（外科学专业论文）胰腺癌中mta1、hif1a的表达及临床意义.pdf

一、摘要 目录 中文论著摘要1 英文论著摘要2 二、英文缩略语3 三、论文 1 j l f j u 舌4 材料与方法4 实验结果6 讨论9 结论l l 四、本研究创新性的自我评价1 2 五、参考文献1 3 六、附录 综述1 5 在学期间科研成绩2 3 致 射2 4 个人简介2 5 中文论著摘要 胰腺癌中m t a l 、h i f 1 a 的表达及临床意义 目的 探讨m t a l 及h i f 1 的表达与胰腺癌的临床病理学特征间的关系，以及两种 蛋白之间的相互关系。 材料与方法 采用免疫组织化学染色方法检测6 9 例胰腺癌组织及3 l 例正常胰腺组织中 m t a l 及h i f 1 a 的表达情况，并结合临床数据分析m t a l 和h i f 1 a 间的关系及 临床意义。 结果 m t a l 、h i f 。l a 在胰腺癌组织中的表达显著高于正常胰腺组织( p 0 0 1 ) ，相 关性分析显示胰腺癌组织中m t a i 、h i f 1 a 二者之间具有正相关性( f o 0 5 7 4 ， p 0 0 1 ) ，结合临床资料分析，m t a l 阳性表达与胰腺癌的临床分期及淋巴结转移 相关( p = 0 0 4 7 ，p = o 0 0 1 ) ，h i f 1 a 阳性表达与肿瘤大小、临床分期、淋巴结转移、 远处转移相关( p = 0 0 1 3 ，p = 0 0 0 1 ，p = 0 0 1 2 ，p 0 0 0 1 ) 。 结论 m t a l 、h i f 1 a 在胰腺癌组织中高表达，m t a l 通过增强h i f 1 a 稳定性促进 胰腺癌的发生、发展，利用这一机制为胰腺癌的治疗提供了一条新的思路。 关键词 胰腺癌；m t a l ；h i f 1 a ；免疫组织化学染色 英文论著摘要 e x p r e s s i o n so fm t a l a n dh i f - lai np a n c r e a t i cc a n c e r a n dt h e i rc l i n i c a ls i g n i f i c a n c e o b j e c t i v e t oe x p l o r et h ec o r r e l a t i o no ft h ee x p r e s s i o n so fm e t a s t a s i sa s s o c i a t e dg e n e ( m t a 1 ) a n dh y p o x i ai n d u c i b l ef a c t o r1 a l p h a ( h i f - la ) t ot h ec l i n i c a lf e a t u r e so fp a n c r e a t i c c a n c e r m e t h o d s t h ee x p r e s s i o n so fm t a la n dh i f - l ap r o t e i n si n6 9p a n c r e a t i cc a n c e rp a t i e n t s a n d31n o r m a lp a n c r e a t i ct i s s u e sw e r ed e t e c t e db y i m m u n o h i s t o c h e m i s t r ys t a i n i n g 1 k s u i t s e x p r e s s i o n so fm t a la n dh i f l ai np a n c r e a t i cc a n c e rt i s s u ew e r es i g n i f i c a n t l y h i g h e rt h a nt h a ti nn o r m a lp a n c r e a t i ct i s s u e ( p o 0 1 ) ，a n dt h ec o r r e l a t i v ea n a l y s i s r e v e a l e dt h a t t h ee x p r e s s i o no f m t a lw a s p o s i t i v e l yc o r r e l a t e dw i mh i f 1 a ( r = 0 5 7 4 ， p 1 0 的肿瘤细胞呈现染色则定义为阳性【3 1 。 