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实验室管理与生物安全,江苏省血液中心 孙 俊 E-mail：jscdcsjvip,实验室建设与管理,实验室建设与管理概述,2019/11/16,3,前言,重视、加强和规范采供血机构实验室建设与管理是加强能力建设，提高检测水平，保障供血安全的重要方面。,2019/11/16,4,前言,近十年来，中央和地方各级政府重视无偿献血工作，投入大量资金用于各级采供血机构的建设，改善基础设施和硬件条件，实验室的建设和装备得到了加强。如何管理好、使用好这些设备，真正发挥其作用，是我们需要讨论和解决的问题。,2019/11/16,5,前言,卫生部血站管理办法、血站质量管理规范、血站实验室质量管理规范中，明确提出了加强实验室建设，规范实验室管理，建立健全各项制度，强化质量控制，确保供血安全。,2019/11/16,6,前言,“工欲善其事，必先利其器” 要加强实验室能力建设，提高检测水平和质量，必须具备： 先进的设备 良好的技术 优秀的人才 科学的管理,2019/11/16,7,实验室能力建设目标,最终成为： 训练有素 装备精良 技术过硬 管理严格 保证供血安全 适应社会需求,疾控机构实验室简介,2019/11/16,9,实验室分类,按业务指导层次分,按使用性能分,按专业分,疾控机构实验室分类,2019/11/16,10,1、病原微生物实验室 2、卫生微生物实验室 3、结核病实验室 4、HIV初筛/确认实验室 5、理化实验室 6、毒理实验室 7、消毒检测实验室,8、媒介生物实验室 9、寄生虫病实验室 10、地方病实验室 11、食品安全实验室 12、放射防护实验室 13、环境卫生实验室 14、职业卫生实验室 15、慢病实验室,按专业分,2019/11/16,11,1、普通（常规）实验室 2、洁净实验室 3、生物安全实验室 4、移动实验室,按使用性能分,2019/11/16,12,1、普通（常规）实验室,普通（常规）实验室主要以无压差及净化要求的理化实验、媒介生物实验、分子生物实验等为主的实验室。 功能区域分布合理 管线布局合理 环境布局合理,2019/11/16,13,2、洁净实验室,洁净实验室是指对尘埃粒子及微生物污染需要进行控制的区域，其建筑结构、装备及使用均具有减少对该区域内污染的要求。按用途分为： 微生物洁净实验室 理化用洁净实验室 动物用洁净实验室,2019/11/16,14,3、生物安全实验室,具有一定的生物安全防护水平的实验室统称为生物安全实验室。 是通过防护屏障和一系列安全管理措施达到的： 人身安全 环境安全 样本安全 开展病原微生物的鉴定、分离和检测工作。,2019/11/16,15,生物安全防护的三个因素,实验室设计、建筑 生物安全设备配置 实验室操作规程,2019/11/16,16,生物安全实验室分级,I级生物安全实验室： 英SL-1 , 俄1. 基础实验室 级生物安全实验室： 英SL-, 俄. 基础实验室 级生物安全实验室： 英SL-, 俄. 生物安全防护实验室 级生物安全实验室： 英SL-, 俄. 高度生物安全防护实验室,2019/11/16,17,4、移动实验室,移动实验室 是采用车载形式，装备特殊的实验仪器和设备，完成现场检验的实验室。 常规移动实验室 装备水、电、气及实验室常用设备、仪器、器材、快速检测试剂等。进行常规化学中毒及污染等现场监测； 生物安全移动实验室 按照生物安全实验室的要求，进行现场生物安全实验。 移动实验室主要用于突发公共卫生事件处置。,2019/11/16,18,由国家、省、地（市）、县（区）四级组成了一个完整的公共卫生实验室网。 特点：国家实验室以研究、培训、制定规范、标准为主，地方实验室以引进指导和执行为主。,按业务指导层分,国家实验室 省级实验室 地级实验室 县级实验室,2019/11/16,19,卫生防病技术支撑 重点传染病、流行病监测和研究、疾病预警预报、食源性疾病监测、慢病监测、与卫生防病相关的科研等。 监督执法技术支撑 五大卫生监测、中毒和污染监测与处理、标准和规范的制定。 