细胞工程二轮复习.ppt

专题2 细胞工程,1996年7月5日,世界第一只-克隆羊多利, 动物体细胞克隆技术， 也揭开细胞工程更深层次发展的序幕!,直击考纲,生物技术实践,构建框架,细胞工程,植物细胞工程,动物细胞工程,植物组织培养,植物体细胞杂交技术,原理,步骤,意义,原理,步骤,意义,动物细胞培养技术,动物核移植技术和克隆动物,应用,植物繁衍的新途径,植物新品种的培育,细胞产物的工业化生产,微型繁殖,作物脱毒,单倍体育种,人工种子,突变体的利用,蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料、生物碱等,动物细胞融合,细胞膜的流动性和细胞全能性,植物细胞的全能性,可证明高度分化的植物细胞，仍具有形成完整植株所需要的 全部遗传信息 。,去壁、诱导融合、筛选、植物组织培养,单克隆抗体制备,1、概念： 在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 2、过程： 外植体 愈伤组织 根、芽 植物体,二、植物组织培养技术（重点 理解）：,再分化,脱分化,外植体 如：茎尖、根尖,适宜的温度、PH值、 养料、激素、充足氧气,条件,生长素、细胞分裂素,（需光）,无定形状态 排列疏松、无规则 无叶绿体,实验 胡萝卜的组织培养技术,原理： 植物根、茎、叶一般都具有全能性，在一定的营养和激素等条件下，可以 形成 , 将愈伤组织转接到含有不同激素成分的培养基上，就可以诱导其 生成胚状体或丛芽，进而发育成完整的小植株。 证明：分化的植物细胞，人具有形成完整植株所需要的 。,愈伤组织,再分化,全部基因,脱分化,原生质体,番茄细胞,原生质体融合,再生出细胞壁,杂种细胞,脱分化,愈伤组织,杂种植株,再分化,三、植物体细胞杂交技术（重点 理解）：,1、过程：,马铃薯细胞,标志：成功融合,人工诱导,去壁,植物组织培养,植物细胞的融合,直击考纲,生物技术实践,动物细胞工程,动物细胞培养技术,动物细胞核移植技术和克隆动物,动物细胞融合,单克隆抗体制备,原理,细胞分裂增殖,过程,相关概念：原代培养、传代培养、贴壁生长、接触抑制、细胞株、细胞系,条件,无菌、无毒的环境，营养，温度和PH，气体环境,受体细胞：,分类,应用：重要价值的生物制品，如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等,过程,意义,原理,细胞膜具有一定的流动性和细胞分裂增殖,过程,诱导动物细胞融合的方法,物理法,化学法,灭活的病毒,过程,单克隆抗体的优点,特异性强、灵敏度高，并可能大量制备,单克隆抗体的应用,作为诊断试剂,用于治疗疾病和运载药物,去掉细胞核的卵母细胞中,：证明动物细胞核具有全能性,归纳 过程,取 的组织、器官,细胞悬浮液,酶,贴满瓶壁的细胞,单个细胞,加入 液,动物胚胎或幼龄动物,胰蛋白,培养,接触抑制,原代 培养(分装前),1-10代细胞,培养,加 液,4050代细胞(细胞株),未,无限传代（细胞系）,已,传代培养,胰蛋白,酶,有关概念,原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。一般培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。 传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。,细胞接触抑制,细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再增加。,细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到4050代，这种传代细胞为细胞株。 细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。 细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。,1、无菌、无毒的环境,保证细胞顺利的生长增殖,添加一定量的抗生素，定期更换培养液,添加：糖（葡萄糖）、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、动物血清等。,动物细胞培养的条件,2、营养,3、温度和PH,培养室中控制,使之达到 36.5 0.5, 7.27.4,培养箱中提供O2和CO2（95%空气和5% CO2 ）,4、气体环境：,去核卵细胞,供体 细胞,重组细胞,代孕母牛C,卵母细胞比较大，容易操作细胞质多，营养丰富含促进核全能性表达的物质,动物体细胞的核移植过程,无性生殖,用灭活的病毒诱导动物细