3 、统计学处理 应用s p s s1 7 0 统计软件进行统计学分析，用矿检验分析m t a i 和h i f 1 a 蛋 白免疫染色强度与临床病理特点的相关性，用s p e a r m a n 双变量相关性检验对 m t a l 和h i f 1 a 进行相关性分析。p 0 0 5 定为有统计学意义。 结果 一、m t a l 、h i f 1 a 阳性表达与胰腺癌临床病理学特征的关系 m t a l 表达仅见于细胞浆，呈棕黄色颗粒状( 见图1 ) ，其中胰腺癌组阴性、 弱阳性、中度阳性、强阳性分别为2 1 、1 6 、2 2 、l o 例；正常胰腺组分别为1 4 、 1 2 、5 、0 例；m t a l 在胰腺癌组织( 4 6 3 8 ) 的表达明显高于正常胰腺组织( 1 6 1 3 ， p = 0 0 0 4 ) ( 见表1 ) 。m t a l 阳性表达与胰腺癌的临床分期及淋巴结转移相关( p = 0 0 4 7 ，p = o 0 0 1 ) ，而与性别、肿瘤大小、分化程度及远处转移等无关。( 见表3 ) 。 表1 ，m t a l 在胰腺癌组织和正常胰腺组织中的表达 有3 7 例呈现h i f 1 a 染色阳性，其中胰腺癌组中3 5 例( 5 0 7 2 ) ，正常组织 中2 例( 6 4 5 ) 。h i f 1 a 在胰腺癌组织中的表达明显高于正常胰腺组织( p 0 0 0 1 ) ( 见表2 ) 。在h i f 1 a 染色阳性的标本中，可见h i f 1 a 主要表达在细胞胞浆，呈 棕黄色颗粒状( 见图2 ) ，部分细胞胞核也有阳性表达；h i f 1 a 在胰腺癌组织中阳 性表达率与肿瘤大小、临床分期、淋巴结转移、远处转移相关( p = 0 0 1 3 p = 0 0 0 1 ， p = 0 0 1 2 ，p 0 0 1 ) ，而与性别、分化程度等无关( 见表3 ) 。 6 表2 ，h i f l a 在胰腺癌组织和正常胰腺组织中的表达 i t e m c a s e h i f - 1 a ( )(+)p p 觚c 豫i t i cc 锄c 盯 6 93 4 ( 4 9 2 8 ) 3 5 ( 5 0 7 2 ) o 0 0 1 n 0 1 1 1 1 a 1p a n c r e a t i ct i s s u e 31 2 9 ( 9 3 5 5 )2 ( 6 4 5 ) 图1 ，m t a l 在胰腺癌中的阳性表达( s p 法，x 4 0 0 ) 图2 ，h i f 1 a 在胰腺癌中的阳性表达( s - p 法，x 4 0 0 ) 7 表3 ，胰腺癌m t a l 、h 1 f 1 a 表达与临床病理特征的相关性 二、m t a l 与i t i f 1 仅表达的相关性 在m t a l 低表达的3 7 例胰腺癌组织中，h i f 1 a 阳性表达率是3 8 6 4 ( 9 3 7 ) ， 在m t a l 过度表达的3 2 例胰腺组织中，h i f 1 a 阳性表达率是8 1 2 5 ( 2 6 3 2 ) 。 对二者行s p e a r m a n 双变量相关性分析，结果显示两者表达具有正相关关系，相关 系数r = 0 5 7 4 ，p 1 ) 的过表达，且m t a l m r n 过表达的胰腺癌患者出现淋巴结转移的几率更高。h o f c r 9 掣1 1 】通过建立m t a l 绿色荧光蛋i 白( e g f p m t a l ) 的胰腺癌细胞株p a n c 1 发现 e g f p m t a l 表达升高的同时伴有细胞运动及侵袭能力的显著增强。我们的研究发 现m t a l 在胰腺癌组中的表达强度明显高于正常胰腺组，m t a i 阳性表达与胰腺 癌的临床分期及淋巴结转移相关( p = 0 0 4 7 ，p = o 0 0 1 ) ，而与性别、肿瘤大小、分 化程度及远处转移等无关。