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专题2 细胞工程,一、 植物细胞工程 1.对细胞工程概念的理解: (1)应用原理:细胞生物学和_学。 (2)操作水平:细胞水平或_水平。 (3)操作目的:按照人的意愿改变细胞内的_或获,得细胞产品。,分子生物,细胞器,遗传物质,2.植物组织培养:,无菌,离体,愈伤组织,(1)概念:在_和人工控制的条件下,将_ 的植物器官、组织、细胞,培养在人工配制的培养基上,给予 适宜的培养条件,诱导其产生_、丛芽,最终形成,完整的植株。,植物细胞的全能性,完整生物体,(2)理论基础:_。 全能性的含义:具有某种生物全部遗传信息的任何一个 细胞,都具有发育成_的潜能。,植物细胞全能性实现的条件:_、提供适宜,的培养条件。,离体,选择性,影响全能性表达的原因:在特定的时间和空间条件下, 细胞中的基因会有_地表达出各种蛋白质,从而构成生,物体的不同组织和器官。,脱分化,再分化,(3)过程:离体的植物器官、组织、细胞,愈伤,组织,根、芽植物体。,3.植物体细胞杂交:,杂种细胞,纤维素酶、果胶酶,(1)概念:将不同种的植物体细胞,在一定条件下融合成 _,并培育成新的植物体的技术。,(2)过程:,脱分化,离心、振动、,原生质体,融合,两种植物细胞 后的原生质体,杂种细胞,愈伤组织,植物体。,聚乙二醇,远缘杂交不亲和,(3)诱导方法:人工诱导融合的物理法包括_ _等;化学法一般用_(PEG)作为诱导剂。 (4)意义:克服_的障碍。,电激,4.应用: (1)植物繁殖的新途径:微型繁殖(快速繁殖)、作物脱毒、,_。,人工种子,单倍体,(2)作物新品种的培育:_育种、突变体的利用。 (3)细胞产物的工厂化生产。,二、动物细胞工程 1.动物细胞工程常用的技术手段: _、 动物细胞核移植、_、生产单克隆抗体等。其 中_技术是其他动物细胞工程技术的基础。 2.动物细胞培养: (1) 概念:从动物机体中取出相关的组织,将它分散成 _,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长,和增殖。,单个细胞,(2)过程:动物组织块分散成单个细胞细胞悬液原代 培养传代培养。,动物细胞培养,动物细胞融合,动物细胞培养,(3)条件: 无菌、无毒的环境:对培养液和所有培养用具进行无菌 处理,添加一定量的_,定期更换培养液以清除代,谢产物。,抗生素,血清、,36.50.5,营养:除正常的有机和无机营养外,通常还需加入_ _等一些天然成分。 温度和 pH:温度为_(哺乳动物),pH 为,_。,7.27.4,维持培养液的 pH,气体环境:含 95%空气加 5%CO2 的混合气体,其中后者 的作用是_。,血浆,单克隆抗体,受体细胞,生理、病理、药理,(4)应用: 生产生物制品:如病毒疫苗、干扰素、_等。 应用于基因工程:动物细胞是基因工程技术中常用的 _,因此,基因工程离不开动物细胞的培养。 检测有毒物质,判断某种物质的毒性。 用于_等方面的研究,如筛选抗癌药,物等。,3.动物体细胞核移植克隆。 (1)概念:将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉 细胞核的_中,使其重组并发育成一个新的胚胎, 这个新的胚胎最终发育为动物个体。 (2)理论基础:_具有全能性。 (3) 分类:包括胚胎细胞核移植和_ ,其中 _较易成功。,(4)过程:,体细胞核移植,胚胎细胞核移植,卵母细胞,动物细胞核,4.动物细胞融合: (1)概念:又称为细胞杂交,指两个或多个动物细胞结合形 成一个细胞的过程。 (2)融合方法:诱导方法与植物原生质体融合的方法相似, 特有的方法是常用_诱导。 (3)过程:不同来源的两个或多个动物细胞,_细胞。,灭活的病毒,杂交,远缘杂交,(4)意义:克服了_不亲和的障碍。,5.