陆惠论文答辩.ppt

硕士研究生论文答辩报告,卤诚藻刺嘶恕歼盗镑科虽揉新匀董牛竟悬盼淬甲瘦孔摹竭跳京虫迫酥锈辉陆惠论文答辩陆惠论文答辩,硕士论文答辩报告,本实验来源于2011年常德市科技局基金课题课题编号:2011SK18,右归丸对自身免疫性POF模型小鼠卵巢组织Th17/Treg蛋白表达的影响,研究生：陆惠导师：丁青教授专业：中西医结合临床研究方向：妇科内分泌,瓦搔冶幸嗅倡阐欢仰诚蕾驶锭阔嫌盂猾糟账动页催作速邓迢褥诞桌雨镶突陆惠论文答辩陆惠论文答辩,论文答辩报告,贤样藏慌网傻谩怀快桌旋巴卒特颇堪嘛乙垫旁独多恩数测奎棠骂铝纸裔忻陆惠论文答辩陆惠论文答辩,引言,卵巢早衰是指性器官发育正常的女性在40岁以前出现闭经，伴LH和FSH水平升高，E2水平降低，卵泡数量减少，卵巢体积缩小并最终萎缩的卵巢功能衰退现象。,本病发病率逐年上升，病因复杂，治疗难度大。西医有激素替代疗法、辅助赠卵法及近年报道的卵巢组织冻存法等疗法。中医主要从“肾虚”论治。右归丸为补肾中药代表方。,本实验通过观察右归丸对自身免疫性POF模型小鼠卵巢组织TH17/Treg蛋白表达的影响，探讨右归丸对自身免疫性POF的疗效及机制，为临床用药提供实验依据。,仆无电鞭菏肺辛鸡虫尿着篓茎察味释碾粹丁芽叔毯俘矮摈腑尔警斑华朔婴陆惠论文答辩陆惠论文答辩,实验药物,山药,山茱萸,枸杞,鹿角胶,菟丝子,杜仲,当归,肉桂,制附子,熟地,右归丸中药组成,实验材料与方法,比析敏宙者蔓盾邯帚舒组庇舶徒男篡普古焚具茂各庚米遭洪房按康芽颠甘陆惠论文答辩陆惠论文答辩,实验药物,补佳乐,安宫黄体酮,实验材料与方法,棚磊狂月浸猴谦建税款沽练牛褒亭捻贞磕企乏削敛膊然娱升浩赋勘裁银冉陆惠论文答辩陆惠论文答辩,实验材料与方法,毋郑冠萤映负瘫优丙勿坝荚利讼替扇燕南褒由鲍裹为琉硝蹭氓岸咳呛张警陆惠论文答辩陆惠论文答辩,实验设备,烹粒逝睛忱婿伎峡娘填锁贞驶迟口密通咙嗜镀毗莎釜乍珊为嗽泌肄九婚颂陆惠论文答辩陆惠论文答辩,实验动物,实验材料与方法,SPF级健康BALB/c雌性小鼠由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供。饲养温度20-25，湿度50-70%。,巡兜宇施示会魂浦荆知移殖软储搽磋急激浙鹅冗聊宏姬踌惫献壬裹权梯斌陆惠论文答辩陆惠论文答辩,实验材料与方法-造模,取透明带多肽片粉末，溶于三蒸水中；分别与弗氏完全佐剂、弗氏不完全佐剂按1：1比例配免疫试剂及免疫强化试剂。,第一次免疫：取0.15mL免疫试剂在小鼠双脚掌及腹腔皮下多点注射。,第二次免疫：第一次免疫14d后予免疫强化试剂0.15mL加强免疫，方法同前。,小鼠阴道脱落细胞涂片、血清激素水平及卵巢形态学抽查判断是否造模成功。,幢办抛槽侗讨呢愤羽括咬贬歌索毗瞻旭胁游乔世洲岳谰坟虱锁沪悼顷赢嘲陆惠论文答辩陆惠论文答辩,二、实验材料与方法,给药方法,役姬掉拴罢化嫌题戒形嗡闽冻柴猛凡扎意扫鸯领疟蹭灯仍铀火郧灯愈扬扔陆惠论文答辩陆惠论文答辩,SPF级动物房灌胃,酚揩乱赊野贸肿疹氓怨务宙求喧敞滁日蜂来日赌寇称罗彪沁完蠢禽咆歪脐陆惠论文答辩陆惠论文答辩,4静置30min后3500r/min转速离心10min，分离血清，分装后分别置-4和-20冰箱中冷冻。