这与上述几人的研究相一致，但m i y a k e 等【1 3 】应用免 疫组化技术检测3 9 例胰腺癌标本中m t a l 的表达，发现m t a l 蛋白表达水平临 床病理特性无关。这需要今后更多的研究予以验证。 肿瘤组织的缺氧在肿瘤形成的病理过程中异常重要，与肿瘤放、化疗耐受及恶 性进展、远处转移密切相关。缺氧时，肿瘤组织新生血管增加，乏氧代谢增强，有多 种基因参与这一过程其中h i f - l a 起关键作用。h i f 1 a 是调节细胞内氧代谢的关键 因子。在常氧条件下，h i f 1 a 被羟基化，而与泛肽链接酶复合物的成分v 蛋白 ( p v h l ) 相结合，最终导致h i f 1 a 的泛肽化而降解；在缺氧条件下，h i f 1 a 的 羟基化被抑制，阻碍p v h l 与其结合，h i f 1 a 表达和活性增加阻钔，参与启动与肿 瘤适应缺氧有关的多种基因的转录，如葡萄糖转运蛋白、血管内皮生长因子、内 皮素1 、转铁蛋白、酪氨酸羟化酶以及糖降解酶等，维持肿瘤细胞的能量代谢、 促进新生血管形成、促进肿瘤的增殖和转移n5 1 6 o 近年来对h i f 1 a 特异性单克 降抗体进行了免疫组化研究结果显示，在绝大多数正常人体组织中未检测到 h i f 1 a 蛋白的表达，而在大多数人类实体肿瘤中存在h i f 1 a 的过表达，且与预后 密切相关m 1 。我们研究结果显示，6 9 例胰腺癌组织中有3 5 例h i f 1 a 蛋白呈阳性 表达，提示在人类胰腺组织中存在缺氧状态，h i f 1 a 的表达在胰腺癌发生、发展 中扮演着重要角色。另外，本研究证实h i f 1 a 与肿瘤大小、临床分期、淋巴结转 移、远处转移相关( p - 0 0 1 3 ，p = 0 0 0 1 ，p = 0 0 1 2 ，p 0 0 0 1 ) ，与性别、分化程度 无关，这一结果与裘正军n 8 1 等的报道相符，但m i y a k ek 1 3 1 等研究显示h i f 1 a 蛋白阳性表达与临床病理特征无明显相关性。可见关于h i f 1 a 的表达与胰腺病理 特征的关系，目前仍没有统一的结论。我们考虑其原因可能是由于各个研究者所 选取的样本量及样本组成有所不同，且阳性结果的判定标准不同，对实验结果产 生了一定影响，有待我们的进一步研究加以验证。 我们的研究证实了胰腺癌中m t a l 和h i f 1 a 蛋白表达有着显著的正相关性。 l o y o u n g - g u ny r o o 【1 9 】等通过对人类乳腺癌组织的研究，发现其根本的机制为m r al 通过增加组蛋白去乙酰化酶l ( h d a c l ) 的表达，诱导h i f 1 a 的去乙酰化，由于去 乙酰化的h i f 1 q 对泛素一蛋白酶体降解的抵抗导致了稳定状态的h i f 1 a 水平升高， 而且h i f 1 a 的靶分子之一血管内皮生长因子( v e g f ) 的表达也随之增强，促进肿 瘤新生血管的形成【2 0 2 。 综上所述，m t a i 与h i f l a 的相互作用促进了胰腺肿瘤细胞侵袭和转移。对胰 腺癌患者进行m t a l 及h i f 1 a 的检测，有助予对其早期诊断及侵润潜能的评估。深 入研究其相互作用机制，实现对其关键步骤的阻断，为临床胰腺癌的治疗提供了 新的途径。 结论 l 、m t a l 在胰腺癌组中的表达强度明显高于正常胰腺组，m t a l 阳性表达与 胰腺癌的临床分期及淋巴结转移相关，而与性别、肿瘤大小、分化程度及远处转 移等无关。 2 、h i f 1 a 在胰腺癌组织中的阳性率高于正常胰腺组织，提示在人类胰腺癌 组织中存在缺氧状态，其表达与肿瘤大小、临床分期、淋巴结转移、远处转移相 关，与性别、分化程度无关。 3 、胰腺癌中m t a l 和h i f 1 a 蛋白表达有着显著的正相关性。m t a l 通过增 强h i f 1 a 稳定性促进胰腺癌的发生，利用这一机制为胰腺癌的治疗提供了一条新 的思路。 