单克隆抗体:,杂交瘤细胞,特异性,灵敏度,(1)制备过程: 一抗体的细胞培养提取抗体。 (2)单克隆抗体的特点:_强、_高, 并,可大量制备。,诊断试剂,运载药物,(3)单克隆抗体的应用: 作为_,具有准确、高效、简易、快速的优点。 用于治疗疾病和_。,判断正误,1.愈伤组织是外植体通过脱分化和再分化后形成的。(,),2.与“多利”羊等克隆动物相关的技术有胚胎移植、细胞,培养和核移植。(,),3. 体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体。,(,) 答案:1. 2. 3.,考点一 植物细胞工程的基本技术 1.植物组织培养技术: (1)植物组织培养的过程:,愈伤组织,离体的植物器官、组织、细胞,胚状体或丛芽试管苗。,(2)脱分化与再分化过程的比较:,2.植物体细胞杂交技术:,(1)诱导融合的方法:物理法包括离心、振动、电激等;化,学法一般是用聚乙二醇(PEG)作为诱导剂。,(2)植物细胞融合完成的标志:新的细胞壁的生成。,(3)植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株,而不是形成 杂种细胞。杂种植株的特征:具备两种植物的遗传特征(原因是 杂种植株中含有两种植物的遗传物质)。,(4)体细胞杂交即两个细胞融合成一个细胞,不管染色体、,基因组还是染色体组都采用直接相加的方法。,(5)该培育新品种的过程中,遗传物质的传递不遵循孟德尔 的遗传定律,只有有性生殖进行减数分裂过程中才符合遗传定 律,而体细胞杂交没有此过程。,(6)植物体细胞杂交克服远缘杂交不亲和的障碍,大大扩展,了可用于杂交的亲本组合范围。,(1)植物体细胞杂交获得的杂种细胞的类型有三种:AA 型、 BB 型、AB 型,符合要求的只有AB 型,需要进行筛选。 (2)杂种植株遗传物质的变化:杂种植株的变异类型属于染 色体变异,杂种植株的染色体数通常是两亲本细胞染色体数目 之和,杂种植株属于异源多倍体。, 高考探究 ,考向 1 植物组织培养的过程,例 1(2015 年甘肃模拟)甘肃省甘谷县的辣椒名扬四海,而 辣椒素是辣椒果实中普遍存在的一种生物碱,广泛用于食品保 健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如下图所示。请回答 下列问题。,(1)图中和分别表示辣椒组织培养中细胞的_,_和_过程。,(2)图中所用的 MS 培养基主要成分应包括:大量元素、微 量元素、有机物,还需要添加多种植物激素,如生长素和细胞 分裂素。培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值 _(填“高”或“低”)时,有利于芽的分化。污染 是植物组织培养过程中最大的技术难题,可发生于不同的对象 和不同阶段,所以培养基配制完成后要进行_, 对外植体进行_。,(3)辣椒素是一种斥水亲脂、易溶于乙醇和丙酮等有机溶剂 的化合物,可以采用_ 方法提取辣椒素,该方法需要 对原材料进行粉碎、干燥,再用酒精、丙酮等浸泡,并利用 _加热方法加热,加热瓶口安装回流冷凝装置,目的是 _。 通过过滤获得滤液,若要获得辣椒素结 晶,还需再对滤液加热蒸发出有机溶剂,这时可以直接使用 _装置进行。, 解析(1) 植物组织培养过程包括脱分化和再分化两个阶 段。(2)MS 培养基包含植物生长和发育所需要的全部营养成分, 除题中所示外,还需添加蔗糖,它是离体组织赖以生长的重要 营养成分;当培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值低时 有利于芽的分化。培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌,对外植体 需进行消毒处理。(3)根据辣椒素的理化性质可知,辣椒素易溶 于有机溶剂,可以采用萃取法提取。