(农药学专业论文)粗酶和固定化酶对毒死蜱降解特性研究.pdf_第1页
(农药学专业论文)粗酶和固定化酶对毒死蜱降解特性研究.pdf_第2页
(农药学专业论文)粗酶和固定化酶对毒死蜱降解特性研究.pdf_第3页
(农药学专业论文)粗酶和固定化酶对毒死蜱降解特性研究.pdf_第4页
(农药学专业论文)粗酶和固定化酶对毒死蜱降解特性研究.pdf_第5页
已阅读5页,还剩83页未读, 继续免费阅读

(农药学专业论文)粗酶和固定化酶对毒死蜱降解特性研究.pdf.pdf 免费下载

版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领

文档简介

关于学位论文原创性和使用授权的声明 本人所呈交的学位论文,是在导师指导下,独立进行科学研 究所取得的成果。对在论文研究期间给予指导、帮助和做出重要 贡献的个人或集体,均在文中明确说明。本声明的法律责任由本 人承担。 本人完全了解山东农业大学有关保留和使用学位论文的规 定,同意学校保留和按要求向国家有关部门或机构送交论文纸质 本和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权山东农业大学可 以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可 以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。 保密论文在解密后应遵守此规定。 论文作者签名: 导师签名: 进 彬 日 期:篮玉 山东农业人学硕1 。学位论文 中文捅安 本研究以有机磷杀虫剂毒死蜱为研究对象,对毒死蜱的气相色谱测定 方法,毒死蜱降解酶的提取,固定化酶的制备及其降解酶和固定化酶的特 性进行了研究,并对降解酶在消除蔬菜表面的农药残留中的应用进行了系 统的研究。主要内容如下: 1 介绍了毒死蜱的理化性质,国内外应用概况,生态毒理及生态风险特征, 以及毒死蜱应用所带来的环境污染和残留问题;进而提出了作者要研究的 问题。 2 建立了环境中毒死蜱的残留测定方法一气相色谱法。水样中毒死蜱的提 取采用液液分配萃取法,用有机溶剂石油醚从水样中提取毒死蜱;蔬菜中 毒死蜱的提取采用振荡提取法,液液分配净化等前处理方式,用气相色谱 测定毒死蜱的残留量。条件为:g c 一1 4 c 。f p d 检测器,内涂1 0 0 d i m e t h y l p o l y s i l o x a n eo v - 1 0 1 大口径毛细管柱( 3 0 m 0 5 3 r a mi d ) ;温度:进样口 2 6 0 柱温2 3 0 ,检测器2 6 0 ;气体流量:载气5 0 m l r a i n 一,尾吹 3 0 m l r a i n ,氢气6 0 m l - r a i n ,空气6 0m l m i n l ;不分流进样,进样量l p l 。 该方法简便、准确、分离度高,最小检知量为2 0 x l o - 1 2 9 ,在此条件下毒 死蜱的保留时间为1 7 6 m i n ,线性范围在5 0 l o _ 1 1 1 0 - s g 之间。水样中 毒死蜱添加量分别为0 0 1 ,0 1 ,1 0 ,5 o m g l ,回收率在9 8 0 5 一1 0 4 4 4 之间,变异系数小于3 ,1 4 ;蔬菜样品中毒死蜱添加量为o 叭、0 0 3 、o 0 5 、 o 5 、5 0m g k g ,回收率在8 0 8 l 一8 7 6 8 之间,变异系数小于4 4 8 。 缓冲液中毒死蜱的测定采用紫外分光光度法及气相色谱法。 3 从高效降解真菌镰孢霉属w z i ( f u s a r i u ml k e xf x ) 中提取了降解酶, 初步研究了该降解酶的分离条件及对毒死蜱的降解特性。研究表明,其胞 内酶对毒死蜱的降解率高达6 0 8 ,细胞碎片对毒死蜱的降解率为4 8 , 但由( n h 4 ) 2 s 0 4 沉淀提取的胞外酶液对毒死蜱的降解率仅为1 1 3 ,经8 次非诱导条件下培养后提取粗酶液,酶活力损失不显著,由此判断w z i 菌株的毒死蜱降解酶为胞内酶和组成酶。以牛血清白蛋白为标准蛋白测得 粗提酶中可溶性蛋白的含量为3 3 6 r a g m l ;该酶对毒死蜱的酶促降解最 适p h 为6 8 ,在p h6 o 9 0 之间都有较高的活性;最适温度为4 0 , 在2 0 5 0 条件下该降解酶均具有较好的降解活性,但在5 5 时,酶活 谢慧:柑酶和i 卉i 定化酶对毒死蜱降解特件研究 迅速降低,降低到最高酶活力的4 1 。测得粗提酶中其米氏常数胁为 1 0 4 9 2 6 m m o l l ,v m a x 为0 2 5 3 5 ,u m o l ( m g m i n ) 。研究结果表明该酶具有 较好的热稳定性和p h 稳定性,对热和p h 均具有较好的耐受力。对毒死蜱 降解效果较好。 4 降解酶i i 对毒死蜱的降解特性。菌株w z j i 在诱导和非诱导条件下生 长,提取其酶液与毒死蜱反应,测定溶液中毒死蜱的残留量。试验表明菌 体w z - i i 的毒死蜱降解酶为诱导酶且为胞内酶,粗提酶中可溶性蛋白的含 量为1 9 9 m g - m l 一,降解酶的为o 6 9 1 m m o l l ,。