（有机化学专业论文）由橙皮苷合成新型黄酮烯基醚类和黄酮糖缀合物的研究.pdf

s t u d i e so ns y n t h e s i so fn e wf l a v o n o i dv i n y le t h e rd e r i v a t i v e s a n df l a v o n o i dg l y c o e o n j u g a t ef r o mh e s p e r i d i n b y l i y u nf u b s ( a n y a n gn o r m a lu n i v e r s i t y ) 2 0 0 8 at h e s i ss u b m i t t e di np a r t i a ls a t i s f a c t i o no ft h e r e q u i r e m e n t sf o rt h ed e g r e eo f m a s t e ro fs c i e n c e i n o r g a n i cc h e m i s t r y i nt h e 1 3 r a d u a t es c h o o l o f h u n a nu n i v e r s i t y s u p e r v i s o r p r o f e s s o rw a n gq i u a n m a y ，2 0 1 1 湖南大学 学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研 究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论 文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文 的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。 本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。 作者签名： 锍谚私日期：加ij 年厂月岁口日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定， 同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子 版，允许论文被查阅和借阅。本人授权湖南大学可以将本学位论文 的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印 或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 本学位论文属于 1 、保密口，在年解密后适用本授权书。 2 、不保密团。 鳓么认( 请在以上相应方框内打“”) 作者签名：, y 劲vf 弋这i 受f - 1 期：枷l 年r 月弘日 导师签名： 日期：沙j j 年j 月；汐日 硕士学位论文 摘要 黄酮类包括黄酮、黄烷酮和黄酮醇等是一类广泛存在于自然界，具有广泛的 药理活性的天然产物，如具有防治心血管疾病、抗癌、抗菌消炎、防氧化和抗病 毒等疗效。为了进一步研究这类化合物的生物活性和新药开发的需要，我们开展 了新型黄酮类烯基醚衍生物及其黄酮糖缀合物的合成研究。 1 、设计了以橙皮苷为起始原料，经过糖苷水解、甲基化、脱氢等反应步骤制 备橙皮素、桃皮素、脱氢桃皮素、香叶木素和木犀草素等种药用黄酮类天然产物， 再分别与异戊烯基溴和法尼烯基溴反应合成5 种异戊烯基取代或法尼烯基取代的 新型黄酮类化合物( 1 9 - l j ) 。再以橙皮苷为起始原料，经脱氢、糖苷水解、脱甲基 化、乙酰化、溴化等反应步骤合成3 溴黄酮( 1 d ) 。 2 、由橙皮苷用两种不同的方法合成黄酮醇。以橙皮苷为起始原料，通过糖苷 水解、苄基化开环等反应步骤合成查尔酮，再通过a f o 反应得到黄酮醇( 2 d ) 。 此反应虽然操作简单，但收率低，生成大量副产物。以橙皮苷为起始原料，通过糖 苷水解、脱氢、苄基化等反应步骤合成黄酮，通过氧化丙酮氧化成黄酮醇( 2 d ) 。 这个反应不仅操作简单，成本低，而且收率高，可得到大量的黄酮醇( 2 d ) 。 3 、以合成的黄酮醇( 2 d ) 为底物合成一系列新的黄酮醇糖苷类和糖缀合物。 采用溴化乙酰基乳糖，四丁基溴化铵( t b b a ) 为相转移催化剂，在碳酸氢钠的碱性条 件下，水- - 氯甲烷体系中进行糖苷化反应获得黄酮醇类的乙酰化糖苷( 2 k ) 。采 用溴化乙酰基葡萄糖、溴化乙酰基麦芽糖为糖基给体，使之叠氮化，同时把黄酮 醇与溴丙炔反应得到炔基黄酮醇( 2 9 ) 。同样用两相体系把炔基黄酮醇( 2 9 ) 进行糖苷 化反应获得黄酮醇类的乙酰化糖苷( 2 h ，2 i ，2 n ) 。这些化合物均未见文献报道。 