e a s u r e d t h es e r u mc o n c e n t r a t i o n so fS O D ，G S H P X ，M D A ，T A O S ， a n de s t i m a t e dA O R ( S O D M D A ) i n17 4 T y p e 2d i a b e t i c p a t i e n t s a n d4 2w e l l m a t c h e d h e a l t h ys u b j e c t s T h e s e r u m l e v e l so fS O D ，T A O S ，G S H P Xw e r ed e c r e a s e di nT y p e2 D M B u tM D Aw a si n c r e a s e d T h e ya l lc o r r e l a t e dw e l lw i t h t h ed u r a t i o no fd i s e a s ea n da g e T h e ya l lc o r r e l a t e dw i t hF P G a n dU M A e x c e p t f o rG S H P X T h ei n c r e a s e dM D A c o n c e n t r a t i o nw a sc o r r e l a t e dw i t ht h e d e g r e e o f h y p e r l i p i d e m i ae x i s t e di nT y p e 2D M W ea l s of o u n dt h a ti n t h ee a r l ys t a g eo ft h ed i s e a s e ，t h eS O Da n dG S H - P Xl e v e l s w e r en o td e c r e a s e d O nt h eo t h e rh a n d ，t h eG S H P Xw a s i n c r e a s e d T h i ss u g g e s t sa na d a p t i v er a t h e rt h a nad e l e t e r i u o s p h e n o m e n o n I n t h en e w l yd i a g n o s e dp a t i e n t sw i t hD K A ，t h e S O D ，G S H P X l e v e l sw e r ei n c r e a s e d T h e r ew e r ea l s o e v i d e n c e s s u g g e s t i n g t h a to x i d a t i v es t r e s s m a y b ea n i m p o r t a n tp a t h o g e n e t i cf a c t o ri nt h ed e v e l o p m e n to fd i a b e t i c v a s c u l a r c o m p l i c a t i o n s I nc o n c l u s i o n ，a b o u tt h i sp r o b l e mw en e e dm e t a - a n a l y s i s o ft h e e x i s t i n g s t u d i e sa n dw ea l s on e e d p r o s p e c t i v e r a n d o m i z e d l o n g t e r mc l i n i c a ls t u d i e s K e yW o r d s ：T y p e 2D MS O DG S H - P XM D AT A O S 8 硕l 。学位论史 前言 近些年来，越来越多的证据显示，自由基反应和非酶糖基化可 能是糖尿病及其并发症的重要凶素。1 9 1 1 1 0 l 1 2 型糖尿病和抗氧化剂 j 刚“基之间的平衡失调有灭。ix 2 自由基是指有不成对电子的原 一f 、分r 、离f 或基团等。