（动物学专业论文）瘰螈属有尾目：蝾螈科分子系统学研究.pdf

贵州师范大学2 0 0 9 届硕士学位论文 摘要 本文测定了瘰螈属( 包括尾斑瘰螈p a r a m e s o t r i t o nc a u d o p u n c t a t u s ， 中国瘰螈p a r a m e s o t r i t o nc h i n e n s i s ，富钟瘰螈p a r a m e s o t r i t o n f u z h o n g e n s i s ，广西瘰螈p a r a m e s o t r i t o ng u a n g x i e n s i s ，龙里瘰螈 p a r a m e s o t r i t o nl o n g l i e n s i s ，织金瘰螈p a r a m e s o t r i t o nz h i j i n e n s i s 和荔波 瘰螈待定种p a r a m e s o t r i t o n s p ) 共7 个种( 种群) 的 1 2 s r d n a t r n a t m 1 6 s r d n a 片段序列，结合g e n e b a n k 中3 种该属物 种的基因序列( 包括老挝瘰螈p a r a m e s o t r i t o nl a o e n s i s ，德氏瘰螈 p a r a m e s o t r i t o nd e l o u s t a l i 和香港瘰螈p a r a m e s o t r i t o nh o n g k o n g e n s i s ) ， 以肥螈属( p a c h y t r i t o n ) 的无斑肥螈僻b r e v i p e s ) 和黑斑肥螈僻l a b i a t u s ) 为外群，进行了最大俭约( m a x i m u mp a r s i m o n y ，m p ) 和贝叶斯分析， 结果如下： 1 瘰螈属是单系起源的，尾斑瘰螈、龙里瘰螈、织金瘰螈和荔波 瘰螈待定种共同组成的尾斑瘰螈种组，因分化早于由中国瘰螈、广西 瘰螈、富钟瘰螈、德氏瘰螈和香港瘰螈组成的中国瘰螈种组，从而成 为瘰螈属除老挝瘰螈之外的最基本物种。 2 对于尾斑瘰螈种组的分类地位，从碱基差异和遗传距离来看， 尾斑瘰螈种组与中国瘰螈种组之间以及它们与外群之间的差异较大， 所以我们建议把尾斑瘰螈种组和中国瘰螈种组提升到亚属的阶元。 3 广西瘰螈不是德氏瘰螈的同物异名，富钟瘰螈与广西瘰螈形成 姐妹种，因此富钟瘰螈与广西瘰螈有着比德氏瘰螈更近的系统关系。 4 龙里瘰螈、织金瘰螈都是2 0 0 8 年依据形态特征发表的新种， 贵州师范大学2 0 0 9 届硕士学位论文 它们在形态上都符合瘰螈属模式种的基本特征，而且有明显区别于其 它瘰螈属物种的形态特征；我们的分子系统学数据表明，龙里瘰螈、 织金瘰螈与该属其他物种有足够大的碱基差异和遗传距离，这两个新 种是成立的。 5 荔波瘰螈待定种，是我们于2 0 0 6 年在荔波茂兰自然保护区发 现的待定种。荔波瘰螈待定种与龙里瘰螈、织金瘰螈之间的碱基差异 和遗传距离相对较小，荔波瘰螈待定种与龙里瘰螈、织金瘰螈之间的 关系还有待于更进一步的研究。 。 关键词：瘰螈属，荔波瘰螈待定种，线粒体d n a ，系统进化关系 贵州师范大学2 0 0 9 届硕士学位论文 a bs t r a c t t oe l u c i d a t et h ep h y l o g e n yo ft h eg e n u sp a r a m e s o t r i t o n ( c a u d a t a ： s a l a m a n d r i d a e ) ，w ei n v e s t i g a t e d m i t o c h o n d r i a ld n ag e n ef r a g m e n t s ( 17 4 3 b pi nt o t a l ) o f12 s r d n a t r n a v u 1 6 s r d n af o ri t ss i xr e c o g n i z e d s p e c i e sa n d p a r a m e s o t r i t o ns p w ea l s od o w n l o a dt h r e es e q u e n c eo ft h r e e s p e c i e s o fp a r a m e s o t r i t o nf r o mg e n e b a n k t h e p h y l o g e n e t i c r e l a t i o n s h i p sw i t h i np a r a m e s o t r i t o nw e r er e c o n s t r u c t e db ym a x i m u m p a r s i m o n y ( m p ) a n db a y e s i a ni n f e r e n c e ( b i ) m e t h o d s 埘t hp a c h y t r i t o n b r e v i p e sa n dp a c h y t r i t o nl a b i a t u s a so