为 o 2 7 7 7 , u m o l ( m g m i n ) 一。降解酶对毒死蜱的最适降解温度为2 5 c ,最适p h 为7 0 ,在p h6 8 7 2 范围内,酶活性保持在7 0 以上,在p h8 o 9 0 范围内,酶活性便迅速地降低,说明降解酶在碱性的环境中其活性较小, 对p h 的耐受力较弱。由热稳定性和酸碱稳定性试验表明该酶对热具有较 强的敏感性,对酸敏感性较强,碱性环境对酶活力影响相对较小。 5 研究了降解酶的固定化方法。从多种不同浓度的包埋剂中选择了浓度为 3 的海藻酸钠,将w z i 毒死蜱降解酶进行固定化,测定固定化酶对毒死 蜱的降解特性。研究表明该酶的固定化条件为:在4 。c 条件下固定,海藻 酸钠质量浓度为3 ,粗酶液的蛋白质含量为3 ,固定化时间为4 h 。 6 固定化酶的特性研究,并比较了粗酶液与固定化酶对毒死蜱的降解特 性。固定化酶降解毒死蜱的最适温度为4 5 ,在4 0 5 5 条件下酶活性 均保持在8 0 以上;最适p h 为8 0 ,在p h6 5 9 0 之间都有较高的活性, 说明该固定化酶对p h 的耐受力较强。在最适环境条件下测得毒死蜱降解 酶的k m 为0 16 7 2 m m o l - l 一,v m a x 为5 0 2 4 6 n m o i m i n l ,其k m 和v m a x 均小于粗酶液。该固定化酶具较好的热稳定性和p h 稳定性,在5 0 保温 处理5 h 后,剩余酶活性为最大酶活力的6 3 1 ,在p h6 0 和9 0 处理2 h 后,其剩余酶活性分别为8 8 0 和8 7 7 。在设定的反应时间8 0 m i n 内, 在最扔反应的4 0 m i n 内,粗酶液对毒死蜱的降解率大于固定化酶,随着反 应时问的延长,固定化酶对毒死蜱的降解逐渐大于粗酶液,1 h 内固定化 酶对毒死蜱的降解率高达8 6 7 ;在温度1 0 和5 0 时,固定化酶在1 h 内对毒死蜱的降解率约为粗酶液的2 倍;固定化酶在p h5 0 ,9 0 ,1 0 0 条 件下对毒死蜱降解率均接近6 0 ,而粗酶液对毒死蜱的降解率最大仅为 山东农业大学硕j 学位论文 4 0 8 。固定化酶经3 次重复利用后,仍能保持8 0 的活性,而粗酶液不 能被重复利用。由固定化酶在不同温度条件下的保存试验表明固定化酶比 较适宜保存在4 冰箱中,3 5 d 后固定化酶仍保持5 5 7 的活性。 7 利用毒死蜱降解菌w z i 能高效降解毒死蜱的特性,研究了消除蔬菜 表面毒死蜱残留污染的途径。用自来水、浓度为0 5 的洗涤剂、用稀释 后的酶液以及浓度为0 5 小苏打( n a h c 0 3 ) ,处理了受农药毒死蜱污染 的甘蓝和黄瓜,结果表明使用一定浓度的降解酶液能有效去除蔬菜表面的 农药残留污染,在1 0 m i n 内最高去除率可达6 0 2 。不同浓度的酶液对蔬 菜表面的毒死蜱残留去除具有较大的影响,随着酶液浓度的增加,对农药 的去除效果逐渐增加。采用酶液优化浓度的选择试验,研究表明0 5 和 5 浓度的酶液在l o m i n 对甘蓝表面的毒死蜱的去除率分别为4 9 8 和 5 5 2 ;对黄瓜表面的毒死蜱的去除率分别为3 0 8 和5 4 2 ,确定去除 甘蓝和黄瓜表面的农药残留的最佳酶液浓度分别为0 5 和5 。在所有选 用的模式中,使用粗酶液对蔬菜表面的毒死蜱残留的去除效果最好。 关键词:毒死蜱残留 降解酶固定化酶 谢怂:粗酶和l 捌定化酶对毒死蜱降解特性研究 d e g r a d a t i o nc h a r a c t e r i s t i c so fc r u d ee n z y m ea n d i m m o b i l i z e de n z y m et oi n s e c t i c i d e sc h l o r p y r i f o s x i e h u i ( c o l l e g eo fp l a n tp r o t e e t i o n ,s h a n d o n ga g r i c u l t u r eu n i v e r i s t y , t a i a n , c h i n a ,2 7 1 0 1 8 ) a b s t r a c t i nt h i sd i s s e r t a t i o n ,t a k i n gc h l o r p y r i f o sa sam o d e lp o l l u t a n t ,i t sg c a n a l y t i c a lm e t h o d ,t h e e x t r a c to fi t s d e g r a d i n ge n z y m e ,c o n d i t i o no f i m m o b i l i z e de n z y m ea n dd e g r a d a t i o nc h a r a c t e r i s t i c so fi t sc r u d ee n z y m ea n d i m m o b i l i z e de n z y m e ,w e r ed e e p l ys t u d i e d a n da p p l i c a t i o no