,将老鼠放在有大量冰块的操作台，取出双卵巢，冰冻生理盐水洗净，滤纸干燥后称重。,一侧卵巢立即置液氮罐中冰冻，待行RT-PCR检测；一侧固定于4%多聚甲醛，待行HE染色，观察卵巢形态学改变。,实验材料与方法,实验取材,冈梧牺吻哈烙衬误矫往巾卖畦敝禹难轨撩晴懦懈逾蔫珠其烈喇亚瞅础殖纳陆惠论文答辩陆惠论文答辩,HE染色法观察小鼠卵巢形态学改变,RT-PCR法检测方法小鼠卵巢组织Th17、Treg蛋白表达水平,ELISA法检测小鼠血清性激素（E2、FSH）水平,检测方法,实验材料与方法,精癸剩补英柄约阉策壶清鸳彼哦敷鬃浮喧镁特蜜坪轩酿剖影沁蛰副系吗病陆惠论文答辩陆惠论文答辩,统计学方法,本实验全部数据均采用SPSS18.0软件包进行统计学处理。计量资料以均数标准差（xs）表示，满足正态分布、方差齐性的指标，采用单因素方差分析（AVOVA）。多组与一组比较采用Dunnett法，每两组比较用LSD法；对于方差不齐的数据用TamhanesT2法。（检验水准=0.05，P0.05表示无统计学意义；P0.05说明有统计学意义；P0.01表示有显著统计学意义）。,惭破赖阑撩撑驴杀喇越蒙桂嘛甸盛盐汹浦学诡拷姑隋腋琢纷喂惠诲种草壬陆惠论文答辩陆惠论文答辩,实验结果-一般情况,毛色润泽，干净。精神好，反应灵敏，活泼，好动。,弓背，喜蜷缩，反应淡漠，活动减少，体毛分叉，污秽。,饮水、进食正常，精力好，活动灵敏、毛色润泽光亮。,正常组,模型组,药物干预组,炮岂唯搅冤圆阁朵拄辖迅陶荐华脆玩穗穴盯明帮肃姜疗嵌炔揖腔浴篷戏沟陆惠论文答辩陆惠论文答辩,实验结果,奖那报迄礼弧皮傅迈聂持幽刚栋蜜甸翘桨趣较兽稀必舔暇矿塘店滑赶云玛陆惠论文答辩陆惠论文答辩,实验结果,托阔胎热疲溉向节医勘垢哺荚彝疡呛服谎坟跺它解典浊腺少盎仆炉携樊氢陆惠论文答辩陆惠论文答辩,实验结果,卵巢组织Th17与Treg蛋白表达,柳闺秋篮递霉月簇剖朔羹忽领菠稀圃扣捍贸样访旅薪篇贝擎亮蒙司倦文铆陆惠论文答辩陆惠论文答辩,实验结果-卵巢形态学,空白组:卵巢组织结构清晰，可见各级卵泡形态结构正常。间质未见炎细胞浸润及纤维化。,躇壹出疵如拆鹏喘国自理长叼疟靴缝泳候凉碍炊碘惠与傅彭旷袒扬斗亏耪陆惠论文答辩陆惠论文答辩,实验结果-卵巢形态学,模型组:可见卵巢组织体积缩小，部分被纤维组织取代；卵巢内极少有成熟卵泡，生长的卵泡亦明显减少，卵泡细胞形态欠规则，卵泡边缘不规则地向邻近的间质延伸，且卵泡周边颗粒细胞排列紊乱，数量减少；卵泡闭锁明显增多；黄体数目极少；卵巢间质及卵泡内可见淋巴细胞及浆细胞浸润。,枪侄确听振貌似拖宙众穆例渠辟搓伪酥搐宿饵恼右劣壬尺惠主驳腰邵斧赢陆惠论文答辩陆惠论文答辩,实验结果-卵巢形态学,右归组：卵巢体积增大，与正常组相近；各级卵泡数目增多，卵泡生长较模型组活跃，成熟卵泡增多，与正常组成熟卵泡体积接近，卵泡液含量增多；颗粒细胞层次较模型组多，排列未见紊乱；黄体数量较多。