所有需氧生物体内均可产生自由基活性 氧，它们在机体内执行许多i 1 ：常的生理功能。另一方面，过多的自 由基攻击重要的生物大分子，导致机体损伤。所以需氧生物体内都 有清除自由基的防御体系。人体内促氧化剂和抗氧化剂是处在一种 动态平衡之中。若促氧化剂作用增大或抗氧化剂作用下降，机体便 处于氧化应激状态( O x i d a t i v eS t r e s s ) 。在氧化应激状态下，机体内 自由基会不断产生而清除能力明显受阻。许多自由基会氧化损伤蛋 白质，核酸，酶，碳水化合物，脂质和生物膜等重要生物大分子， 最终导致机体衰老和患病。糖尿病患者体内自由基生成增加而清除 自由基系统明显受损。但是，高血糖，高胰岛素血症，高脂血症与 氧化应激之间的关系尚存争议。氧化应激出现在糖尿病之前，并发 症出现之前抑或仅是出现并发症的反应尚有疑问，有研究发现在l 型糖尿病人的非糖尿病亲属中其机体的氧化还原状态存在异常。D 4 在漫长的牛物进化过程中，机体为了防御新陈代谢及其它生命活动 中氧自由基的损伤和破坏，组织和细胞中建立和形成了一整套完善 的抗氧化防御系统，如超氧化物歧化酶( S u p e r o x i d eD i s m u t a s e ，简称 S O D ) 、谷胱苷肽过氧化物酶( G l u t a t h i o n eP e r o x i d a s e ，简称G S H P X ) ， 它们的改变或变化对机体的生长、发育、成熟、衰老和死亡起着不 可低估的生理或病理性的调控作用。脂质过氧化物被认为是由自由 基产生，它参与糖尿病并发癌的发，卜。一种测定脂质过氧化物方便 硕士学位论文 而敏感的方法是定量测定他们的代谢终未产物一丙二醛( M D A ) 。 关于2 型糖尿病患者氧化应激状态的研究国外在八十年代中期，国 内在九十年代中期就已开始，测定血清、红细胞中的S O D 、G S H 。P X 、 M D A 、总抗氧化能力( T A O S ) 水平，但各研究结果极不一致，有 升高，降低，及无变化。其相关闪素的研究结果也极不一致，目前 均无统一的定论。其原因可能有以下几个方面：1 糖尿病是一种复 杂的疾病，对其认识尚需一个复杂的过程。2 目前的研究样本量均 较小( 十儿例至几十例) ，可能无力发现某些差异和相关。3 氧化应 激状态受许多因素的影响，如果在实验设计上有缺陷，没有能去除 一些混杂因素，就会使结果出现偏差。4 测定方法的缺陷，这个问 题经过十余年的研究已基本解决，其测定方法无论进口药盒还是国 产药盒均已达到统一，成熟，可靠。0 5 - 2 0 l 总之，2 型糖尿病患者体内氧化应激状态有着极其重大的意义， 虽然研究众多但仍无明确结论，迄待进一步研究。有人甚至提出糖 尿病患者除监测血糖，血脂，血压以外，还应监测氧化应激状态。 有人设想：糖尿病人对微血管，大血管并发症的敏感性的不同，可 能是由于其内源性抗氧化系统状态不同引起。为此我们回顾以往 文献设计了此项研究。为了去除红细胞膜胆固醇，脂肪酸浓度的影 响，且使方法简便易行便于今后应用于临床，我们测定患者血清中 S O D ，G S H - P X ，M D A ，T A O S 水平，且参考文献设计了一项指标： 抗氧化比值A O R = s o D ，M D A 。目的是弄清2 型糖尿病患者的氧 化应激状态以及其与并发症的关系，为其作为早期诊断，预后及疗 效指标应用于临床做一些初步探索。 硕：1 学位论文 材料与方法 2 0 0 1 年I | 、# 年天津医科大学代谢病医院住院2 型糖尿病患者 1 7 4 名( W H O l 9 9 9 年糖尿病诊断分型标准) 。男9 4 名，女8 0 名， 平均年龄5 5 3 4 1 2 2 2 。所有患者均除外F 列疾病：急性心肌梗塞， 急、慢性心力衰竭，急、慢性心律失常，f ；稳定心绞痛，脑梗塞、 脑出血急性期，肝、肾功能不全，急、慢性感染，肿瘤，结缔组织 病。除1 2 名新诊2 型糖尿病患者以反复酮症收住入院外，其他患者 均无酮症。 受枪者隔夜空腹取静脉血测定：血清甘油三脂( T G ) 、胆固醇 ( C H 0 ) 、低密度脂蛋白( L D L ) 、高密度脂蛋白( H D L ) 、糖化血红 蛋白( H b A l C ) 、纤维蛋白元( F I B ) 、S O D 、M D A 、T A O S 、G S H P X 。 