u t g r o u p s t h er e s u l t so ft h e r e s e a r c ha r ea sf o l l o w s ： 1 p a r a m e s o t r i t o n e x c e p t p a r a m e s o t r i t o nl a o e n s i sh a da m o n o p h y 7 l e t i co r i g i n c o m p o s e d o fp a r a m e s o t r i t o n c a u d o p u n c t a t u s ， p a r a m e s o t r i t o n l o n g l i e n s i s ，p a r a m e s o t r i t o nz h o i n e n s i s a n d p a r a m e s o t r i t o n s p ，p a r a m e s o t r i t o nc a u d o p u n c t a t u sg r o u p , w h o s e d i s j u n c t i o ni se a r l i e rt h a np a r a m e s o t r i t o nc h i n e n s i sg r o u p ，c o m p o s e do f p a r a m e s o t r i t o nc h i n e n s i s ，p a r a m e s o t r i t o ng u a n g x i e n s i s ，p a r a m e s o t r i t o n f u z h o n g e n s i s ，p a r a m e s o t r i t o n d e l o u s t a l ia n dp a r a m e s o t r i t o n h o n g k o n g e n s i s ，i s t h eb a s i c s p e c i e s o fp a r a m e s o t r i t o n e x c e p t p a r a m e s o t r i t o nl a o e n s i s 2 f o rt h ec l a s s i f i c a t i o ns t a t u so fp a r a m e s o t r i t o nc a u d o p u n c t a t u s ， i n d i c a t eb yg e n e t i cd i s t a n c ea n db a s ed i f f e r e n c e ，t h e r ea lem a n y d i f f e r e n c eb e t w e e n p a r a m e s o t r i t o n c a u d o p u n c t a t u sg r o u pa n d i i i 贵州师范大学2 0 0 9 届硕士学位论文 p a r a m e s o t r i t o nc h i n e n s i sg r o u p ，a sw e l la st h e ya n do u t g r o u p s ，s ow e s u g g e s tt h a tp a r a m e s o t r i t o nc a u d o p u n c t a t u sg r o u pa n dp a r a m e s o t r i t o n c h i n e n s i sg r o u ps h o u l db ee x a l tt os u b g e n u s 3 t h em o l e c u l a rd a t ao ft h es t u d yd e m o n s t r a t e st h a tp a r a m e s o t r i t o n g u a n g x i e n s i s i sn o tt h es y n o n y mo fp a r a m e s o t r i t o nf u z h o n g e n s i s p a r a m e s o t r i t o ng u a n g x i e n s i sa n dp a r a m e s o t r i t o nf u z h o n g e n s i sf o r m s i s t e r s p e c i e s t h es y s t e m a t i c r e l a t i o nb e t w e e np a r a m e s o t r i t o n g u a n g x i e n s i s a n dp a r a m e s o t r i t o nf u z h o n g e n s i si sc l o s e rt h a nt h a t b e t w e e np a r a m e s o t r i t o ng u a n g x i e n s i sa n dp a r a m e s o t r i t o nd