（微生物学专业论文）两株海洋真菌生理活性物质的初步研究.pdf

摘要 近年来海洋真菌已成为研究活性天然产物的重要资源，已从中得到了一定数 量的具有生理活性的化合物，由于其独特的生境，为了适应海水中盐度、压力、 低温等生存条件，有可能会产生一些具有独特化学结构的次级代谢产物，从中有 可能发现与现有药物不同的新的活性物质，成为治疗肿瘤、感染、老年痴呆等顽 固性疾病的前体药物。 本论文对两株海洋真菌c b 2 和h l y 2 的次级代谢产物进行了研究。菌株 c b 2 经i t s 分析及形态鉴定，确定为a r t i c u l o s p o r as p 。对两株菌的次级代谢产物 展开了初步研究。从菌株c b 2 中得到了6 个化合物，其中2 个化合物c b - 4 和c b 6 经结构解析确定为4 ，6 二羟基2 ，3 二甲基苯甲酸甲酯和3 ( 4 羟基苯甲基) 哌嗪 2 ，5 二酮。从菌株h l y 2 中得到了4 个化合物，h 2 和h 3 是两个同系物，h 2 的 化学名称为7 羟基4 ，6 - 二甲基3 h - 异苯呋喃1 酮，h 3 的化学名称为7 甲氧基- 4 ， 6 二甲基3 h - 异苯呋喃1 酮，都为异苯并呋喃类的化合物，其中h 2 的晶体结构 为首次报道。h 4 是一个已知的抗生素n e c t r i a p y r o n ，化学名称为4 甲氧基3 甲基 6 ( 1 甲基丙烯基) 吡喃2 酮。h 一6 为麦角甾醇类的化合物。 对其中的四个产量比较大的化合物进行了生理活性的测试，具有抗肿瘤活性 的是h 一2 和h 一3 ，对r a j i 细胞的i c 5 0 分别为1 5 p g m l 和7 8 1 a g m l ，具有抗氧化 活性的是h 2 、c b 4 和c b 6 ，对d p p h 的清除率的i c 5 0 分别是6 1 2 1 a g m l 、 1 5 8 1 a g m l 和2 0 0 1 t g m l 。c b - 4 和c b 6 有微弱的抗金黄色葡萄球菌活性，m i c 均为1 0 0 l a g m l 。h 2 和c b 一6 有微弱的抗橙色青霉的活性，m i c 均为2 0 0 1 a g m l 。 本论文还对来自菌株h l y 2 的化合物m y e o e p o x y d i e n e 的发酵条件进行了优 化，通过正交设计，用琼脂表面发酵液体发酵两种方式，各进行了2 5 次实验，得 到了最优的培养基配方。在液体发酵条件下最佳培养基为：马铃薯l o o g l ，海水 2 0 0 m l l ，葡萄糖1 0 0 9 l ，乳糖5 0 9 l ，磷酸二氢钾0 5 m m o l l ，硫酸铵1 9 l ；琼 脂表面发酵的是：马铃薯2 5 0 9 l ，海水3 0 0 m l l ，葡萄糖3 0 9 l ，乳糖5 0 9 l ，磷酸 二氢钾0 6 5m m o l l ，硫酸铵l g l 。该化合物的产量由原来普通p d 培养基液体发 酵的1 7 m g l ，上升至1 1 - j 3 6 6 m g l 和5 2 1 m g l ，分别提高了2 倍和1 6 倍。对两种发 酵条件下产量、生物量和培养基组分的变化进行了研究，发现两种方式下，h l y - 2 对碳源、氨态氮和磷酸盐的利用上有一些区别。 用正交设计中得到的最佳培养基，琼脂表面发酵菌株h l y - 21 0 l ，通过r p 1 8 反相硅胶柱层析和重结晶等技术，得到纯化合物m y c o e p o x y d i e n e 约1 5 9 。在急性 毒性实验中，化合物m y c o e p o x y d i e n e 对小鼠的l d 5 0 为1 2 5 9 8m g k g 体重，对小鼠 肉瘤细胞s 一1 8 0 的体内抑瘤实验，e d s o 为1 1 8 7 m g k g 体重，治疗指数达到了1 0 6 1 。 与目前临床上的一些抗癌药物相当。对接种于裸鼠的人胃癌细胞b g c 8 2 3 也表现 出了良好的抑瘤活性，在1 4 m g k g 的剂量时，抑制率达到了4 2 6 2 ，并且没有引 起动物体重下降。说明m y c o e 对人类肿瘤也是有效的，对该药今后的研究开发有 重要意义。 对化合物m y e o e p o x y d i e n e 的抑瘤机理进行了初步研究。通过形态观察、流式 细胞术、彗星电泳和d n a 梯度电泳几种方式，发现该化合物对r a j i 细胞抑制并不 是诱导凋亡，有可能是使细胞坏死或类似于坏死的一些方式。 本文结果表明，两株海洋真菌都有较好的生理活性，其次级代谢产物都有继 续研究的意义，化合物m y c o e p o x y d i e n e 有潜力成为新型的抗肿瘤药物。 