高效液相色谱分析方法开发.ppt_第1页
高效液相色谱分析方法开发.ppt_第2页
高效液相色谱分析方法开发.ppt_第3页
高效液相色谱分析方法开发.ppt_第4页
高效液相色谱分析方法开发.ppt_第5页
已阅读5页，还剩3页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

分析方法开发三步骤,HPLC 分析方法开发,选择合适的色谱柱(固定相)和流动 相，得到合理的保留时间,调整选择性以及各个色谱峰的分离度,调整流速、填料粒径、色谱柱规格(长度及内径)以获得最佳的分离,开发分析方法的规则,合适的保留因子k (k值1-20)是获得满意分离的基础 保留因子 k=(tR-tM)/tM,用以下“秘诀”可以使您的开发过程更加简便、快速,揭秘-选择合适的起始条件,不同的样品不同的思路 中性化合物无需调整流动相的pH值；而对于含有带电基团的 化合物，则需要用缓冲溶液调整流动相的pH值；有时需要 采用离子对反相色谱,选用通用的色谱柱 一般直接选用C18(或C8) 5um 12.5, 15, 25cm 长的色谱柱,选择流动相 甲醇/水或乙腈/水(依据个人习惯而定),流动相的调整“秘诀”,秘诀1 由强到弱 一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验， 这样可以很快地得到分离结果，然后根据出峰情况调 整有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。,流动相的调整“秘诀”,秘诀2 三倍规则 每减少10%的有机溶剂(甲醇或乙腈)的量， 保留因子约增加3倍，此为三倍规则。这是 一个聪明而又省力的办法。调整的过程中， 注意观察各个峰的分离情况。,秘诀3 粗调转微调 当分离达到一定程度，应将有机溶剂 10%的改变量调整为5%，并据此规则 逐渐降低调整率，直至各组分的分离 情况不再改变。,流动相的调整“秘诀”,流动相的调整“秘诀”,秘诀4 更换流动相的组成 在第三步，我们已经基本上得到了一个合适的 保留因子，如果还有一些组分的分离情况不好， 则应考虑更换流动相的组成(如有机溶剂类型的 改变、pH值的改变或是加入离子对试剂，等等)， 或者，索性改变固定相的类型。,色谱柱的调整,根据操作压力、出峰时间、分
人人文库> 全部分类> 教育资料 > 课件下载

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论