DB33T 402.2-2014 河蚌育珠技术规范 第2部分珍珠接种及育成技术规范.pdfVIP

ICS 65.150 B 52 DB33 浙江省地方标准 DB 33/T 402.22014 代替 DB33/T 402.2-2003、DB33/T 402.3-2003 河蚌育珠技术规范 第 2 部分：珍珠接种及育成技术规范 Technical specifications for freshwater mussel pearl nurturing Part 2：Technical specifications for mussel operation and culture 2014 - 12 - 31 发布 2015 - 01 - 31 实施 浙江省质量技术监督局 发 布 DB33/ 4022014 I 前 言 本部分依据GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本部分代替DB33/T 402.2-2003河蚌育珠技术规范 第2部分：珍珠接种技术规范和DB33/T 402.3-2003河蚌育珠技术规范 第3部分：育珠蚌养殖与采珠技术规范。与原DB33/T 402.2-2003 和DB33/T 402.3-2003相比，除编辑性修改外主要技术变化如下： 增加了有核珍珠和象形珍珠的接种时间和接种水温； 增加了珠核和象形模型的消毒方法； 细化了组织小片规格说明； 修改了PVP保养液配方； 将“插片”改为“接种”并增加了有核珍珠和象形珍珠的接种流程； 增加了有核珍珠和象形珍珠的接种部位说明； 增加了有核珍珠和象形珍珠的接种创口说明； 增加了有核珍珠和象形珍珠接种的操作步骤和要求； 删除了外荡吊养密度的说明，修改了池塘吊养密度的说明； 修改了吊养深度的说明； 修改了养殖管理说明； 删除了表1 蚌病治疗方法，增加了附录A。 本部分由浙江省海洋与渔业局提出。 本部分由浙江省水产标准化技术委员会归口。 本部分起草单位：浙江省淡水水产研究所、诸暨市水产技术推广站。 本部分主要起草人：张爱菊、刘金殿、蒋文枰、朱俊杰、骆年华。 本部分代替了DB33/T 402.2-2003和DB33/T 402.3-2003，DB33/T 402.2-2000、DB33/T 402.3-2003 均为首次制定。 请注意本标准的某些内容可能涉及专利。本标准的发布机构不承担识别这些专利的责任。 DB33/ 4022014 1 河蚌育珠技术规范 第 2 部分：珍珠接种及育成技术规范 1 范围 DB33/T 402 的本部分规定了淡水无核珍珠、有核珍珠和象形珍珠接种的术语和定义，接种时间和 水温，接种前的准备，接种，养殖环境条件，养殖方式，养殖方法，蚌病防治，养殖周期，采珠方法和 珍珠保存等技术。 本部分适用于接种淡水无核珍珠、有核珍珠和象形珍珠及河蚌养殖。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件， 仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 15618 土壤环境质量标准 NY 5051 无公害食品 淡水养殖用水水质 3 术语及定义 下列术语和定义适合于本部分。 3.1 作业蚌（手术蚌） Operation Mussel 制片蚌和插片蚌的统称。 3.2 制片蚌（供体蚌） Donor mussel 用于制取组织小片的蚌。 3.3 插片蚌（育珠蚌，受体蚌） Recipient Mussel 用于接种组织小片、珠核以及象形模型的育珠母蚌。 3.4 组织小片 Graft tissue Piece 河蚌外套膜的边缘膜内、外表皮被分离后，把外表皮及相连部分结缔组织切成的块状膜片。 3.5 DB33/T 402.22014 2 珠核 Beads Nuclei 由河蚌珍珠层加工形成，为珍珠的同源物质，其比重、硬度和膨胀系数等与珍珠基本一致。 