e l o u s t a l i 4 p a r a m e s o t r i t o nl o n g l i e n s i sa n dp a r a m e s o t r i t o nz h u i n e n s 括a r e n e ws p e c i e sr e p o r t e di n2 0 0 8 t h en e ws p e c i e si sd e t e r m i n e da c c o r d i n gt o t h es h a p e ，s k u l lc h a r a c t e r i s t i c sa n dk a r y o t y p e t h et w os p e c i e s b a s i c c h a r a c t e r i s t i c si nm o r p h o l o g i c a lc o n f o r mt ot h eb a s i co n e so ft h et y p e s p e c i e so fp a r a m e s o t r i t o n ，b u td i f f e r e n tf r o mt h o s eo fo t h e rs p e c i e so f p a r a m e s o t r i t o n i nt h ec u r r e n ts t u d yo fm o l e c u l a rp h y l o g e n e t ys h o w s t h a tt h eg e n e t i cd i s t a n c ea n db a s ed i f f e r e n c eb e t w e e np a r a m e s o t r i t o n t o n g l i e n s i s ，p a r a m e s o t r i t o nz h g i n e n s 括a n d p a r a m e s o t r i t o n s p i s r e l a t i v e l yg r e a t t h e r e f o r e ，t h en a m e s o ft w os p e c i e sa b o v ea r ev a l i d 5 t h en e w s p e c i e s o fp a r a m e s o t r i t o ns p w a sf o u n da tt h e m a n a g e m e n to fm a o l a nn a t i o n a lr e s e r v eo fl i b oi n2 0 0 6 t h eg e n e t i c d i s t a n c ea n db a s ed i f f e r e n c eb e t w e e np a r a m e s o t r i t o nl o n g l i e n s i s 、 p a r a m e s o t r i t o nz h i j i n e n s i sa n dp a r a m e s o t r i t o ns p i sr e l a t i v e l ys m a l l ，s o i v 贵州师范大学2 0 0 9 届硕士学位论文 t h er e l a t i o n s h i pa m o n gt h e ms h o u l db es t u d yi nf u t u r e k e y w o r d s ：p a r a m e s o t r i t o n ，p a r a m e s o t r i t o ns p ，m o l e c u l a rd n a ， p h y l o g e n e t i cr e l a t i o n s h i p v 贵州师范大学2 0 0 9 届硕士学位论文 学位论文原创性声明和关于学位论文使用 授权的声明 原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究 所取得的成果。除文中已经注明引用和致谢的地方外，本论文不包含任何其他个 人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究做出重要贡献的个人或集 体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律责任由本人承担。 论文作者签名：久佘 知1 引刚日 ， 关于学位论文使用授权的声明 本人完全了解贵# i n 范大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留 或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅； 本人授权贵州师范大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进 行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编学位论文。