4 、所有合成的化合物的结构已由核磁共振氢谱( 1 hn m r ) 、质谱( m s ) 、红外 光谱( i r ) 等方法进行了结构确认。 关键词：橙皮苷；黄酮类；烯基醚衍生物；黄酮糖缀合物；合成 n 、 a b s t r a c t f l a v o n i d sa r ew i d e l yd i s t r i u t e dt h r o u g ht h ep l a n tm e d i c a m e n t ，w h i c hp o s s e s sa w i d er a n g eo fp h a r m a c o l o g i c a l p r o p e r t i e si n c l u d i n ga n t i v a s c u l a r d i s e a s e a c t i v i t y ， a n t i i n f e c t i v ea n da n t i f e r t i l i t y a c t i v i t y ，a n t i c a r c i n o g e n i ca c t i v i t y ，a n t i v i r a la c t i v i t y ， a n t i o x i d a n te f f e c t t h ei m m e d i a t ef a m i l ym e m b e r so ff l a v o n o i d s i n c l u d ef l a v o n e s c h a l c o n e s ，f l a v a n o n e s ，a n df l a v o n o l s i no r d e rt of u r t h e rr e s e a r c ht h eb i o l o g i a la c t i v i t i e so f t h i sc l a s sc o m p o u n d sa n d m e e tt h en e e d o fn e wd r u gd e v e l o p m e n t ，w ew o u l dl i k e t os y n t h e s i z en e wt y p e f l a v a o n o i dv i n ye t h e rd e r i v a t i e sa n df l a v o n eg l y c o c o n j u g a t e f i v ek e yi n t e r m e d i a t e s ，h e s p e r e t i n ，p e r s i c o g e n i n ，d e h y p e r s i c o g e n i n ，d i o m e t i na n d l u t e o l i nw e r e s y n t h e s i z e df r o mh e s p e r i d i n ，t h r o u g h h y d r o l y z a t i o n ，m e t h y l l a t i o n ， d e h y d r o g e n a t i o n t h e s ef i v ec o m p o u n d sr e a c t e dw i t ht r a n s , t r a n s f a r n e s y lb r o m i d eo r p r e n y lb r o m i d e ，w h i c hs y n t h e s i z e de i g h tn e wf l a v o n o i d s ，i n c l u d i n g ( 1 9 l j ) 3 - b r o m o f l a v o n e ( 1 d ) w a ss y n t h e s i z e df r o mh e s p e r i d i n ，t h r o u g hd e h y d r o g e n a t i o n h y d r o l y z a t i o n ，d e m e t h y l l a t i o n ，a c e t y l a t i o n ，b r o m i n a t i o n f l a v o n o l ( 2 d ) w e r es y n t h e s i z e df r o m h e s p e r i d i n u s i n g t w od i f f e r e n t m e t h o d s f l a v o n o l ( 2 d ) w e r es y n t h e s i z e df r o m h e s p e r i d i n ，t h r o u g hh y d r o l y z a t i o n ， b e n z y l a t i o n ，a f