为防止萃取剂(有机溶剂) 的挥发,需要进行水浴加热并加装冷凝回流装置,最后将萃取 液进行蒸馏除去萃取剂,烧瓶中会剩下较纯的辣椒素。,答案(1)脱分化(去分化) 再分化 (2)低 高压蒸汽灭菌 消毒,(3)萃取 水浴 防止有机溶剂的挥发 蒸馏,考向 2 植物体细胞杂交过程,例 2(2015 年山西太原模拟)甲、乙是染色体数目相同的两 种二倍体药用植物,甲含有效成分 A,乙含有效成分 B。某研 究小组拟培育同时含有 A 和 B 的新型药用植物。回答下列问题: (1)为了培育该新型药用植物,可取甲和乙的叶片,先去除 细胞壁,获得具有活力的_,再用化学诱导剂 诱导二者融合。形成的融合细胞进一步培养形成_ 组织,然后经过_形成完整的杂种植株。这种培育 技术称为_。,(2)上述杂种植株属于多倍体,多倍体是指_ _。假设甲和乙有性杂交的后代是 不育的,而上述杂种植株是可育的,造成这种差异的原因是 _。,(3)这种杂种植株可通过制作人工种子的方法来大量繁殖, 经植物组织培养得到的_等材料用人 工薄膜包装后可得到人工种子。,解析(1)去除细胞壁后,得到原生质体。诱导融合后,原 生质体需经过脱分化过程形成愈伤组织,然后经过再分化形成 完整的杂种植株。(2)多倍体是指体细胞中含有三个或三个以上 染色体组的个体,多倍体后代不育一般是由于减数分裂过程中 同源染色体联会紊乱,无法形成正常配子而导致不育。(3)经植 物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽或腋芽,包裹上人工 种皮即可形成人工种子。,答案(1)原生质体,愈伤,再分化(或分化),植物体细胞,杂交技术 (2)体细胞中含有三个或三个以上染色体组的个体(其他答 案合理亦可) 在减数分裂过程中,前者染色体联会异常,而后 者染色体联会正常(其他答案合理亦可) (3)胚状体、不定芽、顶芽、腋芽(任答其中一个即可),【考点练透】,1.通过细胞工程技术,利用甲、乙两种植物的各自优势(甲 耐盐、乙高产),培育高产耐盐的杂种植株。请完善下列实验流 程并回答问题:,(1)B 是_,D 是具有_优良性 状的幼芽。D 长成的幼苗需要选择的原因是_ _。,(2)由 C 形成植株的过程利用了_技术,愈 伤组织形成 D 需要经过_ 过程。整个培养过程要在 _条件下进行。,(3)植物体细胞融合成功的标志是_。目 前植物体细胞杂交还存在许多问题没有解决,如_ _。,解析:(1)两个原生质体经PEG 诱导后融合,再生出细胞壁 后变成杂种细胞,利用植物组织培养技术可得到愈伤组织、丛 芽结构和试管苗,但并非每个细胞都能表达出耐盐性状,需要 利用含盐培养基进行选择。(2)C 细胞是杂种细胞,形成植株需 要植物组织培养过程,经历了细胞的脱分化和再分化过程。过 程中涉及培养基培养过程,所以无菌操作非常重要。(3)植物细 胞融合时,核质应该都进行融合,当细胞壁再生时,说明融合 后的细胞核与细胞质进行正常的新陈代谢,即融合成功。植物 体细胞杂交虽然克服了远缘杂交不亲和的障碍,但让杂合子表 达出两种植物的优良性状有时还比较困难。,答案:(1)融合的原生质体 耐盐 有耐盐高产和耐盐不高 产两种 (2)植物组织培养 再分化 无菌,不能按照人的意愿表达两个亲本,(3)再生出新的细胞壁 的性状,考点二 动物细胞培养和核移植技术 1.动物细胞培养与植物组织培养的异同:,(续表),(续表),2.概念辨析:,(1)细胞贴壁和接触抑制:,细胞贴壁:悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上。 接触抑制:细胞数目不断增多,当贴壁细胞分裂生长到,表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖的现象。,(2)原代培养和传代培养:,原代培养:动物组织消化后的初次培养。