胺类药物的分析

药物分析,Pharmaceuticalanalysis,掌握胺类药物鉴别试验的方法及含量测定方法。熟悉胺类药物分析方法的原理，典型药物有关物质的检查方法。了解胺类药物结构、性质与药物分析方法的关系。,目标,第八章胺类药物的分析,第八章胺类药物的分析,胺,芳胺芳伯氨基,对氨基苯甲酸酯及酰苯胺类药物的分析苯乙胺类拟肾上腺素类药物的分析芳氧丙醇胺类肾上腺素受体阻滞剂的分析,1,2,3,第八章胺类药物的分析,第一节对氨基苯甲酸酯及酰苯胺类药物的分析,结构与性质鉴别试验杂质检查含量测定,1,2,3,4,一、结构与性质,第一节对氨基苯甲酸酯及酰苯胺类药物的分析,(一)对氨基苯甲酸酯类药物,溶解性,盐酸普鲁卡因,盐酸丁卡因,苯佐卡因,苯环,一、结构与性质,第一节对氨基苯甲酸酯及酰苯胺类药物的分析,(二)酰苯胺类药物,对乙酰氨基酚(扑热息痛),醋氨苯砜,盐酸利多卡因,盐酸布比卡因,溶解性,苯环,一、结构与性质,第一节对氨基苯甲酸酯及酰苯胺类药物的分析,(二)酰苯胺类药物,盐酸罗哌卡因,盐酸妥卡尼,二、鉴别试验,制备三硝基苯酚衍生物测定熔点制备硫氰酸盐衍生物测定熔点,法法,重氮化偶合反应与亚硝酸钠取代反应与三氯化铁反应与金属离子反应羟肟酸铁盐反应水解产物的反应,化学法制备衍生物测定熔点光谱法,第一节对氨基苯甲酸酯及酰苯胺类药物的分析,二、鉴别试验,(一)化学鉴别法,芳伯氨基：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸普鲁卡因胺NaNO2/HCl碱性-萘酚有色偶氮染料（橙黄到猩红色）,潜在芳伯氨基：对乙酰氨基酚、醋氯苯砜盐酸或硫酸加热水解NaNO2/HCl碱性-萘酚有色偶氮染料（红色）,区别盐酸丁卡因：,（乳白色）,1、重氮化偶合反应,2、与亚硝酸钠取代反应,二、鉴别试验,(一)化学鉴别法,1、重氮化偶合反应,2、与亚硝酸钠取代反应,二、鉴别试验,(一)化学鉴别法,3、与三氯化铁反应,（蓝紫色）,4、与金属离子反应与铜和钴离子反应（具有芳酰胺结构的，如盐酸利多卡因）硫酸铜/碳酸钠试液蓝紫色配合物氯化钴/酸性溶液亮绿色细小钴盐沉淀,显黄色（溶于氯仿）,2.羟肟酸铁盐反应（具有芳酰胺结构的，如盐酸普鲁卡因胺）浓过氧化氢/加热至沸羟肟酸三氯化铁羟肟酸铁（紫红色）,3.与汞离子反应芳酰胺类，如盐酸利多卡因硝酸汞/硝酸，煮沸对氨基苯甲酸酯类，如苯佐卡因硝酸汞/硝酸，煮沸,黄色,红色或橙黄色,蓝紫色,4、与金属离子反应,二、鉴别试验,(一)化学鉴别法,二、鉴别试验,(一)化学鉴别法,5、水解产物反应,(1)盐酸普鲁卡因10氢氧化钠溶液白色（加热变为油状物）继续加热蒸气（二乙氨基乙醇）（能使润湿的红色石蕊试纸变为蓝色）加热至油状物消失放冷、加盐酸白色（能溶于过量的盐酸）(2)苯佐卡因氢氧化钠试液煮沸乙醇加入碘试液/加热黄色（碘仿臭气）,二、鉴别试验,(一)化学鉴别法,5、水解产物反应,普鲁卡因,二乙氨基乙醇,对氨基苯甲酸钠,对氨基苯甲酸,能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