酮症入院患者，取血时酮症仍存在。除酮症患者外，同时行口服葡 萄糖耐量试验及测定血清胰岛素和C 肽，酮症患者在酮症纠正后测 定。测定血压体重指数( B M I ) ，留取2 4 小时尿液测定尿微量白 蛋白排泄率( U M A ) 。行双下肢血管彩超检查，行眼底摄片检查。 诊断糖尿病不到一年患者为新诊糖尿病组( n = 5 6 ) ，病程大于等 于一年患者为长期糖尿病组( n = 1 1 6 ) 。按是否合并微血管病变( 糖 尿病肾病、糖尿病视网膜病变) 和大血管病变( 冠心病一根据W H O 的“缺血性心脏病的命名及诊断标准”，陈旧脑梗塞、脑出血一通过 问诊、查体、可疑病人结合头颅C T 诊断，下肢动脉闭塞性病变) 分 为：微血管病变组( n = 2 2 ) ，大血管病变组( n = 3 3 ) ，大微血管病变 组( n = 7 4 ) ，无血管病变组( n ：l I ) 。按一级亲属中是否有糖尿病患 者分为阳性家族史组( n = 9 0 ) 和阴性家族史组( n = 8 2 ) 。按其2 4 小 时尿微量白蛋白排泄率U M A 分为正常白蛋白尿组- - U M A 3 0 m g d 硕j ：学位论文 ( n = 7 0 ) ，微量自蛋白尿组- - 3 0 m g d 一U M A 3 0 0 m g d ( n = 7 6 ) ，临 床蛋白尿组U N A 3 0 0 m g d ( n = 1 7 ) 。新诊糖尿病患者根据有无酮 症分为酮症组( 1 1 = 1 2 ) 和非酮症组( n = 4 0 ) 。 正常对照组( n = 4 2 ) 来自某高校教师，男2 3 名，女1 9 名，平 均年龄5 6 6 4 l O 9 8 ，血压 1 3 0 8 0 m i n i I g ，血脂币常，无一C ，、脑血 管疾病。 S O D 、M D A 、T A O S 、G S H P X 试剂盒购自南京建成生化制品 有限公司，严格按照说明书进行操作。取瓯分离血清后一2 0 保存， 5 天内测定。计算抗氧化比值A O R = S O D M D A 。其余生化、放免、 眼底摄片、下肢血管彩超为本院常规检查。 以下是几种被测物质的测定原理： 、谷胱苷肽过氧化物酶( G S H P X ) ： G S H P X 是机体内广泛存在的一种重要的催化过氧化氢分 解的酶。它特异的催化还原型谷胱苷肽( G S H ) 对过氧化氢的 还原反应，可以起到保护细胞膜结构和功能完整的作用。 G S H P X 的活性中心是硒半胱氨酸，硒是G S H P X 的必需部分， 每克分子酶含有4 克原子硒。测定G S H P X 的活力可以作为衡 量机体硒水平的一项生化指标。 G S H P X 可以促进过氧化氢与还原型谷胱苷肽反应生成 H 2 0 及氧化型谷胱苷肽( G S S G ) ，G S H P X 的活力可用其酶促 反应的速度来表示，测定此酶促反应中还原型谷胱苷肽的消耗， 则可求出酶的活力。 G S H P X 2 H 2 0 + G S S f 硕七学位论文 G S H P X 的活力以催化G S H 的反应速度来表示，由于这两 个底物在没有酶的条件下，也能进行氧化还原反应( 称非酶促 反应) 所以最后计算此酶活力时必须丰除非酶促反应所引起的 G S H 减少的音I ；分。 G S H 量的测定：G S H 和二硫代二硝基苯甲酸作用生成5 一 硫代二硝基苯甲酸阴离子呈现较稳定的黄色，在4 1 2 r i m 处测其 吸光度即可计算出G S H 的量。 定义：规定0 1 m l 血清在3 7o C 反应5 分钟，扣除非酶促反 应作用，使反应体系中G S H 浓度降低lg tm o l L 为一个酶活力 单位。 二、丙二醛( M D A ) ： M D A 是过氧化脂质降解产物之一，测定M D A 的量常常可 反映机体内脂质过氧化的程度。M D A 可与硫代巴比妥酸( T B A ) 缩合，形成红色产物，在5 3 2 n m 处有最大吸收蜂。 三、超氧化物歧化酶( S O D ) ： 采用黄嘌呤氧化酶法测定。