HLA配型与无关供体HSCT.ppt

HLA配型与无关供体HSCT,南京医科大学第一附属医院江苏省人民医院汪承亚2010年2月,前言,1957年首例人类双生子之间骨髓移植成功,为治疗白血病等恶性血液病开创了新疗法。继使用HLA匹配的无关供者造血干细胞移植成功后,1988年美国率先建立起无关供者骨髓库(美国国家骨髓供者计划,简称NMDP),尔后又建立了公共脐带血库。根据世界骨髓供者协会(WMDA)资料目前已有60个国家或地区的骨髓库、37个脐血库参加WMDA;登记在案的骨髓供者数超过900万人;库存脐带血达18万份;全球每年无关供者骨髓移植病例超过5000例。与此同时,HLA分型技术也从简单的血清学方法,转变为更精确的基因分型。目前中国造血干细胞捐献者资料库管理中心(简称中华骨髓库)的供者数已超过100万人,使用无关供者的造血干细胞移植也已普遍开展,1997-2007:Worldwideunrelateddonorhematopoieticcelltransplantation,BonemarrowPeripheralbloodstemcellsCordblood(approximate),NMDPfacilitatedtransplants(fiscalyear19872008),CordbloodPeripheralbloodstemcellsBonemarrow,NMDPTransplantRecipientsbyDiagnosisSelectedMalignanciesNMDP移植治疗恶性肿瘤统计,NMDPTransplantRecipientsbyAgeNMDP移植年龄统计,AcuteMyeloidLeukemiainAdults成人急性髓性白血病,MyelodysplasticSyndromeinAdults,AcuteLeukemia,CR1inChildren,AcuteLeukemia,CR2inChildren,SevereAplasticAnemiainAdults,SevereAplasticAnemiainChildren,前言（续）,尽管有关HLA配合程度对造血干细胞移植结果影响的报告数以百计，但是由于在样本数、疾病类型和病情、HLA分型水平等方面的异质性，所得到的结论不尽相同，此外HLA基因分型结果及其生物学意义的解释也显得日趋复杂。这些情况对于非HLA专业人员,在选择HLA最佳配合无关供者方面产生了一定困扰。为解决此问题，WMDA、美国NMDP以及欧洲免疫遗传学联盟(EFI)等组织相继推出与HLA配型有关的工作指南。,HLA抗原和基因,HLA抗原：HLA抗原是细胞表面上的一种蛋白质,它能刺激宿主免疫系统可产生相应抗体。因此,最初HLA抗原是使用血清学方法检测出来的(表1)。使用血清学鉴定的同一个HLA抗原,可以是许多等位基因的产物,因此已鉴定出的等位基因数,远远多于HLA抗原数,同时由于HLA抗体来源以及抗体特异性的限制,并非所有等位基因对应的HLA抗原都可以用血清学方法鉴定。换言之,在DNA水平上的HLA多态性,只有其中一部分可以用血清学方法来识别。,HLA抗原和基因（续）,HLA抗原交叉反应性：HLA抗原之间存在交叉反应性,比如,某个体只受到一个HLA-B7抗原的免疫刺激,结果产生抗-B7和抗-B27等多种特异性抗体。根据交叉反应性的特点,HLA抗原可以分成许多交叉反应组(表2)。同一个交叉反应组中的抗原,共有一些免疫学决定簇,或称为抗原表位。,表2HLA-A,B,DR抗原交叉反应组A座位B座位DR座位A1,11,36B7,42,54(22),55(22),56(22)DR1,15(2),16(2)A2,203,210,28B38(16),39(16),8DR3,11(5),12(5),13(6),14(6)A3,11,1B45(12),50(21),41DR4,7,9A23(9),24(9),240352(5),53DR11(5),12(5),8A25(10),32B44(12),49(21)DR13(6),14(6),17(3),18(3)A26(10),33,34,43,66B49(21),44(12),A30,31B51(5),52(5),53A36,1,80B57(17),62(15),63(15)A68(28),2,69(28)B58(17),22A74,32B60(40),61(40),48B62(15),35,70,75(15),76(15)B63(15),53,57(17),58(17)B64(14),65(14),8B71(70),35,62(15),72(70),*每一行代表一个交叉反应组,括号中数字代表对应的宽特异性,HLA抗原和基因（续）,HLA基因：HLA基因位于细胞核内,存在于DNA分子中,它编码细胞表面的HLA蛋白分子。