fc h l o r p y r i f o s d e g r a d i n ge n z y m e ( w z i ) t od e g r a d ec h l o r p y r i f o sr e s i d u e so nt h es u r f a c e o f v e g e t a b l ew a ss t u d i e ds y s t e m i c a l l y t h er e s u l t sc o u l db es u m m a r i z e da s f o l l o w s : 1 t h es i t u a t i o no fa p p l i c a t i o n ,p o l l u t i o na n dm o b i l i t yi ne n v i r o n m e n t , e c o l o g i c a l t o x i c o l o g i c a l c h a r a c t e r i s t i c sa n dp o l l u t a n tm a n a g e m e n to f c h l o r p y r i f o sw a si n t r o d u c e da n di th a sb e e na p p l i e de x t e n s i v e l ya l lo v e rt h e w o r l da n dr e c e n t l yi nc h i n a ,a c c o r d i n g l ya u t h o rp r e s e n t st h ei s s u e st h a tw o u l d b ei n v e s t i g a t e d 2 t h ee x t r a c t i o na n da n a l y t i e a lm e t h o d so fe h l o r p y r i f o si nw a t e ra n dc a b b a g e s a m p l e sw e r es e tu p c h l o r p y r i f o sr e s i d u e si nw a t e rs a m p l e sw e r ee x t r a c t e d w i t hp e t r o l e u me t h e r ;f o re x t r a c t i o no fc h l o r p y r i f o sr e s i d u e sf r o mv e g e t a b l e s a m p l e s ,t h es a m p l e sw e r et r a n s f e r r e dt o2 5 0m lc o n i c a lf l a s kw i t h6 0 m lo f a c e t o n ea n ds h a k e nf o r3 0 m i no na no r b i t a ls h a k e r , t h ee x t r a c tw a sc l e a n e du p b yl i q u i d l i q u i ds e p a r a t i o n a n dt h e n a n a l y z e db yg a sc h r o m a t o g r a p h y c h l o r p y r i f o sw a sd e t e c t e db yg c 一1 4 cg a sc h r o m a t o g r a p h ye q u i p p e dw i t ha f l a m ep h o t o m e t r i cd e t e c t o r ( f p d ) a n dac a p i l l a r yc o l u m n ( 3 0 m x o 5 3 m mi d ) p a c k e dw i t h1 0 0 d i m e t h y lp o l y s i l o x a n eo v - i o i t h eo p e r a t i n gc o n d i t i o n s w e r ed e s c r i b e db e l o w :f l o wr a t eo fc a r r i e rg a s ( 9 9 9 9 n i t r o g e n ) ,h y d r o g e n , ,4 山东农业人学顺 :学位论文 a n da i rw e r e5 0 m l m i n - ,6 0 m l m i n a n d6 0m l 。m i n ,r e s p e c t i v e l y t e m p e r a t u r e o fc o l u m n ,i n j e c t o ra n dd e t e c t o rw e r e2 3 0 ,2 6 0a n d2 6 0 。c ,r e s p e c t i v e l y u n d e r t h e s ec o n d i t i o n s ,t h er e t e n t i o nt i m e sf o rc h l o r p y r i f o sw a s1 7 6 m i n ,a n dl i m i t o f d e t e c t i o nw a s2 0 1 0 。