通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反 应系统产生超氧阴离子自由基( 0 2 “ - ) 后者氧化羟胺形成亚硝酸 盐，在显色剂的作用下呈现紫红色，用可见光分光光度计测其 吸光度。当被测样品中含S O D 时，则对超氧阴离子自由基有专 一性的抑制作J 【 J ，使形成的亚硝酸盐减少，比色时测定管的吸 光度值低于对照管的吸光度值，通过公式计算可求出被测样品 中的S O D 活力。 定义：每m l 反应液中S O I ) 抑制率达5 0 时所对应的S 0 1 ) 量 硕士学位论文 为个亚硝酸盐单位( N U ) 。 四、总抗氧化能力： 机体内的抗氧化物质，能使F e ”还原成F e ”，后者可与菲啉 类物质形成稳固的络合物，通过比色可测出其抗氧化能力的高 低。 定义：在3 7o c 时，每分钟每毫升血清样品，使反应体系的 吸光度( O D ) 值每增加0 叭时，为个抗氧化能力单位。 使用仪器：离心机 立U 3 0 0 0 紫外可见分光光度计 恒温水浴箱 统计学处殚：所有资料均输入微机，使用S P S S l 0 0 统计软件处 理。实验室数据以均数标准差表示，两组以上比较采用A N O V A ， 组问比较用q 检验。两组间比较用独立t 检验法。P 0 0 5 被认为有 统计学差异。 硕 ：学位论文 结果 糖尿病组和正常对照组在年龄( 5 5 3 4 1 2 2 2V S5 6 6 4 1 0 9 8 ) ， B M I ( 2 4 5 4 3 8 lV S2 4 5 4 4 6 2 ) ，性别( 分别为：男9 4 ，女7 9 和 男2 3 ，女1 9 ) 卜均有可比性。空腹血浆葡萄糖、空腹胰岛素、服7 5 9 葡萄糖2 小时厢【f 【L 浆葡萄糖糖尿病组升高( p 0 0 1 ) 。糖尿病组T G 、 C l I O 、L D L 、H b A l C 升高( p O 0 1 ) 。糖尿病组血清S O D 、T A O S 降低( p 0 0 1 ) ，G S H P X 降低( p O 0 5 ) ，血清M D A 生高( p O 0 1 ) ， S O D M D A 降低( p 0 0 i ) 。见表一。 2 型糖尿病人中，空腹血清胰岛素( r = O 2 1 5 ，p 0 0 1 ) ，服7 5 9 葡萄糖2 小时后血清胰岛素( r = 0 2 0 9 ，p 0 0 1 ) ，以及T G ( r = 0 2 3 4 ， p 0 0 1 ) 与B M Id i 相关；H D L ( r = 一0 2 4 5 ，p 0 叭) ，H b A I c ( r = 一0 2 0 3 ，p 0 0 1 ) 1 jB M I 负相关。 2 型糖尿病人S O D 与病程，年龄，F P G ，U M A 负相关( p O 0 1 ) ， 与收缩压负相关( p O 0 5 ) 。M D A 与年龄，病程，收缩压，F P G ， C H O ，L D L ，H b A l c 正相关( p O 0 1 ) ，与U M A 负相关( p 0 0 5 ) 。 M D A 与S O D 负相关( p O 0 1 ) 。G S H P X 与病程，年龄负相关( p O 0 1 ) ，与S O D 正相关( p 0 0 1 ) ，与M D A 负相关( p 0 0 1 ) 。 T A O S 与年龄，病程，F P G ，服7 5 9 葡萄糖2 小时后血糖，胰岛素， H b A l c ，U M A 负相关( p 0 0 1 ) ，与S O D ，G S H P X 正相关( p 0 0 1 ) ，与M D A 负相芙( p 0 叭) 。抗氧化比值S O D M D A 与病程， 年龄，F P G ，t t b A l c ，U M A 负相关( p 0 0 1 ) ，与收缩压负相关( P 0 0 1 ) ，与S O D ，G S I f P X ，T A O S 难相关( p 0 0 1 ) ，与M D A 负相关( p 0 0 I ) 。见表- 。 钡1 学位论文 。