共用液相色谱与质谱方法来检测食品中的山梨酸和苯甲酸.pdf

Aug 2015 CHINA FOOD SAFETY 75 分析与检测 所需试剂和检测方法 试剂 取 山 梨 酸 0 . 5 0 0 m g / m l 、 苯 甲 酸 1 . 0 0 m g / m l 的标准溶液，乙酸铵，石油 醚，乙醚，盐酸。实验使用的水是去 离子水，甲醇是色谱纯，试剂全部是 分析纯。 仪器 H P 1 0 0 高效液相色谱仪器；H P 1 0 0 紫外可见检测仪器；恒温箱；H P 1 0 0 离子阱质谱合用仪器；S B 3 2 0 0 超 声波清洗仪器；二级管列阵检测仪器。 色谱与质谱环境 色谱环境 流入相是甲醇比乙酸铵为负值 3 比 9 3 ；流动速度是 1 m l / m i n ；进入样 品含量是4 微升；测定波长是2 2 0 纳米。 质谱环境 离子阱运动电压是 3 0 . 1千伏；电 喷雾电压是3 . 3 千伏；毛细管电压是3 . 3 千伏；流动速度是 9 . 6 L / m i n ；干燥气温 度是 2 3 0 摄氏度；扫描形式是单级的； 离子是负离子；扫描区间是 4 0 a m u 到 5 0 0 a m u ；山梨酸和苯甲酸的电荷质量 比是 1 1 0 与 1 2 0 。 绘制联用标准工作曲线 吸取山梨酸和苯甲酸的标准制备 溶液分别是 6 . 0 0 m l 、2 . 0 0 m l 到 1 0 0 m l 的容量瓶里，使用去离子水稀释到 标记的度数，便能够绘出联用标准工 作曲线。 制取样品 固体类样品 准确称量处理好的样品 3 克到 2 5 毫升比色管里，加进 1 3 毫升去离子水 完全溶液，稀释至标记的度数，摇晃 均匀以后超声晃动 1 5 分钟，吸取一定 量的溶液后快速离心 3 分钟，获取上 面清澈溶液在 0 . 2 0 微米过滤膜过滤后 制备使用。 碳酸饮料 把样品预热搅匀去除二氧化碳或 者超声去除二氧化碳，稀释 3 倍在 0 . 2 0 微米过滤膜过滤后制备使用。 含有蛋白质的样品 精密称量样品 3 克，放入 2 5 m l 比 色管里，加进一定量的去离子水混合 均匀以后，加进亚铁氰化钾 3 m l 和乙 酸锌溶液 3 m l ，稀释到标记的度数，超 声晃动 1 5 分钟，吸取一定量的溶液后 快速离心 3 分钟，获取上面清澈溶液 在0 . 2 0 微米的过滤膜过滤后制备使用。 检测样品 根据前面叙述的色谱环境，用样 品峰面积和标准峰面积的比值进行定 量，用筛选性离子峰的一定留存时间 进行定性。山梨酸和苯甲酸的筛选性 电荷质量比是 1 1 0 和 1 2 0 。 检测结果和探讨 线性关系与检测限 把根据 1 . 4 制备的标准溶液加进 3 微升测定。 用 8 倍信号噪音比得出检出限，山 梨酸和苯甲酸依次是 0 . 0 2 n g 和 0 . 0 2 n g 。 测定回收率 称量固体样品与液体样品加进不 一样浓度的山梨酸标样 4份和苯甲酸 标样 4份，根据以上方法测定回收 率，检测后山梨酸的回收率在 9 1 % 到 9 7 % 范围内，苯甲酸的回收率在 9 5 % 到 1 0 1 % 的范围内。 分析光谱图和质谱图 把山梨酸和苯甲酸的分子离子峰 （m / z ）分别是 1 1 0 和 1 2 0 作为测定方 向的离子，由一级图谱，联系全部离 子流图的留存时间，和标准样品的图 谱做比较，能够精密地给样品定性。 谱库里无有关样品的标准图谱，所以 需要自己建立谱库以后才可以进行定 量和定性分析。 山梨酸的质谱图（m / z ）里 1 1 0 是 样品的羧基去掉氢以后而形成的；苯 甲酸的质谱图（m / z ）里 1 2 0 是样品的 羧基去掉氢以后而形成的。 结语 高效液相色谱检测方法非常适合 于前面论述的食品添加剂的测定，然 而需要使用质谱才可以准确测定呈阴 性的样品。但共用高效液相色谱和质 谱检测方法能够把液相的分开性能强 与质谱的灵敏性强、定性高结合在一 起，为现阶段非常重要的检测方法。 这个技术使用了二级管列阵测定仪器 和液相色谱的紫外测定仪器当做样品 的最开始选择，然后共用液相色谱和 质谱方法来定性。这个技术补救了紫 外测