在移植免疫反应中,HLA基因本身不直接参与，而是其编码的HLA抗原在发挥作用。HLA基因分型的基本原理是检测DNA序列的差异。虽然HLA-类和类基因都含有多个外显子，但实际临床HLA-A,B,C基因分型只检测相应基因外显子2和外显子3的DNA序列，DR基因分型只检测相应外显子2。,外显子,核甘,密码子(HLA一类),HLA常见等位基因大都在2，3外显子的碱基序列差异罕见等位基因大都在2，3外显子以外区域的碱基变异,外显子,核甘,密码子(二类),HLA-DR位点常见等位基因大都在第2外显子的碱基序列变异罕见等位基因大都在第2外显子以外区域的碱基变异,外显子与核甘序列(Exon/Nucleotide),102030405060708090100A*01010101ATGGCCGTCATGGCGCCCCGAACCCTCCTCCTGCTACTCTCGGGGGCCCTGGCCCTGACCCAGACCTGGGCGG|GCTCCCACTCCATGAGGTATTTCTTCAA*02010101-G-T-|-T-110120130140150160170180190200A*01010101CATCCGTGTCCCGGCCCGGCCGCGGGGAGCCCCGCTTCATCGCCGTGGGCTACGTGGACGACACGCAGTTCGTGCGGTTCGACAGCGACGCCGCGAGCCAA*02010101-A-210220230240250260270280290300A*01010101GAAGATGGAGCCGCGGGCGCCGTGGATAGAGCAGGAGGGGCCGGAGTATTGGGACCAGGAGACACGGAATATGAAGGCCCACTCACAGACTGACCGAGCGA*02010101-G-T-GG-AG-C-T-310320330340350360370380390400A*01010101AACCTGGGGACCCTGCGCGGCTACTACAACCAGAGCGAGGACG|GTTCTCACACCATCCAGATAATGTATGGCTGCGACGTGGGGCCGGACGGGCGCTTCCA*02010101G-C-|-G-GG-T-T-410420430440450460470480490500A*01010101TCCGCGGGTACCGGCAGGACGCCTACGACGGCAAGGATTACATCGCCCTGAACGAGGACCTGCGCTCTTGGACCGCGGCGGACATGGCAGCTCAGATCACA*02010101-AC-T-A-C-510520530540550560570580590600A*01010101CAAGCGCAAGTGGGAGGCGGTCCATGCGGCGGAGCAGCGGAGAGTCTACCTGGAGGGCCGGTGCGTGGACGGGCTCCGCAGATACCTGGAGAACGGGAAGA*02010101-A-C-T-TT-C-AC-GT-610620630640650660670680690700A*01010101GAGACGCTGCAGCGCACGG|ACCCCCCCAAGACACATATGACCCACCACCCCATCTCTGACCATGAGGCCACCCTGAGGTGCTGGGCCCTGGGCTTCTACCA*02010101-|-G-A-G-T-G-TG-A-A-,每个外显子包含一定数量的核甘酸不同的核甘酸序列决定不同的等位基因,外显子2的起始位置,外显子3的起始位置,外显子4的起始位置,外显子与密码子(Exon/Codon),-20-15-10-51A*01010101ATGGCCGTCATGGCGCCCCGAACCCTCCTCCTGCTACTCTCGGGGGCCCTGGCCCTGACCCAGACCTGGGCGG|GCA*02010101-G-T-|-510152025A*01010101TCCCACTCCATGAGGTATTTCTTCACATCCGTGTCCCGGCCCGGCCGCGGGGAGCCCCGCTTCATCGCCGTGGGCA*02010101-T-A-3035404550A*01010101TACGTGGACGACACGCAGTTCGTGCGGTTCGACAGCGACGCCGCGAGCCAGAAGATGGAGCCGCGGGCGCCGTGGA*02010101-G-5560657075A*01010101ATAGAGCAGGAGGGGCCGGAGTATTGGGACCAGGAGACACGGAATATGAAGGCCCACTCACAGACTGACCGAGCGA*02010101-T-GG-AG-C-T-80859095100A*01010101AACCTGGGGACCCTGCGCGGCTACTACAACCAGAGCGAGGACG|GTTCTCACACCATCCAGATAATGTATGGCTGCA*02010101G-C-|-G-GG-105110115120125A*01010101GACGTGGGGCCGGACGGGCGCTTCCTCCGCGGGTACCGGCAGGACGCCTACGACGGCAAGGATTACATCGCCCTGA*02010101-T-T-AC-T-130135140145150A*01010101AACGAGGACCTGCGCTCTTGGACCGCGGCGGACATGGCAGCTCAGATCACCAAGCGCAAGTGGGAGGCGGTCCATA*02010101-A-C-A-C-155160165170175A*01010101GCGGCGGAGCAGCGGAGAGTCTACCTGGAGGGCCGGTGCGTGGACGGGCTCCGCAGATACCTGGAGAACGGGAAGA*02010101-T-TT-C-AC-GT-180185190195200A*01010101GAGACGCTGCAGCGCACGG|ACCCCCCCAAGACACATATGACCCACCACCCCATCTCTGACCATGAGGCCACCCTGA*02010101-|-G-A-G-T-G-TG-A-,每个密码子对应由三个核甘组成的一个氨基酸第2外显子的第一个氨基酸,其位置为密码子1,外显子2的起始位置,HLA等位基因发现数量进展(2008年6月),HLA一类等位基因,HLA二类等位基因,IMGT/HLA数据库统计,版本:2.24(2009年1月发表)HLA等位基因总数为3,371个其中一类为2,351A位点:733B位点:1,115C位点:392二类1,020个DRB1位点:608其它与HLA相关等位基因106个(MICA:65个;MICB:30个),VersionReport-2.252(May)VS.2.26(July)2009,HLA抗原和基因（续）,HLA等位基因的命名：HLA等位基因由世界卫生组织(WHO)HLA命名委员会统一命名,采用数字命名方法。一个完整的HLA等位基因最多需要用9个数字表示。HLA座位用大写字母右上角加星号表示。星号后第1、2位数字代表相应血清学特异性;第3、4位代表等位基因,即编码的氨基酸序列有所改变;第5、6位表示外显子中的非编码取代,该核苷酸碱基取代不改变所编码的氨基酸,因此,对应的HLA抗原的分子结构未改变;第7、8位代表内含子区域中的碱基取代。第9位后缀字母S代表该等位基因的产物是可溶性HLA分子,不存在于细胞表面;L代表编码低表达抗原;N代表无效基因,该基因不产生相应的HLA抗原分子。,HLA抗原和基因（续）,HLA等位基因数字命名原则示例,HLA检测分辨率:(Levelofresolution):低分辨率(Lowlevel):A*02中分辨率(Mediumlevel):A*0201/0205/0209/0240/0266N高分辨率(Highlevel):A*020101/0209等位基因水平(Allelelevel):A*02010101模棱两可(Ambiguity):Usingmediumlevelresolutiontypingitispossibletoexcludesomebutnotallallelesfromagroup,hencetheNMDPcodes.B*1501orB*1502=B*15ABB*1501/1502/1505/1515/1521/1545/1556/1570=B*15FGR,HLA命名委员会,StevenMarsh,PhD.March13,2009,AlleleGroupAllelesF（%）AlleleGroupAllelesF（%）A*01A*01011.7422A*24（16.79）A*240217.2456A*01020.1742A*24070.5226A*01030.1742A*26（2.81）A*26012.1776A*02（29.55）A*020112.7649A*29A*29011.2195A*02020.1742A*29020.1742A*02032.7875A*30（9.13）A*30019.9796A*02050.3484A*31（3.74）A*31013.5927A*02064.2967A*32A*32011.6