,传代培养:原代培养过程中,贴满瓶壁的细胞需要重新 用胰蛋白酶等处理,然后分瓶培养,让细胞继续增殖。,(3)细胞株和细胞系:,细胞株:传代培养的细胞能传到 1050 代,这样的传代,细胞称为细胞株。,细胞系:传代培养的细胞在传到 50 代后,有部分细胞的 遗传物质发生了改变,获得不死性,这种具有癌变特点的细胞 称为细胞系。,3.动物核移植技术和克隆动物: (1)原理:动物细胞核的全能性。,(2)核移植种类:胚胎细胞核移植和体细胞核移植。 (3)动物克隆的一般过程:,(4)选卵细胞作为受体细胞的原因:卵细胞大,易于操作; 卵黄多,营养丰富,为发育提供充足的营养;能激发重组细胞 分裂分化。,(5)体细胞核移植技术的应用:加速家畜遗传改良进程, 促进优良畜群繁育;保护濒危物种,增大存活数量;生产 珍贵的医用蛋白;作为异种移植的供体;用于组织器官的 移植等。, 高考探究 ,考向 1 动物细胞培养技术,例 1(2015 年湖北武汉模拟)如下图 1 所示为动物细胞培养,的基本过程示意图。,图 1,图 2,请回答:,(1)容器 A 中放置的一般是幼龄动物的器官或组织,原因是 其细胞_ ,易于培养。培养时先要剪碎,然后用 _分散细胞,制成 B 瓶中的细胞悬液。将细胞悬液 转入 C 瓶中进行的初次培养称为_。,(2)细胞正常培养了一段时间后,发现细胞绝大部分死亡, 只有极少数细胞存活,这是因为存活的细胞发生了_, 可无限增殖。目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为_ _代以内,以保持细胞正常的_核型。 (3)C、D 瓶中的培养液为保证无菌、无毒的环境,需要添 加一定量的_。培养过程中还需要提供 O2 和 CO2 等 气体环境,CO2 的作用主要是_。 (4)动物细胞体外培养时,通常要在培养基中补充一定浓度 的某些物质。图 2 是血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验 结果。据图可知,培养_细胞一定需要添加血清。,解析(1)容器 A 中放置的一般是幼龄动物的器官或组织, 原因是其细胞分裂能力强,易于培养。培养时先要剪碎,然后 用胰蛋白酶分散细胞,制成B 瓶中的细胞悬液。将细胞悬液转 入C 瓶中进行的初次培养称为原代培养。细胞正常培养了一段 时间后,发现细胞绝大部分死亡,只有极少数细胞存活,这是 因为存活的细胞发生了突变,可无限增殖。目前使用的或冷冻 保存的正常细胞通常为10 代以内,以保持细胞正常的二倍体核 型。C、D 瓶中的培养液为保证无菌、无毒的环境,需要添加 一定量的抗生素。培养过程中还需要提供 O2 和 CO2 等气体环,境,CO2 的作用主要是维持培养液的 pH。分析曲线图可知,是 否添加血清对于癌细胞的增殖影响不大,而对于正常细胞增殖 影响很大,故培养正常细胞一定需要添加血清。,答案(1)分裂能力强,胰蛋白酶(或胶原蛋白酶),原代培养 (2)突变 10 二倍体 (3)抗生素 维持培养液 pH (4)正常,考向 2 动物核移植技术和克隆动物,例 2(2015 年山东泰安一模)在治疗人类某些疾病时,人的 体细胞核移植技术得到的胚胎干细胞经诱导分化,形成相应的 组织器官后,可用于组织器官的移植,操作流程如下图所示。 请回答:,(1)进行图中过程时,需将体内取出的卵母细胞在体外培 养至_期,该期卵母细胞核的位置靠近_ _,可用微型吸管将之与细胞核一并吸出。,(2)图中过程表示将用物理或化学方法激活重组细胞,使 其在发育培养液中完成_,最终形成囊胚的过程。 (3) 图中过程表示从囊胚中取出_ 细 胞,将其培养在_细胞上,形成大量胚胎干 细胞的过程。胚胎干细胞在形态上的特性表现为_ _。,(4)图中过程表示在培养液中加入_,就可以 诱导胚胎干细胞向不同类型的组织细胞分化,用于患者的组织 器官移植。