关键词：海洋真菌；培养基优化；m y c o e p o x y d i e n e ：抗肿瘤活性 2 a b s t r a c t m a r i n ef u n g u sh a sb e c o m ea ni m p o r t a n ts o u r c eo fb i o a c t i v en a t u r a lp r o d u c t ， r e c e n t l y t o d a yt h e r ea r ea b o u t3 0 0n e wc o m p o u n d sd e r i v e df r o mm a r i n ef u n g i b e c a u s eo fi t s u n i q u el i v i n ge n v i r o n m e n t ，m a r i n ef u n g u sh a sp r o d u c e ds p e c i a l m e t a b o l i t e s 、析mu n u s u a lc h e m i c a ls t r u c t u r e t oa d a p tt h el i v i n gc o n d i t i o ns u c ha s s a l i n i t y , h i g hp r e s s u r ea n dl o wt e m p e r a t u r e f o rt h e s el a s o n s ，t h em e t a b o l i t e sf r o m m a r i n ef u n g u sm a yp o s s e s sn e wb i o a c t i v i t i e so rn o v e lc h e m i c a ls t r u c t u r e s s e c o n d a r ym e t a b o l i t e sf r o mt w om a r i n ef u n g is t r a i n sw e r eo b s e r v e di nt h i ss t u d y t h ee n t i r er e g i o ni t s1 5 8 s i t s 2o fc b - 2w a sa m p l i f i e db yp c r a s s o c i a t e dw i t h m o r p h o l o g i c a lc h a r a c t e r , c b - 2 w a si d e n t i f i e d 邪a r t i c u l o s p o r a s p e m p l o y i n g d i f f e r e n ti s o l a t i o na n dp u r i f i c a t i o nm e t h o d s ，s i xc o m p o u n d sw e r ei s o l a t e df r o mt h e f e r m e n t a t i o nb r o t ho f c b - 2 ，t w o o ft h e mw e r e m e t h y l4 ，d d i h y d r o x y 一 2 ，3 一d i m e t h y b e n z o a t e ( c b 一4 ) a n d3 一( 4 - h y d r o x y b e n z y l ) - p i p e r a z i n e - 2 ，5 - d i o n e ( c b 一6 ) f o u rc o m p o u n dw e r ei s o l a t e df r o mh l y - 2 ，t h e yw e r e7 - h y d r o x y - 4 ，6 - d i m e t h y l 一3 肛 i s o b e n z o f u r a n l - o n e ( h - 2 ) ，7 - m e t h o x y - 4 ，6 d i m e t h y l 一3 h - i s o b e n z o f u n a n - 1 o n e ( h _ _ 3 ) ， n e c t r i a p y r o n ( h 一4 ) ，e r g o s t e r o l ( h - 6 ) f o u ro fa b o v ec o m p o u n d sw e r es t u d i e df o rt h e i rb i o a c t i v i t i e s ，i n c l u d i n g a n t i m i c r o b i a l ，a n t i - t u m o r , a n da n t i o x i d a n ta c t i v i t i e s h 2a n dh 一3s h o w e da n t i - t u m o r a c t i v i t ya g a i n s tr a j ic e l ll i n e 、析mt h ei c 5 0v a l u ea s15 1 a g m la n d7 8 1 a g m l r e s p e c t i v e l y h 一2 ，c b 一4 ，a n dc b 一6s h o w e da n t i o x i d a n ta c t i v i t ya ss c a v e n g i n go f d p p hr a d i c a l s 谢t l lt h ei c 5 0 v a l u ea s6 