t t J r l ( 9 女1 年龄( 岁) 表一糖尿病人与正常人群某些指标的比较 糖脓病组( n = 1 7 3 ) 9 4 | 7 9 B M I ( k g m 2 ) F P G ( m m o l L ) F I N S ( I U L ) P 2 P G ( m m o l L ) P 2 1 N S ( m m o l L ) T G ( m m o l L ) C H O ( m m o l L ) L D L ( m m o l L ) H D L ( m m o l L ) G H b ( ) S O D ( N U m 1 ) M D A ( n m o l m l 、 T A O S ( U m l 、 G S H P x ( 活力学位) S O D ，M D A ( ”p 0 0 I + p 0 0 5 ) 5 5 3 4 1 2 2 2 2 4 5 4 3 8 1 9 8 9 5 3 4 6 0 8 9 8 7 6 3 0 9 1 8 4 1 7 5 6 0 3 2 6 3 2 8 2 2 1 6 3 2 2 1 3 2 3 1 2 5 6 1 8 j 3 3 2 3 6 2 0 1 1 3 6 1 4 3 6 0 4 1 8 9 1 6 0 2 2 6 2 8 5 _ 3 7 8 1 3 9 7 1 4 9 9 4 0 2 9 0 7 3 6 4 1 6 6 l 7 7 4 8 9 1 4 4 3 2 1 7 1 7 0 3 2 4 2 ：常对照约 ( n = 4 2 ) 2 3 1 9 5 66 4 1 0 9 8 2 4 5 4 46 2 4 9 8 l 0 6 7 5 + 5 2 1 2 1 6 4 0 + + 67 6 0 0 7 9 9 + + 2 5 4 6 l 6 8 3 0 1 2 7 4 0 6 2 5 + + 5 0 2 1 0 9 9 6 + + 2 9 3 6 0 6 2 2 + + 1 5 5 7 0 2 8 l 5 6 4 0 0 5 0 8 + 9 9 9 9 l 9 3 5 5 + + 4 0 7 2 0 4 4 l + 9 5 2 l 0 8 8 4 + 4 8 06 4 0 - L - _ 5 9 3 1 + 2 48 2 7 3 4 4 6 + + 硕 j 学位论文 病程 年龄 S o D 0 6 0 4 0 2 2 6 收缩压 一0 1 5 4 + F P G02 6 4 P 2 P G P21NS| C H O L D L G H b U M A0 4 1 l S o D M D A G S H P X T A O S 表二备相关指标问的相关系数 M D A 0 4 0 3 0 ，2 5 2 0 2 0 8 0 2 7 3 0 3 9 6 0 4 1 9 0 3 2 7 O 1 7 3 + 0 2 6 l ( + p 00 5 ，其余p 0 0 1 ) G S H P XT A o S O 7 l O 一0 5 0 8 0 5 3 0 0 4 6 7 17 0 5 4 4 0 3 3 9 0 4 5 9 0 2 3 2 0 2 4 l O 5 3 5 0 2 5 9 0 5 2 0 0 5 3 6 0 4 7 5 S o D ，M D A 0 6 4 4 0 2 7 3 一O 1 8 3 + 一0 3 1 l O 1 9 4 * 0 3 9 8 09 4 9 0 5 4 1 0 6 0 0 0 6 1 4 坝J j 学位论文 表三长期糖尿病人和新发糖尿病人指标比较 长期糖尿病组新发糖尿病组f 常对照组l A 组( r l = 1 1 6 ) B 组( n = 5 6 ) C - * i l ( r l = 4 2 ) 男女 S O D ( N U I m l ) M D A ( n m o | m | ) T A O S ( U m 1 ) 6 4 5 2 7 9 4 3 1 0 4 7 5 0 5 O 2 7 6 9 7 1 7 0 3 0 2 6 9 7 8 l 1 2 1 9 2 3 1 9 9 9 9 9 9 3 6 4 8 8 0 3 04 0 8 0 4 4 + 4 8 1 5 1 2 69 5 2 O 8 8 4 8 G S H P Xt 活，J 单位) 7 1 2 9 1 2 1 09 0 1 5 9 9 5 8 0 6 4 - I - 5 9 3 + + S O D M D A 1 5 7 8 2 3 62 0 0 6 2 9 5 2 4 3 8 3 4 5 + 4 ( “p O O l 二绷闻有筹异) ( p O 0 1A 组与B 、C 编问有差异) 正常对照组，新发糖尿病组，长期糖尿病组，T - A O S ，S O D M D A 逐渐降低，M D A 逐渐升高，差异有显著性( p 0 0 5 ) ，两组又高 于长期糖尿病组( p O 0 1 ) ，甚至新发糖尿病组G S H - P x 高于正常 对照组，两组又高于长期糖尿病组( p 0 0 1 ) 。