同时 授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到中国学位论文全文数据库， 并通过网络向社会公众提供信息服务。( 保密论文在解密后适用本授权声明) 论文作者签名：爻公导师签名：彳，枷 。一n 1 引日 贵州师范大学2 0 0 9 届硕士学位论文 第一部分文献综述 第一章前言 瘰螈属( p a r a m e s o t r i t o n ) 隶属于两栖纲( a m p h i b i a ) 有尾目( c a u d a t a ) 蝾螈科 ( s a l a m a n d r i d a e ) ，是由c h a n g ( 1 9 3 5 ) 根据典型的头骨的形态学特征而建立的，模式 种为德氏瘰螈( b o u r r e t ，1 9 3 4 ) 。现已报道9 种，包括德氏瘰螈衅d e l o u s t a l i ) ，老 挝瘰螈衅l a o e n s i s ) ，尾斑瘰螈衅c a u d o p u n c t a t u s ) ，中国瘰螈衅c h i n e n s i s ) ，香港 瘰螈僻h o n g k o n g e n s i s ) ，富钟瘰螈僻f u z h o n g e n s i s ) ，广西瘰螈( pg u a n g x i e n s i s ) ， 龙里瘰螈僻l o n g l i e n s i s ) 和织金瘰螈僻z h i j i n e n s i s ) 。除老挝瘰螈衅l a o e n s i s ) 分 布在老挝、德氏瘰螈僻d e l o u s t a l i ) 分布在越南外，其它物种在中国均有分布。近 3 0 年来，中外很多学者从形态、行为、毒素、细胞学和线粒体d n a 等多方面对 瘰螈属的分类和系统发育进行研究，但是还有很多的问题尚待解决，如某些种的 分类地位，瘰螈属的单系起源，属中一些物种的关系等。 织金瘰螈( p a r a m e s o t r i t o nz h i j i n e n s i s ) 和龙里瘰螈( p a r a m e s o t r i t o nl o n g l i e n s i s ) 都是2 0 0 8 年最新发表的物种( 李松等，2 0 0 8 ，a b ) ，它们在瘰螈属中的系统发育 位置尚不清楚；荔波待定种( p a r a e m s o t r i t o ns p ) 是我们在贵州荔波县先新发现的 瘰螈属待定种，虽然在形态学上有足够的证据证明其为一新种，但是缺少分子方 面的证据。 本文采用分子系统学的方法，对已知瘰螈属物种进行研究，以期对解决上 述问题提供分子证据。 1 1 蝾螈科的研究文献综述 蝾螈科s a l a m a n d r i d a e 隶属于两栖纲a m p h i b i a 有尾目c a u d a t a ，是由g o l d f u s s 在1 8 2 0 年所建立，模式属为真螈属s a l a m a n d r a 。现存1 5 属6 0 余种，中国有6 属2 0 余种( 费梁，2 0 0 5 ) 国外学者对蝾螈科动物的研究概况 s a l t h e ( 1 9 6 7 ) 根据蝾螈科动物繁殖行为的进化趋势构建了该科的系统进化 树。w s k e h e 和z e t i ( 1 9 6 9 ) 根据舌骨和腮弓的解剖形状特征构建了蝾螈科动物的 系统发育图。m a r kb r o t h ( 1 9 8 9 ) 将翻译东美螈灯刷染色体上蛋白的e d n a 贵州师范大学2 0 0 9 届硕士学位论文 ( s e 5 a ) 序列的拷贝输入去核的卵母细胞，可高效的翻译其相应的蛋白。 m a c g r e g o r ( 1 9 9 0 ) 对欧螈属t r i t u r u s 进行了最系统、最全面运用用细胞遗传学的研 究。t i t u s 和l a r s o n ( 1 9 9 5 ) m t d n a 的1 2 s 和1 6 s r r n a 基因约1 1 8 k b 的部分序 列数据结合4 8 个形态和发育特征，构建了蝾螈科的系统发育树。l a u r e n m c h a r t ( 2 0 0 1 ) 研究结果表明：( 1 ) 瘰螈属物种为单系群，尾斑瘰螈是这一单系群立 最基本的物种；( 2 ) 蝾螈科动物为并系群，肥螈和尾斑瘰螈与红腹蝾螈的关系较 蓝尾蝾螈密切；( 3 ) 肥螈和尾斑瘰螈在形态、繁殖习性和对环境的要求上非常相 似，具有较近的亲缘关系。w e i s r o e ke ta 1 ( 2 0 0 1 ，2 0 0 6 ) 的研究结果表明：高加索 小默螈和伸舌螈属在中新世的早期分化为两个姊妹群，真螈与卢氏小默螈在中新 世的晚期分化为两个姊妹群；并对蝾螈科6 6 物种中的6 1 个新m t d n a 信息位点 进行综合分析认为：( 1 ) 卢氏小默螈应属于真螈属：( 2 ) 尾斑瘰螈和欧螈显示为并 系群，而且其余各属均为单系群；( 3 ) 1 1 7 _ 洲的蝾螈、肥螈和尾斑瘰螈构成一支；( 4 ) 欧洲的冠欧螈构成一支。w b a b i k ( 2 0 0 5 ) 研究表明普通欧螈和喀尔巴阡欧螈为形 态分类上的姊妹群，普通欧螈分布广，在每个冰期的避难所m t d n a 基因分枝进 化，而喀尔巴阡欧螈仅分布于喀尔巴阡山脉，形态单一，并发现普通欧螈基因不 断渗入喀尔巴阡欧螈等。 