突发公共卫生事件应急处理 自然灾害、重大疫情、群体不明原因疾病、其它影响公众健康事件等。 健康相关产品卫生质量评价 包括了理化、微生物、毒理检验与评价，采用化学、微生物学、毒理学等综合技术，样品复杂，技术先进。,疾控机构实验室的作用,2019/11/16,20,疾控机构实验室的特点,系统性 由国家、省、市、县疾控机构实验室组成一个系统，形成网络。 专业性 疾控机构实验室含盖面广，专业性强，每个专业既是独立的，在承担卫生防病任务中又是整体的。 延续性 自卫生防疫站成立，就建立了实验室，从最初的单一防病逐步发展成多学科、多专业实验室，在规模、装备、技术、人才和能力等方面不断得到发展，这是其它相关部门无法相比的。 适应性 适应社会的需要，适应防病事业的发展需要。体现了能力强、解决疑难问题。,2019/11/16,21,实验室的检测项目,指导意见列出的疾病预防控制机构实验室的检测项目共有433项，其中的86项含多个检测参数，因此，指导意见列出的疾病预防控制机构实验室检测的实际参数是710个。,2019/11/16,22,省级疾控中心检测项目,必须开展的工作项目387项，检测参数562个。 根据地域特点和需求应开展的工作项目46项，检测参数64个。 所开项目为指导意见列出项目的100%,2019/11/16,23,市级疾控中心检测项目,必须开展的工作项目226项，检测参数330个。 根据地域特点和需求应开展的工作项目133项，检测参数166个。 所开项目为指导意见列出项目的82.91%,2019/11/16,24,县级疾控中心检测项目,必须开展的工作项目118项，检测参数165个， 根据地域特点和需求应开展的工作项目61项，检测参数99个， 所开项目为指导意见列出项目的41.34%,现代实验室管理理念,2019/11/16,26,现代实验室管理理念,全面质量管理 标准化管理 安全管理 信息化管理 实验室开放 实验室医学伦理学,2019/11/16,27,1、质量保证体系 检测过程、检测环境与仪器设备、标准物质、标准菌（毒）株及实验动物、实验试剂、检验人员技术素质的保证。 2、标准操作规程 制定并严格遵循各项检验的标准操作规程（SOP），规范检验行为，科学、客观、公正出具检验数据。 3、实验室管理制度 实验室必须制定一系列管理制度，保证实验室工作的有序进行。,（一）全面质量管理,2019/11/16,28,（二）标准化管理,中华人民共和国产品计量法 ISO/IEC17025：2005检测和校准实验室能力认可准则 GB/T27025-2008检测和校准实验室能力的通用要求 GB19489-2008实验室生物安全通用要求,2019/11/16,29,质量管理体系标准,ISO9000:2000：质量管理体系 基础和术语 ISO/IEC17025:2005-5-15:检测和校准实验室能力的通用要求 ISO15189:2007：医学实验室-质量和力的专用要求 血站质量管理规范 血站实验室质量管理规范,2019/11/16,30,（三）安全管理,提高安全意识 建立安全制度 消除安全隐患 保证人员健康,一般安全管理 生物安全管理,内容,目的,2019/11/16,31,（四）信息化管理,检测环节一体化动态管理 提高工作效率 减少差错率 避免检验数据造假 提升在社会上的竞争力,2019/11/16,32,（五）实验室开放 是指打破以往拥有实验室单位之间分割封闭状态,实行在一定条件下的资源共享,提高大型仪器设备使用效率,发挥各自学术和技术的优势,繁荣和促进学术与技术交流，降低科技创新成本,建立科技合作、学科建设、人才培养交流平台。,2019/11/16,33,医学实验室的专业人员因其独特的职业而受到伦理规范的约束 实验室不得从事违反法律的行为 实验室应维护其行业声誉.科学、严谨、严格、规范 在检验申请人与实验室之间公平、公正、平等,（六）医学实验室伦理学,2019/11/16,34,实验室建设与管理所面临的工作,2019/11/16,35,1、加强硬件建设，改善实验条件，提高检测手段； 2、建立健全实验室管理各项规章制度，严格执行； 3、加强人才培养和队伍建设，引进、培训、交流； 4、通过科研工作促进血液检验技术不断发展，应用新理论、新技术、新方法，促进血液检测技术不断上水平，特别是有效阻断通过输血传播疾病方面。