1 2 1 a g m l ，1 5 8 p g m la n d 2 0 0 1 a g m l r e s p e c t i v e l y c b - 4a n dc b 6s h o w e dm o d e r a t ea c t i v i t ya g a i n s t & a u r e n sw i t l lt h ei c 5 0 10 0 p g m lr e s p e c t i v e l y h - - 2a n dc b - 6s h o w e dm o d e r a t ea c t i v i t ya g a i n s tp e n i c i l l i u m a v e l l a n e u m 、析t ht h ei c 5 0v a l u e 弱2 0 0 1 a g m lr e s p e c t i v e l y p r o d u c t i o no fa n t i t u m o ra g e n tm y c o e p o x y d i e n ew a s o p t i m i z e db yo r t h o g o n a l d e s i g n t w ot y p e so ff e r m e n t a t i o nw e r et e s t e d ，w h i c ha r ea g a rs u r f a c ea n ds u b m e r g e d f e r m e n t a t i o n t h er e s u l ts h o w st h a tt h eo p t i m a lc o n d i t i o nf o rm y c o e p o x y d i e n e p r o d u c t i o ni n c l u d e dp o t a t o2 5 0 9 l ，s e aw a t e r3 0 0 m l l ，g l u c o s e3 0 9 l ，l a c t o s e5 0 9 l ， 3 k h 2 p 0 40 6 5 m m o l l ，( n h 4 ) 2 8 0 4lg li nt h ea g a rs u r f a c ec o n d i t i o n t h ep r o d u c t i o n o fm y c o e p o x y d i e n er e a c h e d5 21m g l ，a n di te q u a l e dt o16t i m e so ft h ep r o d u c t i o ni n c u s t o m a r yh a l f - s e a w a t e rp dm e d i u m t h ed i f f e r e n c e so fp r o d u c t i o n ，b i o m a s s ，a n d c o n s u m i n gr a t eo fs u g a r , a m i n oa c i d ，a n dp h o s p h a t eb e t w e e na g a rs u r f a c ea n d s u b m e r g e df e r m e n t a t i o nw e r es t u d i e d s t r a i nh l y - 2w a sf e r m e n t e db yo p t i m a lm e d i u mi na g a rs u r f a c em a n n e rf o r10 l ， a n d1 5 9m y c o e p o x y d i e n ew e r eg a i n e d t h ei nv i v ot e s ts h o w e dt h a tt h ec o m p o u n d h a st h et o x i c i t yt om o u s ew i t hl d s o12 5 9 8 m g k g ，a n dt h ea n t i - t u m o ra c t i v i t y i n h i b i t e dm i c es a r c o m as - 18 0c e l ll i n e 、) l ，i t l le d s o11 8 7 m g k g t h et h e r a p yi n d e xw a s lo 61 m y c o ea l s os u p p r e s s e dh u m a ng a s t r i cc a n c e rb g c - 8 2 3x e n o g r a f lo nn u d em i c e ，t h e i n h i b i t i o nr a t ew a s4 2 6 2 a tt h ed o s eo f1 0 m g k gw h i c he q u a l st o1 1 2o fl d s 0 ，a n dt h em i c e b o d yw e i g h to ft h a tg r o u ph