or e a c t i o n t h es y n t h e s i sm e t h o dw a sb e t t e rt h a no t h e rm e t h o d sw i t h s i m p l eo p e r a t i o n ，b u tt h er e l a t i v e l yl o w e rp r o d u c t i o nr a t e t h es y n t h e s i sm e t h o dw a s z h eb e s to n en o to n l yw i t ht h el o wp r o d u c i n gc o s ta n ds i m p l eo p e r a t i o n ，b u ta l s ow i t h t h er e l a t i v e l yh i g h e rp r o d u c t i o nr a t ea n dr e c e i v i n gal o to ff l a v o n 0 1 f l a v o n o l ( 2 d ) w e r e s y n t h e s i z e df r o mh e s p e r i d i n ，t h r o u g hh y d r o l y z a t i o n ，d e h y d r o g e n a t i o n ，b e n z y l a t i o n ， o x i d a t i o nw i t hs u p e r o x i d e f l a v o n o l o a c e t y lg l u c o s i d e sw e r es y n t h e s i z e d b y t h e f l a v o n o l ( 2 d ) a c e t y l b r o m i d el a c t o s ea sg l y c o s y ld o n o r , u s i n gt e t r a b u t y l a m m o n i u mb r o m i d e ( t b b a ) a sp h a s et r a n s f e rc a t a l y s t ，t h er e a c t i o nw a st a k e nu n d e rt h em i l dr e a c t i o nc o n d i t i o n si n a l k a l i n eb a k i n gs o d ao ft h ew a t e r d i c h l o r o m e t h a n es y s t e m a c e t y lb r o m i d eg l u c o s e ， m a l t o s ea c e t y lb r o m i d ea sg l y c o s y ld o n o r , w h i c hw e r es y n t h e s i z e dt oa z i d e s u g a r f l a v o n o l ( 2 d ) r e a c t e dw i t hb r o m o a l l y l e n e ，s y n t h e s i z e da l k y n y lf l a v o n 0 1 w i t ht w o - p h a s es y s t e m sf l a v o n o lg l u c o s i d e w e r es y n t h e s i z e di nt h i ss t u d y t h e s ec o m p o u n d s u n t i ln o w a n dg l y c o c o n j u g a t e ( 2 h ，2 i ，2 k ，2 n ) h a v eb e e nn o tr e p o r t e di nl i t e r a t u r e s t h es y n t h e t i cc o m p o u n d ss t r u c t u r eh a sb e e nc o n f i r m e db y1 hn m r ，m s a n di r m 硕士学位论文 k e y w o r d s ：h e s p e r i d i n ；f l a v o n o i d ；v i n y le t h e rd e r i v a t i v e s ；f l a v o n eg l y c o c o n i u g a t e ； s y n t h e s i s ； i v 由橙皮苷合成新型黄酮烯基醚和黄酮糖缀合物的研究 目录 学位论文原创性声明与学位论文版权使用授权书i 摘要i i a b s t r a c t ，i i i 第l 章绪论：1 