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第6章 肠道杆菌 p67 （enterobacteriaceae）,1. 肠道杆菌的共性。 2. 大肠埃希菌的致病性。 3. 沙门菌引起的疾病及分离与鉴定程序。 4. Widal test，结果判断。,重点：,肠道杆菌：寄生于肠道的一大群生物学性状相似的G-中等大小杆菌的总称。,多数,正常菌群,部分,条件致病菌,少数,致病菌,肠道杆菌,2. 培养：兼性厌氧，普通琼脂平板培养， 肠道SS培养基（选择培养基）分离培养， 结果： 肠道非致病菌：红色大菌落， 肠道致病菌：无色透明小菌落。,肠道杆菌的共同特征：,形态特征：G-中等大小的杆菌，无芽胞， 多数有周鞭毛及菌毛。,基础培养基，乳糖（底物），胆盐、煌绿（抑 制非致病菌），中性红（指示剂）。,SS培养基：,沙门菌属（Salmonella）,志贺菌属（Shigella）,SS平板（鉴别/选择培养基）,肠道非致病菌 乳糖（） 肠道致病菌 乳糖 （ - ）,3.生化反应：活泼，分解多种糖类、蛋白质。 乳糖发酵试验初步鉴别肠道致病菌与非致病菌。,代表种 动力 葡萄糖 乳糖 靛基质 H2S 尿素酶 埃希菌属 大肠埃希菌 + + + + - - 志贺菌属 痢疾志贺菌 - + - +/- - - 沙门菌属 伤寒沙门菌 + + - - -/+ - 变形杆菌属 变形杆菌 + + - + + +,四类肠道杆菌的生化反应:,菌体抗原（ O-Ag） 鞭毛抗原（ H-Ag） 毒力抗原（Vi-Ag、K-Ag),5. 抵抗力：弱。胆盐和煌绿对非致病性肠道杆菌有选择性抑制作用。,4. 抗原构造,6. 变异：耐药性变异。,维生素（营养） 细菌素（拮抗）,条件,免疫力 寄居部位改变,第1节 埃希菌属（Escherichia）,大肠埃希菌（大肠杆菌， E.coli）,2. 特殊菌株：腹泻。,1. 正常菌群：人类出生不久进入肠道，并延续终 身，合成,条件致病菌,肠外感染。,一、生物学特性,形态染色：G-中等大小杆菌，周鞭毛及普通菌毛 和性菌毛。,2. 培养特性：SS培养基上形成红色大菌落。,3. 生化特点：葡萄糖 +、乳糖 +，动力+，H2S-,O抗原：170种 4. 抗原构造 H抗原：56种 K抗原：100种 血清型表示方式：O:k:H 如：O111:k58:H2,二、致病性,（一）致病物质,1. 黏附素：定植因子抗原,2. 外毒素,志贺毒素 耐热肠毒素（ST） 不耐热肠毒素（LT）,3. 其他致病物质,内毒素 荚膜 载铁蛋白 型分泌系统：,LT ST 对热稳定性 不耐热 耐热 65C30min灭活 耐100C20min 亚单位 A、B a、b 黏膜受体 GM1神经节苷脂 不清 致泻机理 活化腺苷酸环化酶 活化鸟苷酸环化酶 ATP cAMP GTP cGMP,B亚单位与肠黏膜上皮细胞膜表面 GM1神经节苷脂结合，A亚单位穿过细胞膜激活 腺苷酸环化酶，使ATP cAMP 肠液分泌 致泻。,型分泌系统：,犹如分子注射器，是指细菌接触宿主细胞后， 能向宿主细胞内输送毒性基因产物的细菌效应系统， 约由20余种蛋白组成。,1. 肠外感染（条件致病菌）：,（二）所致疾病,寄居部 位改变,肠外感染,化脓性感染,泌尿道感染,肠内正常菌群,腹膜炎 阑尾炎 败血症 新生儿脑膜炎,尿道炎 膀胱炎 肾盂肾炎,ETEC：婴幼儿、旅游者腹泻 EI EC：大儿童、成人腹泻 EPEC：婴儿腹泻 EHEC：O157:H7,2. 