（物理化学专业论文）新型流动注射化学发光体系的研究及其应用.pdf

西南大学碛论文摘耍 新型流动注射一化学发光体系的研究及其应用 学科专业： 指导教师： 物理化学 罗红群 研究方向： 研究生： 摘要 环境分析 李丽娜 化学发光( c h e m i i l 【m i n e s c e n c e ，简称c l ) 是化学反应的反应物或生成物吸收反庇释放的化学 能，电子由基态跃迁至激发态，再由激发态返回基态时所产生的光辐射。根据化学发光反应在某 - - d n 的发光强度或发光总量来确定反应中相应组分含量的分析方法叫化学发光分析法。此法具 有灵敏度度高、线性范圈宽、仪器设备简单、分析快速、彝易实现自动化等优点。c l 已经成为 现代痕苗分析中一个十分活跃的研究和应用领域，作为种有效的痕量分析方法在环境科学以及 生命科学等领域中具有、泛的应用前景。 本研究论文为化学发光在药物分析、生物分析和环境分析中的研究和应用，它包括两部分： 综述雨l 研究报告。 第一部分化学发光分析综述 本练述引j = 文献2 1 6 篇，对化学发光分析的历史、发光机理以及检测原理作了简单的概述， 总结同顾了国内外近年来化学发光分析在环境和生物医药方面的应用。重点介绍了酰肼类、吖啶 酯类、过氧化草酰类和酸性高锰酸钾类发光体系的特性及其分析应用。 第二部分研究报告 本文采用高锰酸钾以及鲁米诺发光体系，结合流动注射分析技术，研究了阿魏酸、复合胺和1 一些金属离子等对发光反应的影响，完成了对以上物质的测定，并对该法机理迸行了初步讨论。 另外，又研究了超声波对化学发光强度的影响。 2 1 流动注射高锰酸钾的化学发光体系测定阿魏酸 论文提出了一个简单、快速、灵敏的测定阿魏酸的流动注射化学发光方法。在实验中，我 西南夫学硬士论文 摘要 们利抖= | 高锰酸钾在硝酸介质中跟阿魏酸反应能产生很强的发光信号，并且发光信号与阿魏酸的浓 度之间存在着定量的关系，建立了一个测定阿魏酸的新方法，该方法的线性范围在60 x 1 0 “至 2 0 x 1 0 m o 【一范同幽，检测限为9 6 x 1 0 8t o o l 一。对2 0 x | o 一4t o o l 一阿魏酸重复测定1 1 次的 平均标准偏差是10 。用于太太口服液中阿魏酸的测定，结果令人满意。另外，对此反应的发 光机理进行了简单的讨论。 22 二级化学发光法测定金属离子 提出了流动注射二二级化学发光测定n p ，f e ”，f e 3 + 剌c r 3 + 等金属离子方法。当这些金属离子 被加进已完全反应的鲁米诺和高锰酸钾的溶液以后又出现了新的发光信号，这一现象我“j 称为二 级化学发光现象，该发光信号和金属离子的浓度之闻存在定量关系。通过发光光谱、紫外光谱以 及另一些其他的实验，研究了反应体系的机理、影响因素以及最佳的优化条件。在最佳的优化条 仆r ，各个金属离子的线胜范同和检测限如r ：n i n ，8 0 2 0 00g 一和o 2 2 0m g 一，33 x1 0 一 g f e ”，ol o 一10 0 0 0 m g 一9 , 8 7 1 0 6g l ；f e ”，0 5 0 - 7 5 0 m g 一和7 5 1 2 0 0 0 0 m g 一 27 1 1 0 6 gnc r ”，o0 1 _ o2 5m g l - i 和0 2 5 - 1 0 0 0m g i 一，5 2 5 1 0 7g i 。 2 3 超声波流动注射化学发光技术联用研究 当对反应物施加超声波以后，再注射进入反应池，反应的发光信号有了很人的变化。根据 这一发现，考察了超声波耐问、超声波频率等对化学发光强度的影响。探讨了反应机理。 2 4 抑制化学发光法测定复合胺 基于复合胺对碱性鲁米诺铁氰化钾体系化学发光有抑制作用提山了对复合胺的定量分析。 实验中。探讨了实验参数和试验条件如试剂的浓度、流速、混合管| 王= 、样品的酸度等对抑制化学 发光强度大小的影响。方法的检测限为】5 8x1 0 。8 r e a l i ；线性范闸为4 0 2 0 0 m ，井对反应 的机理进行了讨论。 关键词：化学发光二级化学发光流动注射阿魏酸复合胺金属离子超声波技术 s t u d i e sa nda p p l i c a t i o n so ff l o w i n j e c t i o n c h e m i l u m i n e s c e n c en e ws y s t e m s s p e c i a l t y ：p h y s i c sc h e m i s t r y t u t o r ：p r o f h o n gq u nl u o r e s e a r c h ：e n v i r o n m e n t a la n a l y s i s a u t h o r ：l i n a l i a b s t r a c t c h e m i l u m i n e s c e n c e ( c l ) i sd e f i n e da st h ee m i s s i o no fl i g h tf r o ma ne l e c t r o n i c a l l ye x c i t e ds t a t e s p e c i e sw h m li sp r o d u c e dd u r i n gt h ec o u r s eo fac h e m i c a lr e a c t i o n ，a n di so b s e r v e dw h e nt h e e l e c t r o n i c a l t ye x c i t e dp r o d u c to ri n t e r m e d i a t ef o r m e dd e c a y st ot h eg r o u n ds t a t ew i t hap h o t o ne m i t t e d d u et oi t s h i g hs e n s i t i v i t y ，w i d et i n e a rr a n g e ，r a p i d i t y s i m p l i c i t ya n dr e l a t i v e l yl o wc o s t ， c h e m i l u m i n e s c e n c ea n a l y s i sh a sb e e nw i d e t ya p p l i e di ne n v i r o n m e n t a ls c i e n c ea n dl i f es c i e n c ea n dh a s b e c o m eo n eo f t h em o s tp o w e r f u lt e c h h i q u e si na n a l y t i c a lc h e m i s t r y t h i sp a p e rr e p o t st i l er e s e a r c l l e sa n da p p l i c a t