（分析化学专业论文）分子光谱法同时测定吩噻嗪类化合物的新方法研究.pdf

摘要 分子光谱法同时测定吩噻嗪类化合物的 新方法研究 分析化学专业硕士研究生张书然 指导教师杨季冬教授 摘要 分子光谱分析法是基于物质分子与电磁辐射作用时，物质内部发生了量子化 的能级之间的跃迁，测量由此产生的反射：吸收或散射辐射的波长和强度而进行 分析的方法，如紫外可见分光光度法、分子荧光光谱法、红外及拉曼光谱法、核 磁共振波谱法等；具有分析速度较快、操作简便、灵敏度高等特点。尤其是共振 瑞利散射光谱法，因其高灵敏和简便性而受到人们的广泛关注。然而光谱技术在 处理复杂体系中多组分的同时测定时具有一定的局限性，通常需要先经过繁琐的 化学分离，然后分别测定。近年来兴起的混合物多组分不经分离直接同时测定引 起了人们的普遍重视。目前分子光谱法多采用导数技术、偏振技术、时间分辨荧 光测定及与化学计量学相结合等技术手段，以达到同时测定的目的。吩噻嗪类化 合物主要作为抑制中枢、抗精神病药和抗组胺药及染色剂被广泛使用。论文工作 以多种吩噻嗪化合物为研究对象，围绕着r r s 光谱结合同原射线计量分析法、荧 光光谱结合偏最小二乘法，以及导数同步荧光光谱技术对其多组分混合物的同时 测定及其分析应用进行了较深入的研究，并对吩噻嗪类多组分混合物体系反应的 条件和机理进行了探讨，试验提出了几种对多组分吩噻嗪类化合物同时测定的新 方法。本文研究的主要成果和结论归纳如下： 1 同多酸与吩噻嗪类药物相互作用的共振瑞利光谱结合同原射线计量分析法同时 测定的研究 在适宜的酸度条件下，3 种同多酸钼酸铵( 舢订) 、钨酸钠( s t ) 和偏钒酸铵( 烈，) 均可与盐酸氯丙嗪( c p h ) 和盐酸异丙嗪( p m h ) 反应形成离子缔合物，引起r r s 显 著增强，并产生新的共振瑞利散射( g g s ) 光谱，但3 种同多酸体系的灵敏度有较大 差异，其中以钼酸铵体系( p h1 1 ) 最高，偏钒酸铵体系次之( p h5 2 0 ) ，钨酸钠体系 最低( p h4 o ) 。故以钼酸铵为r r s 探针作进一步的研究，发现盐酸氯丙嗪和盐酸异 丙嗪与钼酸铵反应形成离子缔合物的最大r r s 散射峰均在3 6 5 衄处，且2 组分的 ， 西南大学硕士学位论文 r r s 光谱强度具有加和性，其差异仅在于两r r s 光谱强度随浓度的线性增幅不同， 据此可建立双组分信号响应的两条同原射线的计量分析法，从而可对2 种吩噻嗪 类药物进行同时测定，其检出限( 3 力分别为4 5n g - m e 1 ( c p h ) 和7 7n g m e - 1 ( p m h ) ， 其线性范围均为o 0 3 2 4 “g m e l 。本文还研究了反应产物的光谱特征，适宜的反 应条件，结合量子化学计算方法讨论了离子缔合反应的历程及对光谱特征的影响， 并考察了共存物质的影响，表明方法具有较好的选择性。方法用于血清、尿样和 非那根止咳糖浆中盐酸氯丙嗪和盐酸异丙嗪的同时测定取得满意结果。 2 阴离子表面活性剂与吩噻嗪类药物相互作用的共振瑞利光谱结合同原射线计量 分析法同时测定的研究 在适宜的酸度条件下，十二烷基硫酸钠( s d s ) 、十二烷基磺酸钠( s l s ) 和十二烷 基苯磺酸钠( s d b s ) 均能与2 种吩噻嗪类药物反应形成离子缔合物，导致共振瑞利 散射( r r s ) 的显著增强，并产生新的r r s 光谱，且它们具有相似的光谱特征，其 最大散射峰均位于2 7 6n n l ，另在3 6 0n l n 附近均有一个相对强度较低的散射峰；6 种体系的散射强度( ) 在一定范围内均与c p h 或p m h 的浓度成正比。而且当 c p h 与p m h 以1 ：1 比例混和成系列不同浓度与3 种阴离子表面活性剂( a n i o n s u r f a c t a n t ，a s ) 反应时，在2 7 6n n l 处a r r s 在一定范围内也随药物浓度的增大而增 强，表明它们的r r s 光谱强度具有加和性，据此可建立混和物体系的标准曲线， 进而可求得混和物的总量。研究还发现在c p h 和p m h 与3 种a s 反应时，c p h a s 体系散射强度均明显大于p m h a s 体系，因而可建立双组分信号响应的两条同原 射线分析法。但3 种a s 体系的灵敏度却呈现出显著的差异性，其中含有芳环的 s d b s 体系的最灵敏，s d s 体系次之，s l s 体系最低。因此，本文主要研究了以 s d b s 为r r s 探针的同原计量分析法同时测定2 种吩噻嗪类药物，方法对2 种吩 噻嗪类药物的检出限( 3 力分别为8 3n g m l 。( c p h ) 和1 1 5n g m l 1 ( p m h ) ，其线性范 围分别为0 0 3 3 6l a g m l 1 和0 0 6 3 2p g m l 一。本文研究了反应体系的r r s 光 谱特征，并以s d b s 体系为例，讨论了适宜的反应条件和影响因素，实验了共存 物质的影响，表明方法有较好的选择性。基于s d b s 与c p h 和p m h 的离子缔合 反应，发展了一种用r r s 光谱结合同原射线计量分析法同时测定2 种吩噻嗪药物 的新方法。方法灵敏、简便、快速，可用于药物制剂、非那根止咳糖浆和尿样中 c p h 和p m h 的同时测定。 3 偏最小二乘法( p l s ) 胶束增敏荧光法同时测定多种吩噻嗪类药物的研究 在p h 为7 o 的t r i s - h c l 缓冲溶液中，十二烷基硫酸钠( s d s ) 与盐酸氯丙嗪 ( c p h ) 、盐酸异丙嗪( p m h ) 和盐酸三氟拉嗪( t f p h ) 3 种吩噻嗪类药物形成胶束体系， 摘要 使其荧光显著增强。但3 种吩噻嗪类药物的荧光光谱重叠严重，彼此干扰。