我国学者对蝾螈科动物的研究概况 物种的多样性研究：张孟闻先生和他的学生方炳文等在1 9 9 2 年发现并描述 了镇海棘螈e c h i n o t r i t o nc h i n h a i e n s i s 和贵州疣螈t y l o t o t r i t o nk w e i c h o w e n s i s 。刘 承钊先生( 1 9 6 0 ，1 9 6 2 ) 先后描述并报道了大凉疣螈t y l o t o t r i t o nt a l i a n g e n s i s 和蓝尾 蝾螈c y n o p sc y a n u r u s 。费梁( 1 9 8 3 ，1 9 8 4 ) 先后描述了蓝尾蝾螈一新种、海南疣螈 新种t y l o t o t r i t o nh a i n a n e n s i s 和细痣疣螈的新亚种一文县亚种t y l o t o t r i t o n a s p e r r i m u sw e n x i a n e n s i s 。杨大同( 1 9 8 3 ) 描述了蓝尾蝾螈的新亚种一云南亚种 c y n o p sc y a n u r u sy u n n a n e n s i s 。 寇治通和刑一玲( 1 9 8 3 ) 描述了新种呈贡蝾螈 c y n o p sc h e n g g o n g e n s i s 。黄正一等( 1 9 8 3 ) 描述了新种广西瘰螈p a r a m e s o t r i t o n g u a n g x i e n s i s 。w e n ( 19 8 9 ) 描述了新种富钟瘰螈p a r a m e s o t r i t o n f u z h o n g e n s i s 。邓其 翔( 1 9 8 4 ) 报到了四川省细痣疣螈一新亚种平武亚种。李松等( 2 0 0 8 ) 先后描述并 报到了新种织金瘰螈p a r a m e s o t r i t o nz h i j i n e n s i s 和龙里瘰螈p a r a m e s o t r i t o n l o n g l i e n s i s 。赵海涛等( 2 0 0 8 ) 也对新种织金瘰螈进行c y tb 和n d 4 基因进行测序。 2 贵州师范大学2 0 0 9 届硕士学位论文 沈猷慧等( 2 0 0 8 ) 描述了肥螈属新种一弓斑肥螈。侯勉等( 2 0 0 9 ) 重新发现了遗失 多年的秉螈，并指定新模标本并予以描述。从已有的资料来看，有些物种种名的 有效性尚有争议。 胚胎发育研究：耿家举( 1 9 6 0 ) 观察了东方蝾螈早期胚胎的发育过程。王朝芳 ( 1 9 8 0 ) 观察了蓝尾蝾螈的早期发育。武玮磷( 1 9 8 1 ) 用免疫酶标技术观察了东方蝾 螈胚胎肌肉t m 生成的时期和部位。高慧( 1 9 8 3 ，1 9 8 4 ) 研究了1 2 5 i 中胚层诱导蛋白 在东方蝾螈外胚层细胞内的作用部位，使用剂量及诱导时间和诱导强度；研究了 东方蝾螈外胚层细胞的细胞周期和细胞同步化；讨论了东方蝾螈外胚层细胞在阻 断细胞周期后的反应能力和不同时相的反应能力等。曾弥! 兰t ( 1 9 8 4 ，1 9 8 6 ，1 9 8 7 ) 报 到了东方蝾螈早期原肠胚在异源诱导中，诱导物质是通过内吞作用进入反应细胞 的：用电镜观察了经受诱导作用之后胚胎细胞的冷冻蚀刻复型膜，讨论了细胞间 隙连接子在信息传递上可能的作用，东方蝾螈细胞连接在神经管形成过程中紧密 连接和间隙连接在各个时期一直存在，而且他们是处于持续的形态变化之中。戴 荣禧( 1 9 8 6 ) 研究了表皮细胞与中枢神经系统联系的问题，讨论了r b 细胞的来源、 数量变化和位置变动等，认为r b 细胞是原始的感觉细胞。 丁小燕( 1 9 8 9 ) 用间 接免疫荧光法观察了结合蛋白在东方蝾螈胚胎发育过程中的生成时期和分布部 位。胡思t , ( 1 9 9 8 ) 研究结果表明光照对贵州疣螈胚胎发育的影响较小，水分影 响较大，潮湿环境较宜。徐艳玲( 1 9 9 8 ) 报道了温度对贵州疣螈胚胎发育的影响。 张学军( 1 9 9 9 ) 讨论了东方蝾螈瓶状细胞在原肠形成过程中的作用。谢锋( 2 0 0 1 ) 研 究了镇海棘螈早期个体发育等。从上述文献可以看出，对蝾螈科动物胚胎发育研 究较多的物种为东方蝾螈，对其它物种研究的较少或还没有研究，所以需要对其 研究或进行更进一步的研究。 生理学研究：戴荣禧( 1 9 8 2 ) 研究了东方蝾螈表皮细胞自发电活动的振幅和频 率，及其出现和消失的变化过程等。庄孝德( 1 9 8 2 ，1 9 8 5 ) 研究了中胚层在胚层表皮 传导中的作用，用异龄移植研究了有尾类胚胎表皮兴奋性传到能力的出现和消 失。陈艳华( 1 9 8 5 ) 研究了东方蝾螈胚胎表皮兴奋性在发育中的变化。武玮磷 ( 1 9 8 5 ，1 9 9 0 ，1 9 9 5 ) 用细胞内记录研究技术研究了东方蝾螈胚胎表皮细胞动作电 位的粒子依赖性；研究了能量代谢抑制剂对胚胎表皮细胞兴奋性的影响；记录了 东方蝾螈胚胎表皮细胞膜的静息电位，输入电阻与其兴奋性的关系。费梁( 1 9 8 7 ) 3 贵州师范大学2 0 0 9 届硕士学位论文 研究了蓝尾蝾螈的肢体再生情况。