i o n so fc la n a l y s i si nl i f ea n a l y s i s ，e n v i r o n m e n t a l a n a l y s i s p a r tir e v i e w t h i sp a r ti n t r o d u c e st h eh i s t o r yo fc l ，t h em e c h a n i s ma n dt i l ed e t e c t i n gp r i n c i p l e so fc lm a i n l y i ts u m m a r i z e st h ec o m m o nc ls y s t e m sa n dt h e ira n a l y t i c a la p p l i c a t i o n s p a r t1 1 r e p o r t s b a s e do np o t a s s i u mp e r m a n g a n a t ea n dl u m i n a lc ls y s t e m sc o m b i n e df l o w i n j e c t i o na n a l y t i c a l m e t h o d ，t h i sp a p e ri n v e s t i g a t e st h ee f f e c to ff e r u l i ca c i d ，s e r o t o n i na n ds o m em e t a li o n so n h n n i n e s c e n e er e a c t i o n ，a n ds i m u l t a n e o u s l y , t h e s em a t t e r sh a v eb e e nd e t e c t e di n r e a l “s a m p l e s ，a n dt h e e x p e r i m e n t a lm e c h a n i s mh a v ei n i t i a l l y b e e nd i s c u s s e d m o r e o v e r ，t h en e wc o m b i n a t i o no ft h e u l t r a s o n i ct e c h n i q u ea n df i a c lm e t h o dh a sb e e ns e a r c h e d 2 1p e r m a n g a n a t e b a s e dc h e m i l u m i n e s c e n c ea n a l y s i so ff e r u l i ca c i du s i n gf l o wi n j e c t i o n a s i m p l e ，s e n s i t _ i v ea n dr a p i df l o wi n j e c t i o nc h e m i l u m i n e s c e n c em e t h o dh a sb e e nd e v e l o p e df o r t h ed e t e r m i n a t i o no ff e r l l i ca c i db a s e do nt h ec h e m j l u m i n e s c e n c er e a c t i o no f f e r u l i ca c i d w i t h p o t a s s i u mp e r m a n g a n a t ei nn i t r i ca c i dm e d i u ms t r o n gc h e m i l u m i n e s c e n c es i g n a lw a so b s er v e dw h e n f e r u l i ca c i dw a si n j e c t e di n t ot h ea c i d i cp o t a s s i u mp e r m a n g a n a t es o l u t i o ni naf l o w c e l lt h ep r e s e n t m e t h o da l l o w e dt h ed e t e r m i n a t i o no f f e r u l i ca c i di nt h ec o n c e n t r a t i o nr a n g eo f 60 1 0 - 6t o2 0 x 1 0 4 m o l i 一a n dt h ed e t e c t i o nl i m i t ( 3 ) f o rf e r u l i ca c i dw a s9 6 x10 8i n n rt h er e l a t i v es t a n d a r dd e v i a t i o n w a s10 f 0 1 _ il r e p l i c a t ea n a l y s e so f 20 x 1 0 4m o lr 1f e r u l i ca c i dt i l ep r o p o s e dm e t h o dw a sa p p l i e d t ot h ed e t e r m i n a t i o no ff er u l i ca c i di nt a r ab e a u t y e s s e n c es a m p l e sw i t hs a t i s f a c t o r yr e s u l t s m o r e o v e r t h er e a c t i o nm e c h a n i s mo f t h ec h e m i l u m i n e s c e n c es y s t e mh a sb e e np r i m a r i l yd i s c u s s e d 2 2s e c o n dc h e m i l u m i n e s c e n c eb e h a v i o ro fs o m em e t a li o n si nt h el u m i n a l k m n o js y s t e m an o v e lf l o wi n j e c t i o nc h e m i l u m i n e s c e n c e ( c l ) m e t h o dh a sb e e nd e v e l o p e df o rt h ed e t e r m i n a t i o n o ft h r e em e t a li o n s ，n a m e l yn i ”，f e “，p e ”a n dc r ”，b a s e do nt h es e c o n dc l ( s c l ) s i g n a lo ft h e m i