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文档简介
国家高等职业教育食品加工技术专业教学资源库子项目,食品检验工,食品中亚硝酸盐的含量测定(分光光度法),主讲教师:韩晋辉,国家高等职业教育食品加工技术专业教学资源库子项目,食品中亚硝酸盐的含量测定,掌握样品制备、提取的基本操作技能掌握分光光度计的使用方法掌握比色法测定亚硝酸盐的操作要点学习标准曲线的制作以及数据处理,一、实验目的,食品中亚硝酸盐的含量测定,样品经沉淀蛋白质,除去脂肪后,在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后,生成的重氮化合物,再与盐酸萘乙二胺偶联成紫红色的重氮染料,产生的颜色深浅与亚硝酸根含量成正比,可以比色测定。,二、实验原理,食品中亚硝酸盐的含量测定,1.仪器比色管,移液管,分光光度计,小型绞肉机2.试剂饱和硼砂溶液、0.4对氨基苯磺酸溶液、0.2盐酸萘乙二胺溶液、亚硝酸钠标准溶液、乙酸锌溶液、亚铁氰化钾溶液。,三、仪器和试剂,食品中亚硝酸盐的含量测定,参考GB/T5009.332010食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定以午餐肉样品为例1.试样预处理从每个待检样中随机取样10g,经绞肉机绞碎后得到混匀的原始样。,四、实验步骤,食品中亚硝酸盐的含量测定,2提取称取5(精确至0.01g)制成匀浆的试样,置于100mL烧杯中,加12.5mL饱和硼砂溶液,搅拌均匀,以70左右的水约300mL将试样洗入500mL容量瓶中,于沸水浴中加热15min,取出置冷水浴中冷却,并放置至室温。,四、实验步骤,食品中亚硝酸盐的含量测定,3提取液净化在上述提取液中加入5mL亚铁氰化钾溶液,摇匀,再加入5mL乙酸锌溶液,以沉淀蛋白质。加水至刻度,摇匀,放置30min,除去上层脂肪,上清液用滤纸过滤,弃去初滤液30mL,滤液备用。,四、实验步骤,食品中亚硝酸盐的含量测定,四、亚硝酸盐的测定,食品中亚硝酸盐的含量测定,注意事项:NaNO2标准溶液要准确量取,移液偏差会导致测定结果不准确。对氨基苯磺酸和盐酸萘乙二胺的加入顺序不能颠倒,反应需先重氮化再偶合。用蒸馏水定容至刻度后,要混匀,不然染料颜色集中在比色管底部。,四、实验步骤,食品中亚硝酸盐的含量测定,五、标准曲线的绘制,y=1.2914x,食品中亚硝酸盐的含量测定,五.计算,食品中亚硝酸盐的含量测定,如:样品滤液的吸光值为0.028,即:y=0.028,
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