428A*02076.0514A*33（10.02）A*330310.3621A*03（2.43）A*03012.9617A*66A*66010.1742A*11（18.56）A*110117.6551A*68A*68010.5226A*11020.5226A*68020.1742A*23A*23010.8711A*69A*69010.6969,HLA-A位点常见等位基因频率表（高分N=287）,HLA-B位点常见等位基因频率表（高分N=287）,AlleleGroupAllelesF（%）AlleleGroupAllelesF（%）AlleleGroupAllelesF（%）B*07B*07010.1742B*27B*27050.3484B*46（9.41）B*46017.6222（2.46）B*07021.9164B*27070.3484B*48B*48011.5679B*07050.8711B*35B*35012.6132B*49B*49010.3484B*07230.1742（4.64）B*35020.1742B*50B*50010.5226B*08B*08010.3484B*35031.3937B*51（6.67）B*51014.6711B*13B*13014.007B*35050.5226B*51020.3484（13.17）B*130210.0367B*37B*37011.1344B*52（3.07）B*52014.1812B*15B*15014.8462B*38B*38021.9164B*53B*53010.1742（14.40）B*15021.9164（2.41）B*39B*39011.3937B*54（3.73）B*54014.8462B*15070.3484B*39050.1742B*55（2.48）B*55022.2648B*15111.2195B*40B*400110.0529B*55040.3950B*15170.1742（13.58）B*40022.6132B*55070.1742B*15181.9164B*40030.1742B*56B*56010.5226B*15250.3484B*40063.4843B*57B*57011.0453B*15270.6969B*40400.1742B*58（6.60）B*58017.0735B*15580.1742B*41B*41010.6969B*67B*67010.5226B*18B*18010.3484B*44B*44021.0453B*81B*81010.1742B*27B*27030.1742（3.75）B*44033.4843B*27041.2195B*45B*45010.3484,AlleleGroupAllelesF(%)AlleleGroupAlleleF(%)DRB1*01DRB1*01012.6132DRB1*11(5.27)DRB1*11014.4062DRB1*01020.1742DRB1*11040.3484DRB1*03(4.76)DRB1*03014.9378DRB1*11050.1742DRB1*04(12.41)DRB1*04011.2195DRB1*12(12.22)DRB1*12012.6132DRB1*04031.7422DRB1*12029.0224DRB1*04040.1742DRB1*13(6.57)DRB1*13012.1731DRB1*04054.7038DRB1*13025.3465DRB1*04062.2648DRB1*13070.1742DRB1*04080.1742DRB1*13120.6969DRB1*04100.1742DRB1*14(4.80)DRB1*14020.3484DRB1*07(12.51)DRB1*070113.1048DRB1*14030.1742DRB1*08(7.36)DRB1*08010.1742DRB1*14040.3484DRB1*08020.1742DRB1*14052.4390DRB1*08037.7570DRB1*14541.9164DRB1*08040.1742DRB1*15(13.09)DRB1*15018.5574DRB1*09(16.15)DRB1*090115.5624DRB1*15022.2648DRB1*10DRB1*10011.5288DRB1*16DRB1*16021.2195,HLA-DRB1位点常见等位基因频率表（高分N=287）,由于新的等位基因不断地被发现,且越发现越多,很多等位基因其核苷序列的不同已经超过了100种,两位数字已经无法涵盖。