1 1 引言l 1 2 黄酮类化合物研究进展2 1 2 1 黄酮类化合物的结构及分类2 1 2 2 橙皮苷的药理作用研究进展2 1 2 3 橙皮苷的提取工艺研究进展一：4 1 3 黄酮醇类化合物研究进展8 1 3 1 黄酮醇类化合物药理活性的研究进展一8 1 3 2 黄酮醇类化合物的合成研究进展1 0 1 4 点击化学及其应用1 5 1 4 1 点击化学”反应的共同特征1 5 1 4 2 “点击化学”的反应类型1 6 1 4 3 叠氮化物炔环加成反应1 6 1 4 4 “点击化学”的应用1 7 1 5 本论文的选题思路及研究内容1 8 第2 章由橙皮苷合成新型黄酮类烯基醚衍生物2 0 2 1 引言2 0 2 2 目标化合物的确定2 0 2 3 合成路线的确定2 l 2 4 实验部分2 3 2 4 1 仪器与设备2 3 2 4 2 实验步骤一2 3 2 5 结果与讨论2 8 2 5 1 合成方法与机理的讨论2 8 2 5 2 谱图解析2 9 2 6 小结3 2 第3 章由橙皮苷合成黄酮糖苷的研究3 3 3 1 引言3 3 硕士学位论文 3 2 目标化合物的确定3 3 3 3 合成路线的确定3 4 3 3 1 用a l g a r - f l y n n - o y a m a d a 反成合成黄酮醇的路线3 4 3 3 2 用过氧丙酮合成黄酮醇的路线3 5 3 3 3 合成黄酮醇糖缀合物3 6 3 4 实验部分3 7 3 4 1 仪器与设备3 7 3 4 2 实验步骤- 3 8 3 5 结果与讨论4 2 3 5 1 合成方法和机理的讨论4 2 3 5 2 黄酮糖苷结构的确认4 4 3 5 3 谱图解析4 4 3 6 硝、结4 7 结论4 9 参考文献5 l 附录a 合成的化合物一览表5 8 附录b 合成的化合物的谱图6 0 致谢7 1 硕士学位论文 1 1 引言 第1 章绪论 黄酮类化合物是自然界分布较广的一类次生代谢产物，是药用植物中的主要 。 活性成分之一，具有广泛的药理作用【1 1 ，如抗氧化【2 1 、降血压【3 1 、抗肿瘤【4 1 等作用。 黄酮类化合物可以分为1 0 多个类别，黄酮、黄烷醇、异黄酮、双氢黄酮、双氢黄 酮醇、噢弄、黄烷酮、花色素、查耳酮、色原酮等，现已发现约4 0 0 0 余种黄酮类 化合物，主要存在于植物的叶、果实、根、皮中，研究人员对其提取方法、成分测 定、功能作用等进行了广泛深入的研究。 柑桔中含有丰富的类黄酮，按其结构的不同可分为4 类：黄烷酮、黄酮、黄酮 醇和黄烷酮醇。它们一般以糖基化苷的形式存在。这其中黄烷酮的含量最多，橙 皮苷主要存在于橙和桔中，柚皮苷主要存在于柚中。 黄酮化合物的生理活性多种多样，具有心血管系统活性，抗菌或者抗病毒活 性，抗肿瘤活性，抗氧化自由基活性，抗炎症痛活性，保肝活性及抗疲劳作用。 所以黄酮类化合物是最近新药研究的的一个十分重要的研究资源，具有广阔开发 的前景，因而受到有机化学家和药物化学家的普骗重视。 橙皮苷一般从天然植物陈皮、枳实、柑橘皮中提取出来。橙皮苷不仅在医学 上有广泛的用途，还在食品、运动营养学方面有着广阔的应用前景。以橙皮苷为 原料制备水溶性橙皮苷、橙皮素、桃皮素、地奥明、香叶木素、甲基橙皮素、橙 皮苷二氢杳耳酮、木犀草素、圣草酚、奥洛波尔和新橙皮苷等黄酮类化合物，因 此开发橙皮苷意义重大。中国有极其丰富的陈皮、枳实、柑橘皮等自然资源，从 中研究出一些具有重要生理功能的活性成分是研究目标综合利用可大幅度提高 资源利用率，提高经济效益。由于它们都是可再生资源，开发利用则应该走生态 种植、绿色加工、综合利用的可持续发展之路。从较便宜的原料合成所需要的新 的黄酮类化合物。 黄酮醇( f l a v o n 0 1 ) 为一类低分子的天然植物成分，也是黄酮类化合物一重要分 支，在自然界中分布广泛。由于其毒副作用小，药理活性广泛，具有防治心血管 疾病、抗癌、清除自由基、抗菌、抗炎等活性，因此越来越受到人们的关注。黄 酮醇类化合物在自然界中具有广泛的分布，在蕨类、裸子植物、被子植物中均有 不同种类、不同含量的分布。随着科学技术的发展，黄酮醇类新化合物的不断发 现，其在临床和人民保健上的应用前景一定十分可观。 黄酮类化合物已成为国内外天然药物开发利用研究的热点【5 6 】。在生物黄酮类 化合物资源的合理利用中，将含量较高的天然产物半合成为生理活性更强的衍生物 或药物，具有来源丰富、合成步骤少、生产成本低的优点，对药物研究开发具有重 基醚类和黄酮糖缀合物的研究 黄酮类化合物的名称来源于黄酮，这是因为这一类物质大都呈黄色和具有4 位羰基的原故。黄酮类化合物过去主要是指基本母核为2 苯基色原黄酮类化合物。 大部分为色原酮的衍生物，现在则是泛指两个苯环( a 与b ) 通过中央三碳链相互 连接成具有c 6 c 3 c 6 基本骨架的一系列化含物，其基本结构见图1 1 。 