为此， 在胶束增敏荧光光谱法中引入了化学计量学技术，采集荧光光谱数据建立不同数 学模型，如偏最小二乘( p l s ) 、主成分回归( p c r ) 和经典最小二乘( c l s ) 等，用这些 模型来分辨重叠光谱，并对它们的分辨能力进行比较。结果表明，在该三组分体 系中，p l s 模型的分辨效果和各组分浓度的预报结果最好，r p e t 为3 6 。据此， 提出了同时测定3 种吩噻嗪类药物的新方法。3 种吩噻嗪类药物的浓度线性范围分 别为0 0 3 8 0g g m e - 1 ( c p h ) 、0 0 4 8 0 鹇m l 。( p m h ) 和0 0 4 0 0 t t g 。m l l ( t f p h ) ：检出限( 3 力分别为1 0 4 0n g m e 1 ( c p h ) 、9 5 3n g m e 以( p m h ) 和6 18 n g m e ( t f p h ) ，相关系数在0 9 9 6 9 o 9 9 9 0 之间，线性关系较好。该方法灵敏度 高、选择性较好，对模拟样品中3 组分的同时测定，其中校正集的相对标准偏差 分别为3 7 3 、4 o 和2 8 0 ，预测集的相对标准偏差分剐为2 1 0 、4 2 0 和 3 3 0 。用于药物制剂和尿样中c p h 、p m h 和t f p h 的同时测定，结果满意。 4 亚甲蓝和天青a 与a u c l 4 离子缔合物的溶剂萃取导数同步荧光光度法同时测 定的研究 。 在酸性介质中，亚甲蓝( m b ) 和天青a ( a a ) 与a u c h 形成离子缔合物，被l ，2 一 二氯乙烷萃取后，以a 2 - - 2 0n m 进行同步荧光扫描并采用一阶导数处理，2 个缔合 物分别在6 8 3 和6 0 8n l n 附近出现峰值并能很好分开，且荧光强度分别与m b 或 从浓度呈良好的线性关系，可用于2 种吩噻嗪衍生物亚甲蓝和天青a 的同时测定， 检出限( 3 力分别为7 9n g m l 1 和1 7 8n g m l 1 ，其线性范围分别为0 0 3 4 8g g m l 1 和0 0 6 5 8i - t g m l l 。本文研究了离子缔合物的组成和光谱特征，适宜的反应条件 及影响因素，结合量子化学计算方法讨论了离子缔合反应的历程及对光谱特征的 影响。方法不仅灵敏度高，而且简单、快速，并有良好的选择性和重复性，用于 尿样和a z u r e i i 中亚甲蓝和天青a 的同时测定，结果令人满意。 关键词：分子光谱分析盼噻嗪类化合物化学计量学同时测定 i i l s t u d y o nt h en e wm e t h o d sf o rt h es i m u l t a n e o u s d e t e r m i n a t i o no fp h e n o t h i a z i n ec o m p o u n d sb y m o l e c u l a rs p e c t r o m e t r y s p e c i a l t y ：a n a l y t i c a lc h e m i s t r y f i e l d ：m o l e c u l a rs p e c t r a la n a l y s i s s u p e r v i s o r ：p r o f e s s o rj i d o n gy a n g a u t h o r ：s h u r a nz h a n g a b s t r a c t m e nt h em a t e d a lm o l e c u l er e c e i v e se l e c t r o m a g n e t i cr a d i a t i o no rl i g h t ，t h ee n e r g y t r a n s i t i o n sw i l lt a k ep l a c ev i ar o t a t i o n ，v i b r a t i o n o re l e c t r o n i ct r a n s i t i o n s s o ，t h e r e f l e c t i o n ，a b s o r p t i o n ，e m i s s i o no rs c a t t e r i n gw i l lo c c u r , m o l e c u l a rs p e c t r o m e t r yi st h e r e l a t i v ei n t e n s i t yo fe l e c t r o m a g n e t i c r a d i a t i o no fe a c hf r e q u e n c y , i n c l u d i n g u l t r a v i o l e t v i s i b l e ( u v - v i s ) s p e c t r o s c o p i ca n a l y s i s ，i n f r a r e d ( s p e c t r o s c o p ma n a l y s i s ， r a m a ns p e c t r o s c o p i ca n a l y s i s ，f l u o r e s c e n c e ( f l ) s p e c t r o s c o p i ca n a l y s i s ，r e s o n a n c e r a y l e ie , hs c a t t e r i n g ( r r s ) a n ds oo n t h e i r c h a r a c t e r i s t i c sa r es i m p l e ，r a p i da n dh i g h l y s e n s i t i v e e s p e c i a l l y , r r sh a sa t t r a c t e dm o r ea n dm o r e a t t e n t i o nd