,解析(1)图中过程是运用体细胞核移植技术得到重组细 胞的过程,在该过程中采集到的卵母细胞,需要在体外培养至 M中期才能去核。该期卵母细胞核的位置靠近第一极体(或极 体),可用微型吸管将之与细胞核一并吸出。(2)图中过程是重 组细胞发育成囊胚的过程,需用物理或化学方法激活重组细胞, 使其完成细胞分裂和分化进程,才能发育成囊胚。(3)图中过程 表示从囊胚中取出内细胞团细胞,将其培养在饲养层细胞,上,形成大量胚胎干细胞的过程。胚胎干细胞在形态上的特性 表现为细胞体积小,细胞核大,核仁明显。(4)图中过程是胚 胎干细胞经诱导分化形成相应的组织器官的过程,欲达到这一 目的,需要在培养液中加入分化诱导因子,以诱导胚胎干细胞 向不同类型的组织细胞分化。,第一极体(或极体),答案(1)M中期 (2)分裂和分化,饲养层,细胞体积小,细胞核大,核仁,明显,(3)内细胞团 (4)分化诱导因子,【考点练透】,2.为研究小鼠皮肤愈合机理,现将小鼠皮肤进行分离培养,,过程如下图所示,请回答有关问题:,(1)在对小鼠皮肤组织进行培养过程中,过程甲中要对实验 小鼠进行_处理,过程乙必须用_处理,使 之分散成单个细胞。,(2)体外培养动物细胞时,通常要加入_等天 然成分,为防止细菌感染,培养液中应添加_,且还要 置于含 5%CO2 气体环境中,CO2 的作用是_ _。,(3)丙过程属于_,丁过程属于_。在 机体内,皮肤干细胞分化成皮肤是机体细胞中的基因_ _的结果。,(4)皮肤损伤后,人体的第_道防线被破坏,容 易感染各种病原体,胚胎干细胞经_可形成再生皮肤 组织。,答案:(1)消毒,胰蛋白酶,(2)血清、血浆 (3)原代培养,抗生素 传代培养,维持培养液 pH 的相对稳定 选择性表达,(4)一,诱导分化,3.(2015 年安徽卷)科研人员采用转基因体细胞克隆技术获 得转基因绵羊,以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子 IX 医 用蛋白,其技术路线如下图。,(1)由过程获得的 A 为_。,(2)在核移植之前,必须先去掉受体卵母细胞的核,目的是 _。受体应选用_期卵 母细胞。,(3)进行胚胎移植时,代孕母羊对植入子宫的重组胚胎基本 上不发生_,这是为重组胚胎在代孕母羊体内的 存活提供了可能。 (4)采用胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆,理论上可 获得无限个转基因绵羊,这是因为_ _。 答案:(1)含目的基因的表达载体,(2)保证核遗传物质来自目的基因的成纤维细胞,M中,(3)免疫排斥反应 (4)整合含有目的基因的成纤维细胞可进行传代培养,考点三 动物细胞融合与单克隆抗体的制备,1.动物细胞融合(单克隆抗体的制备)与植物体细胞杂交的,比较:,(续表),(续表),2.制备单克隆抗体过程中两次筛选的方法及目的:,(续表), 高考探究 ,考向 动物细胞融合与单克隆抗体的制备,典例(2014 年新课标卷)某研究者用抗原(A)分别免疫 3 只同种小鼠(X、Y 和 Z),每只小鼠免疫 5 次,每次免疫一周后 测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原抗体反应的血清最 大稀释倍数),结果如下图所示。,若要制备杂交瘤细胞,需取免疫后小鼠的 B 淋巴细胞(染色 体数目为 40 条),并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞(染 色体数目为 60 条)按一定比例加入试管中,再加入聚乙二醇诱 导细胞融合,经筛选培养及抗体检测,得到不断分泌抗 A 抗体 的杂交瘤细胞。 回答下列问题:,(1)制备融合所需的 B 淋巴细胞时,所用免疫小鼠的血清抗 体效价需达到 16 000 以上,则小鼠最少需要经过_次 免疫后才能有符合要求的。