见表五。 18 硕L 学位论文 表四阳性和阴性家族史糖尿病人指标比较 阳r J ：家族史组| 5 月性家族L 史组 ( n = 9 0 )( n = 8 2 ) 男，女 5 1 3 94 2 4 0 S O D ( N U m 1 ) 8 6 5 7 8 1 4 3 8 68 4 12 9 I35 4 7 M D A ( n m o l m 1 1 4 9 7 5 o2 2 25 0 1 8 _ 4 - O 3 5 l T A O S ( U m 1 ) 7 5 1 2 l5 2 57 1 8 0 1 7 9 2 G S H P X ( 活j 单位17 6 8 0 2 1 4 4 8 77 8 1 1 9 1 4 4 7 5 S O D M D A1 7 4 1 9 317 21 6 9 0 4 33 3 4 2 型糖尿病患者，阳性家族史组和阴性家族史组之间S O D ， M D A ，T A O S ，G S H P X ，s O I ) M D A 值无差异。见表四。 硕j ：学位论文 表五酮症和非酮症新发糖尿病人指标比较 一 一 酮症组 J f ：酮症组 男女 P 2 P G ( m m o l L ) P 2 n U S0 U I 。) P 2 C 肽( p m o l m 1 ) H b A l c ( ) S O D ( N U m 1 ) M D A ( n m o l m 1 ) T A O S ( U m 1 ) G S H P X 活力单位) S O D ，M D A ( + p 0 0 5 ) tn = 1 2 ) 8 4 2 05 6 6 6 4 2 4 l5 8 2 7 82 6 3 1 8 7 7 4 - 0 9 0 5 1 08 6 0 2 6 7 6 1 0 3 3 6 0 1 40 6 5 4 9 2 0 0 15 0 8 0 7 5 0 9 5 9 9 5 5 7 6 5 7 1 8 2 1 0 1 6 2 8 8 8 2 0 ( n = 4 0 ) 2 l 1 9 1 6 7 6 8 53 17 + 3 0 0 2 6 1 07 17 + 34 7 3 28 4 9 + 8 8 6 5 2 2 1 6 + 9 6 1 8 5 I1 6 7 3 + 4 8 7 l 0 3 3 4 8 17 0 I3 5 4 8 8 5 3 6 1 0 4 5 8 + 1 9 7 5 3 3 0 1 6 堡! ：堂垡堡壅一 表六各期糖尿病肾病病人指标比较 l 【：常门蛋白尿组 微量白蛋白尿绑 临床白蛋白尿缃 A 细( n = 7 0 )B 组( n = 7 6 ) C 组( n = I 7 ) 男，f ( 3 7 3 3 4 6 3 0 1 0 7 收缩压( m m H g ) I3 4 1 4 2 2 2 61 3 4 2 3 1 9 6 0 1 4 8 5 7 3 1 8 3 舒张H ( m m H g ) 8 1 2 1 1 2 0 2 8 0 2 8 1 0 0 3 8 8 2 1 1 6 1 3 S O D ( N U m 1 ) 8 9 9 4 3 1 2 9 6 3 8 3 8 9 5 1 3 3 5 1 7 0 3 8 6 1 5 0 4 7 + + M D A ( n m o l m 1 ) 4 9 0 7 O 2 4 95 0 4 5 O 3 1 2 5 2 3 7 - - + 0 2 8 1 + + T A O S ( U m 1 ) 7 8 2 6 I 4 9 97 2 6 0 - + 1 8 7 3 5 8 3 7 - + 1 7 9 9 + G S H P X I 活，J 币位)8 0 4 6 0 1 4 1 5 4 7 5 3 4 8 1 4 6 0 8 7 4 2