为了解决这问题以往是一组等位基因排位99后的另列命名，如A*9240（A*02140），B*9503（B*15103）。现在的新命名将以往前四位数字的内容扩大到了五位数字,如A*02:140,B*15:103.随着新的等位基因不断地上报,可以想象,仅A2家族,就会不断延伸,如A*02:150,A*02:151。,HLA等位基因的新命名,HLA等位基因的新命名,A*01010101becomesA*01:01:01:01A*02010102LbecomesA*02:01:01:02LA*260101becomesA*26:01:01A*3301becomesA*33:01B*0808NbecomesB*08:08NDRB1*01010101becomesDRB1*01:01:01:01,HLA等位基因的新命名,Forallelefamiliesthathavemorethan100allelessuchastheA*02andB*15groupsitwillbepossibletoencodetheseinasingleseries.ThustheA*92andB*95alleleswillnowberenamedintotheA*02andB*15alleleseries.Forexample:A*9201becomesA*02:101A*9202becomesA*02:102A*9203becomesA*02:103etcB*9501becomesB*15:101B*9502becomesB*15:102B*9503becomesB*15:103etc,HLA等位基因的新命名,ThewwillberemovedfromtheHLA-Callelenames,butwillberetainedintheHLA-Cantigensnames,toavoidconfusionwiththefactorsofthecomplementsystemandepitopesontheHLA-CmoleculeoftentermedC1andC2thatactasligandsfortheKiller-cellImmunoglobulin-likeReceptors.Cw*0103becomesC*01:03Cw*020201becomesC*02:02:01Cw*07020101becomesC*07:02:01:01etc,HLA等位基因的新命名,TheDPB1allelenamesthathavebeenpreviouslyassignednameswithintheexistingsystemwillalsoberenamed,forexample:DPB1*0102becomesDPB1*100:01DPB1*0203becomesDPB1*101:01DPB1*0302becomesDPB1*102:01DPB1*0403becomesDPB1*103:01DPB1*0502becomesDPB1*104:01etcListsofoldandnewallelenameswillbemadeavailablethroughtheIMGT/HLADatabase(www.ebi.ac.uk/imgt/hla),WHO命名委员会还定义了某些等位基因串(StringofAlleles)的代码.,2，3外显子多肽序列相同的等位基因串将以大写的P注明，如A*02:01P(包括02:01/02:09/02:66/02:75/02:89/02:97/02:132/02:134/02:140)。其临床意义在于P组里的等位基因可转成同一多肽.因此,抗体不能区分P组里的等位基因.2，3外显子核苷序列相同的等位基因串将以大写的G注明,如A*02:01:01G(包括A*02:01/02:09/02:43N/02:66/02:75/02:83N/02:89/02:97/02:132/02:134/02:140).,国际影响,2005年9月，北爱尔兰国家组织免疫相容性实验室主任ProfDerekMiddleton了解到我室发现新等位基因，表示希望能参与合作，共享等位基因频率等遗传资料。同年9月，国际组织相容性协作组（InternationalHistocompatibilityworkgroup,IHWG负责人Brian.D.Tait教授邀请我实验室参加第14届国际组织相容性协作会议，共同讨论HLA领域相关问题。