x t u r eo fl u m i n a lw i t hk m n 0 4i ns o d i u mh y d r o x i d em e d i u mb yt h ec a t a l y s i so fn i ”，f e ”，f e ”a n d c r ”t h ep o s s i b l ec lm e c h a n i s mo ft h es y s t e m s ，t h ei n f l u e n c i n gf a c t o r s ，a n dt h eo p t i m u mc o n d i t i o n s f o rm er e a c t i o n sh a v eb e e ni n v e s t i g a t e db a s e du p o nt h ek i n e t i cc u r v eo ft h ec lr e a c t i o n ，c ls p e c t r a ， u v - v i s i b l es p e c t r aa n ds o f n eo t h e re x p e r h n e n t s u n d e ro p t i m u mc o n d i t i o n st h es c li n t e n s i t yw a s d ir e c t l yp r o p o r t i o n a lt ot h ec o n c e n t r a t i o no f t h e s em e t a li o n si ns o i n t i o ni nt h er a n g eo f 8 , 0 - 2 0 0 0l a g1 1 a n d0 2 2 0m g f o rn 一01 0 一1 0 00 0m g f o rf e ”，0 5 0 7 5 0a n d7 5 卜2 0 0 0 0m gi 。1f o rf e “， o o l 一0 2 5a n d0 2 5 1 00 0 m g i1 f o r c r ”t h ed e t e c t i o n l i m i t ( 36 i s ) w e r e3 3 x1 0 。g i ，9 8 7x 1 0 。g 1 ，2 7 1 _ 1 0 6 9 a n d5 2 5 1 0 7g l f o r n i h ，f e 2 ，f e 3 + a h dcr 卜，r e s p e c t i v e l y 2 , 3u l t r a s o n i c - f l o wi n j e c t i o n - c h e m i l u m i n e s c e n c et e c h n i q u e w h e nt h er e a g e n t sw e r ei n c u r r e dt ot h eu l t r a s o n i ca n dt h e nw e r ei n j e c t e di n t ot h ec e l l ，t h ec l s i g n a lc o m p a r e dw i t ht h ef o r m e rh a dg r e a tc h a n g e b a s e do nt h i s ，i th a sb e e ni n v e s t i g a t e dt h a tt h ee f f e c t o ft h et d t r a s o n i ct i m ea n dt h eu l t r a s o n i cf r e q u e n c y ，a n dt h eu l t r a s o n i co ft h ed i f f e r e n tr e a c t a n t so nt h e s y s t e ma n dt h ep o s s i b l ec lm e c h a n i s mi sp r o p o s e db a s e do nt h ek i n e t i cc u r v eo ft h ec lr e a c t i o n ，c l s p e c t la ，u v v i ss p e c t r aa n ds o m eo t h e re x p e r i m e n t s 2 4 d e t e r m i n a t i o no fs e r o t o n i nu s i n gf l o w i n j e c t i o ni n h i b i t o r yc h e m i l u m i n e s c e n c e an e wf l o w i n j e c t i o nc h e m i l u m i n e s c e n c em e t h o df o rt h eq u a n t i t a t i o no fs e r o t o n i nh a sb e e n d e v e l o p e db a s i u go nt h es t r o n g l yr e s t r a i n i n ge f f e c to fs e r o t o n i no nt h ec h e m i l u m i n e s c e n c er e a c t i o n b e t w e e nl u m i n a la n d - p o t a s s i u mh e x a c y a n o f er r a t e ( i l l ) i na l k a t im e d i u mt h eo p t i m i z a t i o no ft h e e x p e r i m e n t a la n di n s t r u m e n t a lv a r i a b l e ss u c ha s ，c o n c e n t r a t i o no fr e a g e n t s ，f l o wr a t e s ，t h el e n g t ho f m i x i n gt u b e ，t h ea c i d i t yo fs a m p l e ，e t c ，h a sb e e nc a r r i e d o u ta d o p t i n gt h ep r o p o s e df l o w i n j e c t i o n m a n i f o l dt h ep e r f o r m a n c ec h a r a c t e r i s t i c sh a v eb e e ne s t a b l i s h e d ，s h o w i n gal i n e a rr e s p o n s ei nt h e r a n g eo f 40 t o2 0p m ，a d e t e c t i o nl i m i t ( 3 0 ) 1 5 8 1 0 。