1 2 9 a n dt h el i n e a r i t yr a n g ei s5 0 1 0 一1 1 - - 1 0 g t h e r e c o v e r yr a t e s f r o mw a t e rw i t hc o n c e n t r a t i o no fo 0 1 1 2 8 ,0 1 1 2 8 ,1 1 2 8 , 5 0 m g l w e r e1 0 2 2 5 3 2 1 ,1 0 4 4 4 3 1 6 ,9 8 0 5 1 3 0a n d1 0 4 2 1 1 4 3 。r e s p e c t i v e l y , a n df r o mc a b b a g e s a m p l e sw i t hc o n c e n t r a t i o no f o 0 l ,0 0 3 ,0 0 5 ,0 5 ,a n d5 0m g k g w e r e8 3 2 1 2 0 0 ,8 0 8 1 3 5 6 ,8 6 6 8 2 4 7 。8 7 6 8 1 15 ,8 6 7 8 1 6 3 ,r e s p e c t i v e l y , t h er e s u l t ss h o w e d t h a t t h i sm e t h o dc o u l dm e e tt h er e q u i r e m e n tf o ra n a l y s i so fc h l o r p y r i f o sr e s i d u e s c h l o r p y r i f o si nb u f f e rw a s d e t e r m i n e db yu l t r a - v i o l e ts p e c t r o p h o t o m e t r y 3 d e g r a d a t i o nc h a r a c t e r i s t i c so ft h ec r u d ee n z y m e ,w h i c hw a se x t r a c t e df r o m t h ei s o l a t e ds t r a i nw z 一1 ( f u s a r i u ml k e xf x ) ,t od e g r a d ec h l o r p y r i f o s i n s e c t i c i d e sw e r er e s e a r c h e d t h eo b j e c t i v eo ft h i ss t u d yw a st oi n i t i a l l y a s c e r t a i nt h eb e s ts e p a r a t i n gc o n d i t i o n sa n dt h ed e g r a d i n gc h a r a c t e r i s t i c so f c h l o r p y r i f o s t h ec o n t e n to f t h i ss t u d yi n c l u d e dt h ef o r ma n do r i e n t a t i o no f t h e d e g r a d i n ge n z y m ef o rc h l o r p y r i f o s ;r a t eo fd e g r a d a t i o nf o rc h l o r p y r i f o sb yi t s i n t r a c e l l u l a re n z y m e ,e x t r a c e l l u l a re n z y m ea n dc e l lf r a g m e n tw a s6 0 8 , 11 3 a n d4 8 r e s p e c t i v e l y t h ee n z y m i ca c t i v i t yo ft h ed e g r a d i n ge n z y m e e x t r a c t e df r o mt h ef u n g u si n c u b a t e df o r8g e n e r a t i o n si nt h ec o n d i t i o no f n o n i n d u c e m e n tl o s tl e s s ,t h er e s u l t ss h o w e dt h a t t h i se n z y m ew a sa n i n t r a c e l l u l a ra n dc o n n a t u r a le n z y m e t h es o l u b i l i t yp r o t e i no ft h ec r u d e e n z y m ew a s3 3 6 m g m l 。