,表1HLA血清学分型和DNA分型比较分型方法检材检测对象A,B,C血清学分型单个核细胞细胞表面抗原DR血清学分型B淋巴细胞细胞表面抗原A,B,C基因分型基因组DNA外显子2,3DRB1基因分型基因组DNA外显子2基因分型技术：SSPSSOP（酶标，LUMINEX，芯片）SBT,方法和水平HLA-AHLA-BHLA-DR血清学分型宽特异性水平A9,-B15,B40DR2,DR6窄特异性水平A24,-B62,B60DR15,DR13DNA基因分型低分辨A*24XX,68XXB*15XX(B62),40XX(B60)DRB1*15XX,13XX中分辨A*2402/2404B*1501/1504/1505/1507DRB1*1501/1503/1505A*6801/6802/6811NB*4001/4007/4010DRB1*1301/1305/1306高分辨A*2404,6811NB*15010101,400103DRB1*150101,1306,HLA分型水平比较和报告形式,中华骨髓库要求在括号中注明对应的抗原特异性,HLA基因分型结果转换成HLA抗原特异性,移植排斥反应是免疫活性细胞间的相互作用。在移植免疫反应中,宿主细胞识别的是外来HLA抗原表位,而不是HLA基因。虽然HLA基因分型比经典的血清学分型准确,而且可以检测出血清学难以鉴定的HLA基因产物,但是分型结果只是提供受检者带有哪些HLA基因的信息,不能直接反映出该基因编码的HLA抗原在细胞表面的表达情况以及免疫原性。因此临床造血干细胞移植配型角度要求HLA基因分型结果必需“翻译”成HLA抗原特异性。在此背景下国际通用的HLA字典应运而生,而美国NMDP进一步建立起以血清学代码为基础的SD(searchdeterminants)检索系统。,表HLA等位基因对应的血清学特异性以及编码系统示例,等位基因HLA字典美国NMDP中华骨髓库特异性SD系统指定特异性B*1501B6262B62B*1502,1511B7575B75B*1503B7270B72B*1509B7070B70B*1510,1518B7170B71B*1512B7662/76B76B*1513B7777B77B*1516B6363B63B*1523-70B15B*1526N无效空白无效B*1529B1570B15B*1538-62B15B*1544-75B15B*1547-70B15B*1555B1575B15B*1558B1562B15,常见容易混淆的高分结果(高分前两位数字与血清学结果数字不同),中华骨髓库的特异性指定系统基本上以HLA字典为标准指定HLA特异性。对于血清学特异性未知的等位基因,采用以血清学宽特异性表示的方法处理。比如B*1523,B*1538,B*1544和B*1547等位基因,都被指定为B15。按此方法指定的特异性范围一般比SD系统为宽,但以后可以按照HLA字典提供的新信息而更新。,HLA单体型，纯合子，杂合子,HLA不同座位上的基因,紧密连锁组合成HLA单体型,在家庭中以共显性等位基因的遗传方式传递。因此,每个人都带有2条分别来自父母的HLA单体型。父母和孩子之间总是共有一条HLA单体型。同胞之间,有1/4的机会得到2条相同的单体型;有1/4的机会得到2条不相同的单体型;还有1/2的机会得到一条相同的HLA单体型。如果一个体的某座位上带有2个相同的等位基因,被称为纯合子;如带有2个不相同的等位基因即为杂合子。只有通过家系调查才能确定是否为纯合个体。,HLA等位基因连锁不平衡,HLA不同座位上的等位基因之间存在连锁不平衡即实际观察到的某些等位基因出现在同一条单体型上的频率显著高于或低于预期值,提示这些等位基因倾向于组合在一起。不同种族中的连锁不平衡格局不尽相同。比如,HLA-A2,B46,DR9和HLA-A30,B13,DR7是中国人中最常见的存在连锁不平衡的单体型。HLA-A1,B73,DR10是中国人中发现的罕见连锁不平衡HLA单体型。,HYPLOTYESeHF(%)aHF(%)A*30-B*13-DRB1*076.929.01A*02-B*46-DRB1*093.533.73A*33-B*58-DRB1*032.542.46A*33-B*58-DRB1*131.891.62A*11-B*15-DRB1*121.461.76A*33-B*44-DRB1*131.411.06A*11-B*15-DRB1*041.340.77A*02-B*40-DRB1*091.311.76A*02-B*46-DRB1*081.301.34A*24-B*40-DRB1*091.190.99A*02-B*15-DRB1*091.170.63A*02-B*15-DRB1*151.140.70A*24-B*15-DRB1*041.020.56,常见单体型频率举例,HLA-A*B*DRB1*频率(%)HLA-A*B*DRB1*频率(%)3001130