3.6 象形模型 Pictographic model 采用蚌壳、 塑料、 石蜡、 陶瓷等材料雕刻成各种形象逼真的动物、 人像、 风景等模型， 简称 “像模” 。 3.7 接种 Graft tissue Piece implantation 为了培育珍珠，把组织小片、珠核以及象形模型植入蚌的合适组织内的操作过程。 4 接种时间和水温 4.1 接种时间 无核珍珠、 有核珍珠及象形珍珠接种均以每年的 3 月6 月或 9 月11 月为宜。 接种手术应避开 繁殖期。 4.2 接种水温 无核珍珠、有核珍珠及象形珍珠接种适宜水温15 30 ，最适水温20 25 。 5 接种前准备 5.1 作业蚌选择 5.1.1 蚌源 以人工培育的作业蚌为宜。 5.1.2 蚌龄 5.1.2.1 制片蚌 制片蚌以不超过1 足龄为宜。 5.1.2.2 插片蚌 无核珍珠：当年长至7 厘米以上的蚌；有核珍珠及象形珍珠：2 龄以上，2 龄3 龄为宜。 5.1.3 蚌长及体重 5.1.3.1 制片蚌 蚌壳长7 厘米9 厘米，个体重不应低于20 克。 5.1.3.2 插片蚌 无核珍珠： 蚌壳长7 厘米以上， 个体重不应低于20 克； 有核珍珠及象形珍珠： 蚌壳长15 厘米以上， 个体重不应低于300 克。 DB33/ 4022014 3 5.1.4 质量要求 壳厚，无损伤。外壳色泽鲜艳、光亮，呈深绿至青蓝色，或黄褐色。生长线明显。外套膜肥厚细嫩， 呈白色，不应脱离壳。斧足肥硕，软体部健壮、饱满。无伤无病，生命力强盛，生长季节的生长速度快。 5.2 作业蚌暂养 水温20 为宜。自繁自用的蚌暂养10 天，外地买进的蚌暂养30 天，以蚌体养肥为准。用网袋或 网箱吊养，密度不超过310 5 只/公顷。 5.3 手术用具 5.3.1 开蚌壳用具 开壳器、“U”形钢丝固口塞子。 5.3.2 制组织小片用具 剖蚌刀、切片刀、平头镊子、剪刀、小片板（深色）、划膜刀、解剖盘、PVP保养液、滴管、大小 盆、桶、毛巾和脱脂棉等。 5.3.3 接种用具 手术架、开壳器、固口塞、拔鳃板、创口针、送片针、平头镊子、核片同植针、通道器、拨模棒、 多西环素消毒液、滴管、盆、黑布、毛巾和脱脂棉等。 5.4 消毒 5.4.1 用具 所有固体用具使用前需用开水煮沸消毒。 5.4.2 珠核 用10%的稀盐酸进行反复洗涤30 分钟， 再用新鲜制备的石灰水反复洗涤至珠核的pH为中性， 然后将 珠核置于沸水中杀菌消毒40 分钟， 最后用多西环素消毒液充分清洗， 纯净水(pH 7.2pH 7.3)浸泡24 小 时，去水滴后再经生石灰干燥，装于灭菌的磨口玻璃瓶。 5.4.3 像模 像模需用酒精消毒后，再用脱脂棉擦干后使用。 6 接种 6.1 组织小片制备 6.1.1 制片流程 选蚌剖蚌洗污开膜取下外表皮洗去粘液污物切去色线修边切片。 6.1.2 制片要求 宜采用撕膜法制取小片。 DB33/T 402.22014 4 6.1.2.1 规格 组织小片视作业蚌和所需珍珠的规格而定，具体为： 无核珍珠：以 3.0 毫米4.0 毫米见方为宜； 有核珍珠及象形珍珠：以 1.0 毫米2.0 毫米见方为宜。 6.1.2.2 厚度 以0.4 毫米0.6 毫米为宜。 6.1.2.3 时间 一个蚌的小片制作应在2 分钟内完成。 6.1.2.4 操作 一刀定形，切口整齐，小片正面不应碰伤或擦伤，不能有色线残留。 6.1.2.5 处理及存放 6.1.2.5.1 制好的小片应立即滴入 PVP 保养液保护，保持湿润，避免日晒风吹，保持清洁。小片不能 久置，应边制边插，以 5 分钟内插种完为宜。 6.1.2.5.2 将 500 毫升生理盐水中加入聚乙烯吡咯烷酮 15 克和多西环素 0.4 克0.6 克， 混合后振 荡均匀即成 PVP 保养液，现配现用。 6.2 接种 6.2.1 流程 6.2.1.1 无核珍珠：选蚌开壳加塞洗污挑片创口插片整圆去塞标号。 