（内科学专业论文）卡介苗对哮喘大鼠气道炎症及重塑的影响.pdf

目录 中文摘要1 英文摘要6 研究论文卡介苗对哮喘大鼠气道炎症及重塑的影响 前言一一”一“”一”一”一一”一“一一“”1 1日| j 舌一一”一“”一”一”一”“一”“”“”“” 材料与方法1 3 结果1 9 附图2 3 附表3 3 讨论一一3 8 结论4 2 参考文献4 3 综述支气管哮喘的免疫治疗与b c g 的关系4 7 致谢“”一”一“”一”“一”51 个人简历5 2 中文摘要 卡介苗对哮喘大鼠气道炎症及重塑的影响 摘要 目的：探讨卡介苗对哮喘大鼠气道炎症及重塑的预防作用及可能机 制，以q 平滑肌肌动蛋白( q s m a ) 、细胞周期蛋白d 1 ( c y c l i n d l ) 、 白介素4 ( i l 4 ) 和y 干扰素( i f n y ) 为指标，用i f n y i l 4 间接反 映t h l t h 2 水平，反应炎症指标，c y c l i n d l 、q s m a 反映重塑指标，观 察卡介苗是否可以调整t h l t h 2 平衡，减轻气道炎症，延缓气道重塑发生， 从而改善哮喘症状，控制哮喘发展速度及可能机制。 方法：清洁级s d 雄性大鼠4 0 只，4 周龄，体重5 0 1 0 0 克之间，随 机分成正常对照组、哮喘模型组、多b c g 接种组、b c g 干预组每组1 0 只。 1 正常对照组( n sg r o u p ) ：所有的幼鼠于实验第1 、8 天对幼鼠腹腔注射 生理盐水2 m l 进行致敏，第1 5 天起将幼鼠置于自制的密闭雾化吸入箱 内，予生理盐水5 m l 雾化吸入3 0 m i n ，隔日1 次，共激发2 0 次，每次3 0 m i n 。 2 哮喘模型组( a s t h m ag r o u p ) ：所有的幼鼠于实验第l 、8 天对幼鼠腹腔 注射o v a l 0 0 m g 和氢氧化铝1 0 0 m g ( 混于9 9 l 生理盐水2 m l 中) 进行致 敏，第1 5 天起将幼鼠置于自制的密闭雾化吸入箱内，予2 o v a 生理盐 水5 m l 雾化吸入3 0 m i n ，隔日1 次，共激发2 0 次，每次3 0 m i n ，以出现 烦躁、呛咳、呼吸急促、活动量下降典型的哮喘发作的症状为激发成功。 3 多b c g 接种组( m u l t i p l eb c g v a c c i n a t i o ng r o u p ) ：在o v a 致敏前7 、 3 、1 天，每只幼鼠分别皮内注射b c g0 0 2 5 m g ，于实验第l 、8 天对幼鼠腹 腔注射o v a l0 0 m g 和氢氧化铝10 0 m g ( 混于9 9 l 生理盐水2 m l 中) 进行致 敏，第1 5 天起将幼鼠置于自制的密闭雾化吸入箱内，予2 o v a 生理盐 水5 m l 雾化吸入3 0 m i n ，隔日1 次，共激发2 0 次，每次3 0 m i n ，以出现 烦躁、呛咳、呼吸急促、活动量下降典型的哮喘发作的症状为激发成功。 4b c g 干预组( b c gi n t e r v e n t i o ng r o u p ) ：所有的幼鼠于实验第1 、8 天对 幼鼠腹腔注射o v a l 0 0 m g 和氢氧化铝1 0 0 m g ( 混于9 9 l 生理盐水2 m l 中) 进行致敏，于激发前7 d ( 第8 天) 给予皮内注射b c g 0 0 2 5 m g ，第15 天开始 每日激发前3 0 m i n 给予皮内注射b c g , 剂量同上。 中文摘要 最后一次激发2 4 小时后，l 戊巴比妥钠麻醉动物、取材。动物肺功 能检查( 检测气道基本阻力和静脉注射乙酰胆碱后气道阻力变化) ；肺组 织行病理切片，h e 染色，采用计算机图象分析技术测定支气管基底膜周 径( p b m ) ，总管壁面积( w a t ) ，平滑肌面积( w a m ) 等反映气道壁厚度的指 标；e l i s a 法检测各组大鼠血清中i f n - y ，i l 4 含量的变化；免疫组织 化学法检测各组大鼠气道壁c y c l i n d l 、q s m a 的表达变化，并应用图像 分析软件测量c y c l i n d l 、q s m a 的相对表达强度。 