香莲栓剂制剂处方的正交设计优选.doc

香莲栓剂制剂处方的正交设计优选 作者：郑少文， 廖晓琼，袁小红【摘要】 目的优选香莲栓剂的制剂处方。方法用正交设计法对香莲栓剂的制剂处方进行筛选，以脱模时间、外观、1 h体外溶出度的综合评分为指标，评价香莲栓剂的质量。结果优选出该栓剂的最佳的制剂处方为：浸膏与基质间比例为13，混合脂肪酸甘油酯(36型，36#)与蜂蜡和聚氧乙烯(40)单硬脂酸酯(S-40)之和间的比例为161，蜂蜡与聚氧乙烯(40)单硬脂酸酯的比例为23。结论该处方设计合理，制剂工艺可行，优选出的最佳制剂处方经验证，其结果稳定、可靠，所制备的香莲栓剂色泽均匀、外观光滑，融变时限、1 h的溶出度等均符合规定。 【关键词】 香莲栓剂; 正交设计; 制剂处方香莲外洗液是广东省中医院的院内制剂，主要由丁香、黄连、藿香等中药组成，具有清热燥湿、杀虫止痒的功效，临床上用于治疗各种皮肤病和阴道炎等疾病，对外阴阴道念珠菌病、细菌和滴虫性阴道炎的治疗效果尤其显著，其用于治疗股癣和外阴念珠菌病的痊愈率分别为 80.76%和85.41%;有效率分别为96.15%和 100%;总痊愈率和总有效率分别为83%和98%。实验研究表明，该方对皮肤真菌、细菌和滴虫有良好的抑杀作用1。但由于洗液在治疗阴道炎时只能轻涂患处或用棉纱吸收后置于阴道内，所以存在给药剂量不准确，使用、携带不方便等问题。因此，课题组将其制成栓剂，以提高病人的依从性和提高疗效，并通过正交实验对香莲栓剂的最佳处方组成进行筛选。现报道如下。1 仪器与试药1.1 仪器USC-702超声波清洗器(上海波龙电子设备有限公司);RBY-4融变时限检查仪(天津药典标准仪器厂);ZRS-RG智能溶出试验仪(天津市天大天发科技有限公司);UV-2450紫外分光光度计(日本岛津公司);DK-S26电热恒温水浴锅(上海精宏实验设备有限公司);BS224S电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司)。1.2 试药香莲浸膏(生药含量4 g/ml，由广东省中医院制剂室提供);混合脂肪酸甘油酯(36型)(湖北东信药业有限公司，批号：090504，符合2005版中国药典标准);蜂蜡(广州杰禾蜂业有限公司);聚氧乙烯(40)单硬脂酸酯(广州器化医疗设备有限公司);盐酸小檗碱(中国药品生物制品检定所，批号：0713-9906);吐温-80(天津市化学试剂厂，批号：20081108);盐酸(广州化学试剂厂，批号：20061103)2 方法与结果2.1 香莲栓剂的制备按正交实验安排的处方量分别称取水相和油相，于水浴75加热使溶解，待两相溶解均匀后，将油相迅速加入水相中，搅拌均匀，约30 s后移出水浴继续搅拌使降温，当温度降到40左右时，加入预先溶解的丁香油、冰片和薄荷脑的混合溶液，搅拌均匀，待温度降到35左右时，将样品迅速注入到已涂好甘油的模具中，室温下冷却，刮去溢出部分，脱模，即得。2.2 正交实验筛选香莲栓剂的制剂处方2.2.1 确定因素水平表根据文献报道2， 3及预试验情况，确定考察因素为：香莲浸膏、混合脂肪酸甘油酯(36型)(以36#表示)、蜂蜡、聚氧乙烯(40)单硬脂酸酯(以S-40表示);其因素水平表见表1。选择L9(34)正交表进行正交实验。表1 因素水平水平A浸膏基质B36#(蜂蜡+S-40)C蜂蜡S-40114121412131413231216123基质包括36#、蜂蜡和S-402.2.2 正交实验结果及方差分析采用综合评分法评价所制得栓剂的优劣，以脱模时间(Q1)、外观(Q2)、1h溶出率(Q3)为评价指标进行综合评分，各项指标所占分值比例分别为20%，20%，60%;评分标准为：Q1小于等于30 min者为10分，大于30 min小于40 min者为5分，40 min尚不能脱模或有粘模者为0分;Q2：外观颜色均匀，完整光滑，无气泡者为10分;有小量气泡，或表面粗糙，有纹者为8分;过硬或过软，手捏即碎者为5分;颜色不均匀，有分层或有裂缝及大量气泡者为0分;Q3：以1h的溶出率为判断标准，如100%溶出则为10分，溶出95%则为9.5分，以此类推。正交实验结果及方差分析分别见表23。由表2直观分析可知，各因素对香莲栓剂制备工艺的影响次序为A>B>C,其中A2>A3>A1 ,B3>B2>B1,C3>C2>C1 ,A、B因素的R值较大而且接近，而C因素的R值较小，说明A、B为本实验的主要影响因素，方差分析结果也表明，当 =0.1时，因素A和因素B均有差异，与直观分析结果一致。