,实验室建设与管理所面临的工作,2019/11/16,36,实验室建设与管理所面临的工作,5、全面质量管理，规范化、标准化、制度化、程序化，保证各项检测结果客观、准确、可信，保证供血安全； 6、关注国内外血液检测技术的发展动态，不断提高采供血机构实验室检验能力。,实验室生物安全问题,2019/11/16,38,人 员,送风口,生安柜,排风口,正确的生物安全实验室气流组织,2019/11/16,39,基本建设方面-实验室单体,2019/11/16,40,基本建设方面-实验室单体,生安柜,离心机,箱养培,箱冰,洗眼/手,灭菌器,传真机,2019/11/16,41,反 例 流感实验室,生安柜,鸡胚室-20Pa,细胞室-20Pa,分析室-20Pa,缓冲间10Pa,生安柜,生安柜,2019/11/16,42,管理存在的问题,人员 设备 环境 操作 方法 质量控制,2019/11/16,43,质量管理存在的问题,建立健全实验室质量管理体系 全过程质量控制 有效地持续改进、不断提升实验室能力 建立良好的实验室操作规范（GLP） good laboratory practice 实验设施是基础，人员管理是关键, 标准操作是重点，监督体制是保障。,2019/11/16,44,管理不严引发实验室事故： 配血错误 经血传播疾病 爆燃事件 放射源事件 生物安全事故,实验室安全管理问题,污染、感染事件 乙肝、丙肝、艾滋病 其它经血、气溶胶 传播的疾病,2019/11/16,45,实验室安全管理问题 实验过程中气溶胶随时陪伴着实验人员。,0.001100m,溶解 稀释 洗涤 取样 加试剂 离心 过滤 培养,2019/11/16,46,生物安全常见问题-意识,职工意识：对实验室感染危险性认识不足，怕烦。劳动保护、生物安全 领导意识：实验人员提要求，得不到领导重视，达不到生物安全的基本要求。,2019/11/16,47,2019/11/16,48,生物安全常见问题培训,不重视，不落实，不认真。教材、老师、课件、时间、人员不能保证，培训效果差。 泛泛培训，没有分项、分专题、分专业，针对性差。,2019/11/16,49,生物安全常见问题-概念不清,不能区分生物安全实验室与洁净实验室的概念 生物安全实验室保护人、环境、 样品，用于感染性物质相关实验 洁净实验室只提供对样品的保护，用于产品质量评价卫生学检测 不能区分生物安全柜、超净工作台、通风柜概念,2019/11/16,50,举 例,生物安全实验室与洁净实验室混用，生物安全柜与洁净工作台、通风柜等相互替代 产品质量检测与病原微生物检测在同一 实验室进行 生物安全柜安装在洁净实验室 洁净工作台、通风柜中进行病原微生物 操作 下图：是中央财政结核病专项为部分地区结核病实验室统一配置的通风柜。,2019/11/16,51,2019/11/16,52,生物安全常见问题分区概念不清,一些实验室按要求设置了清洁区、半污染区和污染区，但在使用时不能按照分区操作 照片是某地艾滋病初筛实验室正在实验，各分区间的门敞开，人员直接进出；在污染区打印检测报告后直接拿出签发,2019/11/16,53,2019/11/16,54,生物安全常见问题-消毒灭菌,消毒灭菌缺乏专业培训，不能严格按照操作规程，灭菌效果不监测、不验证。 对抽真空的排气、冷凝水等不处理。,2019/11/16,55,生物安全常见问题个人防护,2019/11/16,56,我国科学家发现青海湖禽流感真凶(图) 动物研究人员在解剖死亡斑头雁 新华社记者 侯德强 摄 2005年07月12日12:29 东方网-文汇报,SARS实验室感染事件,1.新加坡SARS实验室感染事件（2003.8） 2.台湾SARS实验室感染事件（2003.12） 3.北京SARS实验室感染事件（2004.4）,2019/11/16,58,新加坡SARS实验室感染事件,2003年7月新加坡国立大学一位研究生在做病毒实验时因安全程序处理不当而感染。 