谈苦参素对实验性肝纤维化的干预作用

1 / 5 谈苦参素对实验性肝纤维化的干预作用 摘要： 目的：观察苦参素对四氯化碳（ CCl4）诱导的实验性肝纤维化的干预作用。方法：将 SD 大鼠分成正常对照组、模型组、苦参素小剂量治疗组（ 40 mg/kg）、中剂量治疗组（ 80 mg/kg）、大剂量治疗组（ 160 mg/kg），造模 4 周后苦参素治疗至实验第 10 周，取血测相关血清学指标，计算肝脏指数，测定肝组织匀浆中 HYP 和 MDA 含量。结果：苦参素能降低肝纤维化大鼠血清丙转氨酶（ ALT）、谷草转氨酶（ AST）、胆汁酸（ TBA）、 谷氨酰转移酶（ GGT）和肝脏指数，同时 能减少肝组织中羟脯氨酸（ HYP）和 MDA 含量（ P关键词： 肝纤维化；细胞外基质；大鼠；苦参素；四氯化碳 肝纤维化（ liver fibrosis）是各种慢性肝病发展为肝硬化（ 1iver cirrhosis）的必经阶段。肝纤维化是由各种因素引起肝细胞损害和炎症，在修复过程中导致肝脏细胞外基质（ extracellular matrix， ECM）异常增多和过度沉积的病理过程。苦参素又称氧化苦参碱，是由中药苦豆子和苦参根中提取的一种生物碱，一般认为其具有抗炎、抗病毒、调节免疫反应，抗肿瘤等生物学作用 1-2。本研 究观察苦参素对 CCl4 诱导的实验性肝纤维化的干预作用 3，为进一步开发利用苦参素提供实验依据。 2 / 5 1 材料与方法 1.1 实验动物 SD 大鼠 70 只，体重 140160 g，雌雄兼用，由南通大学实验动物中心提供。动物许可证号： SCXK（苏）2002-0019。所有动物自由摄食，饮水。 1.2 药品与试剂 （ 1）四氯化碳（ CCl4）：宜兴市第二化学试剂厂，批号 20010608，使用时用食用花生油配制成 40%的油溶液；（ 2）苦参素：（主要成分为氧化苦参碱 oxymatrine， OM） :江苏正大天晴药业股份有 限公司，批号 :20021004。细结晶颗粒，按需用灭菌生理盐水配制呈溶液使用；（ 3）丙二醛（ MDA）测定试剂盒，南京建成生物医学工程研究所，批号： XX0307；（ 4）羟脯氨酸（ HYP）含量测定试剂盒，南京建成生物医学工程研究所，批号： XX0321。 1.3 实验方法 1.3.1 实验动物分组及模型制备 4 SD 大鼠 50 只，随机分为 5 组： 正常对照组、 模型组、 苦参素小剂量治疗组（ 40 mg/kg）、 苦参素中剂量治疗组（ 80 mg/kg）、 苦参素大剂量治疗组（ 160 mg/kg），每组 10 只动物 ，雌雄各半。各造模组均采用 CCl4 诱导大鼠肝纤维化模型：用40%CCl4 花生油溶液 3.0 ml/kg 皮下注射，每周 2 次，共 10周；动物每周称重 1 次，并根据体重调整 CCl4 的剂量，正常对照组仅以花生油等容量皮下注射。苦参素治疗组从 CCl4造模后第 4 周开始至第 10 周腹腔注射给药，每日 1 次，给3 / 5 药容量均为 1.0 ml/kg。正常对照组、模型组腹腔注射等容量灭菌生理盐水，每日 1 次。 1.3.2 肝功能的检测 造模至第 10 周末，全部动物禁食 16 h 后，断头取血。血液 40 条件下 2000 rpm 离心 15 min，吸取血清于 4 冷藏， 24 h 内用生化自动分析仪测定谷丙转氨酶（ ALT）、谷草转氨酶（ AST）、胆汁酸（ TBA）和 谷氨酰转移酶（ GGT）。 1.3.3 肝脏指数的测算 造模至第 10 周末，全部动物称体重。取血后，将动物解剖，取出肝脏，滤纸拭干，置于电子天平上称重，以肝脏指数肝脏重量 /体重 100 ，计算肝脏指数。同时剪取肝脏组织 -20 保存，备制作肝匀浆液之用。 1.3.4 肝组织中 HYP 和 MDA 含量的检测 取 10肝组织匀浆液测定每份肝匀浆中 HYP 和 MDA 与特定试剂反应后溶液的吸光值，并根据肝组织匀浆液中总蛋白的含量，分别计算肝脏中 HYP 和 MDA 的含量。 1.3.5 统计学方法 使用 Stata6.0 统计软件包进行数据处理。数据以 s 表示，用单因素方差分析和 F 检验处理数据，以 P0.05）。 2.3 肝脏脏器指数及肝组织中 HYP、 MDA 的检测 见表 2。小剂量治疗组与模型组比较，肝脏指数虽有所减少，但差异无统计学意义（ P0.05）；各治疗组间 HYP 和 MDA 含量差异4 / 5 亦无统计学意义（ P0.05）。 3 讨 论 血清 ALT、 AST 和 TBA 主要与肝细胞损伤、 坏死程度呈正相关。我们实验结果显示，造模第 10 周末模型组动物的肝脏脏器指数、血清 ALT、 AST 和 TBA 明显高于正常对照组（ P2 周建明 . 苦参素治疗慢性乙型病毒性肝炎 78 例效果观察J. 南通医学院学报， XX， 24（ 2）： 201-203. 3 闫 波， 陈飞虎， 吴繁荣， 等 .鬼针草总黄酮对肝纤维化大鼠治疗作用及机制探讨 J. 中国药理学通报， XX，24（ 12） :1640-1645. 4 Zim MC， Silveira TR， Schwartsmann G， et al.Potentiation of carbon tetrachloride hepatotoxicity by pentosen polysulfate in ratsJ. Braz J Med Biol Res， 2002， 35（ 11） :1339-1346. 5 唐海燕， 董江龙， 王建彬， 等 . 肝组织碱性成纤维细胞生长因子与乙肝患者肝纤维化关系的研究 J. 临床肝胆病杂志， XX， 24（ 6） :454-555. 6 Liu J， Sendelbach LE， Parkinson A， et al. Endotoxin pretreatment protects against the hepatotoxicity of acetaminophen and carbon tetrachloride: role of cytochrome P450 suppressionJ. Toxicology， 2000， 147（ 3） :167-176. 5 / 5 7 Poli G.Pathogenesis of liver fibrosis: role of oxidative stressJ. Mol Aspects Med， 2000， 21（ 3） :49-98. 8 Miyahara T， Schrum L，