色,（能溶于过量的盐酸）,二、鉴别试验,（二）制备衍生物测定熔点,1、制备三硝基苯酚衍生物测定熔点,盐酸利多卡因三硝基苯酚三硝基苯酚利多卡因（mp.228232）盐酸布比卡因三硝基苯酚布比卡因（mp.194）,盐酸丁卡因,丁卡因硫氰酸盐（mp.131）,25硫氰酸铵溶液/5醋酸溶液,二、鉴别试验,（三）分光光度法,1、紫外-可见分光光度法,(1)盐酸布比卡因,(2)盐酸普鲁卡因胺片,(3)醋氨苯砜,二、鉴别试验,（三）分光光度法,2、红外分光光度法,盐酸普鲁卡因,盐酸普鲁卡因胺片,波数cm-1波数cm-1,酯羰基C=O1692酯基C-O1271,1170,1115二乙胺盐N-H25852645（略向高波数）1550（N-H酰胺带）1280（N-H酰胺带）,三、杂质检查,第一节对氨基苯甲酸酯及酰苯胺类药物的分析,（一）盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查,黄色,检查方法：HPLC法,三、杂质检查,（二）对乙酰氨基酚中的杂质检查,工艺：,对乙酰氨基酚,的有色氧化产物,乙醇溶液的澄清度与颜色：中间体对氨基酚的有色氧化产物在乙醇中显橙红色或棕色。（比浊，比色）,有关物质：中间体、副产物及分解产物（例：对氨基酚、对氯乙酰苯胺、O-乙酰基对乙酰氨基酚、偶氮苯、氧化偶氮苯、苯醌和醌亚胺等）药典规定：HPLC法检查。,对氨基酚的检查,三、杂质检查,（二）对乙酰氨基酚中的杂质检查,四、含量测定,第一节对氨基苯甲酸酯及酰苯胺类药物的分析,亚硝酸钠滴定法,非水滴定法,UV法(吸收系数法/比色法),HPLC法,四、含量测定,第一节对氨基苯甲酸酯及酰苯胺类药物的分析,(一)亚硝酸钠滴定法,原理：,条件：1、加入适量溴化钾加快反应；2、加入过量盐酸1:2.56；3、室温1030；4、滴定管尖端插入液面下滴定。,终点指示方法：1、永停法；2、外指示剂法（碘化钾淀粉）,四、含量测定,(二)非水溶液滴定法,盐酸丁卡因盐酸利多卡因,侧链烃胺的叔胺氮,侧链哌啶环的叔胺氮,弱碱性,高氯酸非水滴定,注：滴定前滴加醋酸汞溶液，以除去氢卤酸的干扰,盐酸丁卡因加醋酐以突出终点；例：盐酸利多卡因的非水滴定反应过程：,指示剂：结晶紫,指示剂：萘酚苯甲醇,盐酸布比卡因,四、含量测定,(二)非水溶液滴定法,非水滴定法实例分析盐酸布比卡因,取本品约0.1970g，精密称定，加冰醋酸20ml与醋酸汞试液5ml溶解后，加萘酚苯甲醇指示液5滴，用高氯酸滴定液(0.1084mol/L)滴定至溶液显绿色，消耗高氯酸滴定液5.56ml，空白试验消耗高氯酸滴定液0.04ml。中国药典（2005）规定，每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于32.49mg的C18H28N2OHCl。本品按干燥品计算，含C18H28N2OHCl不得少于98.5%。请问，该供试品含量是否合格？,对乙酰氨基酚在257nm波长处有最大吸收，中国药典2010版采用百分吸收系数（）法，测定对乙酰氨基酚的含量。