医学检验微生物总结

1 / 31 医学检验微生物总结 不知不觉在 152 中心医院的实习生活已经结束了，在医院实习期间我学到了许多课本上不知道的事情。 刚到血库实习，刚到的时候什么都不懂。我的印象中血库好像就只有交叉配血。 其实不然刚开始我学会了血型的正反定鉴定，能够自主地鉴定血型，并且能自主进行冰冻血浆和灭活冰浆的配置和鉴定。尤其是对 Rh 阴性血型的判断更是要更加小心谨慎，如果判定为 Rh 阴性血型要进行正反定的初步判定然后要用微柱凝胶的试验确诊，每一步都 必不可少。后来慢慢老师让我接触了悬浮红细胞的的交叉配血的操作，这是很重要的一步，要知道配好血直接就上临床给病人输血了。刚开始的时候老师还是比较不放心的，看着我做。慢慢地我能自主地进行交叉配血。从样本血样的采集到离心再到聚凝胺试验试剂的添加，每一步都是很关键，最后的最重要的就是现象的观察。有些凝集是很容易观察到的，但是我也遇到了一些特殊的情况，像 缗钱状凝集其实这只是血清在室温和 37 度中，使红细胞出来了缗钱状的假凝集，常见于巨球蛋白血症、 MM、霍奇病等免疫系统紊乱病。镜下可以看到细胞的聚集和真正的凝集相去甚远 。如果交叉配血真2 / 31 的出现阳性，应该分析出现的原因如受血者血清中可能存在未检明的抗体、蒸馏水中的离子感染等原因最让我印象深刻的一次是温抗体的干扰，让我们师徒三人硬是忙了一个上午，因为比较少见。还有就是最不起眼的阳性率最低但是又很重要的不规则抗体的筛选也是输血工作中不可缺少的一步。操作起来最困难的还是直接和游离抗体的鉴别，即新生儿溶血病抗体的检，产前筛查中的倍比稀释一定不要搞错试管的编号。毕竟是十来个试管就为了一个血清的稀释。最后的结果的观察一定要观察完全没有凝集的前一个倍数孔。这个才是要报告的结果。还有就是产后 的筛查包括吸收、放散和游离抗体的筛查。当然这些只是我在血库的基本操作方面的体会。在实际的检验工作中，老师更是教会我了许多检验上的基本原则和道理，真是让我受益匪浅啊。在这里我真的要谢谢郭老师和王老师。 然后就去了 门诊的临检，说实话我一直不想去门诊的临检实习，最重要的原因就是我怕给小孩子去末梢血。因为医院的各种的原因 8 岁以下的小孩子只才末梢血做常规而不采静脉血。首先是那些患者是小孩，我挺不忍心的， 其次是现在的小孩都挺金贵的，你一个弄不好就惹来家长的一阵责骂。但是该面对还是得面对。同时我也觉得在门诊临检采血就是对我最大的挑战。刚开始的两天老师让我 3 / 31 上手我都说下次吧。后来我知道早晚的上手，实践过程中我遇到很多了很多问题其中有自己的原因也有病人的原因，因为采血的都是几岁的小孩子他们不会很 好配合你。宋老师告诉我，在采血的过程中一定要要用自己的手固定好小孩子的虎口的部位这样就好多了，我慢慢的就学会了固定小孩子的手，但是有时候不敢下手怕扎的太狠把小孩子弄疼，很多次勉强挤出点血，做出来的结果收到了很大的影响。又是宋老师她告诉你下不去手，不是对病人的仁慈恰恰是不负责啊，因为你下不去手孩子还要在受罪。的确老师说的真是金玉良言，一针见血啊。于是我慢慢地敢下手了，但是我发现了有时候你扎过后小孩子的手会流很多血。都流到我的手上了。于是我在研究其他老师的方法，我发现下针一定要快准狠，才能采到理想的标本。就是这 样在不断的实践中我渐渐地掌握了末梢采血的方法。血常规的检查我遇到了很多白细胞很低很低的患者，有的是知道有的是不知道，我知道他们一定是得了血液病，也让我对生命的脆弱有了很深的感触。有一次一个家属就在门口守着，她的家人刚做过治疗希望结果能好点，但是还是令人失望，最后我给她化验单的时候她两眼泛泪光，说了句谢谢就走了。