w h i c hw a sd e t e r m i n e dw i t ha l b u m i n ( b o v i n es c r u m ) a ss t a n d a r dp r o t e i n t h ep ho p t i m u mf o rc r u d ee n z y m ew a s6 8f o re n z y m a t i c d e g r a d a t i o no fc h l o r p y r i f o s ,i t h a dc o m p a r a t i v e l yh i g ha c t i v i t yi nt h er a g eo f p h6 0 9 0 a n dt h eo p t i m u mt e m p e r a t u r ef o re n z y m a t i ca c t i v i t yw a s a t4 0 c i ts t i l lh a dc o m p a r a t i v e l yh i g ha c t i v i t yi nt h er a g eo ft e m p e r a t u r e2 0 5 0 c , b u tt h ea c t i v i t yo fe n z y m er a p i d l yr e d u c e da t5 5 c ,o n l y41 o ft h em a x i m a l a c t i v i t y t h e c r u d ee n z y m es h o w e dk mv a l u ef o rc h l o r p y r i f o so f 1 0 4 9 2 6 m m o l l 一,a n dt h em a x i m a le n z y m a t i cd e g r a d a t i o n r a t ew a s 谢慧:相酶和闹定化酶对毒死蜱降解特性研究 o 2 5 3 5 p m o l 。( r a g m i n ) 一a d d i t i o n a le x p e r i m e n t a le v i d e n c es u g g e s t st h a tt h e c r u d ee n z y m eo ff u n g u sw z ih a dg o o ds t a b i l i t ya n de n d u r a n c ef u r t e m p e r a t u r ea n dp hw h i c hc o u l de f f e c t i v e l yd e g r a d ec h l o r p y r i f o s 4 f u n g u sw z 1 1w a si n c u b a t e di nt h ei n d u c e da n dn o n i n d u c e dc o n d i t i o n s r e s p e c t i v e l y ,f r o mw h i c hd e g r a d i n ge n z y m eo fc h l o r p y r i f o sw a se x t r a c t e d t h e r e s u l t ss h o w e dt h a t t h i sc r u d ee n z y m ew a si n d u c e do n e b yt h eo r i e n t a t i n g e x p e r i m e n to fe n z y m e ,i ti n d i c a t e dt h a tt h i se n z y m ew a si n t r a c e l l u l a ro n e t h e s o l u b i l i t yp r o t e i no ft h ec r u d ee n z y m ew a s1 9 9 m g m l t h ec r u d ee n z y m e s h o w e d k mv a l u ef o rc h l o r p y r i f o s o fo 6 9 1 m m o l l - 1 ,a n dt h em a x i m a l e n z y m a t i cd e g r a d a t i o nr a t eo f0 2 7 7 7 “m o l ( m g m i n ) 一t h ep ho p t i m u mf o r c r u d ee n z y m ew a s7 0f o re n z y m a t i cd e g r a d a t i o no fc h l o r p y r i f o s ,i th a d c o m p a r a t i v e l yh i g ha c t i v i t yi nt h er a g eo fp h6 8 7 2 a n dt h eo p t i m u m t e m p e r a t u r ef o re n z y m a t i ca c t i v i t yw a sa t 2 5 。