毕业论文答辩-人工蛹虫草子实体中核苷类成分的超声提取工艺研究.ppt

人工蛹虫草子实体中核苷类成分的超声提取工艺研究,学院：化学与生命科学学院专业：食品科学与工程姓名：指导老师：,目录,一、研究意义,人工蛹虫草子实体，主要分布于中国东三省，以及河北地区，具有极高的营养价值和药用价值，是集食补、美容、药用等多种功能功效于一体的真菌。,图1蛹虫草子实体,目前，蛹虫草作为药(食)用菌已被广泛接受,市场需求在不断扩大,加强其药用和保健价值的开发是未来深入研究的重要内容。蛹虫草常被作为传统名贵中药冬虫夏草的代用品来开发,虽然取得了不少成果,但其自身特殊的活性成分及药理作用仍有待深入研究。,二、研究内容,核苷类成分的提取方法,核苷类成分的定量方法,超声提取法,热回流法,微波提取法,无机盐复合沉淀法,柱层析法,溶剂萃取法,薄层色谱分析技术,紫外分光光度法,高效液相色谱分析技术,三、实验部分,1、核苷类物质含量的测定方法,图2标准品色谱图,色谱条件：色谱柱：PinnacleIIC18.2504.6mm，5um；流动相：甲醇18%，水82%；流速：0.5mL/min；进样量：10uL；SPA紫外检测器：260nm。,图3虫草素标准曲线,标准曲线方程为:Y虫草素=33.79X-0.8304，R2=0.99994，在线性范围内表现出良好的线性关系。,图4腺苷标准曲线,标准曲线方程为:Y腺苷=32.768X+0.2137，R2=0.99992结果表明，在线性范围内表现出良好的线性关系。,核苷类物质提取率的计算,（公式1）,式中：m为原料蛹虫草子实体粉末质量，g；c为核苷类物质的浓度，mol/L；v为核苷类物质溶液体积，L；n为核苷类物质的摩尔质量，g/mol。,2.提取方法的确定,图5三种提取方法的结果比较,由图5可知，超声波法对蛹虫草子实体中核苷类物质的提取达到最大提取率0.325%，所以本实验选用超声波法进行提取。,3.提取溶剂的选择,图6不同溶剂下提取率,由图6知，当试剂为水时，对蛹虫草子实体中核苷类物质的提取达到最大提取率0.317%，由此可确定水的提取效率最高，所以本实验选定水为提取试剂。,4.超声提取工艺条件优化,单因素试验,液料比对提取率的影响,图7不同液料比下提取率,由图7可知，不同的液料比下，对核苷类物质的提取率各不相同，而在液料比40:1时提取率达到最高的0.327%，由此可以确定最佳提取试剂水与原料比为40:1。,提取时间对提取率的影响,图8不同提取时间下提取率,由图8可知，不同的提取时间对应的提取率有很大的差别，而当提取时间为40min时，对蛹虫草子实体中核苷类物质的提取率达到了0.327%，此后，提高提取时间，对核苷类物质的提取率增加很不明显，由此确定最佳提取时间为40min。,提取温度对提取率的影响,图9不同温度下提取率,由图9可知，不同温度对应的提取率有比较细微的差别，而当温度在80时，对蛹虫草子实体中核苷类物质的提取率达到最高的0.342%。此可得出，对核苷类物质的最佳提取温度是80。,超声功率对提取率的影响,图10不同超声功率下提取率,由图10可知，不同超声功率下对应的提取率有较大的差别，而当功率在100W时，对蛹虫草子实体中核苷类物质的提取率达到最高的0.309%。由此可得出，对核苷类物质的最佳提取功率为100W。,正交试验在单因素试验的基础上，选取四个主要影响因素：超声功率、液料比、提取时间、提取温度，进行L9(34)正交试验，因素水平见表1，以提取率为指标，确定最佳提取工艺。表1正交试验表,表2正交试验结果表,小结,通过以上试验，初步确定了人工蛹虫草子实体中核苷类物质提取的最佳工艺条件为：所得虫草素提取率为0.148%，腺苷提取率为0.197%。,四、实验结论,（1）本论文比较了微波提取法、超声波提取法、热回流提取法等三种方法对人工蛹虫草子实体中虫草素和腺苷的提取效果，结果表明，超声波提取法提取效果较好，结果令人满意。（2）论文分别以甲醇、乙醇和水为提取溶剂，超声波法提取蛹虫草和腺苷，结果表明，水的提取效果最好，尤其是较高温度条件下的提取效果更加明显。（3）对超声波提取法在单因素试验的基础上，采用正交试验法优化了提取虫草素和腺苷的最佳工艺条件为：超声功率100W，提取温度80，提取时间40min，液料比为40:1，提取次数3次。经HPLC检测，最优提取条件下虫草素提取率为0.197%,腺苷提取率为0.148%。,五、致谢,诚挚的感谢王志兵老师对本论文的悉心指导。王老师严谨的治学态度，求真务实的风范，使我受益匪浅，是我终生学习的楷模。其次感谢邱芳萍教授在论文实验过程中的指导，并提出了许多宝贵的意见和建议，在实验实施阶段还为我提供了非常好的实验室条件，使我的论文能够顺利的完成