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70 食品安全导刊 2014年11月 T echnology 科技 分析与检测 目前北虫草的人工栽培越来越受 到人们的关注和重视。蛹虫草中含有 多种 s 生物活性物质如虫草素、腺苷、 多糖、虫草酸及甾醇类物质 1，具有 抗菌 2，调节免疫系统3，抗氧化4 等 作用。虫草素和腺苷作为虫草中的有 效成分，具有很好的抗肿瘤作用 5。 然而对于旨在培育北虫草子座中有效 抗癌药物成分含量高的虫草而言，品 种的差异对成分含量的影响就显得格 外重要，本实验以不同北虫草菌株为 种源，培育北虫草商品子座，并对子 座中虫草素和腺苷含量进行测定，研 究不同菌种对虫草素和腺苷合成能力 的影响。 1 材料和方法 1.1 材料 实验所用的北虫草菌种来源于沈 阳师范大学特种菌业研究所食用菌 菌种资源库，菌种代号分别为 B01、 B02、B03、B04、B05、B06、B07。 主要仪器设备：摇床、恒温箱、 高效液相色谱、灭菌锅等。 米 饭 培 养 基： 大 米 40g+ 清 水 70ml；液体培养基：葡萄糖 20g/L, 蛋 白胨 5g/L, 磷酸二氢钾 2g/L, 硫酸镁 1g/L；固体培养基：葡萄糖 20g/L, 蛋 白胨 5g/L, 磷酸二氢钾 2g/L, 硫酸镁 1g/L, 琼脂 20g/L。 1.2 菌种活化、扩繁及回接 分别取上述虫草菌种，进行常规 活化、转接。1 周后扩繁液体菌种。在 25恒温箱培养 3 天，然后取少量液 体菌种回接到固体斜面培养基上，并 观察是否污染和转色情况，选择转色 良好且无污染的菌种相对应的液体菌 种转接到米饭培养基中，进行常规北 虫草栽培管理。北虫草子座采收后烘 干、取样、研磨、待测。 1.3 虫草素和腺苷的检测 采用高效液相色谱法对虫草素和 腺苷进行分析检测。色谱柱 C18(4.6 mm150mm，5um)， 流 动 相 为 甲 醇 (15%)- 水 (85%)，紫外波长 260nm。 称取虫草素标准品 2.5mg 置于 25ml 容 量瓶，配成浓度为 0.1mg/ml 标准品储 备液。准确吸取上述虫草素标准品储备 液 1ml、2ml、4ml、6ml、8ml 分别置于 10ml容量瓶中， 以去离子水定容至刻度， 过 0.22um 微孔滤膜，分别进样测定， 每个浓度重复3次， 得到相应的峰面积， 以峰面积 Y 对其质量浓度 (mg/L) 进行 线性回归分析。 2 结果与分析 2.1 标准曲线 图 1 为虫草素和腺苷的标准曲线， 相关系数分别为 0.999 和 0.997，线性 关系良好，因此可以进行虫草素和腺 苷样品的定量计算。 不同品种北虫草子实体中虫草素 和腺苷含量的差异化研究 白 冰 1，张 阳1，尹秋云1，羿丽杰1，赵 敏1，柳叶飞2* 1. 沈阳师范大学粮食学院 2. 沈阳师范大学实验教学中心 摘 要：采用高效液相色谱法对不同品种的北虫草子实体中虫草素和腺苷的含量进行分析，从而判断不同北虫草菌种 对子实体中虫草素和腺苷含量的影响。结果表明，北虫草菌种对子实体中虫草素含量的影响较强，对腺苷含量的影响较弱。 关键词：北虫草；不同菌种；北虫草子座；子座虫草素含量 图 1 虫草素和腺苷标准曲线 2.2 不同品种北虫草子实体中虫草素 和腺苷含量 从 图 2 可 以 看 出， 菌 种 B02 和 B04 子实体中虫草素含量较高，分别 达 到 4945.12 和 4693.2 mg/ml， 而 菌种 B02 子实体中虫草素含量最低， 为 1562.04 mg/ml。所有菌种中，菌 种 B04 子实体中腺苷的含量最高，为 1201.76 mg/ml，其它菌种的腺苷含量 基本持平。 0 1000 2000 3000 4000 5000 6000 B01B02B03B04B05B06B07 菌种类别 虫草素和腺苷含量（mg/ml） 虫草素含量 腺苷含量 图 2 不同菌种子实体中虫草素和腺苷的含量 Nov 2014 CHINA FOOD SAFETY 71 分析与检测 3 讨论与结论 实验结果表明，不同品种的北虫 草子实体中虫草素和腺苷含量有较大 的差异。鉴于北虫草 B04 菌种的出草 率和形态特征都比较理想，再加之其 子座中内含的虫草素和腺苷含量也很 高的特性，建议栽培生产优先选择这 样的菌种。 参考文献： 1 马吴伟，潘苏华 . 蛹虫草研究 进展 J. 亚太传统医药，2008，11(4): 148-150. 2 Ahn Y J, Park S J, Lee S G,et al. Cordycepin: selective growth inhabitor derived from liquid culture of Cordyceps militaris against Clostridiumspp J. JAgric Foodchem, 2000, 48(7): 2744-2748. 3 张安宁，袁书林 . 不同剂量蛹 虫草菌丝体对大鼠免疫功能的影响 J. 食品研究与开发，2009,30(3):30-34. 4 贡成良， 潘中华， 郑晓坚， 等.家 蚕蛹虫草的延缓衰老作用研究 J. 白求 恩医科大学学报 , 1994, 20(1): 14-16. 5 Park C, Hong S H, Lee J Y, et al. Growth inhibitition of U937 leukemia cells by aqueous extract of Cordyceps militaris through induction of apoptasisJ. Oncol Rep, 2005