u et oi t sh i g h s e n s i f i v i t ya n ds i m p l i c i t y i th a sb e e ne x t e n s i v e l ya n ds u c c e s s f u l l yu n i t i z e dt os t u d ya n d d e t e r m i n a t i o no fb i o l o g i c a lm a c r o m o l e c u l e s ，t r a c em e t a li o n s ，n o n m e t a l i o n sa n d n a n o p a r t i c l ep r o b ee ta 1 h o w e v e r , m o l e c u l a rs p e c t r o s c o p i ct e c h n i q u e sh a v eac e r t m n l i m i t a t i o no fs i m u l t a n e o u sd e t e r m i n a t i o no fm u l t i c o m p o n e n ta n dc o m p l i c a t e ds a m p l e s c o m m o n l y , e a c hc o m p o s i t i o ni nt h ec o m p l i c a t e ds a m p l e si s m e n s u r a t e dr e s p e c t i v e l y b e f o r et h es a m p l e sa r es e p a r a t e db yt e d i o u sp r o c e s s r e c e n t l y , t h es i m u l t a n e o u s d e t e r m i n a t i o no fm u l t i c o m p o n e n tm i x t u r et h a ti sn o ts e p a r a t e dh a sa t t r a c t e dm o r ea n d m o r ea t t e n t i o n a tp r e s e n t ，t h es i m u l t a n e o u sd e t e r m i n a t i o ni sa c c o m p l i s h e db y m o l e c u l a rs p e c t r o s c o p i ca n a l y s i sm e t h o d sm a i n l yc o m b i n e dw i t hd e r i v a t i v et e c h n i q u e ， p o l a r i z a t i o nt e c h n i q u e ，t i m e - r e s o l v e df l u o r e s c e n c e ea n dc h e m o m e t r i c s p h e n o t h i a z i n e c o m p o u n d sa r ew i d e l yu s e dt oi n h i b i tc e n t r a ln e r v o u ss y s t e m ，a n t i p s y c h o t i cm e x h c a t l o n , a n t i h i s t a m i n e sa n dd y e s t h i sp a p e rt e l l st h ed e t e r m i n a t i o no fe a c hc o m p o s i t i o ni nt h e m i x e ds y s t e mc o n s i s t so fa b o v es u b s t a n c eb yt w ol i n e sw i t ho n es a m ep o i n t - r r s s p e c t r a , p a r t i a l l e a s t s q u a r e ( p l s ) - m i c e l l a r e n h a n c e d f l u o r e s c e n c e a n d d e r i v a t i v e - s y n c h r o n o u sf l u o r e s c e n c e ，a n ds e v e r a ln e w m e t h o d sh a v eb e e nd e v e l o p e df o r i v a b s t r a c t t h es i m u l t a n e o u sd e t e r m i n a t i o no fm u l t i c o m p o n e n tp h e n o t h i a z i n ec o m p o u n d s t h e m a i nr e s u l t sa n dc o n c l u s i o n sa r es u m m a r i z e da sf o l l o w s ： 1 s t u d yo nt h ei n t e r a c t i o nb e t w e e np h e n o t h i a z i n ed r u g sa n di s o p o l y a c i d sa n dt h e i r s i m u l t a n e o u sd e t e r m i n a t i o nb yr e s o n a n c er a y l e i g hs c a t t e r i n gs p e c t r ac