真是让我的好心酸啊。 还有就是一些比较特殊的血象如缺铁性贫血片显示小细胞低色素贫血， MCV 接着就去了血凝室，在该科室我先是学会4 / 31 了血凝检验的基本操作，然后系统地学习了血凝检验中遇到的各种问题。 最让我印象深刻的就是 D-二聚体的检验当仪器的结果大于 3000 时，一定要根据反映的曲线就行相应倍数的稀释，从而更 ）试验敏感度高，特异性强，并且 D-二聚体测定操作更简单、方便，且不受溶血、脂血、黄疸等标本因素的影响，因此临床实用价值更高。 D-二聚体主要反映纤维蛋白溶解功能，增高和阳性见于继发性纤维蛋白溶解功能亢进，只要机体血管内有活化的血栓级纤维溶解的活动， D-二聚体就会升高。对于诊断与治疗纤溶系统疾病及与纤溶系统有关疾病，以及溶栓治疗监测，有着重要的意义。对于治疗栓塞的药物比较常见的就是华法林，在报告结果时一定要结合病人的病例，了解该病人近期是否服用了华法林来判断检验结果的准确性。血栓的检验 在手术中起着举足轻重的作用，因此更要加倍小心。在该科室我还学习了快速三项的的检验，看似简单的检验其实有着很多需要注意的地方。例如离心后血浆的量的加入一定不要太多，否则有时会出现弱假阳性的结果。对于反应板的结果有时候阳性反应线不是很明显一定5 / 31 要自己观察，做到对病人负责。对于疑似 HIV 阳性的患者要将标本送到免疫室进行确诊试验。即使免疫室结果为阳性但是一定要上报当地的疾控中心进行最后的确诊试验。 然后我轮转了生化室，刚到的时候学习标本的接受和处理，包括对病人的试管条码信息的扫描以及对标本的离心。在对标本处理过程 中一定要注意标本中一些凝块当发现凝块是一定手动把凝块挑出来再次离心。由于生化室是标本量最多的一个科室，因此对标本的编号以及信息的输入就显得格外重要。因为标本量的多包括的门诊的很住院病人的因此生化室是最忙的。但是忙中一定要提醒自己要小心谨慎。同时这个科室也是项目最多的一个科室包括肝功 1、肝功 2、肾功 1、肾功 2、脂 1、脂 2、特种蛋白等十来个项目。同时我了解了罗氏 P800 的试用及原理：光电比色原理。了解了仪器每日要进行质控、定标、维护等工作，注意确保仪器中的试剂量，掌握了生化检验标本的采集、存放、处理及玻璃器皿的 清洁。注意溶血和脂血对实验结果的影响。在对结果的报告时一定要结合改病人的以往结果以及该病人的病例进行综合判断。 接着我又轮转了微生物室，这个科室我学了很多东西，科室的主管是副主任缪老师。老师很平易近人，总是耐心的教我学习了很多东西。由于长时间没有接触微生物的知识，他先让我先了解了电脑上课件上许多理论知识，然后在入手检 6 / 31 验工作，我觉得这是非常有必要的。几天只有我开始学习接种标本，刚开始的时候我在接种微生物的时候不是很熟练，但是老师总是鼓励我。于是我慢慢的总结了画板的心得。于是我在接种微生物学习工程中学到了很多以前不知道的东西，包括如何进行正确地对接种环的灼烧步骤以及对培养平板的合理应用。由于对课件的理论知识的熟悉，在对微生物的鉴定以及和药敏试验中，我入手的比较快。其中临床中比较常见的革兰氏阴性杆菌中肠杆菌，鉴定时一定要先观察菌落形态例如肺克的菌落形态大而粘稠，然后就行更加系统的生化鉴定。 还有就是阳性球菌中的金黄葡萄球菌鉴定，由于阳性球菌在血平板上长得比较好，其次进行凝固酶试验进行鉴定，当鉴定为该菌落为金葡菌是一定要进行药敏试验从对苯挫西林的耐药与否判断是否为产 MRSA 的菌株。 MRSA 感染的治疗是临床十分棘手的难题之一，而且其对许多抗生素有多重耐药。