结果： 1 各组大鼠肺功能的检n - 气道激发试验检测呼吸峰值的变化间接反应气 道阻力( 两者成反比) 结果显示：盐水激发( 1 3 0 2 2 4 4 ，1 0 7 14 - 2 4 7 ，1 3 1 5 1 4 7 ，1 2 4 3 2 0 0 ，f = 2 2 0 4 ，p 0 1 ) 和6 2 5 9 9 m l 乙酰胆碱激发( 1 1 6 2 0 8 0 ，1 1 1 6 0 9 1 ，1 1 3 8 1 0 3 ，1 0 6 3 4 - i 1 9 ，f = i 4 5 3 ，p 0 1 ) 时各组间呼吸 峰值的变化无明显差异；随着乙酰胆碱浓度的增加，哮喘模型组( 8 7 9 1 3 1 ，6 4 7 1 6 2 ，4 5 5 1 0 3 ) 呼吸峰值较正常组( 1 2 3 64 - 1 3 5 ，1 2 3 6 1 5 9 ，1 1 8 0 1 9 7 ) 明显减低( f 值分别为1 0 6 6 0 ，2 5 4 3 1 ，4 4 1 2 5 ，p 0 0 1 ) ； 多b c g 组( 1 0 6 l o 8 3 ，1 0 7 0 1 2 4 ，0 4 14 - 0 9 3 ) 、干预组( 1 0 4 7 1 7 7 ，9 5 0 1 0 4 ，9 6 5 1 2 0 ) 呼吸峰值较正常对照组减低，但减低程度 较哮喘模型组低( s n k 组间分析，p 0 0 5 ) 。( 见t a b l e1 ) 。 2 各组大鼠血清i l 4 、i f n y 的检测： 哮喘组( 3 3 9 8 2 3 5 ) n g l 和多b c g 组( 1 6 4 6 4 - 1 9 2 ) n g l 、干预组 ( 2 0 8 9 4 _ 2 2 9 ) n g l 血清i l 4 水平比正常组( 1 1 4 3 2 7 2 ) n g l 显著升高， 有显著性差异( f = 1 3 6 4 1 4 ，p 0 0 1 ) ；多b c g 组和干预组i l 4 水平较哮 喘组明显减低，且有统计学差异( s - n k 组间分析，p 0 0 1 ) ，且多b c g 组与干预组之间有显著性差异，多b c g 组优于干预组( s - n k 组间分析， p 0 0 1 ) 。( 见t a b l e 3 ) 。 哮喘组( 1 0 9 1 9 ) n g l 和多b c g 组( 2 2 7 2 1 ) n g l ；干预组( 1 8 5 1 5 ) n g m 血清i f n - 7 水平比正常组( 3 0 4 3 6 ) n g m 显著减低，有显著性差 异( f = 9 0 0 3 0 ，p 0 0 1 ) ：且各组之间均有显著性差异( s n k 组间分析， p 0 0 5 ) ，多b c g 组优于干预组( s - n k 组间分析，p 0 0 5 ) 。( 见t a b l e 4 ) 。 3 肺泡灌洗液细胞计数及分类 与正常对照组( 5 4 0 1 5 2 ) 1 0 6 细胞总数的表达相比，哮喘模型 中文摘要 组( 1 7 1 5 3 0 2 ) 1 0 6 、多b c g 组( 8 7 8 2 0 0 ) 1 0 6 ，干预组( 1 1 8 7 2 3 1 1 0 6 的数量明显增加，有显著性差异( f = 4 7 9 3 0 ，p 0 0 1 ) ：多b c g 组和干预组较哮喘组数量减低，且有统计学意义( s n k 组间分析， p 0 0 1 ) ，且多b c g 组明显优于干预组( s n k 组间分析，p 0 0 5 ) 。与 正常对照组( 0 5 1 0 1 8 ) x1 0 6 嗜酸性粒细胞的数量相比，哮喘模型组 ( 2 1 9 0 3 0 ) 1 0 0 、多b c g 组( 1 1 9 0 3 1 ) 1 0 6 ，干预组( 1 4 9 0 3 0 ) 1 0 6 的比例明显增加，有显著性差异( f = 6 2 5 6 9 ，p 0 0 1 ) ；多b c g 组 和干预组较哮喘组表达减低，且有统计学意义( s - n k 组间分析，p 0 0 1 ) ， 且多b c g 组明显优于干预组( s n k 组间分析，p 0 0 5 ) 。( 见t a b l e 7 ) 4 各组大鼠气道重塑指标的检测： 4 1 各组大鼠气道管壁厚度的检测 哮喘组大鼠肺组织可见明显的炎性细胞浸润，杯状细胞增生，黏液分 泌增加和平滑肌细胞增生，卡介苗干预后能明显减少上述改变。分析比较 各组大鼠气道管壁面积、平滑肌面积结果显示：哮喘模型组( 9 8 1 7 4 - 9 3 8 、 2 3 3 6 土2 6 2 ) 和多b c g ( 7 2 1 0 士8 7 0 、1 3 0 3 4 - 2 6 2 ) ，干预组( 8 0 3 4 + 9 2 3 、 1 8 6 1 4 - 2 31 ) 气道管壁面积、平滑肌面积显著大于正常对照( 6 1 7 0 士8 7 7 、 1 0 6 1 + 1 1 4 ) ( f = 2 3 3 0 8 ；f = 5 1 5 0 6 ；p 0 0 1 ) ，多b c g 组和干预组气道管 壁面积、平滑肌面积明显小于哮喘模型( s - n k 组间分析，p 0 0 5 ) 。多 b c g 组优于干预组( s - n k 组间分析，p 0 0 5 ) 。