o m b i n e d w i t hm e a s u r e m e n ta n a l t s i so ft w ol i n e sw i t ho n ep o i n t u n d e rt h eo p t i m u ma c i d i t y , t h r e ei s o p o l y a c i d s ，i n c l u d i n ga m m o n i u mm o l y b d a t e ( a m ) ，s o d i u mt u n g s t a t e ( s t ) a n da m m o n i u mm e t a v a n a d a t e ( a ，c a l lr e a c tw i 吐l c h l o r p r o m a z i n eh y d r o c h l o r i d e ( c p h ) a n dp r o m e t h a z i n eh y d r o c h l o r i d e ( p m h ) t of o r m i o n - a s s o c i a t i o nc o m p l e x e s ，w h i c hc a nr e s u l ti nt h eg r e a te n h a n c e m e n to fr e s o n a n c e r a y l e i g hs c a t t e r i n g ( r r s ) a n dt h ea p p e a r a n c eo fn e wr r ss p e c t r a a n dt h e r ew a sa n o b v i o u sd i f f e r e n c eo fr r s s p e c t r ao ft h r e ei s o p o l y a c i d ss y s t e m sa n dt h e i ri n c r e m e n t so f r r si n t e n s i t yw e r ef o l l o w e db yt h i ss e q u e n c e ，a mq h 1 1 ) a vq h5 2 0 ) s t0 h 4 0 ) s o ，a m ，t h em o s ts e n s i t i v er r sp r o b e ，w a st a k e na sa ne x a m p l et ot h ef u r t h e r s t u d i e so nt h ei n t e r a c t i o nw i t hc p ha n dp m h t h er e a c t i o np r o d u c t so fa m c p ha n d a m - p m hh a v es i m i l a rs p e c t r a lc h a r a c t e r i s t i c sa st h em a x i m u mr r sp e a k sa r aa l la t 3 6 5n n la n dt h ei n c r e m e n t so fs c a t t e r i n gi n t e n s i t y ( a t p a s ) a r ed i r e c t l yp r o p o r t i o n a lt ot h e c o n c e n t r a t i o n so fd r u g si nc e r t a i nr a n g e s h o w e v e r , t h e i rl i n e a ra m p l i f i c a t i o n sa r ea g r e a td i f f e r e n c ea st h e i rc o n c e n t r a t i o n b a s e do nt h ed i f f e r e n c e sa n dt h ea d d i t i v i t yo f r r si n t e n s i t y , an o v e lm e t h o df o rs i m u l t a n e o u sd e t e r m i n a t i o no fc p ha n dp m hh a d b e e nd e v e l o p e dw i t h m e a s u r e m e n ta n a l y s i so ft w ol i n e sw i t ho n es a m ep o i n t ”n l e d e t e c t i o nl i m i t s ( 3 a ) f o rc p ha n dp m ha r e4 5n g m l 1 ，7 7n g m l ，r e s p e c t i v e l y , a n d a l lt h el i n e a r r a n g e sa r e o 0 3 2 4p g m l 1 i nt h i sw o r k , t h er r ss p e c t r a l c h a r a c t e r i s t i c sa n dt h eo p t i m u mc o n d i t i o n so ft h er e a c t i o n sw e r ei n v e s t i g a t e da sw e l la s t h ep r o p e r t i e so ft h ea n a l y t i c a lc h e m i s t r y t h em e c h a n i s mo fi o n a s s o c i a t i o nr e a c t i o n a n dt h er e a s o n sf o r t h