达到要求后的 X、Y、Z 这 3 只免疫 小鼠中,最适合用于制备 B 淋巴细胞的是_小鼠,理由 是_。,(2)细胞融合实验完成后,融合体系中除含有未融合的细胞 和杂交瘤细胞外,可能还有_, 体系中出现多种类型细胞的原因是_ _。,(3)杂交瘤细胞中有_个细胞核,染色体数目最多是,_条。,(4)未融合的 B 淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活,原,因是_。,解析(1)据图分析,第四次免疫后X、Y、Z 小鼠的血清抗 体效价均达到16 000 以上,小鼠Y 的B 淋巴细胞产生抗体效价 最高,最适用于制备单克隆抗体。(2)融合体系中除了未融合的 细胞和杂交瘤细胞外,还有骨髓瘤细胞和 B 淋巴细胞的自身融 合产物,由于细胞膜具有流动性,且诱导之后的细胞融合不具 有特异性,故体系中会出现多种类型的细胞。(3)杂交瘤细胞形 成后,小鼠的免疫 B 淋巴细胞核与其骨髓瘤细胞核会融合形成 一个细胞核。小鼠的 B 淋巴细胞(染色体数目为40 条)和骨髓瘤 细胞(染色体数目为 60 条)融合后,染色体可达100 条。(4)未融 合的 B 淋巴细胞经多次传代培养后,仍然不是能恶性增殖的细 胞,同时正常细胞的分裂次数是有限的。,答案(1)四 Y,Y 小鼠的抗体效价最高,(2)B 淋巴细胞相互融合形成的细胞,骨髓瘤细胞相互融合 形成的细胞 细胞融合是随机的,且融合率达不到 100% (3)1 100 (4)不能无限增殖,【考点练透】,4.(2015 年江苏南京月考)下图是某实验室做的通过动物纤 维母细胞等获得单抗的实验研究。据图回答相关问题。,(1)X、Y、Z 细胞的名称分别是_、 _、_。 (2)过程类似于植物组织培养技术中的_过程。与 纤维母细胞相比,诱导干细胞的全能性较_。过程的 实质是_。,(3)过程中需用到的生物诱导剂是_。 (4)处需要筛选,其目的是_,_。,(5)若用 32P 标记的核苷酸的培养基培养 Z 细胞,细胞质中 能测到 32P 的细胞器有_和_。,解析:(1)X、Y、Z 细胞的名称分别是骨髓瘤细胞、抗原刺 激过的B 细胞、杂交瘤细胞。(2)过程是将甲小鼠的纤维母细 胞诱导成诱导干细胞,相当于植物组织培养技术中的脱分化过 程,与纤维母细胞相比诱导干细胞的全能性较高。过程是诱 导干细胞分化成各种体细胞,细胞分化的实质是基因的选择性 表达。(3)诱导动物细胞融合,需用到的生物诱导剂是灭活的病 毒。(5)核苷酸是核酸的基本组成单位,动物细胞中线粒体含有 少量 DNA,核糖体是由蛋白质和rRNA 构成的。因此用32P 标 记的核苷酸的培养基培养 Z 细胞,则在线粒体和核糖体中能检 测到32P。,答案:(1)骨髓瘤细胞,抗原刺激过的(效应)B 细胞,杂交,瘤细胞 (2)脱分化 高 基因的选择性表达 (3)灭活的病毒 (4)筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞 (5)核糖体 线粒体,1.植物组织培养的过程如下图所示。请分析并回答:,(1)B、C 过程是通过细胞的_实现的。 (2)胚状体根据其来源不同,可以分为“体细胞胚”和“花,粉胚”。,用花药离体培养可获得“花粉胚”,同种植物的花粉胚 与体细胞胚在染色体数目上的主要区别是_ _。,如果用_处理二倍体植株的花粉胚,能获得可 育的植株,该过程是_育种中不可缺少的步骤。 在一定条件下培养离体细胞可以形成体细胞胚进而发育 成完整的植株,其根本原因是每个细胞都含有_ _,这一过程体现了_。 (3)微型繁殖培育无病毒草莓时,一般选取茎尖或根尖作为 外植体,其依据是_。 (4)在培养过程中,愈伤组织在培养基中未形成根,但形成 了芽,其原因可能是_。,解析:(1)离体的组织或器官经过脱分化形成愈伤组织,再 通过再分化即细胞的分裂和分化形成胚状体结构。(2)由花药离 体培养得到的花粉胚,其细胞内的染色体数目是体细胞胚的一 半。