8 t o o li a n da1 0 r e l a t i v es t a n d a r dd e v i a t i o n f o ri i r e p l i c a t ea n a l y s e so f1 0p ms e r o t o n i n t h ep r o p o s e dm e t h o dw a sa p p l i e dt ot h ed e t e r m i n a t i o no f s e r o t o n i ni ns y n t h e s i ss a m p l e sw i t hs a t i s f a c t o r yr e s u l t s m o r e o v e r , t h er e a c t i o nm e c h a n i s mo ft h e c h e m i l u m i n e s c e n c es y s t e mh a sb e e np r i m a r i l yd i s c u s s e d k e ) a v o r d s ：c h e m i l u m i n e s c e n c e ；s e c o n d c h e m i l u m i n e s c e n ce ，f l o w - i n j e c t i o na n a l y s i s ；f e r u l i e a c i d ；s e r o t o n i n ；m e t a li o n s ；u l t r a s o u n d 独创性声明 y 9 0 1 8 3 s 学位论文题目：新型流动注射一化学发光体系的研究及其应用 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工 作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地 方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含 为获得西南大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我 一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的 说明并表示谓 意。 d 学位论文作者：歹套：加硐p 签字日期： 20 0 6 年5 月1 日 f 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解西南大学有关保留、使用学位论文的规 定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允 许论文被查阅和借阅。本人授权西南大学研究生院可以将学位论文的 全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫 描等复制手段保存、汇编学位论文。 ( 保密的学位论文在解密后适用本授权书，本论文：口不保密， 口保密期限至年月止) 一 猢黼鲐耆御由砷锄张黟研 签字日期：2 0 0 6 年5 月1 日签字目期：2 0 0 6 年5 月1 日 学位论文作者毕业后去向： 一 工作单位：宣鲞堂瞳电话：i2 通讯地址：逛耍鲞宣查立宣查堂瞳生佥盈堂皇竖境透塑堂医 邮编： 3 3 6 0 0 0 m a s t e rt h e s i so f s o u t h w e s tu n i u e r s i t yr e l j i e w 1 g e n e r a l i t i e s p a r tir e v i e w c h e m i l u m i n e s c e n c ea n db i o l u m i n e s c e n c ew e r ep a i da t t e n t i o na s an a t u r a lp h e n o m e n o nl o n ga g o i i n1 6 6 3 ，b o y l ep r o p o s e dt h ep h o s p h o r u sl u m i n e s c e n c ep o s s i b l yr e l a t e dt ot h eo x y g e n ，w h i c hg a v e af ir e n e wv i s u a l a n g l e f o r c o r r e c t l yo b s e t ：v i n g a n dc o m p r e h e n d i n gc h e m i l u m i n e s c e n c ea n d b i o l u m i n e s e e n c e 2 】l u m i n o u sa n i m a l s a r ek n o w ns i n c et h ea n c i e n tgr e e kc i v i l i z a t i o nb u t a r t i f i c i a l ， c h e m i h n n i n e s c e n c ew a sf i r s td e s c r i b e di n 18 7 7b yr a d z i s z e w s k iw h oo b s e r v e dt h ey e l l o wl i g h t e m i s s i o nw h e no x y g e nw a sb u b b l e di n t oa na l k a l i n ee t h a n o l i cs o l u t i o no f2 , 4 ，5 一t r i p h e n y l i m i d a z o l e ( i o p h i n e ) 3 1h o w e v e r ，u n t i lt h el a t en i n e t e e n t h ，w i e d e m a n nw a sf ir s tt or e p o r tt h el u m i n e s c e n c e n l e c h a n i s n la n dh ec o n c l u d e dt h el u m i n e s c e n c ea s ar e l a t i v es i m p l eo r g a n i cr e a c t i o n 4 】 l a r g en u m b e r so fr e s e a r c h e so nc h e m i l u m i n e s c e n c ew a sd e v e l o p e di nt h eb e g i n n i n go ft h et h e t w e n t i e t hi n 1 9 0 1 ，d u b o i s ，af r e n c hp h y