GB12289-1990水果、蔬菜及制品苯甲酸含量的测定.pdf

中华人民共和国国家标准水果、 蔬菜及制品 苯甲 酸含量的测定Gs 1 2 2 6 9 - 9 0F r u i t s , v e g e t a b l e s a n d d e r i v e d p r o d u c t s 一 D e t e r mi n a t i o n o f b e n z o i c a c i d c o n t e n t 本 标准参照 采用国际标准I S O 5 5 1 8 -1 9 7 8 水 果、 蔬菜及其制 品苯甲 酸含量 的测定 ， 一- 分光光度 法和I S O 6 5 6 0 -1 9 8 3 水果、 蔬菜及1M Cl fln fl 苯甲 酸含量的测定 ( 含ta超过2 0 0 mg / L 或k g ) 分f - 吸收分光光度法)N， 主题内 容及适用范围 本标准规定了 水果、蔬菜及制品巾 苯甲 酸含 量的测定方 法。分光光 度法适用于 笨甲 酸含量低于2 0 0 m g / L 或k g 产 品的测定。 分f 吸收分光光 度法 适用于 测定苯甲 酸含量 超过2 0 0 m g / L 或k g 的产品，重点包括水果汁、蕃茄苦制品，以及用醋或乳酸保存的产品。 分光光度法不适用于有对氯苯甲酸及有大量肉 桂酸存在的产r ii i i . 第一篇 分光光 度 法2 原理 试样混匀后，稀释、 酸化、 用乙 醚提取苯甲 酸，在碱性条件下重提， 通过铬酸氧化提纯， 最后用分光光度计测定溶解在乙 醚中的苯甲 酸。3 试剂和溶液 本 标准 所用试剂均为分 析纯。使用 蒸馏水 或相应 纯度的水。3 . 1 酒石酸 ( Q/ H G 1 0 -2 1 8 7 ) ，结晶状，3 . 2 氢氧化钠 ( G B 1 2 6 6 )溶液，I m o l / L;3 . 3 重铬酸钾 ( G B 6 4 2 )溶液，3 3 - 3 4 g / L ( u r / v) ;3 . 4 硫酸溶液，2 + I ， 用2 体积的浓硫酸 ( GB 6 2 5 ) P 2 0 1 . 8 4 g / m L， 加到1 体积的水中;3 . 5 乙 醚 ( H G 3 -1 0 0 2 ) ，重新蒸馏;3 . 6 苯甲酸标准溶液:0 . 1 0 0 g / L乙 醚溶液;3 . 7 碳酸氢钠 ( GB 6 4 0 ) .4 仪器、设备 常用实验室仪器、设备、 包括:4 . 1 容量瓶，5 0 mL;4 . 2 烧杯，5 0 . 1 0 0 m L。4 . 3 移液管，2 0 m L。4 . 4 刻度吸管;4 . 5 锥形 瓶，2 5 0 m L具有磨口 玻璃塞;国家技术监督局1 9 9 0 - 0 3 一 2 9 批准1 9 9 0 一 1 2 一 0 1 实施免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 标准最全面免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载GB 1 2 2 8 9 -9 04 . 分液漏斗，5 0 0 m L，4 . 7 恒温水浴， 温度能控制在7 0 - 8 0 C ;4 . 8 捣碎机，4 . 9 紫外分 光光度计 :具 光径长l o m m的石英比色 杯;4 . 1 0 分析天平。5 . 1分析步骤 试样的制备5 . 1 . 1 液体样品 ( 汁液) ， 可流动浆液 ( 糖浆)和枯稠的样品 ( 果酱) 。 将样品混合均匀。5 . 1 . 2 固体样品 ( 水 果、 蔬 菜) ， 将样品切成小 块， 检出 种子 和果壳， 混匀，取约4 0 g 放人捣碎机中捣碎。 冷 冻样品首 先 在密闭的容器内 融化，将 融化 液与 样品合并后 捣碎。5 . 2 试样的分取5 . 2 . 1 液体样品 用 移液管 ( 4 . 3 ) 吸取2 0 m L 无悬浮物的试样 ( 5 . 1 ) 用约5 0 mL 水 稀释并转移至5 0 0 m L 的分液漏斗 ( 4 . 6 )( 分液漏斗A)巾。或用感量为0 . 0 1 8 的天平 称取试 样2 0 . 0 0 g o5 . 2 . 2 流动的浆液 取2 0 mL 试样 ( 5 . 1 ) 放在 研 钵里用2 0 mL 水 稀释，倾 倒过滤。 