肠内感染（某些血清型）：,胃肠炎（腹痛、腹 泻、恶心、呕吐）,外源性大肠杆菌,污染的食 物、饮水,三、卫生细菌学检查,大肠菌群数：作为饮水、食品等粪便污染的 指标之一。,我国卫生标准规定：,每1000ml饮水3个 每100ml瓶装汽水、果汁5个,大肠菌群,细菌总数,每ml样品100个,第3节 沙门菌属（Salmonella）,沙门菌属：血清型2500余种,甲型付伤寒沙门菌 肖氏沙门菌 希氏沙门菌,伤寒沙门菌 付伤寒沙门菌 鼠伤寒沙门菌 肠炎沙门菌 猪霍乱沙门菌等。,常见致病性沙门菌：,一、生物学性状,1. 形态染色：G- ，有菌毛及周鞭毛。 2. 培养特性：SS培养基：无色透明小菌落。,3. 生化反应：,葡 乳 尿 靛 H2S 动力 伤寒沙门菌 + - - - -+ + 甲型副伤寒沙门菌 - - - -+ + 乙型副伤寒沙门菌 - - - + +,4. 抗原结构 ：,O抗原/菌体抗原（脂多糖）：耐热100C1h，数种 沙门菌共有，产生IgM型抗体。 H抗原/鞭毛抗原（蛋白质）：不耐热60C30min灭 活，具特异性，产生IgG型抗体。 Vi抗原/毒力抗原：抗原性弱，Vi抗体可用于检测带 菌者。,二、致病性与免疫性,（一）致病物质,1. 侵袭力,菌毛 型分泌系统 侵袭蛋白 Vi抗原,2. 内毒素：白细胞下降,3. 外毒素：肠毒素（某些菌株产生）,沙门菌 粪口途径 肠壁、肠系膜淋巴结 血（第1W：第1次菌血症） 全身各脏器（肝、脾、肾、胆囊等） 血 （第2W ：第2次菌血症） 肠壁 再次侵入肠壁淋巴组织 随粪便排出体外 肠壁坏死、溃疡、出血（第23W：型超 敏反应） 病情开始好转（34W后）,（二）所致疾病,1. 肠热症 （伤寒、副伤寒）,并发症：肠出血、肠穿孔,2. 食物中毒：最常见的沙门菌感染：鼠伤寒沙门菌、 肠炎沙门菌、猪霍乱沙门菌感染。 3. 败血症: 鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、猪霍乱沙门 菌感染。 4. 无症状带菌者：15%。,（三）免疫性,胞内寄生菌， 细胞免疫， 一定程度免疫力。,三、微生物学检查,（一）病原菌的分离与鉴定,1. 标本采取：,2. 步骤 ：,1W 血 发病第 2 W 粪便或尿 全程 骨髓,粪便、尿 SS培养基 无色可疑菌落 血、骨髓 肉汤培养基 双糖铁培养基 （增菌） 生化反应 玻片凝集反应,（二）血清学诊断：肥达试验（Widal test）,概念：用已知伤寒杆菌O、H抗原和甲副、肖氏、希氏伤寒杆菌H抗原与病人血清作试管凝集试验，检查患者血清中有无相应抗体及其效价。 原理：试管凝集试验 诊断菌液 未知抗体 定性、定量,实验方法：,1:20 1:80 1:320 1:1280,1:40 1:160 1:640 阴对,伤寒O-Ag,伤寒H-Ag,甲副H-Ag,乙副H-Ag,TO,PB,PA,TH,正常抗体水平： 当 TO1:80 TH1:160 有诊断意义 PA、PB1:80 动态观察：逐周复查，抗体效价逐次递增4倍有 诊断价值。,判定结果时要考虑因素：,O H 抗体型： IgM IgG 出现时间: 早 晚 消失时间: 快 慢 特异性: 弱 强,O、H均高：伤寒、副伤寒可能性大 O