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文档简介
回收试验,一、实验目的,1掌握回收试验的原理和方法。2熟悉本实验操作过程,掌握实验数据处理的方法。,二、实验原理,1、GOD-POD法测血糖原理:葡萄糖氧化酶(glucoseoxidase,GOD)能将葡萄糖氧化为葡萄糖酸,并释放出过氧化氢。后者在过氧化物酶(peroxidase,POD)的作用下与色原性氧受体4-氨基安替比林偶联酚缩合成红色醌类化合物,即Trinder反应。该红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比。,回收实验原理,本分析方法正确测定加入常规分析样品的纯分析物的能力,用于测定试验方法的比例系统误差,这种误差随分析物的浓度增加而增加(指加入物浓度),常用样品中其他物质与分析物竞争分析试剂并与之发生反应而引起。通过测定GOD-POD法测血糖的回收率,来反应该方法比例系统误差的有无或大小。,三、器材,微量移液器,计算器,三用水浴箱,722型可见光分光光度计,四、试剂,1血清标本含血糖2.2mmol/L的血清(回收实验用)2葡萄糖标准液(80mmol/L)3GOD-POD法测定葡萄糖试剂盒,五、操作步骤,回收样品制备基础样品:血清0.9ml+0.1ml蒸馏水回收样品:血清0.9ml+0.01ml80mmol/L葡萄糖标准液+0.09ml蒸馏水回收样品:血清0.9ml+0.06ml80mmol/L葡萄糖标准液+0.04ml蒸馏水回收样品:血清0.9ml+0.09ml80mmol/L葡萄糖标准液+0.01ml蒸馏水,按下表操作,混匀,置水浴箱37,15分钟,505nm空白管调零,722型分光光度计分别测各管A值。,六、结果计算,回收实验数据处理1加入浓度计算:加入浓度(mmol/L)=2回收浓度计算:回收浓度回收样品测得浓度基础样品测得浓度3回收率计算:回收率=100%,4计算结果请填入表内:,七、注意事项,准确加样在本实验中尤其重要,因为被分析的理论值是根据假如标准液体积及原标本的体积所得到的,吸量稍不准就会影响结果。加入标本液后,总浓度必须在方法的分析范围内,一般需加入高中低不同浓度做回收实验,计算平均回收率。加入标准液后,最好使实验标本的被测定浓度达到医学决定水平。加入标准液的体积最好在整个反应液体积的10以内。若稀释过大,误差将发生改变。,八、方法学评价,回收实验:一般检验方法要求回收率在95%105%之间,最为理想的回收率应是100%。回收率接近100%,说明分析方法对于分析物无论在纯溶液中,还是在复杂的基体环境中,反应能力是一
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