然后连续两 次用2 0 m L 水 溶解残渣，倾倒过滤， 收集滤液 于5 0 0 m L 分液漏斗 ( 4 . 6 ) ( A) 中 。也可用百 分之一天平 称 取2 0 . 0 0 g 试样。5 . 2 . 8 粘稠或N 1 体样品 用百 分之一天平 称取1 0 . 0 0 9 样品 ( 5 . 1 ) ，放入2 5 0 m L 锥形 瓶 ( 4 . 5 ) 中 ，加 3 0 一 4 0 mL 的水。 加人 约5 0 m g 碳 酸氢钠 ( 3 . 7 ) ， 然后放在水浴 ( 4 . 7 ) 上 ， 温度控制 在7 0 一 8 0 C ，放置1 5 一 3 0 m i n 后， 过滤瓶中 的内容 物，并用1 5 - 2 0 - L 水 冲洗两次，全部 滤液并人 5 0 0 m L 分液漏斗 ( 4 . 6 ) ( A ) 中 ，使之冷却。5 . 3 苯甲 酸的 提取5 . 3 . 1 取1 9 洒石 酸 ( 3 . 1 ) 放人装有 稀释试样 ( 5 . 2 ) 的 分液漏斗 ( A) I I I ，加人 6 0 m L 的乙 醚 ( 3 . 5 )并 小心摇动。睁置使之分层。保留 醚层， 将水层转人第二个5 0 0 m L分液漏斗 ( 4 . 6 ) ( 8川: ，用6 0 mL乙 醚萃 取水 相，合并乙 秘相 于分 液漏斗( A )中。5 . 3 . 2 从乙 醚相提取苯甲酸，连续加入氢氧化钠溶液 ( 3 . 2 ) l o mL、5 mL，水l o mL两 次，每加一 次及时摇动，使之分层，收集水相于蒸发皿中， 将皿放在水浴 ( 4 . 7 ) 上 ， 温度控制在7 0 一 8 0 0C , 浓缩碱溶液体积至一半为止。5 . 4苯甲 酸 的提 纯 冷却后， 将蒸发d II 的内 容物放人 盛有2 6 m L 硫 酸溶液( 3 . 4 ) 和2 0 mL 重铬酸钾 溶液( 3 . 3 ) 的2 5 0 m L锥形 瓶 ( 4 . 5 )中 。 盖塞， 摇匀，放置1 h 以上 。5 . 5 苯甲 酸的萃取 用 2 0 一 2 5 m L 的 乙 醚萃 取上 述 ( 5 . 4 ) 提 纯 的 苯甲 酸两 次 ， 收 集 乙 m液 ， 用5 m L 的 水 洗 乙 醚溶 液两次， 然后 I M , 的 倾出乙 挞并通过于 滤 纸过滤至 5 o m L 的容量 瓶 ( 4 . 1 ) 中 ，用乙 醚冲 洗滤纸并 定容至亥 4 9r.5 . 侧定 用分 光 光 度计 ( 4 . 9 ) 在2 6 7 . 5 . 2 7 2 和2 7 6 . 5 n m 波 长 处以 纯乙 醚为对 照， 测量 乙 醚层 ( 5 . 5 ) 的 吸光度。 苯甲酸的吸光度A 按式 ( 1 )计 算:A 二AA l 十 A 3 . . . . . . . . . . . . 。 二 .， . . . 2免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 标准最全面免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载GB 1 2289 - 9 0式中:A, 在2 6 7 . 5 n m的吸光度， A Z 在2 7 2 n m的吸光度， A 3 在 2 7 6 . 5 n m 的 吸 光 度 。 同一试样 ( 5 . 1 )需进行两 次测定。5 . 7 标准曲线的绘制 向6 个5 0 m L 容量板( 4 . 1 ) 中 分别加人苯甲 酸标准溶液 ( 3 . 6 ) ，各52 0 . 0 m L ，用乙 醚 ( 3 . 5 ) 稀释至刻 度。该 标准系列 溶液 的浓度为1 0 . 1 5 按照5 . 6 进行测定。 以 苯甲酸含量mg / L , 为 横坐 标， 吸光 度A 为纵坐 标 绘制 标准 曲线。6 分析结果表示二 1 计算方法和公式6 . 1 . 1 液体样品. 0 . 7 . 5 1 0 . 0 . 1 2 . 5 . 1 52 0 . 2 5 . 3 0 . 4 0 m g / L a苯甲酸的含量以mg / L 表示， 按式 苯甲 酸 ( mg / L)( 2 )计算: 5 0_ _= m “ - = Z . 52 0m ” “ “ . ” ” ” “ ” ” “ “ ” ” ” “ . “l 2 夕式中9。: 由标准曲 线 ( 5 . 7 )上 查 得苯甲 酸的含量 ，mg / L o . 1 . 