C57BL／6小鼠 金紫菱.ppt

c57bl/6小鼠,一、来源 小鼠为生物医学研究中最常用的小鼠品系之一。 年立特（）用艾比拉特洛坡 （ ）的小鼠株，雌鼠号与雄鼠号交配而得。 年从分离出和两个亚系。 年从引到中国医学科学院实验动物研究所。,二、基本特性 品系名称： c57bl/6 类别： 近交系小鼠 毛色 ： 黑色 成熟期（雄性）： 8-10周 成熟期（雌性）： 8-10周 交配比例 ： 1:2 发情周期 ： 4-5天 妊娠期 ： 19-21天 平均每窝产仔数（第一胎）： 6只 平均每窝产仔数（第二胎）：7只 哺乳期: 21天 平均日饲料消耗量: 5g/8周龄 平均日饮水消耗量: 6-7ml/8周龄,三、饲养条件 1.温度：2026。 2.湿度：4070。 3.光照：12小时亮12小时暗。 4.饲育盒更换频度： 配种鼠：每周1次。 带仔鼠：每周1-2次。 离乳鼠：每周1-2次。 5.水瓶更换频度：每周1-2次,四、主要特性 、乳腺肿瘤自然发生率低，化学物质难以诱发乳腺和卵巢肿瘤。 、有眼部缺陷；雌仔鼠.，雄仔鼠为小眼或无眼。 用可的松可诱发腭裂，其发生率达。 、对放射物质耐受力中等；补体活性高；较易诱发免疫耐受性。 、对结核杆菌敏感。对鼠痘病毒有一定抵抗力。 、干扰素产量较高。 、嗜酒精性高，肾上腺素类脂质浓度低。对百日咳组织胺易感因子敏感。,五、主要用途 是肿瘤学、生理学、免疫学、遗传学研究中常用的品系。 与其他品系相较，c57bl/6最适合动脉粥状硬化伤害的研究。,六、c57bl6小鼠cia模型的建立 目的：建立稳定的c57bl6小鼠胶原诱导关节炎(cia)模型，构建进一步进行类风湿关节炎(ra)发病机制及治疗研究的体系。 实验动物：近交系c57bl6(h-2 )小鼠40只，雄性，45周龄，体重1500+032g。 三级环境实验观察。 随机配对分为cia模型组20只，对照组20只。,主要试剂与器材 ：鸡型胶原蛋白、弗氏完全佐剂 (complete freund s adjuvant，cfa)购自美国chondrex公司； 抗小鼠cd4-pecy5、ifn-fitc、il-4一pe及同型对照抗体均购自美国biolegend公司；佛波酯(pma)、离子菌素(ionomycin)、莫能菌素(monensin)购自美国sigma公司。 匀浆器为德国ika公司产品； 流式细胞仪为美国bd公司产品。,模型建立方法 ：鸡型胶原蛋白溶解于005moll冰醋酸 中，浓度为2mgml，将溶解的胶原与cia等体积混合， 冰浴中使用匀浆器充分乳化。 免疫动物时，在小鼠尾根部多点皮内注射01ml乳剂(含100mg鸡型胶原蛋白和200mg结核分支杆菌)。基础免疫后第21天以同样方法重复，避开初次免疫部位，进行加强免疫。同时，对照组用cfa与005moll冰醋酸等体积充分乳化后按上述方法进行免疫及21天加强免疫。 关节和关节外病变观察及关节炎评分: 各关节病变程度按5级评分法 “0”：无红肿；“1”：关节红不肿；“2”：关节轻度红肿；“3”：关节中度红肿；“4”：关节重度红肿伴功能障碍。 关节炎分数(arthritis score，as)为每只小鼠所有病变关节分数的总和，最高分为16分。各剂量组所有小鼠关节炎分数之总和除以该组小鼠的只数，即为该组平均关节炎指数(mean arthritic index，mai),结果：对照组小鼠均未发病。 模型组小鼠在5o天的发病率达7o%，关节炎评分在38分，持续时间大约100天； 病理切片显示典型的炎性细胞浸润，滑膜增生，软骨及软骨下骨破坏；外周血th1th2比值升高。 结论： 应用型胶原能在c57bl6小鼠上成功建立cia模型，该模型是进行ra研究的良好动物模型。 胶原诱导关节炎(collagen induced arthritis，cia)模型是一种免疫炎症模型，cia的特征是多发性关节炎，发病机制和病理特征与人类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis，ra)类似。,意义： cia的建立极大地推进了ra发病机制、治疗等方