气相色谱法测定蔬菜中8种有机磷农药的残留量.pdf

第 7 卷 第 12 期 食 品 安 全 质 量 检 测 学 报 Vol. 7 No. 12 2016 年 12 月 Journal of Food Safety and Quality Dec. , 2016 *通讯作者: 沈荣明, 助理农艺师, 主要研究方向为农产品质量安全. E-mail: ydncpjc *Corresponding author: SHEN Rong-Ming, Assistant Agronomist, Agriculture and Grain Bureau of Yudu County, Ganzhou 342300, China. E-mail: ydncpjc 气相色谱法测定蔬菜中 8 种有机磷农药的残留量 沈荣明*, 杨韶芸 (于都县农业和粮食局, 赣州 342300) 摘摘 要要: 目的目的 采用气相色谱法同时测定蔬菜中甲胺磷、氧化乐果、乐果、甲基对硫磷、毒死蜱、对硫磷、 水胺硫磷和三唑磷 8 种有机磷农药的残留量。方法方法 样品经乙腈提取后, 经 Agilent DB-17 色谱柱分离, 采用 火焰光度检测器检测, 以外标法定量。结果结果 毒死蜱和乐果在 0.255 g/mL, 其他 6 种有机磷在 0.0250.5 g/mL 浓度范围内具有良好的线性关系, 检出限为 0.0060.023 g/mL; 8 种有机磷农药的回收率为 97.6%104.8%, 相对标准偏差为 0.98%1.67%。结论结论 该方法精确可靠, 重复性、稳定性和分离效果好, 可用 于测定蔬菜中有机磷农药的残留量。 关键词关键词: 气相色谱法; 蔬菜; 有机磷农药; 残留 Simultaneous determination of 8 kinds of organophosphorus pesticide residues in vegetables by gas chromatography SHEN Rong-Ming*, YANG Shao-Yun (Agriculture and Grain Bureau of Yudu County, Ganzhou 342300, China) ABSTRACT: Objective To establish a method for the determination of methamidophos, omethoate, dimethoate, parathion-methyl, chlorpyrifos, parathion, isocarbophos and phentriazophos in vegetables by gas chromatography. Methods Vegetable samples were extracted with acetonitrile, separated by an Agilent DB-17 column, and then detected bu flame photometric detector (FPD) using the external standard method for quantification. Results The method showed good linearities in the ranges of 0.255 g/mL for chlorpyrifos and dimethoate and 0.0250.5 g/mL for other 6 kinds of organophosphorus. The limits of detection were 0.0060.023 g/mL. The recoveries of 8 kinds of organophosphorus pesticides were 97.6%104.8% with relative standard deviations (RSDs) of 0.98%1.67%. Conclusion This method has good accuracy, reproducibility, stability and separation, which can be used for determination of organophosphorus pesticide residues in vegetables. KEY WORDS: gas chromatography; vegetables; organophosphorus pesticide; residue 1 引 言 有机磷农药是一种高效、 广谱的杀虫剂, 在蔬菜水果种植 中应用非常广泛, 但其毒性大且脂溶性强, 对人体健康和生态 环境造成很大危害1。