s i o l o g i s t ，i n d u c e dt h ec o n c e p t so ft h el u c i f er i na n dt h e l u e i f e r a s e 5 】f o u ry e a r sl a t e r ，t r a u t zp u t f o r w a r dt h a tc h e m i l u m i n e s c e n c ec o u l db e p o s s i b l e c o n c e m e dw i t ht h ea c t i v e o x y g e ni n h i sf i r s t r e t r o s p e c ta b o u tc lr e a c t i o n 6 j n1 9 2 2 ，k a u t s k i s e a r c h e dt h el i g h te m i s s i o nf r o o tt h er e a c t i o nb e t w e e ns i l o x a n ea n ds t r o n go x i d a n t s 【7 】i n1 9 2 7 ，m a l l e t t h o u g h tt h ee n e r g yf r o mt h er e a c th y p o c h l o r i t ea n dh y dr o g e np e r o x i d ec o u l db et r a n s f e r r e dt os o m e p h o s p h o r e s c e n c ea n df l u o r e s c e n c ec h e m i c a lm a t t e r ss u c ha se o s i n ，a n t h r a c e n ea n dq u i n i n e ，a n df i l n h e r p r o d u c e dc h e m i l u m i n e s c e n c e 8 t h ef o l l o w i n gy e a r ，a l b r e c h tr e p o s e dt h el u m i n e s c e n tp r o p e r t i e so f 5 - a m i n o 一2 ，3 d 【1 1 y d r o p h l a i a z i n e l ，4 - d i o t t e ( 1 t m i n 0 1 ) ，、= v h i c hw a sav e r yi m p o r t a n tp o i n ti nt h eh i s t o r i c a l l o n gr i v e ro f c ld e v e l o p m e n t 9 】l u m i n a l ，w h i c hi th a g ，sm p l em o l e c u l a rs t r u c t u r e ，e a s yt os y n t h e s i z e ， p r o n et od i s s o l v et h ew a t e r ，i sw i d e l yh o m ea p p l i e di nm a n yf i e l d s i ni9 3 5 ，a c r i d i n i u md e r i v a t i v e s w e r ek n o w na sc h e m i l u m j n o g e n j cm o l e c u l e ss i n c eg l e ua n dp e t s c h ，d e s c r i b e dt h eb l u eo rg r e e nl i g h t e m i s s i o no fb i s ( n m e t h y l a c r i d i n i u m ) n i t r a t e ( 1 u c i g e n i n ) 【1o a f t e rm c c a p r a ，i n19 6 4 ，h a sp r o p o s e da m e c h a n i s mb a s e do nt h ef o r m a t i o no fad i o x e t a n o n ec y c l ef o re x p l a i n i n gt h ec h e m i l u m i n e s c e n c eo f a cr i d i n i u i i ls a l t s i1 】，d e r i v a t i v e so f d i o x e t a n ea n dd i o x e t a n e d i o n e ( p e r o x y o x a l a t e ) h a v eb e e np r e p a r e d m a s t e rt h e s i so f s o u t h w e $ 1u n i v e r s i ( vr e v i e w p h e n o m e n o no rd i s c u s s i n gt h er e a c t i n gm e c h a n i s m sa n dt h et e c h n i q u ew a sd i f f i c u l tt ob ea p p l i e di nt h e c h e m i s t r ya n a l y s i s u n t i l1 9 6 0 s ，i ta p p e a r sm a n y n e wm e a n so fs e a r c h i n ga n dd e t e c t i n gc lo w i n g t o t h ed e v e l o p m e n to ft h em o d e r ne l e c t r o nt e c h n i q u ea n dh i g hs e n s i t i v ep h o t o e l e c t r i cs e n s o r ；o nt h eo t h e r h a n d ，w i t hl i f es c i e n c e s ，e n v ir o n m e n t a ls c i e n c e sa n dm a t e r i a ls c i e n c e ss p r i n g i n gu p ，c lt e c h n i q u ew a s c o n s u m e d l yi m p e l l e da n da tl a s t i tw a sa p p l i e di na n a l y t i c a lc h e m i s t r ya n db e c a m ean o v e la n a l y s i s t e c h n o l o g