ee n h a n c e m e n to fs c a t t e r i n gs p e c t r aw e r ed i s c u s s e db yt h e q u a n t u mc h e m i s t r ym e t h o d i na d d i t i o n ，t h ei n f l u e n c eo fc o e x i s t e n c ew e r et e s t e d ，t h e r e s u l ts h o w e dt h a tt h em e t h o dh a sag o o ds e l e c t i v i t y t h em e t h o dh a db e e na p p l i e dt o s i m u l t a n e o u sd e t e r m i n a t i o no fc p ha n dp m hi ns e r u ma n du r i n es a m p l e sa n d p h e n e r g a nc o u g hs y r u pw i ms a t i s f a c t o r yr e s u l t 2 s t u d yo nt h ei n t e r a c t i o nb e t w e e np h e n o t h i a z i n ed r u g sa n da n i o ns u r f a c t a n t sa n d t h e i rs i m u l t a n e o u sd e t e r m i n a t i o n b y r e s o n a n c e r a y l e i g hs c a t t e r i n gs p e c t r a c o m b i n e dw i t hm e a s u r e m e n ta n a l t s i so ft w ol i n e sw i t ho n e p o i n t u n d e rt h eo p t i m u ma c i d i t y , t h r e ea n i o ns u r f a c t a n t sa ss o d i u md o d e c y ls u l f a t e ( s d s ) ，s o d i u md o d e c y ls u l f o n a t e ( s l s ) a n ds o d i u md o d e c y lb e n z e n es u l f o n a t e ( s d b s ) v 两南大学硕士学位论文 c a l la l lr e a c tw i t hc h l o r p r o m a z i n eh y d r o c h l o r i d e ( c p h ) a n dp r o m e t h a z i n eh y d r o c h l o r i d e ( p m h ) t of o r mi o n a s s o c i a t i o nc o m p l e x e s a s ar e s u l t ，t h er e s o n a n c er a y l e i g h s c a t t e r i n g0 u 王s ) i se n h a n c e dg r e a t l ya n dt h en e wr r ss p e c t r aa p p e a r t h es t u d i e ds i x s y s t e m sh a v es i m i l a rs p e c t r a lc h a r a c t e r i s t i c sw h i c ht h em a x i m u mr r sp e a k sa r ea 1 1 l o c a t e da t2 7 6n n l ，a n dt h e r ea r et h es m a l lp e a k sa t3 6 0n l n a n dt h es c a t t e r i n g i n t e n s i t i e s ( ) a r ee n h a n c e dw i t ht h ei n c r e a s eo fm e d i c a t i o nc o n c e n t r a t i o ni nc e r t a i n r a n g e s a f t e rc p ha n dp m hw e r em i x e da tar a t i oo f1 ：1 ，as e r i e so ft h ed i f f e r e n t c o n c e n t r a t i o n so ft h em i x t u r ed r u g sr e a c t e dw i t ha n i o ns u r f a c t a n t s t h er r si n t e n s i t i e s a r ea l s od i r e c t l yp r o p o r t i o n a lt ot h et o t a lc o n c e n t r a t i o n so fc p ha n dp a t2 7 6n n l t h er e s u l t ss h o w e dt h a tt l l er r si n t e n s i t i e so fc p ha n dp m hh a v et h ea d d i t i v i t y h e n c e ，t h ec a l i b r a t i o nc u r v ef o rt h em i x t u r es y s t e mw a sc o n s t r u c t e d ，a n dt h et o t a l c o n c e n t r a t i o no fc p ha n dp m hi nm i x e ds a m p l e sw a so b t a i n e d f u r t h e r m o r e ，t h e r ew a s a no b v i o u sd i f f e r e n c eo fr r ss p e c t r ao ft 1 1 eb o u n dp r o d u c t sf o rc p ha n dp m h ，a n d t h e i ri n c r e m e n t so f 剐r si n t e n s i t yw e r ef o l l o w e db yt h i s 。