6.2.1.2 有核珍珠： 选蚌开壳加塞洗污创口通道穿核、 贴片送核消毒去塞标号。 6.2.1.3 象形珍珠：选蚌开壳加塞洗污创口通道送模贴片（非附壳珍珠）消毒去 塞标号。 6.2.2 要求 6.2.2.1 开壳 用开壳器轻缓开壳，双壳撑开的距离为0.8 厘米1.0 厘米。 6.2.2.2 部位 6.2.2.2.1 无核珍珠：接种部位以外套膜中央膜的中后部、鳃能遮盖的地方为宜，但不能超过蚌体长 的二分之一。 6.2.2.2.2 有核珍珠：接种部位在外套膜边缘或内脏囊，其中内脏囊接种的具体位置以唇瓣右下面、 内脏背侧、斧足与内脏囊交界处为宜。 6.2.2.2.3 象形珍珠：接种部位位于外套膜和贝壳连接处。 6.2.2.3 创口 6.2.2.3.1 无核珍珠：创口与小片间隔排列呈“品”字形。创口大小以能使组织小片插入为宜。 6.2.2.3.2 有核珍珠：创口大小以刚好通过珠核为宜；创口深度为核径的 1.5 倍为宜。 DB33/ 4022014 5 6.2.2.3.3 象形珍珠：创口大小以象形模型通过为宜。 6.2.2.4 数量 6.2.2.4.1 无核珍珠：接种数量按蚌体规格而定，每蚌以 32 片为宜。 6.2.2.4.2 有核珍珠：接种数量按蚌体、珠核规格和接种部位而定，外套膜接种每蚌以 6 个8 个珠 核为宜，内脏囊接种每蚌以 1 个珠核为宜。 6.2.2.4.3 象形珍珠：接种数量按蚌体和象形模型规格而定，每蚌以 2 个象形模型为宜。 6.2.2.5 操作 6.2.2.5.1 无核珍珠：送片针应挑在组织小片的正中。组织小片的外表皮应卷在里面，插入育珠蚌外 套膜的内外表皮之间的结缔组织中，然后退出送片针，同时用创口针将小片整圆。挑片、创口、插片、 整圆应一次成功。 6.2.2.5.2 有核珍珠：切开创口后，从送核口伸入通道器，进行通道，后退出通道器；将珠核套在送 核器的针上，用针尖穿刺组织小片中央，使小片表皮紧贴珠核，左手用钩针将创口扩开稳定，右手将珠 核与小片用腕力从送核口送达核位，然后用钩针压住创口退出送核针。创口、挑珠、贴片、送核应一次 成功。 6.2.2.5.3 象形珍珠： 附壳珍珠应先用湿海绵球擦净中央膜处手术部位， 用通片针挑起剥离的外套膜， 再用镊子夹住像模的一端，正面向上，底面贴壳，以 45角慢慢地从创口送进，用拨模棒调整像模位 置，并轻轻压一下外套膜，使之与像模紧贴；非附壳珍珠也应先用湿海绵球擦净中央膜处手术部位，切 开创口，用通片针挑起剥离的外套膜，再用镊子夹住像模的一端，正面向上，底面贴壳，以 45角慢 慢地从创口送进，拨模棒调整像模位置。用送片针挑起组织小片从创口处进入，帖在像模表面，退出送 片针。送模时应注意平拿平放。 6.2.2.6 处理 接种完成后立即在创口滴加多西环素消毒液消毒，拔掉固口塞子待养。 6.2.2.7 时间 每只蚌插片的时间应在5 分钟内完成。完成接种手术的育珠蚌，立即吊养于育珠水域。 7 养殖水域环境条件 7.1 地理位置 养殖育珠蚌的水域应阳光充足，水源丰富，进排水方便，交通便利。 7.2 水域条件 养殖育珠蚌的水域，面积以1 公顷3 公顷、常年水深以2 米3 米为宜。水质应符合NY 5051的 规定。土质应符合GB 15618的规定。以粘土、水底淤泥厚度以15 厘米为宜。 8 养殖方式 以蚌为主，套养一定比例鱼类。鱼蚌数量比以1.5:1为宜。 DB33/T 402.22014 6 表1 鱼蚌综合生态养殖模式下套养鱼类的参考种类、规格及数量表 放养品种 数量(尾/公顷) 规格(克/尾) 草鱼 5 000 100150 鲫鱼 1 5002 000 100150 鲢鱼 1 5002 000 150250 鳙鱼 1 5002 000 150250 9 养殖方法 9.1 吊养架设置 采用延绳式吊养育珠，以毛竹为桩，用聚乙烯绳相联，每间隔2 米吊一个浮子（渔用浮子等）。 