范三_ ) 1 1 ( 1 9 9 9 ) 观察了蓝尾蝾螈血液组织学。马 德滨( 2 0 0 3 ) 认为东方蝾螈红细胞和白细胞比爬行类的大，淋巴细胞比例最高，而 嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞比例极小等。 形态学研究：章菊i j y j ( 1 9 6 0 ) 观察了东方蝾螈的多精受精现象。曲韵芳( 1 9 6 4 ， 1 9 6 6 ) 研究了东方蝾螈的排精和纳精现象；观察研究了东方蝾螈生殖腺的周期性 变化，包括外形和内部结构两部分。苏星煌( 1 9 8 8 ) 观察了东方蝾螈胚胎早期发育 过程中细胞核超微结构。罗素元( 1 9 9 9 ) 用光镜和电镜观察了贵州疣螈精巢的显微 和超微结构。范三) 1 1 ( 1 9 9 9 ) 研究了无斑肥螈的骨骼系统。陆宇燕( 1 9 9 9 ) 对黑斑肥 螈、中国瘰螈、细痣疣螈和东方蝾螈部分机能形态学进行了研究等。郑中华( 2 0 0 4 ) 研究报道了镇海棘螈的精子结构，镇海棘螈和大凉疣螈的精子形态，镇海棘螈的 精子结构与其生殖习性的关系。李顺才( 2 0 0 5 ) 对东方蝾螈的外形和内脏进行了系 统研究等。 细胞遗传分析研究：施立明( 1 9 7 9 ) 制备了蓝尾蝾螈灯刷染色体并对其活体进 行了观察。朱季美( 1 9 8 1 ，1 9 8 5 ) 对东方蝾螈和黑斑肥螈的核型、c 带和免疫过氧化 物酶染色体进行了分析研究，制备了东方蝾螈灯刷染色体并绘图。杨玉华( 1 9 8 6 ， 1 9 9 0 ) 分别报道了红瘰疣螈、蓝尾蝾螈云南亚种、贵州疣螈、无斑肥螈和中国瘰 螈5 种蝾螈科动物的核型。谷晓明和高晓冬( 1 9 9 5 ，1 9 9 7 ，2 0 0 0 ) 先后报到了贵州疣 螈、细痣疣螈、无斑肥螈、蓝尾蝾螈和尾斑瘰螈的核型和c 带。 生态和行为学研究：费梁( 1 9 8 8 ，1 9 9 0 ) 研究了蓝尾蝾螈的繁殖生态；观察了 蓝尾蝾螈的食性和食量及耐饥时间。杨道德( 1 9 9 3 ) 对东方蝾螈的繁殖生态做了研 究。田应洲( 1 9 9 4 ，1 9 9 7 ) 报导了贵州疣螈的繁殖生态，对贵州疣螈的繁殖习性做 了较为系统的观察。辜永河( 1 9 9 4 ) 对贵州疣螈的夏季生态进行了研究。胡思玉 ( 1 9 9 5 ，1 9 9 8 ) 对贵州疣螈野外繁殖群体作了观察：对贵州疣螈的捕食行为和反捕 食行为进行了初步的观察；对贵州疣螈繁殖群体进行了初步调查。王延斌( 1 9 9 5 ， 1 9 9 9 ) 观察了贵州疣螈的繁殖习性；报到了贵州疣螈在贵州西部、西北部的分布 现状及环境影响。谢锋( 1 9 9 9 ) 报道了有尾类繁殖行为生态学研究的现状和未来。 徐金l j ( 2 0 0 0 ) 对无斑肥螈生殖腺季节性变化进行了初步研究。谢锋( 2 0 0 1 ) 报到了镇 海棘螈的产卵位点及其对繁殖成功率的影响。徐垒j ( 2 0 0 2 ) 研究了无斑肥螈的种群 结构和食性，对无斑肥螈的生态学进行了观察等。 4 贵州师范大学2 0 0 9 届硕士学位论文 分子系统学研究：余平( 1 9 9 2 ) 用聚丙烯酰胺凝胶电泳比较分析了潮汕蝾螈和 东方蝾螈7 种组织的乳酸脱氢酶和苹果酸脱氢酶同工酶谱。曾科文( 1 9 9 1 ) 对东方 蝾螈各组织l d h 同工酶的带谱分布进行了描述；探讨了蝾螈科演化及l d h 基 因在各组织中的特异性表达，提供了生化方面的资料。谷晓明( 2 0 0 0 ) 对贵州5 种 蝾螈几种组织的l d h 、e s t 同工酶进行了电泳分析等。 此外张作干先生( 1 9 3 5 ) 对我国蝾螈科动物的变异进行了研究；费梁( 1 9 9 2 ) 简述了镇海棘螈的研究概况、外形特征、生活习性、研究价值及其濒危现状；庞 家庆( 1 9 9 2 ) 对东亚蝾螈科区系的起源和区系的演化进行了讨论；何晓瑞( 1 9 9 8 ) 分 析了我国特有滇螈的灭绝及原因；周 步h ( 2 0 0 4 ) 报道了两栖动物种群衰退的研究进 展等。 1 2 瘰螈属研究文献综述 自从1 9 3 4 年瘰螈属模式种报道至今，国内外学者对瘰螈属物种，尤其尾斑瘰 螈的一般生物学特征、行为学、细胞遗传学、分子系统学、驯养情况及系统发育 等做了大量的研究： s p a r r e b o o m ( 1 9 8 1 ) 报道了尾斑瘰螈在饲养情况下的生殖行为和产卵方式，发 现：( 1 ) 雄体的交配行为有别于其它瘰螈；( 2 ) 卵常粘连成簇或成串，与属内其它 种在行为上有较大差异。 f r e y t a g ( 19 8 3 ) 依据头骨狭长骨化较弱、头背骨质脊棱发育普遍较差、吻极 宽扁的鉴别特征结合s p a r r e b o o m 的研究将尾斑瘰螈订为一新属a l l o m e s t r i t o n 庞家庆( 1 9 9 2 ) 认为a l l o m e s t r i t o n 应为瘰螈属的亚属较为适宜，这是因为：( 1 ) 尾斑瘰螈的性状特征符合以p d e l o u s t a l i 为模式种而给出的瘰螈属的特征；( 2 ) s p a r r e b o o m 的报道是在饲养情况下的观察，缺乏在自然条件下的观察资料作证 实；( 3 ) 解剖研究表明，瘰螈属各种骨骼形态差异较大，因此不应过分强调这种 差异的系统发育意义。 