( 见t a b l e 2 ) 4 2 各组大鼠气道免疫组化c y c l i n d l 、q s m a 的图像半定量分析，以阳 性平均灰度值为统计量( 含量与阳性平均灰度值成反比) ： 仅一s m a ：与正常组( 1 2 6 3 6 0 9 4 - 6 9 0 0 6 ) ( 见f i 9 3 a ) 大鼠气道q s m a 的阳性平均灰度值相比，哮喘组( 9 9 6 9 5 14 - 5 8 1 3 1 ) ( 见f i 9 3 b ) 、多b c g 组( 1 1 6 6 6 8 14 - 9 4 0 6 1 ) ( 见f i 9 3 c ) 干预组( 1 0 9 4 3 3 2 4 - 5 0 1 3 1 ) ( 见f i 9 3 d ) 的明显减低，有显著性差异( f = 1 5 6 5 8 ，p 0 0 1 ) ；其中哮喘组比多b c g 组和干预组表达减低，有显著性差异( s n k 组间分析，p 0 0 5 ) 。( 见t a b l e 5 ) 。 c y c l i n d l ：与正常对照组( 1 5 7 7 4 - 4 5 0 7 9 ) ( 见f i 9 4 a ) c y c l i n d l 阳 性目标平均灰度的表达相比，哮喘模型组( 1 2 9 8 4 - 4 9 6 6 6 ) ( 见f i 酗b ) 、 多b c g 组( 1 5 2 24 - 5 0 6 9 2 ) ( 见f i 9 4 c ) ，干预组( 1 4 8 34 - 2 0 0 17 ) ( 见 3 中文摘要 f i 9 4 ，d ) 的阳性平均灰度值明显减低，有显著性差异( f = 4 6 9 9 7 ，p 0 0 1 ) ： 多b c g 组和干预组较哮喘组表达增加，且有统计学意义( s n k 组间分 析，p 0 0 5 ) 。( 见t a b l e 6 ) 。 5c y c l i n d l 与仅- s m a 及c y c l i n d l 与i f n y 和i l 4 与c y c l i n d l 的相关分 析 p e a r s o n 相关分析证明哮喘模型组大鼠肺组织中c y c l i n d l 与仅s m a 的表达成正相关( r = o 7 2 8 ，p = 0 0 0 0 ) ；血清中i f n y 与肺组织中c y c l i n d l 含量( 1 平均阳性灰度值) 成负相关( f 0 5 2 9 ，p = 0 0 0 8 ) 。血清中i l 4 与 肺组织中c y c l i n d l 含量( 1 平均阳性灰度值) 成正相关( r - - 0 7 6 7 ，p = 0 0 0 0 ) 。 ( 见t a b l e 8 ，t a b l e 9 ，t a b l e 10 ) 。 结论： 1 哮喘模型成功建立，哮喘组大鼠在实验期间出现毛色无光泽、精神萎靡、 反应迟钝、体重轻于正常对照组等情况；激发过程中可见大鼠呼吸急促、 烦躁不安、张口呼吸、口唇紫绀、甚至四肢瘫软的表现。而正常对照组大 鼠在实验过程中无异常表现，饮食、行动、呼吸节律、体重均正常。这为 建立哮喘模型组提供依据。 2 哮喘模型组各大鼠肺组织病理可见大量炎性细胞浸润，肺泡灌洗液中细 胞总数和嗜酸性粒细胞比例明显高于正常对照组，血清i l 一4 水平明显升 高，i f n - 7 水平下降，i l 4 i f n - 7 比例升高，且均与正常对照组有显著性 差异，提示t h 2 反应在哮喘发病中占主要的地位。t h l t h 2 比例失衡在哮 喘发病中起到重要的作用。 3 多b c g 组和b c g 干预组大鼠肺组织病理中的炎性细胞低于哮喘模型组 但高于正常对照组，肺泡灌洗液中细胞总数和嗜酸性粒细胞比例低于哮喘 模型组但高于正常对照组，血清i l 4 水平低于哮喘模型组但高于正常对 照组，i f n - y 水平高于哮喘模型组但低于正常对照组，i l 4 i f n - 7 比例低 于哮喘模型组，说明b c g 可以调节t h l t h 2 比例平衡，促进t h l 型反应， 抑制t h 2 型反应，减轻气道炎症。 4 哮喘模型组气道0 【s m a 和c y c l i n d l 含量( 1 f l t 性平均灰度值) 水平明 显高于正常组且差别有统计学意义，说明哮喘发病初期即有气道重塑发 生。行i l 4 与c y c l i n d l ( 1 f f i 性平均灰度值) 相关分析成正相关，0 【s m a 中文摘要 与c y c l i n d l 相关分析成正相关，推测t h 2 分泌i l 4 ，进而产生各种炎性介 质刺激c y c l i n d l 的表达，启动细胞周期，气道平滑肌细胞增殖导致a s m a 表达增多。b c g 干预后a s m a 和c y c l i n d l ( 1 阳性平均灰度值) 水平明 显低于哮喘组，行i f n - 3 , 与c y c l i n d l ( 1 阳性平均灰度值) 相关分析成负 相关，推测b c g 可能通过上调1 1 1 l 反应，促进i f n y 的产生，而i f n y 可抑制c d k 2 的活化和c y c l i n d l 的表达，使g l 后期p r b 不能高磷酸化， 转录因子e 2 f 失去转录活性，气道平滑肌细胞g 1 s 期转化受阻，从而有 效地抑制气道平滑肌增值，减少a s m a 的产生。 