问题： 缺乏安全意识 实验室过于拥挤 缺乏对生物安全程序的理解 操作不规范、多种病毒混合操作,2019/11/16,59,2019/11/16,60,2019/11/16,61,2019/11/16,62,台湾SARS实验室感染事件,2003年12月台湾一位实验人员在 P3 实验室做病毒实验时，因清理废弃物操作疏忽，安全程序处理不当而感染病毒。 问题： 实验室人员的培训 错误的操作程序 单独、长时间工作 缺乏对消毒的了解,2019/11/16,63,Transfer cabinet,2019/11/16,64,中国SARS实验室感染事件 2004年4月中国CDC病毒所腹泻病毒室两名研究生在做病毒实验时感染SARS病毒。 问题： 事故起因系该所实验人员多次违规将未完全灭活的SARS病毒从P3实验室带出至普通实验室操作而引起。,2019/11/16,65,冰箱和速冻器的使用和保养,要定期除霜和清洁，破裂的安瓿、冻存管要及时清理，在清扫的过程中应配戴面部保护装置并戴手套，清扫后，抽屉内表面应消毒处理。 保存在冰箱里的容器等，都应该有清楚的标签，并且标签上有内容物的科学命名、贮存日期和贮存人姓名。无标签的和过期的材料应高压灭菌后丢弃。对于冰箱内的储存物应有详细的目录。 除非有防爆措施，严禁将易燃液体保存在冰箱里，冰箱的门上应张贴这方面的注意事项。,2019/11/16,66,2019/11/16,67,2019/11/16,68,生物安全 bio-safety,避免或控制生物因子伤害的意识 、措施和方法的综合概念 意外的 有意的,2019/11/16,69,实验室生物安全,实验室生物安全是保护工作人员避免接触实验室工作中的生物因子的原则和技术路线。避免实验生物因子伤害风险的原则和措施。,2019/11/16,70,生物安全实验室,具有一定的生物安全防护水平的实验室统称为生物安全实验室。 1.生物安全实验室（BSL) 2.动物生物安全实验室（ABSL) 标准化的建筑、生物安全设备配置、个人防护、翔实的SOP 和严格的管理来实现 。,2019/11/16,71,传播过程分析,病人 传 呼 （气） 人 动物 染 消 （食） 体 实验室 物 皮 （破） 感 医院 （源） 血 （接） 染,2019/11/16,72,危险（风险） risk,危险或风险 在操作生物因子中受到生物因子伤害的概率和严重性。 生物安全实验室是把这种风险控制在最小程度。,2019/11/16,73,生物危害 bio-hazard,由生物因子形成的已有的和潜在的危险或威胁（bio-threat）: (1)传染病 (2)生物（战）恐怖 (3)双刃剑 基因武器 (4)有害生物的侵入 (5)实验室感染 (6)医院感染,2019/11/16,74,生物安全柜（BSC),通过负压、HEPA过滤、气幕和机械屏障的原理实现物理防护功能，在其内操作有害生物因子时防止工作者和环境暴露于实验过程中产生的生物气溶胶、防止空气对样品的污染，保护工作人员、环境和样品的设备。,2019/11/16,75,微生物危险分级 Risk group classification,国际 中国 危险级I risk group I (第四类) 危险级II risk group II (第三类) 危险级III risk group III (第二类) 危险级IV risk group IV (第一类),2019/11/16,76,各国病原微生物危险分级,1,2019/11/16,77,生物危害评估,对实验微生物和毒素可能给人或环境带来的危害所进行的评估。评估的基本依据是生物危险因子的危害分级在此基础上要考虑： （）操作的生物有害因子的数量和浓度，大量还是小量 （）操作的生物有害因子的剂型，是干粉还是液体 （）操作试验的内容，动物试验和气溶胶还是检验诊断或是细胞水平研究 （）实验室硬件水平 （）领导管理水平和经验 （）工作人员的专业和安全操作水平和经验 （）安全操作规程的科学性严密性和实用性 （）研究室主任的水平和经验,2019/11/16,78,实验室的生物安全防护水平,生物安全防护水平,2019/11/16,79,应对生物威胁,1.生物战 2.应对传染病和新发传染病 3.应对医院感染 4.应对实验室感染 5.