y 14 一i6 】f o re x a m p l e ，i n t h em i d d l ep e r i o do ft h es i x t i e t h ，c h a n d r o s sa n dr a u h u t i n v e s t i g a t e dt h er e a c t i n gs y s t e mo fh y d r o g e nd i o x i d ea n do x a l a t em o n o h y d r a t ec o m p o u n d s ，a n di t sc l e n e r g yt r a n s f e ra m o n gt h e s em a t t e r sw i t hf l u o r e s c e n c e 【17 ，i8 1 b e f o r el o n g ，c u r t i sa n ds e i t z s u c c e s s f i d i yd e t e c t e df l u o r o p h o r e sb yt h es y s t e mc o m b i n e dt h i n l a y e rc h r o m a t o g r a m 1 9 】i nt h el a t e s e v e n t i e t h ，t h ec la p p l i c a t i o nc o m ef o r t hg r e a ta d v a n c e ，l m a ie ta 1 s u r v e y e dl a r g en u m b e r so f c o m p o u n d sb yu n i t e d i tw i t hh p l ca tp r e s e n t ，c h e m i l u m i n e s c e n c ea n a l y s i sh a sb e c o m eav e r y s i g n i f i c a n tm e t h o di nm i n i ma n a l y s i sa n dt r a c ea n a l y s i s 【2 0 2 2 i no u rc o u n t r y a tt h eb e g i n n i n go ft h ee a r l ye i g h t i e t ht h ec h e m i l u m i n e s c e n c er e s e a r c hf e t c h e di n h a sg a i n e dg r e a tp r o g r e s si nt w e n t yy e a r sa n dt h er e p o r t si n c r e a s es h a r p l yy e a rb yy e a r 2 3 2 s r e c e n t y e a r s ，t h ea p p i c a t i o no f c la n a l y s i si sg r a d u a l l yb r o a d e n e dw i t hi t sf u r t h e rd e v e l o p m e n t ，i tc a nb es e e n f r o mt h eb e l o w ： ( 1 ) t h e d e t e c t e dm a t t e r si n v o l v e di nor g a n i s m ，m e d i c a m e n t ，i a t r o l o g y 1 i f es c i e n c e s ， e n v ir o n m e n t a ls c i e n c e sa n dm a t e r i a js c i e n c e sa n ds oo n ( 2 ) n e wl u m i n o p h o r ，n e ws y s t e ma n dn e wm e a n sc o n s t a n t l ya p p e a r b e s i d e si t sc o m b i n a t i o nw i t h h p l ca n dc a p i l l a r i t ye l e c t r o p h o r e s i s ，i t su n i t e dw i t hc h e m i l u m i n e s c e n c ei m m u n i t ya n a l y s i s ， e l e c t r o g e n e r a t e dc h e m i l u m i n e s c e n c e u l t r a s o n i cc h e m i l u m i n e s c e n c ea n do p t i c a l f i b e rs e n s o r a n ds of o r t ha r ea l s or a p i d l yd e v e l o p e d ( 3 ) t h ed e d u c t i o no ft h e m e c h a n i s mc a nb em a d es u r ei nv i r t u eo ff l u o r e s c e n c es p e c t r u m ， c h e m i l u m i n e s c e n c es p e c t r u m ，u v - a b s o r bs p e c t r u ma n dt h ec a t c ho f i n t e r m e d i u m s 。 ( 4 ) t h es e n s i t i v i t y ，t h ed e f i n i t i o na n da u t o m a t ai o no ft h ei n s t r u m e n t a r eg r e a t l y i m p r o v e d p r o v i d i n gp o s i t i v ec o n d i t i o n sf o ri n v e s t i g a t i o n t h ec h e m i | l i m i n e s c e n c eh a s j cm e c h a n j s mh a sb e e nd i s c u s s e da n ds e v e r a lc h e m i i u m i n e s c e n c e s y s t e m sa n dt h e i ra p p l i c a t i o n sh a v eb e e na l s ol o o k e db a c ki nt h i sp a p e r 2 2 c h e m i l u m i n e s c e n c eb a s i cm e c h a n i s m c h e