藿香正气软胶囊含量测定方法的改进

1 / 4 藿香正气软胶囊含量测定方法的改进 作者：崔晓丽，郑晓英，许立锋 【关键词】 藿香正气软胶囊 ;含量测定 ;高效液相色谱法 ;方法改进 中国药典 XX 年版一部收载的藿香正气软胶囊质量标准是在卫生部药品标准新药转正第五册的基础上提升而来，二者比较，现行版增加了苍术和橙皮苷的薄层色谱鉴别，但含量测定方法没有改进。实验发现，用高效液相色谱法测定厚朴含量，部分条件需要改进。药典方法规定： (1)进样量：对照品溶液 6l, 供试品溶液 10 20l ，不一致，易造成进样误差。 (2)和厚朴酚与厚朴酚对照品溶液浓度分别为80g/ml 和 100g/ml ，均偏高，应调整至与供试品溶液浓度相近。 (3)流动相为甲醇 -水 (75： 25)，欠佳，因其保留时间长，分离效果差，理论板数难达规定要求。笔者对以上三个条件进行改进，用改进后的条件进行实验，取得了良好的实验效果。 1 仪器与试药 岛津 LC-10ATvp高效液相色谱仪。厚朴酚、和厚朴酚对照品 (购自中国药品生物制品检定所 )。乙腈为色谱纯，其他试剂为分析纯。藿香正气软胶囊为抽验样品 (石家庄神威药业生产 )。 2 / 4 2 实验方法与结果 2.1 色 谱 条 件 色 谱 柱 ： DiamonsilTM( 钻石 )C18(5m ， 2004.6m); 流动相：乙腈 -水 -冰醋酸 (60：38： 2)1;流速： 1.0ml/min;检测波长： 294nm;进样量：10l 。 2.2 对照品溶液制备 精密称取和厚朴酚、厚朴酚对照品，分别加甲醇制成每 1ml各含 40g 、 50g 的溶液。 2.3 供试品溶液的制备 取本品装量差异项下的内容物，混匀，取约 0.25g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇 50ml，密塞，称定重量，超声提取 10min，放冷，称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过， 取续滤液，即得。 色谱图见图 1。 作者单位： 067000 河北承德，承德市药品检验所 a.和厚朴酚对照品 b. 厚朴酚对照品 c.供试品 (藿香正气软胶囊 ) 图 1 藿香正气软胶囊 HPLC色谱图 2.4 线性关系考察 (按厚朴酚峰计 ) 精密吸取不同浓度的厚朴酚对照品溶液，注入高效液相色谱仪，测定峰面积，以峰面积为纵坐标，对照品进样量 (g) 为横坐标，绘制标准曲线，结果表明厚朴酚在 0.0501 1.6032g 范围内呈良好的线性关系，回归方程为 Y=1887.216+616437.465X， r = 0.9999 ，见表 1。表 1 线性关系考察结果 3 / 4 2.5 精密度试验 (按厚朴酚峰计 ) 精密吸取同一厚朴酚对照品溶液，连续进样 6次，测定峰面积，其 RSD为 0.35 %，表明精密度良好，见表 2。 2.6 重现性试验 取同一批号的样品 5份，精密称定，按供试品溶液制备方法制成供试品溶液，照上述色谱条件测定，供试品中厚朴酚与和厚朴酚总含量的 RSD 为 0.26%，表明重现性良好，见表 3。表 2 精密度试验结果表 3 重现性试验结果 2.7 加样回收率试验 精密称取已知含量为 0.9636%的同一 样品约 0.13g，共 5 份，每份均精密加入厚朴酚1.0020mg，和厚朴酚 0.8025mg，按供试品溶液制备方法制备，照上述色谱条件测定，计算加样回收率，结果见表 4。表 4 回收率试验结果 3 小结 3.1 在基层药检所，用 HPLC 法测定含量，除少量自动进样外，多采用定量环进样，所以统一对照品和供试品溶液的进样量，一方面消除进样误差，另一方面不必更换定量环，简化操作。同时降低对照品溶液浓度，使之与供试品溶液浓度接近，测定结果更准确。 3.2 改进流动相，大大缩短了保留时间，既节约试剂，又减少了 试剂的污染和对人体的危害。流动相改变后，经方4 / 4 法学验证证明 ,方法可行。另外厚朴酚与和厚朴酚为同分异构体，在做线性关系等考察时考察其一即可。 3.3 实验对比知，改进后的色谱图分离效果好，理论板数 (按厚朴酚峰计 )由原来的不足 5000(