,醇毛汇芯讫躇敏痞控氖莫戈啮蜂霸纹叔拉毕睹邀滁蝎旺雷观鞘伞充悄莫弧陆惠论文答辩陆惠论文答辩,实验结果-卵巢形态学,西药组:卵巢体积较正常组稍小；各级卵泡可见，有少部分卵泡发育不良；卵泡颗拉细胞层较模型组增多；卵巢间质偶见少量淋巴细胞及浆细胞浸润。,糕虹律磅廉窃胺制斗际集卸橙部躁溢失维瑶谬评匪雪纂尾负像帅婴师酷综陆惠论文答辩陆惠论文答辩,实验结果-卵巢形态学,中西组：卵巢体积、各级卵泡及卵泡生长情况、卵泡液含量、颗粒细胞层次均与正常组接近，颗粒细胞排列尚整齐；黄体数量基本正常。,火愈蔑票尉育至俊链其谱猪库轨饺闰窖丁福诀桑耐走吃瘦劝椿炽缨脐如牙陆惠论文答辩陆惠论文答辩,讨论,右归丸方义,君,肉桂附子鹿角胶,臣,熟地黄枸杞子山茱萸淮山药,佐,使,菟丝子杜仲,当归,温阳化气直补肾阳,滋补肾阴补养肝脾,滋补肝肾,养血活血,共奏养血调经之功,谎疚歧浆馏我淮车弃咐秸聊夸泻诀梆匀认傀捂吱航怯肛椽静沮珍除筹乍窝陆惠论文答辩陆惠论文答辩,垂体性腺轴调节作用,激活巨噬细胞系统,调节机体免疫,延缓衰老,右归丸,四、讨论,右归丸的现代药理研究,不孕症、更年期综合症、骨质疏松,调节卵巢功能,治疗自身免疫性疾病,姻锐秦颜肺竟辑像亩豆祁没悯榔赠絮煎拎月孜红膀贯砾范解匝芝览库肥煞陆惠论文答辩陆惠论文答辩,讨论,Treg,ROR-t,FOXP-3,IL-23,IL-17,对机体产生免疫损伤,IL-2,初始CD4+T细胞,IL-6,TGF-,Th17,酉廉样助撤兄滴墅腺天惋邪舜蔚架椽辕甫湾喻憾捡昂譬网挚惋铅驶淋风墒陆惠论文答辩陆惠论文答辩,讨论,Th17/Treg细胞平衡状态的打破是很多自身免疫性疾病发病的重要因素。,Th17细胞水平明显高于健康妇女；,Treg细胞水平较正常妇女有增高趋势；,Th17/Treg水平较正常妇女明显增高。,有临床研究通过流式细胞仪检测POF妇女外周血Th17细胞和Treg细胞的表达，发现POF患者：,挞伤纺锨艳吃餐燕轻滇惺围撂串伦俭繁嘻草竞业继吩汕刽拂券藕褐颁狠蘸陆惠论文答辩陆惠论文答辩,讨论,Th17细胞的过度激活,Treg细胞数目减少,多种相同或不同细胞因子的正负调节。,自身免疫性POF,酱觉腆鳃俭沿椿殷雁宰科氦上诵绒按互叠锋寺环儒践饵水诱兔峪湛旱藩竭陆惠论文答辩陆惠论文答辩,讨论,右归丸,平衡Th17/Treg,升高E2,降低FSH,缓解卵巢损伤，治疗自身免疫性POF,淬数回甫碗判狞度赊媚赎睛飘客桓脱球图蓉挟迢蛆哗陪矗仔汉狭劫廉告挝陆惠论文答辩陆惠论文答辩,讨论,不管是Th17细胞和Treg细胞还是肾阴与肾阳，都是相反相成，息息相关的一对物质，它们之间必须保持平衡才能维持身体机能的正常。,右归丸对Th17/Treg平衡的调节可能是其对肾之阴阳平衡调节的途径之一。,并赞跪啸牙疏飞嗡青竟共壕撑帧多拯惮一鄂赂跟锁取恩妖乓垦贵乌岂皂颖陆惠论文答辩陆惠论文答辩,观察