a dt h eb i g g e s ti n c r e a s e p r i m a r ya n t i - t u m o rm e c h a n i s mo fm y c o e p o x y d i e n ew a sa l s os t u d i e d t h er e s u l t s o fm o r p h o l o g i c a lo b s e r v a t i o n ，f c m ，c o m e ta s s a y , a n dd n al a d d e re l e c t r o p h o r e s i s s h o w e dt h a tt h ec o m p o u n dd i dn o ti n d u c ea p o p t o s i so ft u m o rc e l l t h ee x a c t m e c h a n i s mo fi t sa n t i t u m o ra c t i v i t y , m a y b en e c r o s i so rs o m e t h i n ge l s e ，i ss t i l l p u z z l e d i ti sn e e d e dt oh a v ef u r t h e rs t u d y o u rs t u d yi n d i c a t e dt h a tm e t a b o l i t e sf r o ms t r a i nc b - 2a n dh l y - 2w e r ew o r t ht o b er e s e a r c h e di n d e p t h c o m p o u n dm y c o e p o x y d i e n eh a dt h ep o t e n t i a l i t yt ob ean e w a n t i t u m o rd r u gi nc l i n i c k e yw o r d s ：m a r i n ef u n g i ；m e d i u mo p t i m i z a t i o n ；m y c o e p o x y d i e n e ；a n t i - t u m o r 4 厦门大学学位论文原创性声明 兹呈交的学位论文，是本人在导师指导下独立完成的研究成 果。本人在论文写作中参考的其他个人或集体的研究成果，均在 文中以明确方式标明。本人依法享有和承担由此论文产生的权利 和责任。 声明人c ：墨蒡雪 刎年7 月夕日 厦门大学学位论文著作权使用声明 本人完全了解厦门大学有关保留、使用学位论文的规定。厦 门大学有权保留并向国家主管部门或其指定机构送交论文的纸 质版和电子版，有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允 许论文进入学校图书馆被查阅，有权将学位论文的内容编入有关 数据库进行检索，有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。保密 的学位论文在解密后适用本规定。 本学位论文属于 1 、保密() ，在年解密后适用本授权书。 2 、不保密弋 ( 请在以上相应括号内打“4 ) 日期：m 年7 月夕日 日期：冰泸7 月厂p e t 前言 1 土 刚舌 1 海洋真菌次级代谢产物的研究概况 1 1 研究背景 人类对海洋生物药用价值的认识可以追溯到几千年前。早在公元前3 世纪的 皇帝内经中就记载有以乌贼骨为丸、饮以鲍鱼汁治疗血枯。从我国最早的药 物专著神农本草经、李时珍的本草纲目到清朝的本草纲目拾遗，历经 2 0 0 0 多年，共收录海洋药物1 1 0 余种，成为我国中医中药宝库中的一个重要组 成部分。近代的 ：全国中草药汇编收录了海洋药物1 6 6 种， ：中草药大辞典 亦收录海洋药物1 4 4 种。海洋药物的研究是以海洋天然产物的研究作为基础的。 而海洋天然产物的研究则是起源于陆生生物的化学成分的研究，是陆生生物天然 产物研究领域的拓展和延伸。2 0 世纪中叶，由于天然有机化学的迅猛发展，在 分离技术和结构分析技术特别是光谱技术方面的长足进步，促进天然产物的研究 取得了迅猛发展，使得从海洋生物中获取含量很低、结构复杂的化合物变得不再 非常困难。目前，开发利用海洋生物资源已成为世界各国竞相研究的一个重要领 域和发展方向。例如，1 9 4 5 年从海洋污泥中分离到顶头孢霉菌，从中发现了头 孢菌素，以后发展成系列的头孢类抗菌素，这一研究成果可认为是海洋药物开发 最早的成功实例。此后，从海绵中发现了抗病毒药物a r a - a 。上世纪6 0 年代发现 了河豚毒素并确定了其化学结构，相继完成了河豚毒素的人工合成。1 9 6 9 年 s p r i g g i n s 从加勒比海的柳珊瑚p l e x a u r ah o m o m a l l a 中分离获得前列腺素1 5 r p g a 2 。上述这些重要发现极大地刺激了科学家对海洋生物次生代谢产物研究的 兴趣【l j 。 