c a d d i t i o n a le x p e r i m e n t a l e v i d e n c es u g g e s t st h a tt h ee n z y m eh a dt h er e l a t i v e l ys t r o n g e rs e n s i t i v i t yf o r t e m p e r a t u r ea n dp hv a l u e 5 t h ei m m o b i l i z e dm e t h o d so ff l e ee n z y m ew e r es t u d i e d t h ef r e ee n z y m e , e x t r a c t e df r o mt h es t r a i ni d e n t i f i e da sf u s a r i u ml k e xf x ( f u n g u sw z i ) , w h i c hc o u l dd e g r a d ec h l o r p y r i f o se f f e c t i v e l y , w a si m m o b i l i z e dw i t ht h e s o d i u ma l g i n a t ea n dc a l c i u mc h l o r i d e t h er e s u l t si n d i c a t e dt h a tt h ef r e e e n z y m ew a si m m o b i l i z e df o r4 hu n d e rc o n d i t i o n so f3 0 9 l 。s o d i u ma l g i n a t e a n d3 p r o t e i na tt h e4 0 6 d e g r a d a t i o nc h a r a c t e r i s t i co ft h ei m m o b i l i z e de n z y m ea n dt h ef r e ee n z y m e t oc h l o r p y r i f o sw e r ec o m p a r e d t h ei m m o b i l i z e de n z y m es h o w e dm a x i m a l a c t i v i t y a tp h8 0a n da l s oc o m p a r a t i v e l yh i g ha c t i v i t yi nt h er a n g eo fp h 6 5 9 0 t h eo p t i m u mt e m p e r e t u r ef o re n z y m ea c t i v i t yw a sa t4 5 c ,b e s i d e s i nt h er a n g eo f t e m p e r a t u r e4 0 - - 5 5 c ,d e g r a d a t i o na c t i v i t yt oc h l o r p y r i f o sw a s a b o v e8 0 t h ei m m o b i l i z e de n z y m es h o w e dk ma n dp “v a l u ef o r c h l o r p y r i f o so f0 16 7 2 m m o l l a n d5 0 2 4 6 n m o l m i n r e s p e c t i v e l y , l e s st h a n t h ef r e ee n z y m e a d d i t i o n a le x p e r i m e n t a le v i d e n c es u g g e s t st h a tt h e i m m o b i l i z e de n z y m es h o w e dg o o ds t a b i l i t ya n de n d u r a n c ef o rt e m p e r a t u r ea n d ,6 - 山东农业人学硕士学位论文 p t tv a l u e a f t e r5 hi n c u b a t i o na t5 0 r e s i d u a la c t i v i t yw a s6 3 1 a t i e r t r e a t e d2 hw i t hb u f f e ra tp h6 ,0a n d9 0 ,r e s i d u a la c t i v i t yw a s8 8 a n d8 7 7 , r e s p e c t i v e l y a tt h eo p t i m u mc o n d i t i o n ,t h ed e g r a d a t i o nr a t eo ft h e i m m o b i l i z e de n z y m ew a sl o w e rt h a nf r e ee n z y m e sb e f o r e4 0m i n u t e s ,b u t a l o n gw i t h t i m ep r o l o n g e d ,w a sg r a d u a l l yg r e a t e rt h a nf r e ee n z y m e ,w h i c h c o u l da t t a i n8 6 7 a tlh t h ed e g r a d a t i o nr a t eo fi m m o b i l i z e de n z y m ew a s 3 0 a t10 cw i t h i nlh ,d o u b l e dt h a nt h ef r e ee n z y m e sl i k ea sa t5 0 。