5 多次b c g 接种组优于b c g 干预组，推测b c g 可以预防哮喘炎症及气 道重塑的发生，但哮喘炎症及重塑一旦发生，就很难逆转。 关键词：哮喘；气道重塑；卡介苗；白介素4 干扰素吖；细胞周期蛋 白d 1 ；仅肌动蛋白 英文摘要 t h ee f f e c t so fb a c i l l u sc a l m e t t e g u 6 r i ni mm u n i z a t i o no n a i r w a y i n f l a mm a t i o na n dr e m o d e l i n gi na s t hm ar a t s a b s t r a c t o b j e c t i v e ：t oi n v e s t i g a t ew h e t h e rt h eb a c i l l u sc a l m e t t e g u d d n ( b c g ) i m m u n i z a t i o no na s t h m ar a t sc a np r e v e n tt h ea i r w a yi n f l a m m a t i o na n d r e m o d e l i n ga n de v a l u a t et h eu n d e r l y i n gi m m u n o l o g i c a lm e c h a n i s m s t h r o u g h o b s e r v et h el e v e lo fi l - 4a n di f n - ? i nt h eb l o o ds e r u ma n dt h ee x p r e s s i o no f a s m aa n dc y c l i n d1i nl u n gt i s s e ，t oe x p l o r ew h e t h e rb c gc a na d ju s tt h e b a l a n c eo ft hl t h 2a n dl e s s e na i r w a yr e m o d e l i n g m e t h o d ：f o r t yc l e a n i n gm a l es dr a t s ，4w e e k so l d ，w e i g h t sf r o m5 0t o 10 0g r a m s ，w e r er a n d o m l yd i v i d e di n t of o u rg r o u p s ( 10i ne a c hg r o u p ) ：n o r m a l c o n t r o lg r o u p ，a s t h m a t i cg r o u p ，m u l t i p l eb c gv a c c i n a t i o ng r o u pa n db c g i n t e r v e n t i o n g r o u p t h e r a t so ft h em u l t i p l eb c gv a c c i n a t i o ng r o u pw a s i n j e c t e dh y p o d e r m a t i c a l l yb c g ( o 0 2 5 m g ) o nt h e7 t h 、3 t h 、f i r s td a y sb e f o r e s e n s i t i z e d t h ea s t h m a t i cg r o u p ，m u l t i p l eb c gv a c c i n a t i o ng r o u pa n db c g i n t e r v e n t i o ng r o u pr a t sw e r es e n s i t i z e do nt h ef i r s td a ya n dt h e8 t hd a yw i t h o v a l b u m i n ( o v a ) ( 10 0 m g ) c o m b i n a t e d w i t h a l ( o h ) 3 ( 10 0 m g ) b y i n t r a p e r i t o n e a li n j e c t i o n a n dt h e nt h o s er a t sw e r ec h a l l e n g e dr e p e a t e d l yw i t h i n h a l e da e r o s o l i z e do v ai na2 0 c m x 3 0 c mx 4 0 c mc l o s et i g h t l yb o xf r o m f i f t e e nd a y , r a t sw e r ec h a l l e n g e d3 0 m i n u t e se a c ht i m e ，e v e r yo