19 4 5 年，g i u s e p p eb r o t z u 开始对海水中的样品进行研究，在s a r d i n i a 下水道 出口寻找产生抗生素的微生物。b r o t z u 假设：水的自然净化功能可能部分是由于 水中的微生物对细菌的拮抗。他从海水中分离得到了一株与顶头孢霉相似的真 菌，具有抗细菌活性，这个观察报告通向了头孢菌素c 的发现之路，打开了海 洋真菌的研究之门【伺。 在随后的几十年，放线菌成了药物开发的焦点，但是，随着1 9 7 6 年环孢菌 前言 素a 从t o l y p o c l a d i u mi n f l a t u m 分离出来，19 8 3 年被批准作为临床应用的免疫抑 制剂，真菌研究的兴趣又复苏了。然而，由于重复发现了大量以前已经报道过的 化合物，人们把研究目标从传统的陆地资源，转向了其他比较独特的生境，比如 说海洋，由于生存条件的特殊性，海洋真菌具有产生新颖的次级代谢产物的潜力。 虽然头孢菌素c 是由海洋真菌分离得到的，但是关于海洋真菌化学方面的 报道在9 0 年代以前都很少。在1 9 7 0 年和1 9 9 0 年之间只有很少的报道，但是 到了1 9 9 0 年以后，报道数量呈指数性增长。在对海洋真菌的研究过程中，已经 发现了超过2 7 2 个新化合物m l ，其中很多具有全新的骨架，因此，有足够的证 据证明，海洋真菌是潜在的药物先导化合物的丰富资源。近年来海洋真菌被看作 是新颖的生物活性天然产物的丰富来源。这些微生物生长在特殊的和极限的环境 中，因此它们有可能具有产生特殊次级代谢产物的能力。一般认为，真菌的次级 代谢产物有可能是化学防御的手段，以竞争生存物质 6 1 。j e n s e n 和f e n i c a l 还认 为，海洋真菌产生的这些次级代谢产物可能是由于对这种独特环境生存压力的适 应川。 海洋中的真菌被分为专性海洋真菌和兼性海洋真菌，专性海洋真菌就是只能 在海洋或河口生长的真菌；而兼性海洋真菌就是来自淡水或陆地，但是可以在天 然海洋环境中生长的真菌。 1 2 海洋真菌生物活性的多样性 近几年，随着海洋真菌次级代谢产物的研究深入，越来越多的化合物被发现， 并且其中有很多具生理活性的多样性【1 9 】，如抗肿瘤、抗菌、抗病毒、抗真菌、免 疫调节剂、酶抑制剂等，见表1 。 海洋真菌的产生的化合物，比如s a r g a s s a m i d e 、h a l i m i d e 和a v r a i n v i l l a m i d e 都表现出了选择性的肿瘤细胞抑制活性，在体内实验中具有抑制p 3 8 8 淋巴白 血病的活性。更重要的是，这些化合物每一个都具有独一无二的特征，如， a v r a i n v i l l a m i d e 选择性的抑制l n c a p 孕酮依赖型的前列腺癌。上述几个潜在药 物中的两个已经取得药品生产的许可证并进入临床前研究 2 1 。另外，由海绵 j a s p i s ( 可产生环缩肽j a s p a m i d e ) 中得到的未知真菌中，分离到了两类次级代谢 产物。第一类包含有氯倍半烯萜，c h l o r i o l i n sa ，b 和c ( 3 】，与革盖菌素b 和二氢革 盖菌素c 相近，尽管化合物c h l o r i o l i n s 在由n ci 进行的以疾病为导向的活性筛 2 前言 表1 来自海洋真菌的生物活性物质 t a b 1b i o a c t i v ec o m p o u n d sf r o mm a r i n ef u n g i m c t a b o l i t e ( s ) s o u r c ec l a s so f c o m p o u n d a c t i v i t y r e p h o m o p s i d i np h o m o p s i ss p ( o b t a i n e d s h o w e d 锄l c 翔v a l u eo f 【2 7 1 f r o mas u b m e r g e d5 7 p mi am i c r o t u b u l e【1 9 1 m a n g r o v eb r a n c h ) a s s e m b l y i n s u l i c o l i d ea a s p e r g i l l u sv e r s i c o l o r s c s q u i t c r i m n o i d s h o w e dam e a nl c 挪o f 【3 0 】 9 a , 1 4 - d i h y d r o x y - 6 肛 i s o l a t e d n i t r o h e n z o y le s t e r s 1 1p g m li nt h e 【3 1 】 n i u - o h e n z o y l c i n n a m o l i d e f l o r at h es u i 内i c co f t h en a t i o n a lc a n c e r c a r i b b e a ng r e e na l g ai n s t i t u t e s6 0c e l l l i n e p e n t c i l l u s v e