s e q u e n c e ，c p h p m h s o ， m e a s u r e m e n ta n a l y s i s o ft w ol i n e sw i t ho n es a l t l ep o i n tc a l lb ec o n s t r u c t e df o rt h e s i m u l t a n e o u sd e t e r m i n a t i o no fb o t hc o m p o n e n ts y s t e r n s d u et ot h er e m a r k a b l e d i f f e r e n c eo fs e n s i t i v i t yo ft h ed i f f e r e n ta n i o ns u r f a c t a n t sf o rt h es a m ep h e n o t h i a z i n e d r u g s ，w h i c ha r ef o l l o w e db yt h i ss e q u e n c e ，s d b s s d s s l s ，s d b sa r et a k e na sa n e x a m p l et ot h ef u r t h e rs t u d i e so nt h es i m u l t a n e o u sd e t e r m i n a t i o no fc p h a n dp m hb y r r ss p e c t r ac o m b i n e dw i t hm e a s u r e m e n ta n a l y s i so ft w ol i n e sw i t ho n es a m ep o i n t t a k e i n gs b d sa sr r sp r o b e ，t h ed e t e c t i o nl i m i t sa n dt h el i n e a rr a n g e sa r e8 3n g 。m l ， o 0 3 3 6p g 。m l 1f o rc p ha n d11 5n g m l 1 ，o 0 6 3 2 肛g m l 1f o rp m h t h e o p t i m u mc o n d i t i o n so fr e a c t i o na n dt h ee f f e c t so ff o r e i g ns u b s t a n c e s h a v e b e e n i n v e s t i g a t e d b a s e do nt h er e a c t i o nb e t w e e np h e n o t h i a z i n ed r u g sa n da n i o ns u r f a c t a n t s ， an e wm e t h o do fs i m u l t a n e o u sd e t e r m i n a t i o nf o rc p ha n dp m hh a sb e e nd e v e l o p e db y r r ss p e c t r ac o m b i n e dw i t hm e a s u r e m e n ta n a l y s i so ft w ol i n e sw i 。t ho n es a m ep o i n t t h em e t h o di ss i m p l e ，r a p i da n ds e n s i t i v e ，c a l lb ea p p l i e dt od e t e r m i n a t ec p ha n dp m h i np h a r m a c e u t i c a l sa n du r i n es a m p l e sa n d p h e n e r g a nc o u g hs y r u p 3 s i m u l t a n e o u sd e t e r m i n a t i o no fe h l o r p r o m a z i n eh y d r o e h l o r i d e , p r o m e t h a z i n e h y d r o e h l o r i d ea n dt r i f l u o p e r a z i n eh y d r o e h l o r i d eb yp a r t i a ll e a s ts q u a r e - m i c e l l a r e n h a n c e e df l u o r e s c e n c es p e c t r o m e t r y i tw a sf o u n dt h a ti n ir i s h c lb u f f e rs o l u t i o no fp h7 0 ，t h ea d d i t i o no fs o d i u