因其耐药机制是 PBPs 性质的改变，因此， MRSA几乎对所有的 -内酰胺类抗生素耐药，且在同时，还可能对大环内酯类抗生素、氨基糖苷类抗生素等多种抗菌药物表现出耐药性。目前最常用，也是疗效最肯定的抗生素为万古霉素、去甲万古霉素、替考拉宁等。因此 MRSA 的鉴定显得尤为重要。还有比较常见的是链球菌的其中的甲型溶血性链球菌和乙型溶血性链球菌的鉴定，应该注意到几乎所有肺炎链球菌对奥普托欣试验敏感的特殊性。以及临床中常见的细7 / 31 菌对一些抗生素的天然耐药都能成为鉴定细菌的依据。同时要注意在测量一些细菌的抑菌环时一定要注意一些虽然有些细菌仍在抑菌环能生长但是也不能忽略，即仍要测量真实的抑菌环的真实直径。对于一些特殊的细菌，通过各种涂片染色以及生化药敏试验无法明确鉴定的要进行板条的加样进行鉴定。再检验工作中也遇到了比较特殊的流感嗜血杆菌，让我最印象深刻就是他的卫星现象，即 当流感嗜血杆菌和金葡菌仪器培养时，可见到金葡萄球菌的流感嗜血杆菌落较大，而远离葡萄球菌的流感嗜血杆菌菌落较小，这种现象称为卫星现象。这是因为葡萄球菌能合成 因子释放于培养基中，从而促进流感嗜血杆菌的生长。这就是我在这个科室学到的关于微生物的知识，但是让我感触最深的是老师谆谆的教导，他不厌其烦地给我讲各种关于微生物方面的知识，你问他的知识他都是知无不答，当我犯错误时他也总是鼓励我，更多的是告诉我应该怎么做，怎样做的更好。在这里我真的要谢谢谬应业老师还有秦晓燕老师。他们是优秀的老师更是优秀的检验工作者。 最后我轮转了免疫室，在岳老师的讲解下，我了解到免疫室分为 ELISA、 HIV 筛选实验室、免疫荧光实验室、特定蛋白实验室和其他一些杂项检验等 5 大部分。到现在为止，我熟悉了科室的工作流程，在标本送到科室之后，我们首先签收，8 / 31 然后将其分类编号录入、离心，再送去相应的实验室检测，在检测结果出来后，要将结果输 入电脑，最后经过复查和审核，才能发出报告。除了熟悉了科室的工作流程之外，在岳老师和喻老师的教导带领下，我逐渐学会了免疫常规和特定蛋白的检测。免疫常规主要是采用 ELISA 的方法，由于每天的标本量很大，所以科室采用仪器自动加样，自动洗板等程序，在酶标板做到结果之后，还要拿去分光光度计测其波长。特定蛋白的检测主要是采用 BN-2 这台仪器，只要我们在电脑上输入标本编号和相应的项目，在把标本装架放入仪器，它就会自动检测。科室的每一个老师都非常耐心的教导我，让我更快的熟悉科室的工作，受益匪浅。并且，在免疫室学会了基本功洗 板的基本药理，并且知道了在操作过程中严格遵守操作步骤和操作要求，如：温育时间和加样顺序，只有严格的遵守了操作步骤及用量才能得到更加准确而合理的实验结果。在免疫室里我学到了与我们专业有关的专业知识，在实践中寻找知识更为重要，学到了与自己相关的更加的踏实。通过各种病例的实验结果再结合书本知识，让我学的更踏实，掌握的更彻底，才能真正的体会到只是对我的重要性，才能理解到知识与实践的结合。 就这样我的实习 生活结束了，首先我要感谢检验科的李主任还有各位带教老师的悉心教导，是他们让我更加了解到检验9 / 31 工作的重要并且认识到和理论和实际的差异。其次我更加认识到不断的学习和不断的充实自己的检验知识，才能做一位优秀的检验工作者。 路漫漫其修远兮，吾将上下而求索。 Internship Zhao China people s liberation army 152 hospital 临床微生物实习小结 1、临床微生物实习小结 不知不觉我都在微生物呆了一个多月了，从真菌结核到手工鉴定，再到血培，血清，培养基，最后一周就是前台。