7 6 7 6 4 7 6 4 1 2 2 橙皮苷的药理作用研究进展 橙皮苷( h e s p e r i d i n ) 异名陈皮苷、橘皮苷，分子式为c 2 8 h 3 4 0 i s ，相对分子量是 6 1 0 5 5 ，熔点为2 5 7 - 2 6 0 1 2 。1g 橙皮苷可溶于5 0l 水中，在6 0 溶于二甲基 硕士学位论文 甲酰胺及甲酰胺，微溶于甲醇、乙醇及热的冰醋酸；几乎不溶于丙酮；不溶于乙 醚、苯；难溶于三氯甲烷，稍易溶于热醋酸、苯胺；可溶于吡啶、甘油、稀的碱 溶液。其乙醇溶液中滴加三氯化铁试液后，成现暗褐色，用镁粉和浓盐酸还原后， 里紫色，溶在稀碱中呈黄色，加酸到一定的酸度会有黄色沉淀析出。稀酸中加热 会水解成葡萄糖、鼠李糖和橙皮糖。由于橙皮苷分子结构中含有多个羟基，所以 有酸性，有亲水性，属黄酮物质的黄烷酮。早期把它作为维生素p ，近年来发现其 具有降血压、抗过敏、降低骨密度和胆固醇的作用它还具有改变体内酶活性， 改善微循环，抗菌、抗炎、抗肝炎、抗肿瘤等药理作用。近来的研究表明，橙皮苷 具有维持血管正常渗透压，增强毛细血管韧性【9 】、降低胆固醇、提高免疫力、抑菌、 抗病毒等多种功效【1 0 j ，引起了人们的广泛关注，目前，已成为天然保健食品和药物 学研究的热点内容。 ( 1 ) 对胃肠功能及平滑肌作用 橙皮苷对胃肠有兴奋作用，而明显拮抗阿托品、肾上腺索引起的小肠胃排空 和小肠推进抑制作用。橙皮苷对新期的明所致胃排空、小肠推进加快无影响，对 平滑肌的作用先有短暂兴奋，然后抑制，所以它是健胃消食类药物的主要成分之 一o ( 2 ) 有增强维生素c 的作用 橙皮苷能促进豚鼠的生长速度，从而提高脾、肾上腺及自细胞中抗坏血酸的 含量，改善眼球结膜血管内红细胞凝聚和毛细血管抵抗力降低等由于维生素c 缺乏 导致的疾病【1 1 1 。 ( 3 ) 抗羟自由基氧化 橙皮苷具有抗脂质过氧化和清除羟自由基的作用，且呈剂量依赖关系；还对 羟自由基引起的红细胞膜质过氧化有明显的抑制作用，且与其分子中酚羟基有关 【1 2 】。橙皮苷还对羟自由基引起的红细胞膜氧化损伤有一定的保护作用【13 1 。研究表 明自由基可加速机体老化，引发心血管等疾病，造成机体在各个水平上的损伤【1 4 1 。 刘瑞、朱思明等【1 5 d 6 】研究表明，橙皮苷可清除机体内的自由基，提高机体免疫力； 可与金属离子螯合，从而抑制自由基引发剂的产生。这样就可以直接清除自由基。 ( 4 ) 对中枢神经系统的影响 橙皮苷是新发现的作用于中枢神经系统的黄酮类化合物，具有镇静、催眠作 用【l7 1 。橙皮水提取物中含有橙皮苷它有明显抑制中枢神经的作用，可显著加快 给与阈上剂量戊巴比妥钠小鼠的入睡时间，同时延长睡眠时间，提高睡眠质量【1 8 l 。 ( 5 ) 降低胆固醇 橙皮苷可抑制3 羟3 甲基戊二酰辅酶a 还原酶和胆固醇o 酰基转移酶的活 性从而降低载脂蛋白合成所需脂类，抑制微粒体甘油三酰转运蛋白活性，因此 降低肝内胆固醇。 由橙皮苷合成新型黄酮类烯基醚类和黄酮糖缀合物的研究 ( 6 ) 治疗风湿 橙皮苷对佐剂性关节炎和大鼠继发性关节炎有治疗作用。它与调节机体免疫功 能及维持细胞网络功能平衡有关。对人类的类风湿关节炎的治疗有借鉴意义【i 9 1 。 抑制皮肤色素沉着，具有美白作用 橙皮苷使多巴阳性的黑色素细胞及黑色素颗粒的细胞数减少，对u v b 诱导的黑 色素沉着有抑制作用。柑橘果实中的二氢黄酮糖苷有抗酪氨酸酶，吸收u v a 、 u v b 和s o d 样作用，从而达到皮肤美白的作用【2 0 j 。 ( 7 ) 防止骨质疏松的作用 由于雌激素缺乏可导致骨质疏松。而雌激素受体存在于骨母细胞和骨髓基质细 胞中。橙皮苷对雌激素受体亲和力强，可作用于雌激素受体，这样就有效防止骨 细胞丢失，明显减少股骨远端骨的破骨细胞数量 2 1 - 2 2 1 。 ( 8 ) 抗癌功能 橙皮苷对人的肺癌、直肠癌、肾癌、人乳腺癌细胞有明显抑制作用，不仅无致 突变性，而且可拮抗其他化疗药物的致突变性。可用于癌症预防，并极有可能成 为一种很好的治疗癌症的药物或合成药物的原料。 当然橙皮苷对人乳腺癌细胞增生有一定的抑制作用，陈皮提取物对人肺癌细 胞、直肠癌细胞、肾癌细胞也有显著性的抑制活性【2 3 1 。这一特性已引起美国、日 本等国家的普遍关注，并认为是一种有开发前景的抗肿瘤中药提取物。不仅表现出 无致突变性，还能拮抗呋喃氟脲嘧啶、噻替哌、环磷酰胺等多种化疗药物的致突变 毒性【2 4 1 ，同时能显著拮抗环磷酰胺所致的雄性小鼠生殖细胞的损伤，故可用于癌症 的预防【2 5 1 。最近还有较多报道，橙皮苷及其衍生物能抑制许多诱变物引起的癌肿 形成2 6 2 3 1 ，暗示橙皮苷可能是一种强有力的化学治疗物或原料。 1 2 3 橙皮苷的提取工艺研究进展 1 2 3 1 以陈皮为原料的提取工艺 为芸香科植物橘( c i t r u sr e t i c u l a t eb l a n c o ) 及其栽培变种的干燥成熟果皮，分为 “陈皮和“广陈皮 。“广陈皮 产于广东新会等地，品质最佳，但产量小； 四川江津、重庆、简阳等地产量大。