索氏抽提法实验报告.doc

索氏抽提法实验报告一、实验目的1.了解索氏抽提法测定粗脂肪含量的原理；2.掌握索氏抽提法测定粗脂肪含量操作方法；3.测定脂肪的含量，可以作为鉴别样品品质优劣的一个指标。二、实验原理脂肪含量的测定有很多方法，如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、电测和核磁共振法等。目前国内外普遍采用抽提法，其中索氏抽提法（Soxhlet extractormethod）是公认的经典方法，也是我国粮油分折首选的标准方法。本实验采用索氏抽提法中的残余法，即用低沸点有机溶剂（乙醚或石油醚）回流抽提，除去样品中的粗脂肪，以样品与残渣重量之差，计算粗脂肪含量。由于有机溶剂的抽提物中除脂肪外，还或多或少含有游离脂肪酸、甾醇、磷脂、蜡及色素等类脂物质，因而抽提法测定的结果只能是粗脂肪。三、实验试剂和器材1.实验材料 油料作物种子(花生)、中速滤纸.2.仪器 SZF-06A脂肪仪 干燥器(直径1518cm，盛变色硅胶) 不锈钢镊子（长20cm） 培养皿 分析天平 称量瓶 恒温水浴 烘箱 样品筛（60目）3.试剂 无水乙醚或低沸点石油醚（A.R.）四、操作步骤1.准备 将滤纸切成4cm4cm，叠成一边不封口的纸包，用硬铅笔编写顺序号，按顺序排列在培养皿中。将盛有滤纸包的培养皿移入1052烘箱中干燥2h，取出放入干燥器中，冷却至室温； 按顺序将各滤纸包称重（记作a）、(称量时室内相对湿度必须低于70)。2.包装和干燥 将花生研碎,放入1052的烘箱中干燥3h，移至干燥器中冷却至室温； 称取约0.5g左右研碎的样品放入上述已称重的滤纸包中装入，封好包口，按顺序号依次放入称量瓶中称重（记作b）。3.抽提 将装有样品的滤纸包用长镊子放入抽提筒中，向其中注入一次虹吸量的1.67倍的无水乙醚，使样品包完全浸没在乙醚中； 连接好抽提器各部分，接通冷凝水水流，在恒温水浴中进行抽提，调节水温为60，使冷凝下滴的乙醚成连珠状（10min-15min虹吸一次），抽提至抽取筒内的乙醚用滤纸点滴检查无油迹为止（约需612h,本次实验1h）； 抽提完毕后，用长镊子取出滤纸包，在通风处使乙醚挥发（抽提室温以1225为宜）。提取瓶中的乙醚另行回收。4.称重 待乙醚挥发之后，将滤纸包置于65烘箱中干燥15min，放入干燥器冷却至恒重为止（记作c）。五、实验结果式中：a：称量瓶加滤纸包重（g） b：称量瓶加滤纸包和烘干样重（g） c：称量瓶加滤纸包和抽提后烘干残渣重（g）由实验得数据：a：称量瓶加滤纸包重（g）0.23b：称量瓶加滤纸包和烘干样重（g）0.84c：称量瓶加滤纸包和抽提后烘干残渣重（g）0.48即本次试验得粗脂肪含量为：59.02六、注意事项1.测定用样品、抽提器、抽提用有机溶剂都需要进行脱水处理。这是因为：第一，抽提体系中有水，会使样品中的水溶性物质溶出，导致测定结果偏高；第二，抽提体系中有水，则抽提溶剂易被水饱和（尤其是乙醚，可饱和约2的水），从而影响抽提效率；第三，样品中有水，抽提溶剂不易渗入细胞组织内部，结果不易将脂肪抽提干净；2.试样粗细度要适宜。试样粉末过粗，脂肪不易抽提干净；试样粉末过细，则有可能透过滤纸孔隙随回流溶剂流失，影响测定结果；3.索氏抽提法测定脂肪最大的不足是耗时过长，如能将样品先回流12次，然后浸泡在溶剂中过夜，次日再继续抽提，则可明显缩短抽提时间；4.YG-型油分测定器容量大，适合于样品较多的选种鉴定工作使用，温度控制在70左右，8h可提取完毕；5.必须十分注意乙醚的安全使用。抽提室内严禁有明火存在或用明火加热。乙醚中不得含有过氧化物，保持抽提室内良好通风，以防燃爆；6.乙醚中过氧化物的检查方法是：取适量乙醚，加入碘化钾溶液，用力摇动，放置1min，若出现黄色则表明存在过氧化物，应进行处理后方可使用。处理的方法是：将乙醚放入分液漏斗，先以1/5乙醚量的稀KOH溶液洗涤23次，以除去乙醇；然后用盐酸酸化，加入1/5 乙醚量的FeSO4 或Na2SO3溶液，振摇，静置，分层后弃去下层水溶液，以除去过氧化物；最后用水洗至中性，用无水CaCl2或无水Na2SO4脱水，并进行重蒸馏。七、思考与讨论1.如何利用残余法测定油料作物种子中的粗脂肪含量？答：残余法测定油料作物种子中的粗脂肪含量，是用低沸点有机溶剂（乙醚或石油醚）回流抽提，除去样品中的粗脂肪，以样品与残渣重量之差，来计算粗脂肪含量。2.测定过程中为什么需要对样品、抽提器、抽提用有机溶剂都要进行脱水处理？答：进行脱水处理的原因有三：第一，抽提体系中有水，会使样品中的水溶性物质溶出，导致测定结果偏高；第二，抽提体系中有水，则抽提溶剂易被水饱和（尤其是乙醚，可饱和约2的水），从而影响抽提效率；第三，样品中有水，抽提溶剂不易渗入细胞组织内部，结果不易将脂肪抽提干净。3.在实验过程中安全使用乙醚应注意哪些问题？答：抽提室内严禁有明火存在或用明火加热。乙醚中不得含有过氧化物，保持抽提室内良好通风，以防燃爆。4.测定样品粒子粗细有什么要求？答：试样粗细度要适宜。试样粉末过粗，脂肪不易抽提干净；试样粉末过细，则有可能透过滤纸孔隙随回流溶剂流失，影响测定结果。八、讨论经过本次利用索氏提取法进行花生中脂肪的粗测定实验，使我较为熟练的掌握了SZF-06A脂肪仪的使用，并且了解了其工作原理，这对于以后的学习是有很大帮助的。经查阅资料得，花生中脂肪的含量大概在50左右，本次实验的结果为59.02，总体来讲，本次试验较为成功，较为粗略地测量出了花生中脂肪的含量。经过分析后，得出几点影响实验结果的因素，如下：1.虹吸现象不发生。不发生虹吸现象的原因可能是因为：仪器虹吸管道顶部有破损，因此水不会出来，空气会进去，压强增大，虹吸现象会中断；虹吸管道在以前实验中操作不当，有杂质残留在管道中堵塞了管道，影响虹吸现象的发生；仪器内压强过大，导致无法造成压强差，从而不发生虹吸现象；2.在使用烘箱烘干剩余残渣时，烘干时间较短，未将残渣中存留的水蒸干完全，导致实验结果出现误差；3.由于有机溶剂的抽提物中除脂肪外，还或多或少含有游离脂肪酸、甾醇、磷脂、蜡及色素等类脂物质，因而抽提法测定的结果只能是粗脂肪，即结果会偏理论值较大；4.试样粗细度不够合适。试样粉末有些过粗有些过细，研磨不均匀。过粗，脂肪不易抽提干净；试样粉末过细，则有可能透过滤纸孔隙随回流溶剂流失，影响测定结果；5.在用滤