t h e rd a y ，2 0 t i m e si na l l ，t h er a to ft h eb c gi n t e r v e n t i o n g r o u p w a si n je c t e d h y p o d e r m a t i c a l l yb c g ( o 0 2 5 m g ) o nt h e7 md a yb e f o r ec h a l l e n g e d f r o mt h e 15 曲d a yo n ，t h er a to ft h eb c gi n t e r v e n t i o n g r o u p w a s i n j e c t e d h y p o d e r m a t i c a l l yb c g ( o 0 2 5 m g ) b e s i d e s b ec h a l l e n g e d t h ec o n t r o lg r o u p r a t sw e r es e n s i t i z e da n dc h a l l e n g e dw i t hn o r m a ls a l i n e a f t e r2 4h o u r so f1 a s t c h a l l e n g e ，r a t s w e r ea n e s t h e s i a e db y1 p e n t o b a r b i t a l i na n dm e a s u r e d p u l m o n a r yf u n c t i o n ( t h ea i r w a y b a s i c e x p i r a t o r y r e s i s t a n c ea n d a i r w a y e x p i r a t o r yr e s i s t a n c ea f t e ri n j e c t e da c h ) l u n gt i s s u e sw e r es l i c e da n ds t a i n e d w i t hh e t h e p a r a m e t e r s s u c ha sb r o n c h i a lb a s e m e n tm e m b r a n e 6 英文摘要 p e r i m e t e r ( p b m ) ，t o t a l b r o n c h i a lw a l l a r e a ( w a t ) ，a n d s m o o t hm u s c l e a r e a ( w a m ) ，w h i c hr e f l e c tt h et h i c k n e s so fa i r w a yw a l l ，w e r em e a s u r e db y i m a g ea n a l y s i ss y s t e m t h el e v e lo fi f n - ? ，i l 4 i ns e r u mw a sm e a s u r e db y e l i s a t h ee x p r e s s i o no f c y c l i n d 1 、0 【s m a i na i r w a yt i s s u e sw e r eo b s e r v e d b yi m m u n o h i s t o c h e m i s t r yc o m b i n e dw i t ht h em i c r o i m a g ea n a l y s i s ，a n dm e a n o p t i c a ld e n s i t yo fc y c li n d1 、a - s m a w e r em e a s u r e db yi m a g ea n a l y s i s s o f t w a r e r e s u l t s ： ，1 m 一 一 一 l lh ep u l m o n a r yf i m c t i o na m o n g s t u d yg r o u p s ： t h ea i r w a yb a s i ce x p i r a t o r yr e s is t a n c ew a s h i g h e ri na s t h m a t i c i ti se f f e c t e d b yr e s p i r a t o r yp e a k t h er e s p i r a t o r yp e a ko ft h ea s t h m ag r o u pa n dm u l t i p l e b c gv a c c i n a t i o ng r o u p 、b c gi n t e r v e n t i o ng r o u pw e r es i g n i