2 粘稠或固体样品 苯甲 酸的 含量以m g / k g 表示， 按式 ( 3 ) 计算 苯甲 酸 ( m g / k g )二 m2 x -式 中 : 二， 一 ， 称 取 试 样的 重 量( 5 . 2 ) ， 9 ; 。 ， ， ( 3)6 . 2。: 标准曲线 ( 5 . 7 )上 查得苯甲 酸含量，Mg .允许差同一分析人员对同一试样两个平行测定值之差不得超过j o mg / L 或l o mg / k g . 第二篇分子吸收分光光度法7 原理 用乙 醚从酸化的试样中 提取苯甲酸，随后消化、还原，与盐酸羚胺进行莫尔氏反应。于分光光度计上测定已 得到的红色化合物吸光度。8 试剂和溶液 所有试剂应是分析纯，水用蒸馏水或相当纯度的水。二 1 苯甲 酸标准溶液: 浓度为1 g / L , 称取1 0 0 mg 苯甲 酸精确至。 . 0 0 0 1 g , 溶解于2 5 m L 的。 . 1 mo l / L 氢氧化钠溶液中并 用水 稀释至1 0 0 m L。此标准溶液含苯甲酸1 mg / mLo8 . 2 石 肖 化液 2 3 9 硝酸 钾 ( G B 6 4 7 ) 溶解于2 5 0 m L 浓硫酸 ( P 2 0 = 1 . 8 4 g / mL)中。8 . 3 盐酸经胺 ( HG 3 -9 9 7 )溶液，2 0 9 / Lo8 . 4 浓 氨 溶 液( G B 6 3 1 ) ( P , = 0 . 9 1 0 g / - L ) 。8 . 5 酚酞溶液免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 标准最全面免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载GB 1 2 2 8 9 -9 0 1 g 酚酞 ( HGB 3 0 3 9 ) 溶解于I 0 0 -L 6 0 %， 乙 醇 ( v / v )中。8 . 6 氢 氧化钠 ( G B 1 2 6 6 -7 7 ) 溶液，l mo l / L o. T 氢氧 化钠溶液， 0 . 1 mo l / L o8 . 8 硫酸溶液，2 5 % ( m/ m) 。8 . ， 卡瑞 ( Ca r r e z ) I 溶液: 1 5 0 9 三合水亚铁氰化钾 ( GB 1 2 7 3 ) ( K4 Fe ( CN) 3 H2 0 溶解于水中并稀释至1 0 0 0 m L o8 . 1 0 卡瑞 ( Ca r r e z ) II 溶液: 3 0 0 9 七合水硫 酸锌 ( GB 6 6 6 ) ( Z n S O4 7 H2 0 ) 溶解于水中 并稀释至l 0 0 0 - L a8 . 1 1 乙 醚 ( H G 3 -1 0 0 2 ) ，近期重蒸馏。， 仪器、设备 常用实验室仪器、设备，包括:9 . 1 分液漏斗， 2 0 0 m L ， 装有磨口 塞。9 . 2 移液管，1 . 2 . 5 . 1 0 . 2 5 和5 0 mLo9 . 3 移液管，2 mL、分刻度至。 . 1 mLo9 . 4 容量 瓶， 1 。 和l o o mL 备 有磨口 玻璃塞。9 . 5 沸水浴。9 . 6 试管，直径1 . 5 或2 . 0 c -09 . 7 烘箱，能控温在1 0 3 1 2 。9 . 8 恒温水浴，控温在2 0 1 2 和6 0 1 2 。9 . 9 分光光度计，适合于5 3 3 n m 波长处进行测量，备光径长l o m m 的比色杯。1 0 分析步骤1 0 . 1 试 样的制备1 0 . 1 . 1 液体样品 试样充分混匀。1 0 . 1 . 2 半粘稠样品 将试样混合完全。功. 1 . 3 粘稠样品 试样充分混匀。1 0 . 2 试 样的分取1 0 . 2 . 1 液休样品 用移液管 ( 9 . 2 ) ,1 0 . 2 . 2 枯稠样品取部分试样通过四层纱布压汁，弃去初始几滴滤液，收集剩余的部 分进行测定。取l o m L 试样移至2 0 0 -L 分 液漏斗 ( 9 . 1 ) 中。 称取试样1 0 8 , 准确至0 .呈 碱性。放在沸水浴 ( 9 . 5 )I 溶液 ( 8 . 9 ) 和2 mL卡瑞O l g ， 加少量水，加2 滴酚酞溶液上 加热3 0 mi n o冷却后，移至1 0 0( 8 . 5 ) ，再加氢氧化钠溶液 ( 8 . 