“陈皮在福建漳州、浙江温州等地产量大， 9 1 0 月果实成熟，剥取果皮。阴干或通风干燥。陈皮中含挥发油，其含量为1 5 - 2 0 ；广陈皮挥发油含量为1 2 1 3 。黄酮类成分主要有橙皮苷 ( h e s p e r i d i n ) 、新橙皮苷( n e o h e s p e r i d i n ) 、川i 陈皮素( n o b i l e t i n ) 等【2 9 1 ，还含有辛弗林 ( s y n e p h r i n e ) 。陈皮有理气健脾、燥湿化痰的功效，用于胸脘胀满、食少吐泻、咳 嗽痰多等症。陈皮提取物是一种有着开发前景的抗肿瘤中药活性成分。陈皮在中 国资源十分丰富，可提取橙皮苷、挥发油、色素、果胶等。提取以上成分后，它 的渣可作饲料、肥料、燃料等。应对其加以综合利用，提高其资源利用率。发挥 硕士学位论文 其综合经济效益。林林等【3 0 】研究表明，陈皮储存时间越长，橙皮苷和总黄酮含量就 越高，证实了古人所述的“陈久者良 的说法。 ( 1 ) 热水提取法【3 0 】 陈皮粉碎后加3 4 倍量水煮沸3 0m i n 左右，压榨过滤，滤液浓缩至原液浓度 的3 5 倍。再放在0 3 下放置，结晶、过滤得粗品，粗品用热水或乙醇重结晶， 得纯品。这种工艺简单，收率低，纯度低。 ( 2 ) 醇提酸沉法【3 l 】 陈皮粗粉以9 5 甲醇或乙醇同时煮沸提取3 次，每次lh 。过滤、浓缩，浓缩 液以盐酸调至p h = 4 ，会有沉淀析出，过滤得粗品粗品重结晶得精品。所得产品 纯度达9 4 7 ，但工艺复杂，成本高，提取率低。 ( 3 ) 碱( 石灰水) 提酸沉法 陈皮粗粉p h 值1 2 一1 3 ，用石灰水提取，压榨过滤，滤液以盐酸中和，加热6 0 7 0 ，放置过滤，过滤得粗品，粗品重结晶，得精品。该工艺艺回收率只有2 0 。 ( 4 ) 水提树脂吸附法【3 0 】 1 0 0g 原料，加蒸馏水15 0 0m l ，再加n a 2 c 0 37 5g 浸泡4h ，离心，过滤， 滤液以浓盐酸调至p h = 5 ，放置，过滤；滤液加5 乙醇洗涤，得粗品，粗品热水 争 溶解，上d 1 0 1 树脂吸附，以5 0 乙醇洗涤，收集醇洗液，浓缩干燥，纯度达9 6 7 ，收率达1 9 2 。其工艺复杂，成本高，收率低。 ( 5 ) 脱脂碱溶酸沉法 取陈皮粗粉加入1 4 倍量水，进行水蒸汽蒸馏，收集蒸馏液残渣以石灰乳溶 解，过滤，滤液以l ：l 盐酸酸化至p h = 2 ；收集沉淀，沉淀再用乙醇溶解结晶得产 j 品。本工艺先得到陈皮油，再提取橙皮苷，可得到综合利用。 ( 6 ) 醇提碱溶酸沉法【3 2 】 陈皮粗粉以5 0 6 0 乙醇回流提取至提取液几近无色后，把乙醇提取液收集 到一起，使其沉淀，过滤；水洗沉淀，7 0 下干燥，得粗品；粗品溶于含2 氢氧 化钾的5 0 乙醇中，过滤，滤液以稀盐酸中和。过滤，沉淀以乙醇重结晶得白 色结晶。其工艺简单，但纯度不高。 ( 7 ) 醇提铅沉法 以乙醚和甲醇冷浸数次，过滤，滤液弃去，残渣以甲醇热提至提取无色为止， 加入饱和醋酸铅，过滤，滤液通入h 2 s 气体，过滤，浓缩，放冷，乙醇中重结晶。 该工艺不但用到易燃易燥乙醚，而且使用了醋酸铅，若除铅不彻底，会使产品中 重金属含量超标。 ( 8 ) 碱( 氢氧化钠) 提酸沉法【3 2 】 陈皮粗粉以p h 值1 1 5 1 2 的氢氧化钠溶液提取2h ，提取液以稀盐酸巾和至 p h = 5 放置，过滤，滤饼水洗后得粗品：粗品以含1 氢氧化钠的5 0 乙醇溶解， 过滤，滤液以稀盐酸调至p h = 5 ，放置，过滤，滤饼水洗，干燥，得精品旧。该法 含量不高，且工艺复杂。 ( 9 ) 水提沉淀树脂吸附法 陈皮以热水提取，提取液以钙盐沉淀，过滤滤液以大孔树脂吸附，水洗，浓 缩干燥。该法收率高，但含量较低。 ( 1 0 ) 高速逆流色谱法【3 3 】 以石油醚：乙酸乙酯：甲醇：水( 2 ：4 ：3 ：3 ( v v ) ) 为两相溶剂系统，主机转速8 5 0 d m i n ，流动相流速1 7m l m i n ，检测波长2 8 0n m 条件下，6h 内可从4 4g 陈皮中 提物分离得到橙皮苷l o 1m g ，纯度在9 7 以上。 1 2 3 2 以枳实为原料的提取工艺 它为芸香科植物酸橙( c i t r u sa u r a n t i u ml ) 及其栽培变种或甜橙( c i t r t a s s i r v e r l ，i s o s b e c k ) 的干燥幼果，主产于四川、广西等地，以广西产地最为丰富把 它称“江枳实 。本品性味苦、微寒，它的功能破气、行痰、散积、消痞，主治 食积痰滞、胸腹满、腹胀腹痛、胃垂、子宫下垂、脱肛等疾病。