f i c a n t l yl o w e r t h a nt h a ti nn o r m a lc o n t r o lg r o u p ( p 0 0 1 ) ，a n dt h a tw a sl o w e ri nm u l t i p l e b c gv a c c i n a t i o n g r o u p a n db c gi n t e r v e n t i o ng r o u pt h a ni na s t h m a t i c g r o u p ( s n ka n a l y s i s ，p 0 0 5 ) 2t h el e v e lo f i l 一4 、i f n - 7i nb l o o d s e r u ma m o n g s t u d yg r o u p s ： t h ec o n c e n t r a t i o no fi l - 4i ns e r u mo fa s t h m a t i cg r o u p ( 3 3 9 8 + 2 3 5 ) n g l ， m u l t i p l e b c gv a c c i n a t i o ng r o u p ( 1 6 4 6 + 1 9 2 ) n g l a n db c gi n t e r v e n t i o n g r o u p ( 2 0 8 9 + 2 2 9 ) n g l w a ss i g n i f i c a n t l yh i g h e r t h a nt h a to fc o n t r o l g r o u p ( 11 4 3 4 - 2 7 2 ) n g l ( f ：1 3 6 4 1 4 ，a l lp 0 0 1 ) ，t h ec o n c e n t r a t i o no f i l 一4 i ns e r u mo f m u l t i p l e b c gv a c c i n a t i o n g r o u p ( 16 4 6 + 1 9 2 ) a n d b c g i n t e r v e n t i o ng r o u p ( 2 0 8 9 + 2 2 9 ) n g lw e r es i g n i f i c a n t l yl o w e rt h a na s t h m a t i c g r o u p ( 3 3 9 8 4 - 2 3 5 ) n g l ( s n ka n a l y s i s ，p 0 01 ) ，w h i l et h ec o n c e n t r a t i o no f i l 一4b e t w e e nm u l t i p l eb c gv a c c i n a t i o ng r o u p ( 1 6 4 6 + 1 9 2 ) n g l a n db c g i n t e r v e n t i o n g r o u p ( 2 0 8 9 4 - 2 2 9 ) n g l w e r es t a t i s t i c a l s i g n i f i c a n c e ( s n k a n a l y s i s ，p 0 0 1 ) t h ec o n c e n t r a t i o no fi f n - 丫i ns e r u mo fa s t h m a t i cg r o u p ( 1 0 9 4 - 1 9 ) n g l ， m u l t i p l e b c gv a c c i n a t i o n g r o u p ( 2 2 7 4 - 2 1 ) n g l a n db c gi n t e r v e n t i o n g r o u p ( 18 5 4 - 1 5 ) n g l w a ss i g n i f i c a n t l y l o w e rt h a nt h a to fc o n t r o l g r o u p ( 3 0 4 4 - 3 6 ) n g l ( f ：9 0 0 3 0 ，a np 0 0 1 ) ，t h ec o n c e n t r a t i o no fi f n - ? i n s e r u mo f m u l t i p l e b c gv a c c i n a t i o n g r o u p ( 2 2 7 士2 1 ) n g l a n d b c g 7 英文摘要 i n t e r v e n t i o ng r o u p ( 1 8 5 士1 5 ) n g lw e r es i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a na s t h m a t i c g r o u p ( 10 9 + 1 9 ) n g l ( s n - ka n a l y s i s ，p 0 01 ) ，t h ec o n c e n t r a t i o no fl f n y o f m u l t i p l e b c gv a c c i n a t i o ng r o u p ( 2 2 7 士2 1 ) n g l w a sb e t t e rt h a nb c g i n t e r v e n t i o ng r o u p ( 18 5 士1 5 ) n g l ( s - n - ka n a l y s i s ，p 0 0 5 ) 3t h es u mo fc e l l s i nb r o n c h o a l v e o l a r l a v a g ef l u i d ( b a l f ) a n d c l a s s i f i c a t i o n ： t h es u mc e l l si nb a l f o fa s t h m a t i cg r o u p ( 17 15 + 3 0 2 ) x10 6 ，m u l t i p l e b c gv a c c i n a t i o n g r o u p( 8 7 8 + 2 o o ) 1 0 6 a n db c gi n t e r v e n t i o n g r o u p ( 11 8 7 土2 31 ) 1 0 0 w a s s i g n i f i c a n t l yh i g h e r t h a nt h a to fc o n t r o l g r o u p ( 5 4 0 士1 5 2) 1 0 0 ( f = 4 7 9 3 0 ：p 0 0 1 ) ，m u l t i p l eb c gv a c c i n a t i o n g r o u pa n db c gi n t e r v e n t i o ng r o u pw e r es i g n i f i c a n t l yl o w e rt h a nt h a to f a s t h m a t i cg r o u p ( s n ka n a l y s i s ，p 0 01 ) m u l t i p l eb c gv a c c i n a t i o ng r o u p w e r eb e t t e rt h a nb c gi n t e r v e n t i o ng r o u p ( s n ka n a l y s i s ，p 0 01 ) t h e q u a n t i t ye o so fa s t h m a t i cg r o u p ( 2 19 士0 3 0 ) 10 0 ，m u l t i p l eb c g v a c c i n a t i o n g r o u p ( 1 19 士0 31 ) 10 0 a n db c gi n t e r v e n t i o ng r o u p ( 1 4 9 土0 3 0 ) 10 6 w a s s i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a nt h a to fc o n t r o lg r o u p ( o 51 - 4 - 0 18 ) 10 6 ( f = 6 2 5 6 9 ， p 0 01 ) ，m u l t i p l eb c gv a c c i n a t i o ng r o u pa n db c gi n t e r v e n t i o ng r o u pw e r e s i g n i f i c a n t l y l o w e rt h a nt h a to fa s t h m a t i c g r o u p ( s - n - ka n a l y s i s ， p 0 01 ) m u l t i p l eb c gv a c c i n a t i o ng r o u pw e r eb e t t e rt h a nb c gi n t e r v e n t i o n g r o u p ( s - n ka n a l y s i s ，p 0 0 5 ) 4 a i r w a yr e m o d e l i n ga m o n gs t u d yg r o u p s ： 4 1t h e p a t h o l o g yo fl u n gt i s s u e ： o b v i o u si n f i l t r a t i o no fi n f l a m m a t o r yc e l l sa n dp r o l i f e r a t i o no fg o b l e t c e l l sa sw e l la se n h a n c e m e