n d c o p i t a t u j l e p t o s i nf a m i l yc o n t a i n1 9 m e m b e r s l u n a t i n c y t o s k y r i na s c r a g i k i n o n ea u l o c l a d o l l e p t o s p h a e r i as p d i m c r i c o u p s - 4i s o l a t e dt i t a nt h e d i k e t o p i p e r a z i n 矗 m a r i n ea l g as a r g a x s u m t o r t i l e c u r v u l a r i al u n a t a ( i s o l a t e df i x x nt h es p o n g e n i i p h a r o so l e m d a ) u n i d e n t i f i e d m a r i n e - d e r i v e d f u n g u s m i c r o s p h a e r o p s i ss p ( d e r i v e df r o r a h es p o n g em y x i l l a i n c r u s t a n s ) z o p f i c l l al a t i p e s u l o c l a d i u mb o t r y t i s o b t a i n e df r o ms p o n g e m y x i l l ai n c r u s t a n s a n t h r a c y c l i n cr e l a t e d p e n t a c y c l i cc o m p o u n d e r e m o p h i l a n e d e f i v 剐慨 p y r r o l i d i n o n c d e r i v a t i r e 3 t h ep o t e n c yo f t h e l e p t o s i n sa g a i n s ta p 3 8 8 l e u k e m i ac e l ll i n er a n g e d f r o ml o wn g m lt ol o w 咖l s h o w e da c d v i t ya g a i l l ! s t s m ”髓堪e h e n c h 证 c o l t 雒一最s 翟b t i l i s m o d e s ta n t i b a c t 翻柚 a c t i v i t ya g a i n s t s 珊i 坝堪o o 删蜘l ) ，m 1 u t c u s ( 2 0 p g m l ) , 洲c r i u mx c r o s i s ( 2 0 蚓m l ) a n db s u b t i l i s ( 4 l 瑚m i l ) a n t i f u n g a la c t i v i t y 驾阚u s t i l a g ov i o l a c e a a n dm y c o t y p h a m i c t o s p o r a 址5 0i gl e v e l i n h i b i t sn e m a t o s p o r a c o r y l ia n d s a c c h a r o m y c e s c e f t _ v i s i a e w i t l l m i cv a l u e ss t a r t i n ga t2 i g n 柚 p 5 6 1 c kt y r o s i n ck i n a s e i n h i b i t o r 【1 明 3 4 1 【3 6 1 【3 7 】 【4 l 】 【4 2 】 【4 3 】 前言 选中没有活性，但是革盖菌素b 对人乳腺癌t 4 7 d 细胞和中枢神经系统肿肿瘤 s n b 7 5 有细胞毒活性【4 】。从b a h a m a s 岛附近的红树林栖息地的一个漂浮木样上 分离到的海洋真菌c n c - 4 7 7 以海水为基质进行发酵后，得到两类化合物， n e o m a n g i c o l sa - c 和m a n g i c o l sa g 。n e o m a n g i c o l sa c 具有未报道过的c 骨 架结构，其中n e o m a n g i c o l sa 对人乳腺癌细胞株m c f 7 和人结肠癌细胞株 c a c o 2 的i c 5 0 分别为4 9 “m 和5 7 1 t m ，n e o m a n g i c o l sb 对该细胞株的i c 5 0 2 7 1 x m 2 1 1 。s a n s a l v a m i d e 是从一株海洋真菌中发现的一个新化合物，见图1 ， 美国国家癌症研究所( n c i ) 测定了其对6 0 种细胞株的细胞毒活性，平均i c 5 0 为2 7 4 “卧n l ，其对结肠癌细胞株c o l 0 2 0 5 和黑色素瘤细胞株s k m e l 2 的 i c 5 0 分别为3 5 和5 9 n g m l ，这一数据比f d a 核准的一些抗肿瘤剂表现出的 细胞毒活性还要高【2 2 1 。