用秋水仙素处理花粉胚,可使细胞内的染色体数目加倍, 获得可育的二倍体植株,该过程是单倍体育种中不可缺少的步 骤。离体细胞发育成完整植株的根本原因是每个细胞中都含有 该物种的全套基因,该过程体现了植物细胞的全能性。(3)茎尖 或根尖由于细胞不断分裂,病毒来不及侵染,所以在培养无病 毒植株时常选用茎尖或根尖作外植体。(4)植物组织培养过程中 需用生长素和细胞分裂素来调节细胞的分裂、分化,若培养基 中生长素类物质用量与细胞分裂素类物质用量的比值偏高,容 易诱导根的生成;若培养基中生长素类物质用量与细胞分裂素 类物质用量的比值偏低,则易诱导芽的生成。,答案:(1)分裂和分化 (2)花粉胚细胞中的染色体数目是体细胞胚的一半 秋水仙素 单倍体,本物种的全套基因(或全套遗传信息),植物细胞的全,能性 (3)茎尖或根尖病毒极少,甚至无病毒 (4)培养基中生长素类物质用量与细胞分裂素类物质用量 比例不合理(或培养基中生长素类物质用量与细胞分裂素类物 质用量的比值偏低)(合理即可),2.下图为利用生物技术制备单克隆抗体的实验探究。请回,答问题:,(1)图中过程导入的诱导基因的作用是_ _。实现过程所需的工具酶是 _。,(2)图中过程属于_,其实质是_,_。,(3)图中过程属于_技术,该过程的实现通常,采用_作为诱导剂。,(4)丙细胞所具有的特点是_,_。 (5)与普通培养基相比,图中用于细胞培养的培养液需加入,_等。,解析:(1)从图中可以看出,导入诱导基因的目的是诱导小 鼠成纤维母细胞形成干细胞。过程为基因工程,所需的工具 酶是限制酶和 DNA 连接酶。(2)经过过程,干细胞转化为造 血干细胞、脂肪细胞、骨细胞等多种细胞,因此属于细胞分化 的过程,细胞分化的实质是基因的选择性表达。(3)过程为动 物细胞融合过程,该过程常用的诱导剂是灭活的病毒等。(4)丙 细胞有甲、乙两种细胞的特点,即既能无限增殖,又能分泌单 一的抗体。(5)用于动物细胞培养的培养液中需要加入动物血 清、血浆等。,限制酶和,答案:(1)诱导小鼠成纤维母细胞形成干细胞 DNA 连接酶,(2)细胞分化 (3)细胞融合,基因的选择性表达 灭活的病毒(或聚乙二醇),(4)既能无限增殖,又能分泌单一的抗体 (5)动物血清、血浆,3.人工种子是人们模仿天然种子的结构制造出来的生命有 机体,它能像天然种子一样萌发生长。人工种子的核心部分是 胚状体,其培育过程如下图所示。请回答下列有关问题。,(1)制作人工种子依据的原理是_;制作过程 的关键是确保无菌操作,其原因是_ _。,(2)表示脱分化的过程,其实质是_ _;表示再分化的过程,其实质是_ _。培养基中生长素和细胞分裂素的浓度、 _、_影响、过程的进行。,(3)从保证人工种子正常的生命力以及生态系统的物质循 环上来看,人造种皮应具有半透性(透水、透气性)和_ _的特点。,(4)某二倍体植物的基因型为 DdTt,利用花药离体培养的方 法,可培育成“花粉胚”,也可制成人工种子,这种种子萌发 形成的个体称为_,从生殖方式看属于_生殖。,解析:培育人工种子的原理是细胞的全能性。脱分化的实 质是使不分裂的细胞恢复分裂能力;再分化的实质是使分裂的 细胞在形态、结构和功能上再次发生变化,这种变化是基因的 选择性表达的结果。培养基中生长素和细胞分裂素的浓度、比 例和使用顺序将影响脱分化和再分化过程。种子萌发的过程中, 需要从外界吸收大量的水分和氧气进行有氧呼吸,因此,人工 种皮应该具有透水、透气性;从物质循环的角度来看,人工种 皮应该能被微生物降解。通过花药离体培养获得的植株属于单 倍体,基因型为DdTt 的植物能产生基因组成为DT、Dt、dT 和 dt 的四种花粉,这种通过有性生殖细胞产生后代的生殖方式属 于有性生殖。,答案:(

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