,例：对乙酰氨基酚、片剂、咀嚼片、注射液、栓剂、胶囊、颗粒剂,四、含量测定,(三)UV法(1)吸收系数法,四、含量测定,(三)UV法(2)比色法,中性条件下的重氮化反应,盐酸普鲁卡因+1,2-蒽醌-4-磺酸钠,pH4-9,棕红色化合物，max482nm处测定A,四、含量测定,第一节对氨基苯甲酸酯及酰苯胺类药物的分析,(四)HPLC法,一、结构与性质,第二节苯乙胺类拟肾上腺素类药物的分析,（含苯环结构）,一、结构与性质,第二节苯乙胺类拟肾上腺素类药物的分析,拟肾上腺素类药物，分子结构中具有苯乙胺基本结构,肾上腺素(adrenaline)盐酸克伦特罗(clenbuterolhydrochloride)硫酸沙丁胺醇(salbutamolsulfate)盐酸麻黄碱(ephedrinehydrochloride),R1R2R3HX,溶解性,苯环,苯环,盐酸克仑特罗,硫酸沙丁胺醇,盐酸麻黄碱,盐酸伪麻黄碱,二、鉴别试验,第二节苯乙胺类拟肾上腺素类药物的分析,1.与三氯化铁反应；2.与甲醛硫酸反应,(一)化学鉴别法,二、鉴别试验,第二节苯乙胺类拟肾上腺素类药物的分析,3.氧化显色反应,(一)化学鉴别法,本类药物分子结构中多数具有酚羟基，易被碘、过氧化氢、铁氰化钾等氧化而呈色。,重酒石酸去甲肾上腺素在酸性条件下不被I2氧化，可与肾上腺素和盐酸异丙肾上腺素区别,二、鉴别试验,第二节苯乙胺类拟肾上腺素类药物的分析,4.与亚硝基铁氰化钠反应(Rimini试验),(一)化学鉴别法,脂肪族伯胺的专属反应,注：丙酮中必须不含甲醛,二、鉴别试验,第二节苯乙胺类拟肾上腺素类药物的分析,5.氨基醇的双缩脲反应,(一)化学鉴别法,二、鉴别试验,第二节苯乙胺类拟肾上腺素类药物的分析,5.氨基醇的双缩脲反应,(一)化学鉴别法,6.氯化物或硫酸盐的鉴别反应,二、鉴别试验,第二节苯乙胺类拟肾上腺素类药物的分析,1.紫外-可见分光光度法,(二)分光光度法,2.红外分光光度法,三、杂质检查,第二节苯乙胺类拟肾上腺素类药物的分析,(一)酮体检查生产工艺：酮体氢化还原制得，若氢化不完全则引入酮体杂质。,紫外分光光度法检查酮体的条件及要求,三、杂质检查,第二节苯乙胺类拟肾上腺素类药物的分析,(二)盐酸苯乙双胍中有关双胍检查,PC法,四、含量测定,第二节苯乙胺类拟肾上腺素类药物的分析,原料：非水溶液滴定法、溴量法制剂：,比色法,提取容量法,紫外分光光度法,高效液相色谱法,四、含量测定,第二节苯乙胺类拟肾上腺素类药物的分析,（一）非水溶液滴定法弱碱性,原理：脂烃胺基侧链，显弱碱性适用范围：本类药物原料药测试条件：溶剂：冰醋酸；滴定液：高氯酸；指示终点：结晶紫、萘酚苯甲醇、电位法；注意事项：加入醋酸汞试液消除盐酸的干扰。若测定药物碱性较弱，可加入醋酸酐，以提高其碱性，同时防止氨基乙酰化，使终点突跃明显。,四、含量测定,（一）非水溶液滴定法,冰醋酸为溶剂醋酸汞消除氢卤酸的干扰结晶紫为指示剂（盐酸甲氧明的指示剂为萘酚苯甲醇，也可电位法指示终点）若碱性较弱则加醋酐使突跃明显,例：重酒石酸去甲肾上腺素直接滴定盐酸克伦特罗加醋酸汞消除氢卤酸干扰；由于碱性较弱，电位法指示终点硫酸沙丁胺醇加入醋酐以增大突跃，结晶紫为指示剂,注：加入醋酐注意防止氨基被乙酰化，所以在冰醋酸溶解样品后应放冷后再加醋酐。