中山大学的林永成组从南中国海红树林真菌# 7 3 2 的发酵 液中分离得到的新化合物e n n i a t i ng 具有抗肝癌h e p s 7 4 0 2 的活性，e d s o 为 1 2 1 x g m l l 2 4 1 。同组李厚金博士从红树植物内生真菌# 2 5 0 9 中分离得到了一个新 的化合物e r g o s t a - 8 ( 9 ) ，2 2 d i e e 一3 ，5 ，6 ，7 一t e t r o l ( 3 1 3 ，5 a ，6 p ，7 a ，2 2 z ) ，其对正常人肝细 胞株l 0 2 的i c 5 0 为1 3 6 2 1p g m l ，对人肝癌细胞株b e l 7 4 0 2 和人大细胞肺癌 细胞株n c l l 4 4 6 0 的i c 5 0 分别为8 4 4 5 p g m l 和5 0 3p g m l 。这种选择性的细 胞毒性具有很高的研究价值【2 5 1 。m i c h i o 等从浸没的木质样品中分离得到的一株 海洋真菌m y r o t h e c i u mr o r i d u m 能产生一种新的杆孢菌素，1 2 ，1 3 d e o x y r o r i d i n e ，该化合物对h l 6 0 和l 1 2 1 0 细胞株的i c 5 0 分别为2 5 和1 5 n g m l t 2 7 1 。从 p o h n p e i 的珊瑚礁采集到的一个红树植物浸没枝条样品，分离到的一种茎点霉 ( p h o m o p s i ss p ) ，发酵液分离得到的化合物p h o m o p s i d i n 可以抑制微管集合， i c 5 0 为5 7 p m ，并对其生物合成途径及抗微管聚合活性机理进行了深入的研究。 由海洋真菌产生的抗细菌化合物也呈上升的趋势。p e s t a l o n e ，见图2 ，是从 海洋真菌p e s t a l o t i as p 分离到的一种氯苯甲酮类化合物，对耐甲氧西林的金黄 色葡萄球菌的m i c 为3 7 n g m l ，对耐万古霉素的粪肠球菌的m i c 为7 8 n g m l ， 具备进一步研究开发成为抗感染药的实力。有趣的是，这种化合物只有在与单细 胞的海洋细菌c n j 3 2 8 共培养的时候才能产生，有可能这个抗生素是为了与细菌 竞争产生的【8 】。s p e r a d i n ea ，见图2 ，是2 0 0 3 年由m a s a s h it s u d a 等从海洋真菌 a s p e r g i l l u st a m a r i i 中分离到的一个新五元环羟吲哚生物碱，是环匹克尼酸类化 4 前言 合物，其对m y c r o c o c c u sl u t e u s 的m i c 为16 7 p g m l l 9 1 。z o p f i e l l a m i d ea 是 p y r r o l i d n o n e 的衍生物，分离自专性的海洋子囊菌z o p f i e l l al a t i p e s ，能抑制革兰 s a n s a l v a m i d e a n e o m a n g i e o l sa 、b b n e o m a n g i e o l sc。phonopsidinc 图1 来自海洋真菌的抗肿瘤化合物结构 f i g 1c h e m i c a ls t r u c t u r eo fc o m p o u n di s o l a t e df r o mm a r i n e - d e r i v e df u n g i s h o w i n ga n t i t u m o rp r o p e r t i e s 资料来源：a ：g i l b e r tnb e l o f s k y , p a u lrj e n s e n ，w i l l i a mf e n i c a l s a n s a l v a m e d e ：an e wc y t o t o x i cc y c l i c d e p s i p e p t i d ep r o d u c e db yam a r i n ef u n g u so f g e n u sf u s a r i u ml j l t e t r a h e d r o nl e t t e r s , 1 9 9 9 , 4 0 ：2 9 1 3 - 2 9 1 6 b ： m a t t h e wkr e f i n e r , p a u lrj e n s e n , w i l l i a mf e n i e a l m a u g i c o l s ：s t r u c t u r ea n db i o s y n t h e s i so f an e wc l a s so f s e s t e r t e r p e n ep o l y o l sf r o mam a r