6 )使之mL 容量瓶中， 加人2 mL 卡瑞( Ca r r e z )( Ca r r e z ) 9 溶液 ( 8 . 1 0 ) ， 用水 稀释至刻 度。放 置3 0 mi n ， 然后离心或过滤。该澄清的溶液用于提取 ( 1 0 . 3 ) 01 0 . 3 苯甲酸的提取和纯化1 0 . 3 . 1 液体样品 加2 m L 硫 酸 溶 液( 8 . 8 ) 至 盛 有 试 样 的 分 液 漏 斗 中 。 加 2 5 m L 乙 醚( 8 . 1 1 ) , 振荡 分 出 醚层 ， 用 2 5 m L乙 醚再重复振荡提取一次，合并乙 醚相。 加1 滴 酚 酞 溶 液( 8 . 5 ) 加2 m L 氢 氧 化 钠 溶 液( 8 . 6 ) 并 振荡5 m i n 。 分 离 碱 相 。 然 后 用2 m L 氛氧化钠溶液 ( 8 . 7 ) 振荡 提取2 次。收集 碱相提取液于l 0 m L 容量 瓶 ( 9 . 4 ) 中 井用水 稀释至刻 度。免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 标准最全面免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载GB 1 2 2 8 9 -9 01 0 . 3 . 2 粘稠样品 5 0 mL 澄清后的溶液 ( 1 0 . 2 . 2 ) 于2 0 0 m L 分液漏斗中， 加5 0 m L 硫酸溶液 ( 8 . 8 ) ， 加5 0 m L乙 醚，振荡，分出 醚层。用5 0 m L 乙 醚重复提取两次以上。合并乙 醚相于分液漏斗中。 加5 mL 水， 振荡，并弃去水相。 加2 mL 氢氧化 钠溶液 ( 8 . 6 )层， 振荡 ( 形成苯甲 酸钠) 分出 碱相，然后用2 mL 氢氧化 钠溶 液 ( 8 . 7 ) 再 振摇提取2 次。 收集碱相提取液于i o mL 容量 瓶 ( 9 . 4 ) 中，并用水 稀释至刻度。1 0 . 4 测定1 0 . 4 . 1 显色 根 据 苯甲 酸 含量 ， 取 。 . 5 一 1 . O m L 碱 提取 液 移人 试 管 ( 9 . 6 ) 中 ， 在 沸 水 浴 ( 9 . 5 ) 上 蒸发至干 。 移至烘箱 ( 9 . 7 )中，在1 0 3 士2 0C 下干燥1 5 m i n o 随后冷却，加1 mL 硝化液 ( 8 . 2 ) 放在沸水浴上加 琳2 0 m i n( 开始时振摇试管几分钟) 。 移人 水浴 ( 9 . 8 ) ，保持在2 0 1 2 下，放置1 5 m i 、 小心的加2mL 水， 再放置1 5 mi n 。 加l o m L氨 溶液 ( 8 . 4 ) ，分次加，最初的5 mL，每次加0 . 5 m L， 剩余的每次加1 mL 。放在水浴上1 5 m i n o注意水 浴的温度 控制 在2 0 土2 。 加2 mL 盐酸 径胺 溶液 ( 8 . 3 ) 并放 在.:1 C 士2 水 浴 ( 9 . 8 ) 仁 保持5mi n ,1 0 . 4 . 2 分光光度计 测量 冷却试管， 移人比 色杯。 在3 0 mi n 之内 用分 光光度计， 在5 3 3 n m 波长处，以 试剂空白为对照， 测量溶液的吸光度。 同一w 羊 作平 行测定。1 0 . 5 标准曲线的绘制。1 0 . 5 . 1标准系 列溶 液的制 备 用 移 液管( 9 . 3 ) 连 续 向5 支 试 管中 转 移苯甲 酸标 准 溶 阵 ( 8 . 1 ) 0 . 6 . 0 . 8 , 1 . 0 , 1 . 2 , 1 . 4 - L , 相对应的苯甲酸量为0 . 6 , 0 . 8 , 1 . 0 , 1 . 2 , 1 . 4 M g . 向另1 支试管中移人氢氧化钠溶液 ( 8 . 7 ) 0 . 5 m L 作试剂空白。1 0 . 5 . 2 显色 将试管移人 沸水浴中蒸发至干。然后将试管移人 烘箱中，并在1 0 3 1 2 下干 燥1 5 m i n 。以下步骤按1 0 . 4 . 1 第二段起所描述的进行。1 0 . 5 . 8 分光光度测量 按1 0 . 4 . 2 规定ff lA 作进行。1 0 . 5 . 4 标准曲线献 险制 以苯甲 酸标准 溶液的毫克 数为 横坐标，以 所对 应的吸 光度为 纵坐标， 绘制曲线。” 分析结果表示1 1 . 1 计算方法和公 式1 1