9.2 吊养工具的制作 9.2.1 方网箱 规格40 厘米40 厘米12 厘米，网目2.5 厘米。 9.2.2 网夹 竹片长50 厘米，宽2 厘米；网片长17 目、高6 目，网目4 厘米。竹片两端打孔，串扎网线,竹片 中间用网片做成网袋。 9.3 吊养密度 吊养育珠蚌7 000只/公顷8 000只/公顷。 9.4 吊养方法 9.4.1 蚌体长小于 12 厘米的育珠蚌，使用方网箱， 每箱装 10 只20 只。 养殖一年后（蚌体长 12 厘 米为宜）转入网夹。 9.4.2 蚌体长大于 12 厘米的育珠蚌，使用网夹。手术完毕后的育珠蚌吊养时，蚌体后端在上前端在 下，腹缘斜向朝上装入网夹袋，每袋装 3 只4 只。 9.5 吊养深度 育珠蚌的吊养深度以40 厘米50 厘米为宜。 9.6 养殖管理 9.6.1 投喂配合饲料 每天上午 8:0010:00 投喂，投喂量为鱼体存塘量的 1%2.5%。 9.6.2 施入生石灰 吊养期间，1 公顷水域每月用生石灰 150 千克200 千克，使 pH 值维持在 78.5，确保池水肥、 活、嫩、爽，维持水体透明度在 30 厘米40 厘米。 DB33/ 4022014 7 9.6.3 定期加注新水 5 月9 月，每天注水 3 小时5 小时，交换 10%的池塘水体，使水体溶氧保持 5 毫克/升以上。 9.6.4 定期检查 手术完毕吊养7 天以后，检查蚌的成活，蚌大量死亡时应立即停止接种手术。以后应每隔半个月检 查一次，发现死蚌立即清除。及时洗刷和清除网袋、网箱上的附着物，吊养设施破损及时修复。 10 蚌病防治 10.1 蚌病预防 吊养期间，1 公顷水域每月用生石灰 150 千克200 千克，兑水全池均匀泼洒，保持池水 pH 值为 78.5。 10.2 蚌病治疗 蚌病治疗方法详参见本标准附录A。 11 养殖周期 无核珍珠育珠蚌的养殖周期为三夏二冬至四夏三冬， 有核珍珠和象形珍珠的养殖周期为二夏一冬至 三夏二冬。 12 珍珠采收 12.1 季节 每年的12 月至翌年2 月。 12.2 方法 12.2.1 剖蚌取珠 将已育成珍珠的蚌，用剖蚌刀切断前后闭壳肌，打开双壳，取出珍珠。 12.2.2 活蚌取珠 用开壳器将已育成珍珠的蚌撑开，加固口塞固定；置于手术架上，洗去蚌内污物；用拨鳃板将鳃和 斧足等拨向一侧， 用开口针在每个珍珠的小突起上将珍珠囊划开一个小口， 再用拨鳃板在珍珠突起的底 部朝上推，将珍珠从开口处推挤出来；或用弯头镊子把珍珠取出。 12.3 洗涤 先将取出的珍珠放入清水盆中洗去污物，用有机溶剂在pH 为77.5 的条件下浸泡，再将珍珠放 入清水盆中，漂洗数分钟捞出，用清洁的白毛巾或绒布擦干，打光。 13 存放 DB33/T 402.22014 8 将打光后的珍珠装进布袋，放在通风透气的橱架上保存。 14 模式图 珍珠接种技术模式图、育珠蚌养殖及采珠技术模式图参见本标准附录B。 A DB33/ 4022014 9 A B 附 录 A （资料性附录） 蚌病治疗方法 A.1 蚌病治疗方法 蚌病治疗方法见表A.1。 表 A.1 蚌病治疗方法 序号 蚌病名称 蚌病症状 治疗方法 1 蚌瘟病 排水孔与进水孔纤毛收缩， 鳃有轻度溃烂， 外套膜 有轻度剥落， 肠道壁水肿， 晶杆萎缩或消失。 聚维酮碘溶液或者漂白粉全池泼洒。 2 烂鳃病 鳃丝肿大，发白或发黑糜烂， 残缺不一，附有泥沙 污物， 有大量粘液；闭壳肌松驰，两壳张开后无力 闭合。 漂白粉挂袋水体消毒，或全池泼洒。 3 烂斧足病 斧足边缘有锯齿状缺刻和严重溃疡， 组织缺乏弹性， 呈肉红色，常有萎缩，并有大量粘液。 漂白粉挂袋水体消毒，或全池泼洒。 4 侧齿炎 蚌的双壳不能紧闭, 侧齿四周组织发炎、 糜烂，呈 黑褐色。 漂白粉挂袋水体消毒，或全池泼洒。 5 胃肠炎 有不同程度的水肿； 有大量淡黄色粘液流出, 间有 腹水, 斧足多处残缺糜烂。 