3.美国灵芝新资源的开发和利用 －袁浩

美国灵芝新资源的开发和利用食品科学与工程袁浩2001360131,一、目的和意义,灵芝（Canodermalucidum）是一种名贵中药，现代医学科学研究证明，灵芝具有抗肿瘤、抗病毒、调整血糖血脂血压、提高免疫力等作用。因此，灵芝已被广泛用于治疗或辅助治疗多种疾病。近年来，灵芝的开发利用越来越受到人们的重视，消费量增长很快，种植面积不断扩大。但由于传统灵芝的栽培产量低，成本高、质量不稳定、产品档次低等现象，严重影响了灵芝生产规模的进一步扩大。,一、目的和意义,为了提高灵芝的产量和质量，不但要在原有物种基础上研究更好的培养方法，还需要寻找新的种质资源，培育新的灵芝品种。本课题组的指导老师从美国采集了一种灵芝新种质资源，针对该灵芝新种质资源的生物学特性做进一步的研究，以期获得高产、优质、抗逆性强、药用活性成分含量高的灵芝新品种直接应用于生产，或利用该种质的某一优良性状做为杂交育种的亲本加以利用。,二、实验方法,本实验分为两大部分：1、培养实验选取四个品种的灵芝，分别是美国灵芝、赤芝、紫芝、黑芝；选取四种培养基，分别是玉米芯、木屑、稻草、棉子壳；和四个温度，16、21、26、31，进行正交培养实验，观察记录全过程，计算总结出最适合美国灵芝生长的培养基和温度；然后进行追加实验，得到在理想因素下的美国灵芝子实体。,二、实验方法,2、有效成分分析由于在培养过程中，发现美国灵芝的生长情况最佳，因此选取正交实验中生长情况第二理想的品种赤芝，进行有效成分分析比较。对两种灵芝子实体的水分、灰分、蛋白质、多糖、氨基酸进行测定比较。其中，蛋白质测定采用凯氏定氮法；多糖测定采用苯酚硫酸法；氨基酸测定交由华农检测中心测定。,三、结果与分析,1、正交实验培养基、菌种、温度三个因素的四个平均速度点示意图,1、正交实验结果分析：（1）培养基因素：本实验所选取的木屑培养基未能符合灵芝生长需要，使各品种灵芝均生长迟缓、菌丝稀疏、原基不能形成；稻草培养基为试验性选用的培养基，配合辅料的帮助，各品种灵芝的菌丝均正常生长；棉子壳培养基上各品种灵芝生长高速稳定，菌丝粗壮雪白。（2）温度因素：低温对灵芝菌丝的生长抑制，在16下各品种生长缓慢、原基未能形成；普遍生长良好的温度范围在2631，原基正常形成。（3）菌种因素：美国灵芝与赤芝表现最突出。,三、结果与分析,1、正交实验菌丝生长情况图,三、结果与分析,2、子实体部分子实体生长情况,三、结果与分析,三、结果与分析,2、子实体部分子实体生长情况图,三、结果与分析,2、子实体结果分析：培养基因素（1）玉米芯培养基，糖类等营养成分最高，普遍菌种在玉米芯中的子实体生长情况良好，而且子实体较大；（2）木屑培养基，由于选择树种不适当，导致在菌丝生长期间及子实体生长期间均不理想，部分生长停止；（3）稻草培养基，菌丝生长期间速度及浓密度均高，但子实体生长未能如菌丝生长迅速，出现缓慢或停止，原基变硬、子实体畸形等现象，成熟的子实体菌盖不大；（4）棉子壳培养基，四个培养基中最稳定的一个，子实体生长稳定，形成菌盖较大。,2、子实体结果分析：菌种因素（1）美国灵芝，在棉子壳培养基中生长最稳定，菌盖最大，橙红色，弹射少量孢子；在玉米芯培养基中表现次之；（2）赤芝，在玉米芯、稻草、棉子壳培养基中均能长成子实体，在玉米芯中子实体最大，棉子壳次之；菌盖在生长第二十日左右时颜色开始变红褐，随着变色程度加大，菌盖产生一层红褐色孢子，并弹射大量孢子；（3）黑芝，早期生长稳定，但中期受到霉菌感染；（4）紫芝，在棉子壳及玉米芯培养基中生长稳定，菌盖较大，颜色褐黑，表面有光泽，弹射少量孢子。,三、结果与分析,3、追加实验追加实验条件确定：通过正交实验分析，最佳组合为1D26（美国灵芝、棉子壳、26），但在正交设计实验中并不包含，所以进行追加实验，接种6瓶1D26。结果分析：在第22天时几乎同时满瓶，原基也同时形成，证明此追加实验的温度、菌种、培养基三因素的组合最为理想，为进一步对其有效成分分析奠定基础。,三、结果与分析,3、追加实验追加实验美国灵芝成熟子实体图,三、结果与分析,4、有效成分分析（1）灰分含量测定,三、结果与分析,三、结果与分析,4、有效成分分析（1）灰分含量测定,三、结果与分析,4、有效成分分析（2）蛋白质含量测定,三、结果与分析,4、有效成分分析（2）蛋白质含量测定,4、有效成分分析（3）多糖含量分析葡萄糖曲线,三、结果与分析,回归方程,三、结果与分析,4、有效成分分析（3）多糖含量分析,三、结果与分析,4、有效成分分析（3）多糖含量分析,三、结果与分析,4、有效成分分析（4）氨基酸含量分析灵芝子实体内含有谷氨酸、缬氨酸、天门冬氨酸、蛋氨酸、丝氨酸等十六种氨基酸，美国灵芝氨基酸含量分析结果与资料上的赤芝氨基酸含量分别为8.99和7.082，美国灵芝高出接近2。,1、菌丝在棉子壳培养基上生长速度快、菌丝浓密、粗壮。尽管本实验所选用木屑培养基不适宜灵芝的生长，未能进行对比，但从环保的角度看，如果大规模进行种植，选用棉子壳更为合适，而且价格更低。从子实体生长情况看，棉子壳培养基上生长稳定、高速。2、本实验所选取赤芝菌种表现良好