应对突发公共卫生事件,2019/11/16,80,实验室相关感染,操作时发生的试验生物因子的感染。 可避免性 减少到最小 生物安全实验室是避免实验室感染的有力措施,2019/11/16,81,实验室感染,而引起实验室感染的病原微生物种类很多，感染途径主要有皮肤、粘膜接触感染、吸入感染、食入感染和接触动物感染等4种。 74例与实验室相关的布鲁氏菌感染导致布鲁氏菌病的评述，并且推断“在培养基培养操作或标本处理过程中接触布鲁氏菌、吸入含有布鲁氏菌的灰尘，是导致实验室工作人员感染的主要危险。”,2019/11/16,82,实验室感染,导致实验室感染主要来自4个方面： 从事感染性因子研究的占21， 接触动物的占17， 暴露于感染性气溶胶的占13， 偶然事故占18。,2019/11/16,83,实验室感染-感染性气溶胶,80以上的报告病例由感染性气溶胶引起的。 28例虫媒实验室病毒感染，暴露于感染性病毒气溶胶导致的感染是最常见的实验室相关感染 引起实验室获得性感染的病原体主要是细菌、病毒和立克次体等病原微生物，主要的传播途径可能是通过气溶胶(Aerosol)传播感染。,2019/11/16,84,推广BSL-2的理由,1.应用最多 2.最普遍 3.容易建容易通过 4.风险小，使用方便 5.节约 6.训练队伍，可应急,2019/11/16,85,良好的操作规范,从事病原微生物操作的任何人应遵循： 1）经过培训，通过考核，获得上岗证书； 2）应对所从事的病原微生物及相关操作进行危险评估,制定全面、细致的标准操作规程和程序文件，对于关键的危险步骤设计出可行的防护措施； 3）熟悉各种仪器的操作步骤和要点，进行正确的操作和使用，对于各种可能的危害应非常熟悉；,2019/11/16,86,生物安全管理体系,生物安全管理体系是为实施实验室生物安全管理和控制所需要的组织结构、程序、过程和资源。 它应能保证实验室现有研究工作的生物安全性并满足生物安全目标。 实验室应将政策、制度、计划、程序和指导书制定成文件，并将这些文件传达到全体人员，并被其理解、获得和执行。 保证对管理方针和目标的适应性和有效性。 生物安全管理体系体系具有关联性、协调性、适应性等特点。,2019/11/16,87,生物安全管理体系,管理：指挥和控制组织的协调活动。 管理体系：建立方针和目标，并实现这些目标的体系。包括为实施管理所需的组织结构、程序、过程和资源及证明。 管理体系应有明确的目的、规范的管理、有效的制约、高效的机制、能自我发展和有机的整体等特点。 生物安全管理体系贯穿于实验室活动的整个过程，从取样开始到所有潜在危险材料被处理。,2019/11/16,88,生物安全管理体系,先进的生物安全管理体系是确保实验室生物安全所必需的。好的生物安全管理体系应做到： 1、防止所操作的病原微生物通过实验室暴露感染个体。 2、防止传染性微生物从一个被感染的个体传染给他人，造成社会危害。 3、防止传染性生物材料或受污染的物体离开实验室造成环境污染。 4、防止生物恐怖的攻击或利用。,生物安全管理体系的运行,2019/11/16,90,法律、法规和实验室生物安全管理体系文件的宣贯、考核； 实际操作培训、考核； 开展新工作培训 紧急撤离演习； 急救培训、消防培训； 签署知情同意书、操作授权书；,一、定期开展工作人员、新进人员培训、考核工作，做到培训到位,2019/11/16,91,二、实时监督工作人员身体状况、工作状况及实验室运转状况，做到监督到位,保证双人工作制； 对身体不适人员禁止进入； 违规人员及时发现、及时处理； 密切关注实验室设施、设备运转情况；,2019/11/16,92,三、定期开展工作人员健康监护,日常监测； 本底血清的留存、检测； 定期体检； 定期免疫；,生物安全管理体系的运行,2019/11/16,93,四、控制物品的进出、定期监测消毒、灭菌效果,无关物品不得进入； 取出物品必须保证经过彻底消毒、灭菌并得到效果确认； 清场消毒必须切实有效；,生物安全管理体系的运行,2019/11/16,94,五、设施、设备的定期维护,空调系统的维护； 关键设备的维护；,生物安全管理体系的运行,2019/11/16,95,六、加强管理、力争做到管理到位,强化管理、凡事有章可循 