说一下我的感受，也希望后面来实习的同学能从我这提前得到点信息 最有挑战性的：手工鉴定 1.老师一大早会开始看头天孵的平板，看长得如何，长得不10 / 31 好的，接着孵一天 ;没有分出单个菌落的，不能上机的就要交 给我们来转个平板，转平板的注意事项就是要挑菌，这个需要技术，小心不要挑到杂菌。 2.像比较典型的菌落，老师直接根据其特征就能判断出是革兰阴性还是阳性来决定上机，有疑问的交给我们，我们来染色，染色也要注意挑菌。 3.需要手工生化鉴定的，像什么血浆凝固酶实验，卫星现象，普平， %的氯化钠这些，我们都会接触到，同志们在进手工鉴定之前可以提起复习一下老师原来给的鉴定流程和实验书上的操作步骤。 4.还有手工药敏实验，革兰阴性杆菌营养要求低点，一般用MH，阳性球菌一般用血平板，补药敏的话，手工鉴定那有手册，要按着手册进行。 5.一般最后的工作就是留菌，就是保存菌种 下午如果有时间的话，可以自己看一些一天前上机的平板，做一下染色，触酶，凝固酶等简单的实验，而且一般报告都已经出了，可以查看是什么菌。 11 / 31 写的很短，要实习的很多，真的发现时间过得很快，实践出真知，让 我们慢慢积累吧。 2、临床微生物实习小结 在这次见习中，我和其他三位同学被 一起分到了微生物科。在微生物科负责我们见习工作的是一位韩老师，他为人很随和，给我们布置的见习任务就是每个人跟踪一种类型的临床标本。他要求跟踪从标本被送到微生物科开始一直到得出最终的报告为止并把从中的所见所得记录下来，通过这样一个过程让我们能够对微生物科有尽可能多的了解。除此之外，韩老师还让我们了解一下里面的一些大型自动化仪器的用途及操作方法，为我们以后能更快的适应实习做准备。 见习的第一天，我们看的是标本的接种，我们看过那里的老师熟练的接种过程后深感自己平时做实验室的速度是如此之慢，如果以我们这种速度去完成每天要接种上百个标本的临床工作是根本不可能的。此外我们还看了临床上的革兰染色，发现它与我们做实验时有一些不同，主要区别是在染料上，临床上为了提高染色速度都用了快速染料。总之，这一天的见习让我们了解到的就是效率在临床上是十分重要的。 12 / 31 见习的第二、第三天，我们看的是临床标本的鉴定，对某些细菌，临床上有经验的老师只要通过观察菌落特征、气味及其他一些简单物理性状就可以初步判断出是何种细菌，让我们大感吃惊。科室里还有一位很热心的老师在她空闲的时候向我们详细的讲解了一番在临床上一些常见微生物的鉴定方法，听过之后让我们受益匪浅。见习的第四天，我们看的是临床标本的药敏反应。在这一天里，我们详细的了解了 临床上是如何做药敏反应的，以及不同的微生物需要做哪些药敏反应，这些都是我们在课堂上所无法学到的宝贵知识。 最后一天，我们看的是微生物科是如何做质控的。通过这一天的见习，使我们深刻了解到质控对于检验科的重要性。之前，我们只是从书本上了解到其对于检验这一学科是很重要的，但是无法有深切的体会，这次见习 给了我们一次很好的机会能让我们在实践中认识到它。除了这些以外，我们每天还在科室里老师有空的时候让他们给我们讲解了一番微生物科中各种孵育箱的作用、 ATB 仪器的操作方法及其他一些仪器的用途和操作方法，让我们对微生物科有了更全面的了解。 五天的时间眨眼就过去了，我的见习也在不知不觉中圆满结13 / 31 束了，能学到的东西却比我们在学校一个月学到的还多。回想这段时间的生活，我觉得自己过的很充实，也很快乐，更重要的是我学到了不少东西。我相信，这段时间的收获将是我人生中的一笔宝贵的财富。我也相信，通过这次见习的锻炼，将帮助我能更快的融入到即将到来的实习生活中以及以后的工作中。 