cw i t h i n 1 h a tp h5 ,9a n d10w i t h i nl h ,t h ed e g r a d a t i o nr a t eo fi m m o b i l i z e de n z y m e t oc h l o r p y r i f o sw a s5 9 1 ,5 8 4 ,a n d5 7 5 ,r e s p e c t i v e l y , b u tt h er a t eo ft h e f r e e e n z y m ew a s 18 6 ,4 0 8 ,a n d3 3 8 r e s p e c t i v e l y m o r e o v e r , t h e i m m o b i l i z e de n z y m eh a sa s y s t e mi nw h i c ht h ee n z y m ec a nb er e c o v e r e da n d u t i l i z e dr e p e a t e d l y a f t e rc o n s e r v e df o r3 5 da t40 c ,t h ee n z y m ea c t i v i t y r e m a i n e d5 5 7 t h er e s u l ts h o w e dt h a ti m m o b i l i z e de n z y m ew a ss u p e r i o rt o f r e ee n z y m e ;i tc o u l db ea p p l i e di nt h et r e a t m e n to f w a s t ew a t e r 7 s o m et r e a t m e n t s ,i n c l u d i n gw a t e r , c r u d ee n z y m ew i t hd i f f e r e n t c o n c e n t r a t i o n s ,w h i c hd e r i v a t e sf r o mw z i ,d e t e r g e n ta n ds a l e r a t u sw i t h c o n c e n t r a t i o no f0 5 w e r eu s e dt od e g r a d er e s i d u a lc h l o r p y r i f o so nt h e s u r f a c eo fc a b b a g ea n dc u c u m b e r t h er e s u l t ss h o w e dt h a td e g r a d i n ge n z y m e w e r ee f f e c t i v e w i t ht h eb e s te f f e c to f6 0 2 w i t h i n10 m i n u t e s t h ee f f e c tw a s g r e a t l ya f f e c t e db yt h ee n z y m a t i cc o n c e n t r a t i o n ,w i t hi n c r e a s i n gt h er a t eo f r e m o v i n gp e s t i c i d e si sg r a d u a l l ye n h a n c e d ,a tt h es a n l et i m ec o s te n h a n c i n g i n a l lt r e a t m e n t s ,c r u d ee n z y m eh a dt h eb e s te f f e c t t h er a t i o n a la d d e da m o u n to f e n z y m ew a s0 5 a n d5 f o rc a b b a g ea n dc u c u m b e rr e s p e c t i v e l y i ti s i n d i c a t e dt h a tc r u d ee n z y m ec o u l dd e g r a d ec h l o r p y r i f o s k e y w o r d s :c h l o r p y r i f o s ;r e s i d u e s ;d e g r a d e de n z y m e ;i m m o b i l i z e de n z y m e 7 谢慧:茕i 