n to fm u c u sa n ds m o o t hm u s c l eh y p e r p l a s i ac a nb e s e e ni nt h el u n gt i s s u eo fa s t h m a t i cr a t s a f t e rt h et r e a t m e n tw i t hb c c t h e d e c r e a s eo ft h ea b o v em e n t i o n e de f f e c t sw e r eo b s e r v e d o b s e r v et h ea i r w a y w a l la r e aa n ds m o o t hm u s c l ea r e ai nt h e s et h r e eg r o u p sb yo p t i c a lm i c r o s c o p e a n di m a g ea n a l y s i ss y s t e m ：t h ea i r w a yw a l la r e aa n ds m o o t hm u s c l ea r e aw e r e s i g n i f i c a n t l yt h i c k e ri na s t h m a t i cg r o u p ( 9 8 17 土9 3 8 、2 6 7 7 士6 7 9 ) a n dm u l t i p l e b c gv a c c i n a t i o ng r o u p ( 7 2 1 0 士8 7 0 、1 6 9 8 士1 6 6 ) 、b c gi n t e r v e n t i o ng r o u p ( 8 0 3 4 士9 2 3 ，21 3 3 士2 91 ) t h a nt h o s ei nn o r m a lc o n t r o lg r o u p ( 61 7 0 土8 7 7 、 8 英文摘要 12 2 2 士2 6 3 ) ( f ：2 3 3 0 8 ；p 0 o1 ) t h e a i r w a yw a l la r e a ，s m o o t hm u s c l ea r e a w e r es i g n i f i c a n t l yt h i n n e ri nb c g g r o u p t h a nt h o s ei na s t h m a t i cg r o u p ( s n k a n a l y s i s ，p 0 0 5 ) 4 2t h ee x p r e s s i o no fa s m a , c y c l i n d1 i na i r w a yt i s s u e sw e r eo b s e r v e db y i m m u n o h i s t o c h e m i s t a yc o m b i n e dw i t ht h em i c r o i m a g ea n a l y s i s ，t h em a s e a v e r a g eg r a ys c a l ew e r eu s e da ss t a t i s t i c ： q - s m a ：t h em a s t a v e r a g eg r a y s c a l eo fa - s m ai na s t h m a t i c g r o u p ( 9 9 6 9 5 1 + 5 8 1 3 1 ) ，m u l t i p l eb c gv a c c i n a t i o ng r o u p ( 1 1 6 6 6 8 1 士9 4 0 6 1 ) a n d b c gi n t e r v e n t i o ng r o u p ( 10 9 4 3 3 2 士5 013 1 ) w e r el o w e rt h a nt h a t i nc o n t r o l g r o u p ( 1 2 6 3 6 0 9 士6 9 0 0 ) ( 见f i 9 3 a ) ( f ：1 5 6 5 8 ，p 0 0 1 ) ，a n dt h a tw a sh i g h e r i nm u l t i p l eb c gv a c c i n a t i o ng r o u p ( 116 6 6 81 士9 4 0 6 1 ) a n d b c gi n t e r v e n t i o n g r o u p ( 1 0 9 4 3 3 2 士5 0 1 31 ) t h a ni na s t h m a t i cg r o u p ( 1 2 6 3 6 0 9 士6 9 0 0 6 ) ( s - n k a n a l y s i s ，p 0 0 5 ) c y c l i n d l ：t h em a s