3、临床微生物实习小结 岁月如梭，光阴似箭，不知不觉在微生物室实习的时间已接近尾声了。 回想这两个月在微生物室实习的这三个月时间里在指导老师的带领下自己真的学会了不少。通过自己的勤奋在积极协助老师完成细菌学方面检验项目的同时，我发现自己的操作能力不说有了很大程度的提高但也有了更大的进步了，相比在学校的时候操作起来更熟练了比如在利用显微镜看细菌形态的时候，以前调显微镜亮度、找视野等就要弄好几分钟，现在通过在医院检验 科微生物室三个月的实习，这些小问题都不存在了，而且通过染色在显微镜下能辨认的细菌也比较多了，像球菌科的葡萄球菌感染、链球菌、淋球菌以及杆菌科的肠杆菌，真菌孢子在显微镜下也能一眼辨认。 14 / 31 总之在微生物三个月的实习日子里感觉自己受教颇多，通过亲身实践操作把自己在学校学到的理论知识同实践很好的结合了起来 ，从而更进一步加深了自己的细菌学知识底蕴，在带教老师的悉心指导下已熟悉掌握了各类标本的接种、细菌培养以及细菌的初步鉴定、细菌的药敏试验等。 在此做次总结为自己更好的回顾在医院检验科微生物室所学。 4、临床微生物实习小结 微生物室是我此次临床药师进修的第一站，也是非常重要的第一步，经过这一个月的学习，我对于一张张药物敏感性报告后的各个步骤有了更直观的认识，学习从临床检验的角度看待抗生素的合理使用， 在这一个月的学习中，我了解了微生物室常用的细菌学检验方法，熟悉抗菌药物敏感试验方法和特殊耐药机制的筛选方法，并跟随带教老师参与了简单的临床检验操作及药敏报告的解读。同时，熟悉了微生物的基本分类，本地区常见的病原菌及耐药情况，以及临床常见感染性疾病的常见病原菌及15 / 31 耐药情况。在 老师的耐心教导下，我对于 MRSA、 VRE、 PRSP、产 ESBLs 菌等几种特殊病原菌的耐药情况及药物选择有了更加全面系统的学习。这一个月的学习让我受益匪浅。 杜克雷嗜血菌导致软下疳，只需要 X 因子 ,不需要 V 因子。 接种 1. 尿液一般不超过 1 小时。 痰液检查 留标本最佳时机：上午 9-10 点。 观察分层情况可用少量苯酚防腐。 可冷藏保存但不宜超过一天。 细菌的结构 1. 溶菌酶： G-有外膜，弱。 2. 万古霉素： G-弱，外膜膜孔径小； 3. S-R：胞壁缺乏特16 / 31 异多糖； 4. 碳水化合物： 1. O/F 试验： 发酵型；葡萄球菌； 氧化型：链球菌 2. 七叶苷水解试验： D 群链球菌，其他链球菌 3. 甲基红试验： 大肠杆菌，产气肠杆菌 沙门、志贺、变形、枸橼酸杆菌 4. V-P 试验： 一般结果与甲基红试验相反。 碳源和氮源利用 1. 枸橼酸盐：沙门、克雷伯，其他肠杆菌阴性 2. 丙二酸盐：克雷伯 氨基酸试验 1. 明胶液化试验：肠杆菌鉴别，沙雷菌、普通、奇异 变形、阴沟杆菌 2. 吲哚试验：肠杆菌鉴定 17 / 31 3. 硫化氢试验：肠杆菌科鉴定，沙门、爱德华、亚利 桑那、枸橼酸杆菌、变形、绝大多数 4. 尿素分解试验：肠杆菌科中，变形杆菌鉴定。奇异、 普通变形杆菌 酶类试验： 1. 氧化酶试验： 肠杆菌和单胞菌 (+)。但奈瑟菌、莫拉菌(+)。 2. 过氧化酶试验： 葡球菌 +，微球菌；链球菌 -。 3. 凝固酶试验： 致病性葡萄球菌 4. DNA 酶试验： 金葡菌 5. 脂酶试验： 产芽胞梭菌、肉毒梭菌、诺维 梭菌，其他梭菌 6. CAMP 试验： B 群链球菌 7. 胆汁溶菌试验： 肺炎链球菌，甲型链球菌 抑制试验： 18 / 31 1. 奥普托欣实验： 肺炎链球菌。 2. 