筒和潲定化酶对毒死蜱降解特性研究 英文缩略表 a c c e l e r a t e ds o l v e n te x t r a c t i o n c o e f f i c i e n to f v a r i a t i o n d a y d j e t h y l t h i o p h o s p s h a t e e n v i r o n m e n tp r o t e c t i o na g e n c y f l a m ep h o t o m e t r i cd e t e c t o r g r a m g a sc h r o m a t o g r a p h y h o u r k i l o g r a m m i n u r e m i l l i g r a m o p t i c a ld e n s i t y r o t a t i o np e rm i n u t e c o r r e l a t i o n s e c o n d s t a n d a r dd e v i a t i o n s u p e r c r i t i c a lf l u i de x t r a c t i o n s o l i d p h a s ee x t r a c t i o n u i t r a v i o l e t 34 5 ,6 一t r i c h l o r o 一2 一p y r i d m o l 3 , 5 ,6 一t r i c h l o r o 一2 一m e t h o x y p y r i d i n e l m m u n o a s s a y 快速溶剂萃取 变异系数 天 二乙基硫代磷酸酯 美国国家环保局 火焰光度检测器 克 气相色谱仪 小时 千克 分钟 毫克 光密度 转分钟 相关系数 差 流体提取 取 3 ,5 ,6 一三氯一2 吡啶酚 3 , 5 ,6 一三氯2 甲氧毗啶酚 免疫分析 偏界萃 准临相外秒标超固紫 脚叭。唧 暾肿 。 。薹 峭 呻 , 。s 辱; 溉 w 础 m 认 山东农业大学碗上学位论文 1 日u 吾 1 1 毒死蜱的结构和理化性质 毒死蜱( c h l o r p y r i f o s ) ,商品名:白蚁清( 陶氏益农) ,乐斯本( 陶氏益 农) ,有效成分的化学名称o ,0 一二乙基一o 一( 3 ,5 ,6 - 三氯一2 一吡啶基) 硫逐 磷酸酯,化学结构式: c 2 h 5 0 。 c 2 h ;o 硎。 s 毒死蜱原药为白色颗粒状结晶,在水中溶解度为1 2 m g k 9 1 ,溶于大 多数有机溶剂。具有较好的疏水性( 1 0 9 k o w = 5 2 7 ) 和较低的蒸汽压但5 为 2 5 m p a ) ,室温下稳定,在碱性介质中易分解。按我国农药毒性分级标准, 毒死蜱属中等毒性杀虫剂。毒死蜱无内吸性,不会渗透进入根和叶部,仅 有代谢物进入植物体内部,毒死蜱的光解产物在植物体内仅为使用量的 0 5 2 0 ( s m i t hg n e ta 1 1 9 6 7 ) 。 1 2 毒死蜱的应用概况及存在问题 毒死蜱是甲胺磷和甲基对硫磷等高毒农药的新型高效、低毒替代品 种,我国已有许多厂家生产毒死蜱,目前它是全球应用最广泛的五种杀虫 剂之一。作为卫生杀虫剂在家庭中用来防治白蚁和蟑螂等;作为农用杀虫 剂,可有效防治水稻、苹果、蔬菜等方面的螟虫、韭蛆等百余种害虫。毒 死蜱虽然属于中等毒性杀虫剂,但危险性仍然很大,已在一些发达国家如 美国禁用。在肯尼亚主要用毒死蜱保护观赏园艺作物水果和蔬菜( l a l a hj o ,1 9 9 4 ) ;1 9 9 5 年毒死蜱在美国被广泛应用于家庭和农业,大约4 0 0 0 6 0 0 0 t 毒死蜱应用于植物保护i 约9 0 0 1 8 0 0 t 在非农业中使用( a r n o l dl & a s p e l i np h d ,1 9 9 7 ) :土耳其每年应用于蔬菜上的毒死蜱高达3 5 t ( a n o n y m o u s ,1 9 9 6 ) ;在非洲西部国家喀麦隆( c a m e r o o n ) 毒死蜱是被 使用的主要杀虫剂之一( m a t t h e w sg ,2 0 0 3 ) 。我国生产无公害农作物, 毒死蜱是被广泛推荐使用的一种有机磷杀虫剂。 由于毒死蜱对人和生物均具有毒性,这种化合物的大量使用已经造成 谢慧:靼酶和i 州定化酶对毒死蜱降解特性研究 了严重的生态环境毒理问题,作为一种乙酰胆碱酯酶抑制剂,对哺乳动物 的大脑细胞发育会造成伤害( j e t t d a e t a l ,1 9 9 9 ;l u n ds ac t a l ,2 0 0 0 ;j e a n t y ge ta l ,2 0 0 1 : s l o t k i nt ae ta l ,2 0 0 1 l 尤其对怀孕的妇女和儿章伤害更大 ( c o o n yc m ,1 9 9 9 ) 。试验研究表明婴儿对毒死蜱的神经毒性比成人更敏 感( v i d a i rca ,2 0 0 4 ) 。并且毒死蜱很容易被哺乳动物的

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论