费梁( 1 9 9 9 ，2 0 0 6 ) 对蝾螈科各属的外部形态和骨骼形态作了对比研究，认为 尾斑瘰螈做为瘰螈属的一个种组为宜。 谷晓i j f j ( 1 9 9 7 ) 报道了尾斑瘰螈核型和c 带，染色体数为2 n = 2 4 ，包括9 对中部 着丝粒染色体和3 对亚中部着丝粒染色体( n o 7 、1 0 、i i ) ，其核型类似于国产其它 5 贵州师范大学2 0 0 9 届硕士学位论文 蝾螈科动物，都属单型的对称核型，再次证明蝾螈科动物的染色体进化相对稳定。 尾斑瘰螈与东方蝾螈、黑斑肥螈差异较小，与疣螈属、棘螈属的差异较大，尾斑 瘰螈的各染色体都显示弱的着丝粒带。 黄红武( 1 9 9 8 ) 报道了一起食用尾斑瘰螈肉而中毒致死的案例，说明尾斑瘰螈 为有毒动物，不可食用。 吕金海( 1 9 9 8 ) 研究了中国瘰螈的行为习性。 马军( 1 9 9 8 ) 的研究表明富钟瘰螈的舌和齿都比广西瘰螈的略发达，雄性消化 道远比雌性的长，个体的两肺长度差异也较后者大。 袁志冈j j ( 2 0 0 0 ) 对富钟瘰螈和广西瘰螈六种组织乳酸脱氢酶同工酶进行了比 较研究。 谷晓1 刃( 2 0 0 0 ) 用聚丙酰胺垂直板凝胶电泳技术对贵州疣螈、细痣疣螈、无斑 肥螈、蓝尾蝾螈和尾斑瘰螈的酯酶同工酶( e s t ) 和乳酸脱氢酶同工酶( l d h ) ：l 较 研究分析，结果表明尾斑瘰螈和蓝尾蝾螈有较近的亲缘关系，推测尾斑瘰螈是蓝 尾蝾螈和无斑肥螈之间的过渡类型。 王利民( 2 0 0 0 ) 报道了尾斑瘰螈的生活习性：尾斑瘰螈栖息在海拔10 0 0 m 以上 的山涧溪流所形成的水流平缓或静水的水潭和湾塘中，水域处着生有较茂密的矮 小灌丛和以禾本科植物为主的草丛。在夏季其活动捕食的高峰期是每日的2 0 ： 0 0 , - - - 2 1 ：0 0 ，活动场所多是它的捕食场所，尾斑瘰螈主要捕食鳞翅目、鞘翅目的 成虫和幼虫及螺、虾等一些低等的两栖动物。 李松( 2 0 0 0 ) 对尾斑瘰螈的骨骼系统进行了系统的解剖与观察，并详细的描述 了尾斑瘰螈各部分的骨骼的形态结构，为瘰螈属的分类、演化及动物实验提供了 完整的资料。 谢锋( 2 0 0 4 ) 报道了重庆地区酉阳县青华林场尾斑瘰螈新记录，与贵州雷山标 本比较，酉阳标本尾的相对长度较短；贵州雷山标本腹面橘红色有黑斑，黑斑的 数目大小变异颇大，酉阳标本则腹面颜色相同，但黑斑的变化不明显；贵州雷山 标本雄性尾鳍弱，而酉阳标本显著高起。 s h t m q i n gl u ( 2 0 0 4 ) 构建了中国瘰螈属的系统发育图，认为富钟瘰螈为有效 物种，有别于庞家庆( 1 9 9 2 ) 的形态分类，并研究表明尾斑瘰螈是这一单系起源组 里的最基本物种。 6 贵州师范大学2 0 0 9 届硕士学位论文 王延斌( 2 0 0 6 ) 模拟尾斑瘰螈的自然生境，以鱼虫干、金鱼颗粒饲料、水丝蚓、 昆虫幼虫等多样化食物为饲料，水温控制在1 5 - - 2 2 ( 2 左右，p h 值在5 - - 7 之间，尽 量满足其对水流的要求，可使其正常存活与生长，但未见生殖现象。 宋玉赞( 2 0 0 6 ) 报道了中国瘰螈在江西分布的新记录。 w e i s r o c ke ta 1 ( 2 0 0 6 ) 的分子系统学研究也支持l ue ta 1 ( 2 0 0 4 ) 的研究结果，认 为尾斑瘰螈是这一单系起源组里的最基本物种。并与其他中国瘰螈物种形成姊妹 群( 图2 ) 。 李松等( 2 0 0 s ) 报道了采于贵州省织金县的新种，依据独特的形态特征，将其 定名为织金瘰螈。赵海涛等( 2 0 0 s ) 也利用分子数据( c y t b ，n d 4 ) 对织金瘰螈种名的 有效性进行了证实。 李松等( 2 0 0 8 ) 报道了采于贵州省龙里县的新种，依据形态特征，将其定名为 龙里瘰螈。 厂胁u d o p 一g r o u p p c 柏嘲t u s 瘰螈属一 厂 广西瘰螈 p a r a m e s o t r i t o n1 l p g u a n g x i e n s i s l中国瘰螈种组j 中国瘰螈 i p h o n g b n g e n s j s 7 贵州师范大学2 0 0 9 届硕士学位论文 随着分子生物学技术在动物分类系统研究中的应用，许多学者对瘰螈属的分 类系统进行了更进一步的研究，如，l u e t a l ( 2 0 0 4 ) 构建了中国瘰螈属的系统发育 图，认为富钟瘰螈为有效物种，并研究表明尾斑瘰螈是这一单系起源组里的最基 本物种。w e i s r o c ke la 1 ( 2 0 0 6 ) 对瘰螈属更为广泛深入的分子系统学研究中认为 除老挝瘰螈之外的瘰螈属物种是单系起源，尾斑瘰螈是这一单系起源的最基本 物种，并与其他中国瘰螈物种形成姊妹群( 图2 ) 。 