i n ef u n g u so f t h eg e n u sf u s a r i u m l j j o r g c h e m , 2 0 0 0 , 6 5 ：4 8 4 3 - 4 8 5 2 c ： k o b a y a s h ih m e g u r os ，y o s h i m o t ot n a m i k o s h im a b s o l u t es t r u c t u r e ，b i o s y n t h e s i s , a n da n t i - m i c r o m b u l e a c t i v i t yo f p h o m o p s i d i n , i s o l a t e df r o mam a r i n e - d e r i v e df u g u sp h o m o p s i ss p 1 j 1 t e t r a h e d m n , 2 0 0 3 ，5 9 , 4 5 5 - 4 5 9 氏阳性菌b a c i l l u sb r e v i s , b a c i l l u ss u b t i l 趣al i c h e n i f o 朋i s , c o r y n e b a c t e r i u m i n s i d i o s u m , m i c r o c o c c u sl u t e u s , m y c o b a c t e r i u m p h l e i , a r t h r o b a c t e rc i t r e u s 以及链霉 菌和革兰氏阴性菌醋酸钙不动杆菌，对这些菌的m i c 在2 1 0 t t g m l 之间【1 0 1 。分 离自海草的海洋真菌k i r s c h s t e i n i o t h e l i am a r i t i m a 能发酵产生一种芳香醛类的化 合物，a s c o c h i t a l ，见图2 ，其对枯草芽孢杆菌的m i c 为5 0 0 n g m l t 4 6 1 。m o d i o l i d e s a b ，见图2 ，是分离自h o r s e - m u s s e l 的海洋真菌p a r a p h a e o s p h a e r i as p n 119 大 环内酯类抗生素，对m i c r o c o c c u sl u t e u s 的m i c 为16 7 t t g m l t 叭j 。 5 前言 1 r = m o 2 r = h p e s t a l o n e a a s c o c h i t a l 。 l ：冀* 1 4 聿：r 一硝m 的i c ；羽c o m o d i o l i d e sa d 掳 s p e r a d i n ea b m o d i o l i d e sb d 图2 来自海洋真菌的抗菌活性物质的化学结构 f i g 2c h e m i c a ls t r u c t u r eo fc o m p o u n df r o mm a r i n e - d e r i v e df u n g is h o w i n g a n t i b a c t e r i a lp r o p e r t i e s 资料来源：a ：c u e t om ，j e n s e np r , k a u f f m a nc ，f e n i c a lw ，l o b k o v s k ye ，c l a r d yj p e s t a l o n e , an e wa n t i b i o t i c p r o d u c e db yam a r i n ef u n g u si nr e s p o n s et ob a c t e r i a lc h a l l e n g e 明jn a tp r o d , 2 0 0 1 ，6 4 ：1 4 4 4 - 1 4 4 6b ：t s u d am m u g i s h i m at ，k o m a t s uk s o n et t a n a k am ，m i k a m iy ，s h i r om ，h i r a im ，o h i z u m iy ，k o b a y a s h ij s p e r a d i n e 八an e wp e n t a c y c l i co x i n d o l ea l k a l o i df r o mam a r i n ed e r i v e df u n g u sa s p e r g i l l u st a m a r i il j l t e t r a h e d r o n2 0 0 3 a , 5 9 ：3 2 2 7 _ 3 2 3 0c ：t i msb u g n i c h r i smi r e l a n d m a r i n e - d e r i v e df u n g i ：ac h e m i c a la n db i o l o g i c a ld i v e r s