207018.51101400609010.73303580103012.81101130115010.70207460109011.91101460109010.73303580113021.71101540104050.73303440313021.72402400108030.72402400104050.93201520101010.70207460108030.93303580101010.71101150212020.9其他357种单倍型0.5,167个家系等位基因水平15种常见单倍型,子女与其父或母HLA单体型出现完全相同的家系,P793MFHLA-A-B-DRB1301307301307301307335803335803244008P1772MFHLA-A-B-DRB1244008244008244008114015114015021512,GuidelinesforUnrelatedBoneMarrowTransplants1Commenwell-documented(CWD)alleles2NMDPHLA-MatchingGuidelinesforUnrelatedMarrowTransplants3permissiveun-matchinginallo-HSCT,关于CWD(常见等位基因+少见等位基因),ASHI-HLA专家委员会对HLA基因分类的定义:常见等位基因(Commonalleles):在任何参照人群中,该等位基因频率均大于0.0012)少见等位基因(Well-documentedalleles):无关个体中至少被独立观察到三次的等位基因，但它们的频率未能被准确地评估，某一特定人群中发现的等位基因可能在另外一人群中频率极低。总体上,这类等位基因的频率明显低于常见等位基因3)罕见等位基因(Rarealleles):余下的等位基因被归类于罕见基因这类等位基因的频率非常低其最高频率可通过出现在被检测人群的规模而估算出来例如，被检测的总标本量为万人，该基因被检测出一次因此，该基因的最高频率为1/20,000。除了与被检测出的个体具有血缘关系外,很难从其他个体再被发现。,关于CWD(常见等位基因+少见等位基因),由于研究方面的限制，ASHI-HLA专家委员会建议将常见等位基因和少见等位基因归于一类,即CWD等位基因,以便明确区分罕见基因.这样有利于实验室和临床实践.此外,对等位基因的分类应定期加以审查CWD的确定基于在任何参照人群中,其精确的基因频率大于0.001，或者，某一个实验室从三个无关个体中获得明确的高分检测结果,或者，不同实验室报告给IMGT/HLA基因库的至少来自三个无关个体的高分结果,绝大部分CWD序列的差异HLA-I类基因在2和3外显子，HLA-II类基因在外显子2。CWD基因可基本上反映人类各人群HLA系统的基因多态性.综合考虑，迄今为止在每个被研究的人群中,各位点的CWD基因约占99%以上。一些目前不在CWD表中的基因,可能将来会被确认为少见基因，但几率非常低截止到2006年,约27至30的常见HLA位点(HLA-A,B,C,DRB1)的等位基因被认为是CWD等位基因。到2009年4月,CWD等位基因的比例降到20%.随着时间的推移,WHO命名的HLA等位基因会显著增加，而CWD等位基因的数量将保持相对稳定某些不表达的HLA基因(Nullalleles)被发现频率并不低,如Cw*0409NDRB4*01030102N，DRB5*0108N;或曾被多次报道过，如A*0104N,A*2409N,A*2411N被列入CWD基因表内但ASHI-HLA专家委员会建议实验室在进行临床检测时可进一步排除这类不表达的基因,关于CWD(常见等位基因+少见等位基因),CWD等位基因与罕见等位基因之比,HLA-A:13048926.676717.7HLA-B:24583029.51,17821.9HLA-C:8126630.544020.7HLA-DR14346330.970723.5CWD=29.2%CWD=19.4%,等位基因总数等位基因总数CWD2006%2009%,世界卫生组织命名的等位基因越来越多.在过去的三年时间里,A,B,C和DR位点增加了1,000多个新等位基因,但CWD等位基因的数目并没有增加.可以预测,再过几年,CWD等位基因数目可能不足10%绝大部分等位基因将为罕见等位基因.需要检测的几乎是常数的CWD,外显子2,3为HLA-I类和外显子2为HLA-II类的关键区域,2,3外显子为HLA的关键区域(KeyDomain)，绝大部分CWD在2和3外显子内。