1 0 广肠毋们姗b r e v i p e s ( j i n l i a n s h a n ) 卅! ；q r 砌c 缈砌以l a b i a t u s 1 0 0 1 3 0 1 - - 心c 衄t r i t o nb r e v i p e s ( q i - l i - y a n g ) u! ：q 广一p a r a m e s o t r i t o ns p ( g u a n g d o n gp r o v i n c e ) 盟1 厂而万一l 砌r 口m 咖州娜c 口砌p “，z 嘲m s lnii1 o 广尸口，乜，z i 已s d f f d 刀d 匆石i 岱勉“ 蒜叫行砌r 口嬲舭门s p ( b a c k a np r o v i n c e ) 业l 同 p a r a m e s o t r i t o n f u z h o n g e n s i s 1 x 觋鳇一菱二眦， l 蕊广一p a r a m e s o t r i t o n c h i n e n s i s ( z h e j i a n gp r o v i n c e ) 8 4 爿l0 p a r a m e s o t r i t o nh o n g k o n g e n s i s ( h o n gk o n gi s l a n d ) 一- 升p a r a m e s o t r i t o nh o nr k o n g ( n e wtemtorry)5551 0 0 1 6 2 t a r a m e s o t r t t o nh o n g g o n g e n s t s ( n e w1 e m t o 一 裔l p a r a m e s o t r i t o nh o n g k o n g e n s i s ( l a n t a ui s l a n d ) 1 3 2 瘰螈属系统发育上存在的问题 1 瘰螈属是否为单系起源。c h a r te la 1 ( 2 0 0 1 ) 和l ue ta 1 ( 2 0 0 4 ) 依据m t d n a 部分序列，构建了中国瘰螈属的系统发育图认为瘰螈属是单系起源的，但是具有 相对较低的支持率，w e i s r o c ke la 1 ( 2 0 0 6 ) 的研究结果显示除老挝瘰螈外的瘰螈 属是单系起源的( 图2 ) ，所以瘰螈属的单系起源问题尚需进一步的证实。 2 对于尾斑瘰螈的分类地位，国内外一直都有较大的争议。s p a r r e b o o m ( 1 9 8 1 ) 认为其外部形态、生殖行为和产卵方式和属内的其它物种都有较大的差别。 f r e y t a g ( 1 9 8 3 ) 将尾斑瘰螈订为一新属a l l o m e s t r i t o n 。庞家庆( 1 9 9 2 ) 认为尾斑瘰螈作 为瘰螈属的一个亚属为宜，费梁( 2 0 0 5 ) 亦认为尾斑瘰螈是瘰螈属的一个种组。 3 庞家庆( 1 9 9 2 ) 提出广西瘰螈是德氏瘰螈的同物异名，所以广西瘰螈种名的 8 贵州师范大学2 0 0 9 届硕士学位论文 有效性需要进一步的证实。 4 龙里瘰螈( 李松等，2 0 0 8 ) 和织金瘰螈( 李松等，2 0 0 8 ) 的确定是以外形、头骨 特征和染色体组型为依据，缺乏分子方面数据的支持。因此，龙里瘰螈和织金瘰 螈的分类地位及它们在瘰螈属中的系统发育地位，都需要进一步的研究。 5 我们最近发现的荔波瘰螈待定种( p a r a m e s o t r i t o n s p ) ，虽然在形态上符合 瘰螈属模式种的基本特征，又有明显区别于其它瘰螈属物种的形态特征，但是它 在瘰螈属中的分类地位，是否为新种，都需要进一步的研究。 第二章贵州省瘰螈属的分布概况 2 1 贵州地理概况 贵州是我国喀斯特分布面积甚广，是面积比例最大的省区之一，达6 1 9 7 ， 形态类型多样，被称为中国的“喀斯特省一，地处副热带的东亚大陆，位于东经 1 0 3 03 6 l 一1 0 9 03 3 ，北纬2 4 03 8 _ _ 2 9 01 4 7 ，东西跨度5 05 7 ，南北跨度4 03 6 ，距 海洋4 0 0 余公里，是比较著名的季风区。由于贵州处于云贵高原的东斜坡上，地 势自西向东逐渐降低，威宁一带，海拔2 4 0 0 余米，而铜仁、锦屏一带却降到海 拔约2 0 0 米，由于东濒两湖盆地、南连桂北丘陵、西接云南高原、北临四川盆地， 是以东西斜坡之南北，地形又复外倾，形成中部隆起。在这样的地形、地势下， 冷锋多从偏北、东北方入侵，而且常在贵州中部、南部形成静止锋，带来持续阴 雨。 在贵州可见到除冰川喀斯特以外的世界上所有的喀斯特地貌形态类型，如地 表的石崖溶洞、漏斗、洼地、落水洞、竖井、盲谷、槽谷、干谷、溶盆、石林、 峰丛、峰林、溶丘、天生桥、穿洞、喀斯特瀑布、湖泊、溶潭、多潮泉、地下溶 洞、地下暗河、伏流、地下潭、湖泊、瀑布，洞穴水流形成的钙质沉积形态及洞 穴溶蚀形态以及多种复合地貌类型，如溶原坡地、峰林盆地、峰林谷地、峰丛谷 地和峰丛洼地等亚热带喀斯特地貌类型。 贵州全省气候温和，雨量充沛，冬无严寒、夏无酷暑。上述种种自然条件， 均有利于动物的生存和繁衍，也特别适宜蝾螈的生存，也被成为中国蝾螈科动物 的分化中心( 张荣祖，2 0 0 4 ) ，为我们的实验提供了充分的材料。 9 贵州师范大学2 0 0 9 届硕士学位论文 2 2 贵州瘰螈物种生存环境及分布 2 2 1 尾斑瘰螈生存环境及分布 尾斑瘰螈主要栖息再海拔8 0 0 米以上的山间溪流中，水质良好，清澈见底， 水底多有石块堆积，堆积石块的缝隙常常是尾斑瘰螈的藏身之处。水潭近岸处水 底沉积腐