m d o d e c y ls u l f a t e ( s d s ) t ot h es o l u t i o no fp h e n o t h i a z i n ed r u g s ，s u c ha sc h l o r p r o m a z i n e h y d r o c h l o r i d e ( c p h ) ，p r o m e t h a z i n eh y d r o c h l o r i d e ( p m h ) a n dt r i f l u o p e r a z i n e v i a b s t r a c t h y d r o c h l o r i d e ( t f p h ) ，s h o w e d ar e m a r k a b l ee n h a n c e m e n to ft h e i r f l u o r e s c e n c e i n t e n s i t i e s af u r t h e rs t u d yp r o v e dt h a tt h ep h e n o t h i a z i n ed r u g sc a nb ed e t e r m i n e db y f l u o r o p h o t o m e t r i c m e t h o di nm i c e l l a rs y s t e m h o w e v e r , t h eo v e r l a p p i n go ft h e f l u o r e s c e n c es p e c t r ao ft h r e ep h e n o t h i a z i n ed r u g sa r es e r i o u s ，w h i c hw i l li n t e r f e r ei nt h e s i m u l t a n e o u sd e t e r m i n a t i o no ft h e m s o ，d i v e r s ec h e m o m e t r i s ，i n c l u d i n gp a r t i a ll e a s t s q u a r e ( p l s ) ，p r i n c i p a lc o m p o n e n tr e g r e s s i o n ( p c r ) c l a s s i c a ll e a s ts q u a r e ( c l s ) ，w e r e i n t r o d u c e dt or e s o l v eo v e r l a p p e ds p e c t r aa n dt h o s em e t h o d sw e r ec o m p a r e di nt e r m so f i t sr e s o l u t i o na b i l i t y t h er e s u l ts h o w e dt h a ts h o w e d ，a m o n gt h et h r e ec o m p o n e n t s s y s t e m ，i tw a st h eb e s tf o rp l st or e s o l v eo v e r l a p p e ds p e c t r aa n df o r e c a s tr e s p e c t i v e c o n c e n t r a t i o no fc o m p o n e n t s ，i t sr p e ti s3 6 h e n c e ，an e wm e t h o df o rs i m u l t a n o u s d e t e r m i n a t i o no ft h r e ep h e n o t h i a z i n ed r u g sh a sb e e nd e v e l o p e d t h el i n e a rr a n g e so ft h e c a l i b r a t i o nc u r v e sf o rt h r e ep h e n o t h i a z i n ed r u g sa r e0 0 - 3 8 0p g m l ( c p h ) 、o o 4 8 0 p g m l 1 ( p m h ) a n d0 0 4 0 0i x g m l - l ( t f p h ) ，r e s p e c t i v e l y ；t h ed e t e c t i o nl i m i t s a r e lo 4 0n g m l - if o rc p h ，9 5 3n g m l 1f o rp m ha n d6 18n g 。m l 1 f o rt f p h ；t h e c o r r e l a t i o nc o e 伍c i e n t sa r eb e t w e e n0 9 9 6 9 0 9 9 9 0 t h em e t h o d sa r eg o o ds e l e c t i v e a n dh i g hs e n s i t i v i t y , s ot h e yc a nb ea p p l i e dt os i m u l t a n e o u s l yd e t e r m i n a t ec p h ，p m h a n dt f p hi nt h es y n t h e t i cs a m p l e s ，a n dt h er s do fc a l i b r a t i o ns e ta r e3 7 3 ( c p h ) ， 4 o ( p m h ) a n d2 8 0 ( t f p h ) ，r e s p e c t i v e l