综合考虑，初步确定最佳处方为A2B3C3,即浸膏与基质间比例为13，混合脂肪酸甘油酯(36型)与蜂蜡和聚氧乙烯(40)单硬脂酸酯(S-40)之和间的比例为161，蜂蜡与聚氧乙烯(40)单硬脂酸酯间的比例为23。2.3 紫外分光光度法测定溶出液中总生物碱的含量2.3.1 对照品溶液的制备将盐酸小檗碱对照品干燥至恒重，精密称取2.0 mg，置100 ml容量瓶中，加适量0.1 mol/L的稀盐酸超声使溶解，再以同浓度的稀盐酸稀释至刻度，摇匀，即得20 g/ml的盐酸小檗碱标准液，作为贮备液。2.3.2 样品溶液的制备取所制香莲栓剂1枚置于0.1 mol/L稀盐酸900 ml中，于37水浴加热使溶解，吸取5 ml用0.45 m的微孔滤膜过滤，得样品溶液。表2 正交实验方法及结果2.3.3 测定波长的确定以0.1 mol/L的稀盐酸作为空白溶液，将上述样品溶液和浓度为6.0 g/ml的对照品溶液于200700 nm波长范围内进行扫描，结果见图1。可见盐酸小檗碱在230，266，345，430 nm波长处均有最大吸取，与文献报道相一致4。考虑到峰形及吸收强度等因素的影响，选定345 nm作为测定波长。2.3.4 标准曲线的制备精密量取“2.3.1”项下的贮备液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0， 6.0 ml,分别置于10 ml量瓶中，加0.1 mol/L的稀盐酸稀释至刻度，摇匀，制成浓度为2.012.0g/ml的系列对照品溶液，以0.1 mol/L的稀盐酸为空白，在345 nm波长处测定其吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，结果表明在2.012.0g/ml范围内浓度与吸光度线性关系良好，标准曲线方程为Y=93.234X-0.003 5，r=0.999 8(n=6)。1.样品 2.对照品 3.空白图1 光谱扫描图2.3.5 精密度实验取上述浓度为3.0 g/ml的盐酸小檗碱对照品溶液，同日内重复测定吸光度6次， 日内RSD为0.40%;同法在第0，1，2，3，4，5天分别测定吸光度，测得日间RSD为0.28%(n=6)。2.3.6 稳定性实验 取上述浓度为3.0g/m的盐酸小檗碱对照品溶液和“2.3.2”项下的样品溶液，分别在0，2，4，8，12，24，48 h测定其吸光度，结果表明盐酸小檗碱和样品在48 h内稳定，RSD分别为0.78%和0.85% 。2.3.7 加样回收率实验 取已知浓度的香莲药液6份每份5 ml置于10 ml容量瓶中，分别加入一定量的贮备液，定容后按“2.3.4”项下方法测其吸光度，计算回收率。结果见表4。表4 加样回收率实验结果2.4 溶出度测定方法 按中国药典(2005版)5部附录XC溶出度测定法项下规定操作，溶出介质为0.1 mol/L的稀盐酸900 ml，温度(370.1)，转速(1001)r/min，取各正交试验号下栓剂6枚，分别投入6个溶出杯内，自栓剂接触溶出介质起立即计时，于1 h取样5 ml，每次取样操作在30 s内完成。样品液用 0.45 m的微孔滤膜过滤,取续滤液冷却至室温后按“2.3.4”项下方法测定吸光度。2.5 验证实验为保证制剂工艺的重复性和可行性，对优选的最佳处方进行验证实验。结果见表5。表5 验证实验由表5结果可见，其3批的综合评分均高于正交实验中的最高分，证明优化处方可行，重现性好，其融变时限均符合中国药典要求，所以筛选出的制剂处方为A2B3C3 。3 讨论从光谱扫描图可以看出，空白溶液在各波长处几乎无吸收，盐酸小檗碱和样品在300 nm波长以下的吸收峰峰形尖锐，345 nm与430 nm的吸收峰峰形圆钝，更适合紫外分光光度法的测定波长，而345 nm处的吸光度比430 nm处强，因此我们选择了345 nm作为测定波长。关于溶出介质的选择，研究考虑到女性的阴道内pH值呈酸性，而且处方中含有多种生物碱，它们在酸性环境下的溶解度比较大，故选择0.1 mol/L盐酸溶液作为本实验的溶出介质，不仅价廉易得，而且有利于生物碱从介质中溶出，贴近体内制剂溶出环境。本实验所用混合脂肪酸甘油酯(36型)为脂溶性基质，在溶出度测定时若采用转篮法，则容易堵塞孔眼，从而造成测定结果不准确，故选择桨法。【参考文献】 1 范瑞强. 中药香莲复方外用治疗股癣及外阴念珠菌病的实验和临床研究J. 广州中医学院学报， 1991， 8(2，3): 170.2 胡容锋，朱家壁，彭代根，等. 综合评分法优化银杏叶分散片处方J