杆菌肽试验： A 群链球菌。 伪膜性肠炎： 1. 阴杆严重 ，葡菌或 FC 明显 可导致。 健 康婴幼儿粪便中可出现酵母菌。正常细菌主要为双歧杆菌、拟杆菌、葡萄球菌等。 胆汁检查： 1. 慢性胆囊炎稀薄； 2. 十二指肠引流管依次引出 D/A/B/C液 3. B 胆汁中 培养出伤寒杆菌可诊断伤寒带菌者。 金葡菌 1. 院感最常见细菌； 2. SPA 是胞壁 A 蛋白，可结合特异性抗体 IgG 的 FC 19 / 31 段，余下 Fab 段可结合相应抗原，这种连接成为抗体致敏的颗粒载体。接触相应抗原后发生反向间接凝集反应。 3. VISA是指 淋病奈瑟菌 不会引起败血症 鼠疫耶尔森菌 1. 最适温度 20-28 ，液体培养基底部堆积呈钟乳石 状，表面可形成白色菌膜。 肺炎克雷伯菌 1. 动力阴性。； 2. 带荚膜，易产生 ESBLs 变异链球菌 与龋齿关系密切 A 群链球菌 与心肌及肾小球基底膜有共同抗原 20 / 31 B 群链球菌 若对青霉素敏感，则用红霉素药敏试验。 肺链 动物模型：小白鼠最敏感； 荚膜肿胀试验 猩红热 1. 乙型溶血性链球菌 2. 急性期嗜酸粒增高。 大肠杆菌 1. 在血平板上也可能会有溶血； 2. ETEC 旅行者腹泻 志贺菌 1. 动力； 2. 容易导致内毒素血症； 21 / 31 沙门菌 1. 动力； 2. 与毒力相关的抗原是 VI 抗原； 3. 1-2w 血液， 2-3w 大小便，全程骨髓。 4. 伤寒：发热阶梯状上升，胸背腹部玫瑰疹，相对缓 脉，白细胞一般不升， ES 消失。 粘质沙雷菌 是巧克力平板的阳性质控菌株 霍乱弧菌 1. TCBS 平板，呈黄色较大菌落 2. 亚碲酸钾平板，呈中心灰褐菌落。 3. PH 为； 22 / 31 弯曲菌 空肠弯曲菌 43 生长， 25 不长； 胎儿弯曲菌 25 生长，43 不长； 简明弯曲菌两 个温度都不长； 上述菌 37 都生长。 对 内酰胺类耐药。 厌氧菌 1. 大肠中厌氧与需氧菌比例为 1000： 1 2. 厌氧平板阳性质控菌株：脆弱拟杆菌 放线菌 1. 不形成空中菌丝； 破伤风杆菌 早期培养革兰阳性，容易变为格兰阴性。 治疗四环素，红霉素。 肉毒梭菌 23 / 31 毒素耐酸，不耐热 单纯毒素中毒，两种毒素；毒素 A，肠毒素。毒素 B，细胞毒素。 白喉棒状杆菌： 1. 毒力试验： EleK 平板试验 S PA 协同凝集试验； 对流免疫电泳； 动物实验。 2. 早期死因多为假膜脱落阻塞呼吸道；晚期死因多为 外毒素结合易感组织； 3. 锡克试验：调查人群对白喉的免疫力 产气荚膜梭菌 青霉素首选，其次万古霉素。 非发酵菌 24 / 31 1. 除不 动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌、个别假单胞菌外， 氧化酶试验为阳性； 2. 铜绿杆菌：透明溶血环。多重耐药。 3. 不动杆菌 “ 三阴 ” ：氧化酶阴性、动力阴性、硝酸 盐还原试验阴性 。 分支杆菌 1. PPD 试验：硬结超过表示可能有活动结核； 2. 麻风杆菌是人工不能培养的细菌； 3. 泡沫状细胞鉴别两种分支杆菌 支原体 1. 解脲脲原体能通过胎盘感染胎儿； 2. 衣原体 1. 细胞内生长，在上皮细胞形成包涵体。 2. 原体，感染型；始体：繁殖型。 25 / 31 3. 培养： 鸡胚卵黄囊接种； 细胞培养； 小白鼠 接种； 4. 沙眼衣原体： a.沙眼； b.包涵体结膜炎； c.泌尿 生殖道感染； d.性病淋巴肉芽肿； 鹦鹉热衣原体：非典型肺炎； 肺炎衣原体： 5. 四环素、大环内