,四、含量测定,（一）非水溶液滴定法,四、含量测定,（二）溴量法,基本原理：,四、含量测定,（三）亚硝酸钠法,四、含量测定,（四）紫外-可见分光光度法,1、吸收系数法,四、含量测定,（四）紫外-可见分光光度法,2、比色法,测定原理：,注意：由于偶合剂（N-(1-萘基)-乙二胺）与亚硝酸也能显色干扰测定，所以在重氮化后，应加入氨基磺酸铵分解剩余的亚硝酸。,四、含量测定,（四）紫外-可见分光光度法,2、比色法,四、含量测定,（五）高效液相色谱法HPLC,0.8299,高效分离，高灵敏度和高选择性可用于制剂常规分析，临床药物监测和体内药物动力学研究。,A型题,1盐酸普鲁卡因注射液中检查的特殊杂质是A.水杨醛B.间氨基酚C.水杨酸D.对氨基苯甲酸E.氨基酚2对乙酰氨基酚中检查的特殊杂质是A.水杨醛B.间氨基酚C.对氨基酚D.苯甲酸E.苯酚3肾上腺素和盐酸去氧肾上腺素中检查的特殊杂质是A.水杨醛B.间氨基酚C.对氨基酚D.酮体E.苯甲酸,自测题,B型题,A。硫酸铜反应B.氧化反应C.还原反应D.水解后重氮化-偶合反应E.重氮化-偶合反应1.盐酸利多卡因2.肾上腺素3.盐酸普鲁卡因4对乙酰氨基酚,A,B,E,D,自测题,自测题,A.溴量法B.紫外分光光度法C.亚硝酸钠滴定法D.RP-HPLC法E.非水滴定法5.盐酸去氧肾上腺素6.肾上腺素注射液7.盐酸普鲁卡因8对乙酰氨基酚,A,D,C,B,B型题,自测题,X型题,1.直接能与FeCl3产生颜色反应的药物有A。盐酸普鲁卡因B.盐酸去氧肾上腺素C.对乙酰氨基酚D.盐酸利多卡因E.盐酸丁卡因2.直接和水解后能发生重氮化-偶合反应的药物有A。盐酸丁卡因B.盐酸普鲁卡因C.对乙酰氨基酚D.对氨基酚E.盐酸肾上腺素,一、结构与性质,第三节芳氧丙醇胺类肾上腺素受体阻滞剂的分析,典型药物：氧烯洛尔(Oxprenolol,别名烯丙氧心胺，心得平，Tracosal,Trasacor,Trasieor)肾上腺素受体阻滞药盐酸卡替洛尔(Carteololhydrochloride)受体阻滞药,一、结构与性质,第三节芳氧丙醇胺类肾上腺素受体阻滞剂的分析,苯环,二、鉴别试验,第三节芳氧丙醇胺类肾上腺素受体阻滞剂的分析,(一)化学鉴别法,1、氧化反应鉴别法,二、鉴别试验,第三节芳氧丙醇胺类肾上腺素受体阻滞剂的分析,(一)化学鉴别法,2、沉淀反应鉴别法,二、鉴别试验,第三节芳氧丙醇胺类肾上腺素受体阻滞剂的分析,(二)分光光度法,1、紫外-可见分光光度法UV,二、鉴别试验,第三节芳氧丙醇胺类肾上腺素受体阻滞剂的分析,(二)分光光度法,2、红外分光光度法IR,三、杂质检查,(一)盐酸卡替洛尔中有关物质的检查,TLC法自身稀释对照法(高低浓度对照法),.,.,.,.,.,.,.,样品液对照品,三、杂质检查,(二)盐酸普萘洛尔中有关物质的检查,HPLC,四、含量测定,第三节芳氧丙醇胺类肾上腺素受体阻滞剂的分析,(一)非水溶液滴定法,