果实含挥发油及 黄酮成分，黄酮类成分有苦橙素( a u r a n t i a m a r i n ) 、橙皮苷( h e s p e r i d i n ) ，新橙皮苷 ( n e o h e s p e r i d i n ) ，柚皮苷( n a r i n g i n ) ，酸橙素( a u r a n t i n ) 、辛弗林( s y n e p h r i n e ) 、n 甲基酪胺( n m e t h y h y r a m i n e ) 等。果实未成熟时含新橙皮苷，成熟后消失。中国 有极其丰富的枳实资源，在全围年销量约在6 0 万9 0 万k g 左右。可从中分别提取 橙皮苷、柚皮苷、辛弗林、n 甲酪胺、新橙皮苷及挥发油等重要医药化工原料。 文献【3 4 3 5 】报道了5 个产地枳实中橙皮苷的含量：四川江津1 0 9 7 ，江西清江1 5 7 4 ，广东新会2 3 4 l 福建漳州2 4 7 l ，湖南沅江2 1 2 5 但四川江津产枳实 中新橙皮苷含量高达1 5 0 5 ，柚皮苷为5 0 2 。 ( 1 ) 醇提酸沉法p 州 枳实以碱性乙醇浸泡提取3 次，过滤，滤液合并，以浓盐酸调p h 值近中性或 弱酸性，过滤。滤液水洗，干燥，收率达1 3 。 ( 2 ) 碱性醇液提取法1 3 6 j 用6 0 乙醇8 倍量，回流提取2 次，每次1 5h ，残渣以含氢氧化钠的7 5 乙 醇液以l o 倍量回流提取2 次，每次o 5h ，合并提取液，滤液测得橙皮苷含量最高 达2 0 5 5 。该法工艺简单。 ( 3 ) 水提取法 1 0 0g 枳实药材，置挥发油提取器中，加1 0 0 0m l 水煮沸3h ，收集挥发油， 水液取适量测橙皮苷类含量；残渣以1 0 0 0m l 水过滤回流1h 。如此操作2 次，分 别检测，得出第1 次提取液橙皮苷类成分提取率达6 7 4 7 ，第2 次提取率达1 4 9 0 第3 次提取率为6 9 3 。3 次提取陈皮苷类成分近9 0 ，说明水提取是可行 硕士学位论文 的而且成本低，工艺简单。 ( 4 ) 超声提取法【3 7 1 取0 1g 枳实粉，用2 0m l1 0 0 甲醇超声提取1 5m i n ，含量达2 8 6 2m g g 。 1 2 3 3 以柑橘皮为原料的提取工艺 本品为芸香科植物茶枝柑( c i t r u sc h a c h i e n s i sh o r t ) 、成瓯柑( s u a v i s s i m o l t a n a k a ) 的干燥果皮。芸香科植物橘( a t r u s r e t i c u l a t eb l a n c o ) 干燥果皮称“橘红。 柑橘皮是柑橘加工的主要副产物，主要含有精油、色素、果胶、黄酮类化合物， 约占果重的2 5 4 0 ；柑橘精油约占鲜果皮重的o 5 3 ，精油里含有萜烯类、 倍半萜烯类等。天然色素占果皮十重的o 4 1 3 ，分水溶性和脂溶性色素。黄 酮类化合物主要有橙皮苷、新橙皮苷、柚皮苷等。其中橙皮苷约占果皮千重的1 一3 ，最具提取价值；果胶约占果皮十重的2 0 3 0 ，在食品医学方面广泛 应用。柑橘纤维是从果皮中提取的一种膳食纤维，约占果皮于重的6 0 。柑橘在 加工橙汁过程中会产生3 0 5 0 的果皮渣，也含有橙皮苷等功能成分，橙皮苷含 量约3 。 ( 1 ) 脱脂碱提酸沉法【3 8 】 取柑橘皮以5 倍量石油醚( 沸程：3 0 6 0 ) 回流lh ，过滤。然后将残渣加5 倍甲醇同流3h ，过滤，滤渣冉以l 倍量甲醇洗，合并甲醇液，浓缩，浓缩物加稀 醋酸，可得白色结晶；粗品以l o 甲酰胺在6 0 溶解，脱色过滤，滤液放置，结 晶：滤饼先以热水洗，冉以异丙醇洗，得白色结晶。 ( 2 ) 榨汁碱提酸沉法【3 9 】 柑橘粗皮加入l ( w w ) 的生石灰混匀陈皮堆放2 0m i n ，压榨，渣子打散后， 用3 6 倍量( m l g ，v w ) 饱和石灰水浸提3 0m i n ，加盐酸酸化。过滤，滤饼用水 洗，干燥得粗品，粗品以热水重结品，得精品。该工艺设备简单，提取方法简单。 ( 3 ) 碱提酸沉法 提取果胶后的果皮渣，加入3 0 - - 4 0 氢氧化钠调至p h = 1 2 ，然后再把提取液 用稀盐酸调至p h = 5 ，析出沉淀后加热至7 0 ，保温2 0m i n ，静置1 0 1 5h ，过滤， 滤饼用热水洗，再以乙醇洗，在6 0 干燥得白色橙皮苷产品，收率为果胶渣的4 5 。该工艺具有工业化生产价值。 ( 4 ) 超声提取树脂吸附纯化法【3 9 】 马丽萍等以氢氧化钙为溶剂超声提取过滤。滤液以盐酸调p h 值至酸性，过 滤，干燥，得粗品。提取液以d a 2 0 1 b 树脂吸附，以8 0 的乙醇解吸，解吸率达 9 0 ，纯度达9 3 。 ( 5 ) 超滤提取法 采用超滤法提取橙皮苷以截流量为3 0k d 的聚丙烯腈膜，在压力0 2 5m p a 、 温度3 5 、流速8 0l h 、体积浓缩比为3 ：4 的条件下，结晶，橙皮苷纯度可达8 5 由橙皮苷合成新型黄酮类烯基醚类和黄酮糖缀合物的研究 以上。 ( 6 ) 微波提取树脂纯化法 提取时间为1m i n ，乙醇体积分数为6 0 料液比1 ：1 0 ，橙皮苷收率2 0 2 ， d 1 0 1 大孔树脂纯化，纯度达9 6 7 。 1 3 黄酮醇类化合物研究进展 1 3 1 黄酮醇类化合物药理活性的研究进展 黄酮醇( f l a v o n 0 1 ) 是一类低分子的天然植物成分，也是黄酮类化合物一重要分 支，在自然界中分布相当广泛。由于其毒副作用小，药理活性广泛，具有防治心 血管疾病、抗癌、清除自由基、抗菌、抗炎等活性，因此受到人们的广泛关注。 为了充分利用这一植物资源，本文对近年来黄酮醇类化合物的药理活性的研究进 行综述。 ( 1 ) 对心血管系统的作用 血栓性疾病、心脑血管疾病与血小板凝集密切相关。只要抑制血小板凝集活 性能，就能有效地防治此类疾病的发生、发展。槲皮素( q u e r c e t i n ) 是一种黄酮醇类 化合物，可强烈抑制凝血酶，从而诱导的血小板凝集作用。血小板激活因子( p a f ) 是迄今为止最强的血小板激活剂，它与组织缺血再灌注损伤、冠心病、动脉粥样 硬化等许多脑血管疾病密切相关。从红花中分离出的杨梅素( m y r i c e t i n ) 和山柰酚 ( k a e m p f e r 0 1 ) 可通过抑制p a f 控制血小板内游离c a 2 + 浓度，从而而使血小板活化 受到抑制，因此起到保护心血管的作用。其机理可能与p a f 受体拮抗剂银杏总内 酯的作用相似【4 0 1 。同时黄酮醇类化合物还具有松弛血管平滑肌的作用。槲皮素、 漆树黄酮( f i s e t i n ) 和芦丁( m t i n ) 均可抑制k + 和脱羟肾上腺素( p e ) 来诱导的血管平 滑肌的收缩，在高剂量时可能是通过抑制c a 从细胞内的释放等机制来实现的。 m a c h h a1 4 1 】的研究表明在5 位上连有o h 的黄酮醇对p e 诱导的血管收缩较k 诱导 的血管收缩具有更好的松弛作用：在6 位上的o h 或者5 、6 、7 位上具有三个相连 的o h 可减少黄酮醇松弛血管平滑肌的活性作用。当血管内皮细胞( v e c s ) 受损时， 可导致动脉粥样硬化、高血压等心血管疾病的发生【4 2 1 。林蓉等研究表明槲皮素对 缺氧缺糖诱导的血管内皮细胞的损伤【4 3 】和过氧化氢诱导的血管内皮细胞损伤【4 4 】 均有保护作用，发生机理可能与槲皮素抗氧化性相关。金丝桃苷可以减少大鼠心肌 缺血再灌注损伤和心肌细胞凋亡，作用机制可能与其抗氧化性和n o 自由基的形 成，减少心肌缺血再灌注凋亡的发生有关。研究表明黄酮醇类化合物对于高血压、 高血脂、心肌肥厚等心血管疾病，也具有一定的防治作用。 ( 2 ) 抗抑郁作用 抑郁症是一种情感病态变化为主要症状的精神性疾病。近年来，用金丝桃提取 物来治疗抑郁症已经成为趋势。目前，已占据了德国抗抑郁药市场的2 0 ，而且 硕士学位论文 还有上升趋势。而槲皮素、金丝桃苷、异槲皮素等黄酮醇及其苷类化合物为金丝 桃提取物中抗抑郁的主要成分，其机理可能与抑制单胺氧化酶( m a o ) 和5 羟色胺 ( 5 - h t ) 有关。从棉花籽中分离得到的黄酮醇苷( c t n 9 8 6 ) ，能对皮质酮造成的神 经细胞损伤具有保护作用。黄酮醇类在对小鼠强迫游泳实验中，能使小鼠不动时 间缩短，表明它有较强的抗抑郁作用啊。 ( 2 ) 抗氧化、清除自由基作用 自由基是指含有未成对电子的原子、原子团或分子。在生物体内自由基的产 生与消除处于动态平衡中，一旦平衡被破坏，少量的自由基可能对机体产生很大 的危害，从而导致疾病的发生。研究表明自由基与许多疾病密切相关，如动脉粥 样硬化、糖尿病、癌症等。又有研究表明自由基也与人类的衰老有关1 4 5 1 。人体内 的自由基主要有氧自由基、o h 、r c o o 等几种，黄酮醇对这些自由基均有良好 的消除作用，与金属离子形成鳌合物可能是其消除自由基的主要途径【4 6 1 。 近年来，国内外学者相继对黄酮抗氧化的构效关系做了研究，张红雨【4 7 】用a m i 法发现黄酮类化合物b 环上邻二酚羟基的活性强于间二酚羟基。赵继红【4 8 】用结构 化学和量子化学半经验计算的方法研究表明：( 1 ) 在分子内形成半醌式自由基时所 需能量的生成热之差较低，所形成的自由基较稳定，从而具有较高的抗氧化活性； ( 2 ) 电子自旋密度分布均匀性，是黄酮类抗氧化性较强的重要原因；( 3 ) 分子中的 酚羟基的数目和可形成氢键的数目与分子的抗氧化活行相关，是黄酮类化合物具 有强抗氧化性的重要因素。b r o w n t 4 9 】通过对槲皮素、山柰酚、芦丁与c u 2 + 相互作 用的研究，发现b 环上邻3 ，4 二羟基的存在对“螯合物的形成具有非常重要的作 用，影响着抗氧化活性。h o u l t 5 0 】的研究表明对于a a p h 、c u 2 + 诱导的l d l 氧化作 用，邻位具有羟基的黄酮醇要比没有的黄酮醇的抗氧化性强。而黄酮醇的糖苷具 有更强