此外有机磷农药还可以通过环境迁移和 食物链富集在动物体内, 从而对人类健康有潜在威胁2。 目前有机磷农药的测定方法主要有气相色谱法4-8和 气相色谱-质谱联用法, 针对有机磷农药残留量的研究也 较多。本研究拟优化气相色谱法条件测定蔬菜中 8 种有机 磷农药的残留量, 使有机磷的检测时间有效缩短。 第 12 期 沈荣明, 等: 气相色谱法测定蔬菜中 8 种有机磷农药的残留量 4983 2 材料与方法 2.1 试剂与仪器 Agilent 7890B 型气相色谱仪(配备火焰光度检测器, 美国安捷伦公司); TTL-DC氮吹仪(北京同泰联科技发展 有限公司); T25 匀浆机(德国 IKA 公司); GL-88B 旋涡混合 器(海门市其林贝尔仪器制造有限公司)。 丙酮、氯化钠(分析纯, 国药集团化学试剂有限公司); 乙腈(色谱纯, 中国 SK Chemicals 公司); 甲胺磷、氧化乐 果、乐果、甲基对硫磷、毒死蜱、对硫磷、水胺硫磷和三 唑磷标准溶液(浓度为 100 g/mL, 规格 1 mL, 购自农业部 环境保护科研监测所)。 蔬菜(基地和种植户抽取的样品, 主要为叶菜类和瓜 果类)。 2.2 实验方法 2.2.1 标准溶液的配制 分别精密量取 100 g/mL 毒死蜱、 乐果的标准溶液 0.5 mL, 100 g/mL 甲胺磷、氧化乐果、甲基对硫磷、对硫磷、 水胺硫磷和三唑磷的标准溶液 0.05 mL 置于 10 mL 容量瓶 中, 用丙酮定容至刻度。所得标准储备液毒死蜱和乐果浓 度为 5 g/mL, 其他均为 0.5 g/mL。采用倍比稀释法, 依 次稀释配制成系列浓度的标准工作溶液备用。 2.2.2 样品前处理 准确称取 10.0 g 试样, 加入 20.00 mL 乙腈, 在匀浆机 中高速匀浆 2 min, 加入 3 g 氯化钠再匀浆 1 min。然后以 4000 r/min 离心 5 min 使试样残渣、 水相和有机相分层。 准 确吸取 10 mL 乙腈溶液, 放入 15 mL 离心管中置于氮吹仪 进行氮吹, 水浴温度为 80 , 蒸发尽干。取出用丙酮定容 至 5 mL, 在旋涡混合器上混匀, 用 0.2 m滤膜过滤后进行 测定。 2.2.3 仪器条件 色谱柱: Agilent DB-17(30.0 m0.32 mm, 0.25 m), 进 样口温度: 250 , 模式: 不分流, 进样量: 1 L, 载气: 高 纯氮气, 流量: 1 mL/min, 检测器: 火焰光度检测器; 程序 升温: 150 保持 2 min, 10 /min升至 210 保持 4 min, 6 /min升至 250 保持 8 min。 3 结果与分析 3.1 色谱条件 本方法使用火焰光度检测器因为其对有机磷有较高 的灵敏度, 色谱柱主要考察了弱极性的 DB-1701 柱和中等 极性的 DB-17 柱。程序升温考察了 4 个升温程序, 分别是 (1)150 保持 2 min, 10 /min升至 210 保持 2 min, 8 /min升至 250 保持 6 min, (2)150 保持 2 min, 10 /min升至 220 保持 2 min, 4 /min升至 250 保持 8 min, (3)150 保持 2 min, 10 /min升至 220 保持 4 min, 6 /min升至 250 保持 8 min, (4)150 保持 2 min, 10 /min升至 210 保持 4 min, 6 /min升至 250 保持 8 min。 最终确定 2.2.3 的仪器条件为最优条件, 采集的色谱 图如图 1, 由图 1 可知, 8 种有机磷农药分离度良好。 3.2 线性关系考察 将系列浓度的混合标准工作溶液, 在 2.2.3 仪器条件下 进样。以标准溶液浓度(g/mL)为横坐标, 峰面积为纵坐标, 绘制标准曲线。回归方程、相关系数、线性范围和检出限见 表 1, 检出限以 3 倍信噪比的浓度计算。 从表 1 可以看出, 该 方法线性关系较好, 检出限为 0.0060.023 g/mL。 图 1 8 种有机磷标准溶液的色谱图 Fig. 1 Chromatogram of 8 kinds of organophosphorus pesticide multi-residues standard solution 1.甲胺磷, 2.氧化乐果, 3.乐果, 4.甲基对硫磷, 5.毒死蜱, 6.对硫磷, 7.水胺硫磷, 8.