不断修订、改进管理体系文件,生物安全管理体系的运行,2019/11/16,96,七、强化安保,通行限制:实验室对人员的准入依照不同生物安全防护等级分别进行限制； 场地限制：与实验无关或妨碍实验的物品或设备的放置予以限制； 人员限制：人员数量或人员移动或无关人员的出入予以限制； 行为限制：一切与实验无关的行为或工作予以限制； 防盗、防抢；,生物安全管理体系的运行,2019/11/16,97,谢谢,2019/11/16,98,附：血站质量管理体系的监控, 血站质量管理规范中的相关要求：,12.监控和持续改进 中主要包含以下内容：,12.2采供血过程和血液的质量控制 12.3确认,12.4不合格品控制 12.5不合格项控制 12.6内审,12.9纠正预防措施 12.10管理评审,2019/11/16,99,附：血站质量管理体系的监控 一）内部质量体系审核, 12.6,建立和实施内部质量审核程序。内部质,量审核应覆盖采供血及相关服务的所有过程和部 门。内部质量审核应预先制定计划，规定审核的 准则、范围、频次和方法。内部质量审核包括对 质量体系的审核和对质量体系执行状况的审核。, 12.7,内部质量审核员须经过培训，具备内审,员相应的资质和审核能力，并且与受审核方无直 接责任关系。内部质量审核员须经法定代表人任 命。,2019/11/16,100,附：血站质量管理体系的监控, 12.8,内部质量审核完成后应形成审核报,告，内容包括审核情况和评价、不合格项 及其纠正措施和预防措施。 12.9 应对纠正措施和预防措施的实施及其 效果进行追踪、验证和记录。,2019/11/16,101,附：血站质量管理体系的监控, 术语和定义,审核：为获得审核证据并对其进行客观,的评价，以确定满足审核准则的程度所进 行的系统的、独立的并形成文件的过程。 注：内部审核，有时也称第一方审核，用 于内部目的，由组织自己或以组织的名义 进行，可作为组织自我合格声明的基础。,外部审核包括通常所说的“第二方审核”和 “第三方审核”。,2019/11/16,102,附：血站质量管理体系的监控, 第二方审核由组织的相关方（如顾客）或,由其他人员以相关方的名义进行。, 第三方审核由外部独立的组织进行。这类,组织提供符合要求（如：GB/T19001和 GB/T24001-1996）的认证或注册。,2019/11/16,103,附：血站质量管理体系的监控, 何谓系统性：,审核要求有遵循、有计划、有步骤、规范 的得到设施。, 何谓独立性：,审核员应独立于被审核的部门或组织之 外，即审核应由与被审核对象无直接责任 关系的人员进行。,2019/11/16,104,附：血站质量管理体系的监控, ,内审的目的： 审核管理体系的符合性、有效性； 发现问题，为改进管理体系创造机会； 有助于外部审核,2019/11/16,105,附：血站质量管理体系的监控, ,内审的依据： 标准 管理体系文件 合同 国家有关的法律、法规、技术标准 管理计划,2019/11/16,106,附：血站质量管理体系的监控, ,内审的时机和频次： 一般一年两次，至少一次 外审前应安排一次 出现严重不符合、重大事故、客户重大投,诉时应追加审核 组织机构、职责分配、资源发生重大变化 管理体系依据发生变化,2019/11/16,107,附：血站质量管理体系的监控, ,内审的范围： 全要素 全部门 全区域 但可分次进行，每年覆盖一遍,2019/11/16,108,附：血站质量管理体系的监控, ,内审员的要求： 熟悉标准、管理体系文件 有经培训并持有证书 熟悉内审的过程、方法、技巧 具有一定的专业知识 客观、公正、严谨,2019/11/16,109,附：血站质量管理体系的监控, 审核的步骤：, 年度计划成立内审小组-发放内审实施 计划-编写检查表-现场审核（首次会,议调查取证-记录审核中的发现-末次会议） -发出内审不符合报告-责任部门分析原 因、提出纠正措施-内审小组跟踪确认- 编写内审报告,2019/11/16,110,2019/11/16,111,附：血站质量管理体系的监控,2019/1