变异在2,3外显子以外区域的等位基因往往为罕见等位基因变异在2,3外显子以外区域往往免疫反应不明显,例如:B*0705/0706的区别在第5外显子一个核甘不同.从免疫学角度出发,此差别可忽略。而B*1501/1502的变异在2,3外显子内,有5个氨基酸不同.从免疫学角度出发,变异明显同是第四位数字不同,但B*1501/1502为模棱两可,而B*0705/0706不归属于模棱两可,并作为可接受的高分结果临床反应不同,B*0705/0706视为高分相同而移植,但B*1501/1502却被视为模棱两可而避免移植,A位点CWD等位基因,ASHI-HLA专业委员会颁布的CWD基因A*0203,A*0301/0301N/0320/0326:HLA专业委员会可作为高分结果接受因为只有A*0301为CWD,B位点CWD等位基因,C位点CWD等位基因,DR位点CWD等位基因,CWD=CommonWellDocumentedCWDgi=allelegroupofCWDalleleswithidenticalARSsequenceCWDgi,gf=twodifferentgroupsofCWDalleleswithidenticalARSsequenceARS=AntigenRecognitionSite,NMDP多基因型结果接受标准,ASHI规定的可接受的高分结果(案例),当结果出现一对以上时,只有一对存在于CWD表内,如:“B*3501,B*4601”or“B*3562,B*4606”只有B*3501/4601在CWD表内一类基因其序列不同在2,3外显子外,二类在2外显子外,如:“B*0705,B*1502”or“B*0706,B*1502B*0705与B*0706的不同只在第5外显子第281密码子一个核甘不同.从免疫学角度看,这个不同可忽略不计.也可采用NMDP代码,如:B*07EH,B*1502,因EH=05/06,NMDP多基因结果接受标准,小结,已经研究过的人群,CWD占99%以上截止到2009年4月,HLA基因中,罕见等位基因已经超过了80%，CWD中不包括的等位基因将来可能会成为CWD,但机率极低目前尚无技术和方法一次检测出一半以上的HLA等位基因ASHI规定的可接受的高分结果:A,B,C位点在2,3外显子序列相同的等位基因DR,DQ,DP位点在2外显子序列相同的等位基因当结果出现一对以上时,只有一对存在于CWD表内当某一高分结果因罕见等位基因的存在而带有组合时,大量临床数据表明,六个抗原相合,甚至五个抗原相合可获得成功的骨髓移植.NMDP现行的HLA配型最低标准仍为六个抗原中的五个抗原相合.但要求HLA-A,B,DRB1进行高分辨分型,2005起增加-C高分.-C,-DQ,-DP高分匹配有助于提高移植效果.首选HLA-A,B,C,DRB18/8匹配的供者,次选7/8相配近年报告HLA-C错配对移植有负面效果.DQBI的影响较小,但与其他位点同时错配可能有不良效果.DP位点错配还未见明显作用,关于NMDP现行的HLA配型策略,Sinceitsinceptionin1987,theNMDPhasrequiredevaluationofdonor-recipientmatchingatHLA-A,-B,and-DR.Theminimumacceptablematchwasoriginallydefinedbyserologicsplitsatthese6lociandrequiredatleast5matches,ie,a5of6match.AlthoughtherequiredlevelofresolutionhasevolvedovertheyearsandHLA-DRisnowevaluatedattheDRB1allelelevel,thebasicminimumrequirementfora5of6matchhasnotchanged.ThisisbecausethereareabundantdatatoshowthatHLAmatchingatthisminimumlevelcanleadtosuccessfultransplantationoutcomes.However,itisalsoclearthattransplantationoutcomescanbeimprovedbymatchingstrategiesthatincreasethedegreeofHLAcompatibilityabovetheminimum(eg,matchingforHLA-C).,NationalMarrowDonorProgramHLA-MatchingGuidelinesforUnrelatedMarrowTranspla