三唑磷 4984 食品安全质量检测学报 第 7 卷 表 1 8 种有机磷农药的线性方程、相关系数和检出限 Table 1 Linear equations, correlation coefficients and limits of detection (LODs) of 8 kinds of organophosphorus pesticides 线性回归方程 相关系数 线性范围(g/mL) 检出限(g/mL) 甲胺磷 Y=2675.2X-32.226 r2=0.9994 0.0250.5 0.023 氧化乐果 Y=852.58X-11.44 r2=0.9991 0.0250.5 0.023 乐果 Y=47757X-387.96 r2=0.9998 0.255 0.006 甲基对硫磷 Y=1974.64X-13.36 r2=0.9995 0.0250.5 0.009 毒死蜱 Y=3654.27X-186.04 r2=0.9999 0.255 0.007 对硫磷 Y=1529.1X+6.05 r2=0.9995 0.0250.5 0.009 水胺硫磷 Y=1545.78X-2.96 r2=0.9995 0.0250.5 0.008 三唑磷 Y=2394.6X-32.63 r2=0.9996 0.0250.5 0.013 3.3 精密度试验 在 2.2.3 仪器条件下, 取低、中、高 3 个浓度的标准 混合工作溶液进样, 每个浓度连续进样 5次9,10, 记录峰面 积以计算相对标准偏差(RSD), 结果如表 2 所示。 从表 2 的 数据可看出, 该方法精密度良好。 表 2 精密度试验结果(n=5) Table 2 Precision results (n=5) 低浓度 RSD 中浓度 RSD 高浓度 RSD 甲胺磷 1.46% 0.42% 0.29% 氧化乐果 1.24% 0.49% 0.26% 乐果 0.43% 0.12% 0.05% 甲基对硫磷 0.82% 0.35% 0.19% 毒死蜱 0.36% 0.08% 0.07% 对硫磷 0.99% 0.27% 0.20% 水胺硫磷 1.21% 0.19% 0.22% 三唑磷 1.17% 0.26% 0.17% 3.4 稳定性试验 取中浓度标准混合工作溶液, 室温放置 0、4、8、12、 16、20 和 24 h 后按 2.2.3 仪器条件下进样, 记录峰面积计 算日内精密度, 8 种物质的 RSD 分别为 1.43%、1.29%、 0.27%、0.76%、0.23%、0.82%、0.68%和 0.92%(n=7), 该 结果说明样品在 1 d 内比较稳定, 制备样品可在 24 h 内进 行测定。 3.5 加标回收率试验 以空白新鲜蔬菜基质为样品, 采用添加法进行试验。 准确称取平行样品 5 份, 每份 10 g, 加入甲胺磷、氧化乐 果、甲基对硫磷、对硫磷、水胺硫磷和三唑磷浓度为 0.5 g/mL(毒死蜱和乐果 5 g/mL)的混合标准工作溶液 1 mL, 按照 2.2.2 的方法制备供试品溶液, 在 2.2.3 的仪器条件下 进行测定, 计算加标回收率, 结果如表 3 所示。 8 种物质的 回收率为 97.6%104.8%, 相对标准偏差为 0.98%1.67%, 该结果表明此仪器方法稳定、可靠。 表 3 蔬菜中有机磷农药的平均回收率和相对标准偏差(n=5) Table 3 Average recoveries and relative standard deviations (RSDs) of organophosphorus pesticides in vegetables (n=5) 加标值(g) 回收值(g) 平均回收率(%) RSD(%) 甲胺磷 0.5 0.488 97.6 1.58 氧化乐果 0.5 0.524 104.8 1.67 乐果 5 0.504 100.8 0.98 甲基对硫磷 0.5 0.491 98.2 1.06 毒死蜱 5 0.498 99.6 0.99 对硫磷 0.5 0.494 98.8 1.24 水胺硫磷 0.5 0.508 101.6 1.32 三唑磷 0.5 0.510 102.0 1.47 第 12 期 沈荣明, 等: 气相色谱法测定蔬菜中 8 种有机磷农药的残留量 4985 4 结论与讨论 色谱条件主要考察了色谱柱, 最终确定选择 DB-17 柱。本研究主要考察了程序升温速率, 最终所确定的方法 能够使甲胺磷、氧化乐果、乐果、甲基对硫磷、毒死蜱、 对硫磷、水胺硫磷和三唑磷 8 种有机磷农药达到较好的分 离度, 该方法还考察了检出限、线性关系、精密度、稳定 性和回收率, 均满足实验要求。 该方法适用于新鲜蔬菜中 8 种有机磷农药残留量的同时测定。 参考文献 1 顾晓军, 田素芬. 农药的负面效应: 过去、现状及展望J. 福建农林大 学学报: 自然科学版, 2001, 30(1): 8083. 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