初期蚌壳微开，出水管 喷水无力，严重时完全失去闭壳功能。 漂白粉挂袋水体消毒，或全池泼洒。 6 外套膜（边 缘膜）溃疡 边缘膜会因溃烂而内缩，出现时断时续。植片手术时 消毒不严也会使外套膜溃烂穿孔。 漂白粉挂袋水体消毒，或全池泼洒。 7 水霉病 鳃、斧足等因寄生虫的侵袭、机械损伤等使水霉菌寄 生，呈灰白色棉絮状“毛”。 用聚维酮碘溶液全池泼洒。 8 蚌蛭病 吸附在鳃、外套膜或斧足上的小蚂蝗， 体扁、多环 节， 作尺蠖状爬行， 肉眼易见。 一般有几条到十几条， 多的1只蚌达100多条。 1.保持池水pH值78，抑制蚌蛭生长繁殖。 2.用稻草把子沾满新鲜畜禽血， 晾干后挂于 水中，经 1 天2 天，诱集大量蚌蛭后提 起焚烧，连用数次，清除为止。 9 原虫病 为纤毛虫、 斜管虫和车轮虫等, 常寄生在蚌的鳃上， 呈白点状，鳃组织破坏引起感染、发炎、糜烂。 硫酸铜全池泼洒。 10 线虫病 粘液浓厚微黄，多泡沫或沾染淤泥，低倍镜镜检可检 出寄生虫。 精制敌百虫溶液全池泼洒。 C DB33/T 402.22014 10 附 录 B （资料性附录） 模式图 B.1 珍珠接种技术模式图 珍珠接种模式图见图B.1。 B.2 育珠蚌养殖及采珠技术模式图 育珠蚌养殖及采珠技术模式图见图B.2。 DB33/ 4022014 11 图 B.1 珍珠接种技术模式图 接种时间和水温接种时间和水温 1 1.接种时间：无核珍珠、有核珍珠及 象形珍珠均以每年的 3 月6 月或 9 月11 月为宜。接种手术都应避开繁 殖期。接种手术都应避开繁殖期。 2 2.接种水温：适宜水温1530， 最适水温20 25 。 作业蚌选择及暂养作业蚌选择及暂养 1.1.作业蚌选择： 要求蚌体厚实， 体质健壮。 制片蚌以不超过1足龄为宜， 壳长7厘米9厘米，个体重不得低于20克；当年长至7厘米以上的蚌即 可作为培育无核珍珠的育珠蚌，且个体重不得低于20克；有核珍珠和 象形珍珠均要求育珠蚌在2龄以上，2龄3龄为宜，壳长15厘米以上， 个体重不得低于300克。 2.2.作业蚌暂养：自繁自用的蚌暂养10天，外地买进的蚌暂养30天，以 蚌体养肥为准。用网袋或网箱吊养。暂养密度不超过310 5只公顷。 组织小片制备组织小片制备 1.1.工具消毒：开水煮沸法。 2.2.组织小片制备采用撕膜法。 3.3.规格：无核珍珠以 3.0 毫米4.0 毫米见方为宜；有核珍珠及象形珍 珠以 1.0 毫米2.0 毫米见方为宜。厚度以 0.4 毫米0.6 毫米为宜。 4.4.制片流程：选蚌剖蚌洗污开膜取下外表皮洗去粘液污物 切去色线修边切片。 5.5.保存：制好的小片应立即滴入 PVP 保养液保护。 接种接种 接种后处理接种后处理 接种完成后立即在创口 滴加多西环素消毒液消 毒，然后拔掉固口塞子， 待养，水质应符合 NY 5051 的规定。 种类 部位 流程 创口 接种数量 备注 无核珍珠 外套膜中央 膜的中后部 选蚌开壳加塞洗污挑片 创口插片整圆去塞标号 创口与小片间隔排列呈“品”字， 大小以能使组织小片插入为宜 按蚌体大小而定，每蚌以 32 片 为宜 有核珍珠 外套膜边缘 或内脏囊 选蚌开壳加塞洗污创口 通道穿核、 贴片送核消毒去 塞标号 创口大小以刚好通过珠核为宜， 深度为核径的 1.5 倍为宜 按蚌体大小、 珠核规格和接种部 位而定，外套膜接种每蚌以 6 个8 个珠核为宜，内脏囊接种 每蚌以 1 个珠核为宜 接种前珠核需经过 消毒处理 象形珍珠 外套膜和贝 壳连接处 选蚌开壳加塞洗污创口 通道送模贴片（非附壳珍珠） 消毒去塞标号 创口大小以象形模型通过为宜 按蚌体大小和象形模型大小而 定，每蚌以 2 个象形模型为宜。 接 种前像模需经过消 毒处理 DB33/T 402.22014 12 图 B.2 育珠蚌养殖及采珠技术模式图 养殖场址选择养殖场址选择 及环境条件及环境条件 育珠蚌放养育珠蚌放养 养殖养殖管理管理 珍珠采