本研究创新性的自我评价 本研究首次采用免疫组织化学s - p 法检测m t a i 与h i f 1 a 在胰腺癌和正常胰 腺组织中的表达，同时结合大量临床病例资料进行全面分析，发现m t a i 、h i f 1 a 在胰腺癌组织中的表达显著高于正常胰腺组织相关性分析显示肿瘤组织中 m t a l 、h i f 1 a 二者之间具有正相关性。m t a l 阳性表达与胰腺癌的临床分期及 淋巴结转移相关，h i f 1 a 在胰腺癌组织中阳性表达率与肿瘤大小、临床分期、淋 巴结转移、远处转移相关。研究证实m t a i 通过增强h i f 1 a 的稳定性促进胰腺癌 的发生、发展，利用这一机制可以为临床胰腺癌的治疗提供了新途径。实验设计 科学新颖，i 晦床资料翔实可靠。 1 2 参考文献 1a h m e d i l lj , r e b e c c as , e l i z a b e t hw ，e ta lc a n c e rs t a t i s t i c s 【j 】c ac a n c e rjc l i n 2 0 0 7 , 5 4 ： 4 3 6 6 2h o f e rm d ，k u e f e rr ，v a r a m b a l l ys ，e ta 1 t h er o l eo fm e t a s t a s i s - a s s o c i a t e dp r o t e i n1 i n p r o s t a t ec a n c e rp r o g r e s s i o n c a n c e rr e s 2 0 0 4 ；6 4 ：8 2 5 8 2 9 3s 锄e n z ag l r e g u l a t i o no fm a m m a l i a n0 2h o m e o s t a s i sb yh y p o x i a - i n d u c i b l ef a c t o r1 a n n u r e vc e l ld e vb i 0 1 1 9 9 9 ；1 5 ：5 5l - 5 7 8 4t o hyp 朗c i ls d ，n i c o l s o ng l an o v e lc a n d i d a t e m e t a s t a s i s a s s o c i a te dg e n e ，m t a l ， d i 岱釉t i a l l ye x p r e s s e d i nh i g l u n e t a s t a t i cm a m m a r ya d n o c a r c i n o m ac e n i n e s j , j b i o l c h e m ，19 9 4 ，2 6 9 ( 3 7 ) ：2 2 9 5 8 - 2 2 9 6 3 5t o hy , p e n c i ls d , n i c o l s o ng l a n a l y s i so ft h ec o m p l e t es e q u e n c eo ft h en o v e lc a n d i d a t e m e t a s t a 略i s a s s o c i a t e dg e n e , m t a l ，d i f f e r e n t i a l l ye x p r e s s e d i nh i g h l ym e t a s t a t i cm a m m a r y a d e n o c a r c i n 咖aa n db r e a s tc a n c e rc e l ll i n e s 【j 】g e n e ，1 9 9 5 ，1 5 9 ( 1 ) ：9 7 1 0 4 6p e n c i ls d , t o hy , n i c o l s o ng l c a n d i d a t em e t a s t a s i s a s s o c i a t e dg e n e s o ft h er a t1 3 7 6 2 n f m a m m a r ya d e n o c a r c i n o m a j b r e a s tc a n c e r r e st r e a t ，19 9 3 ，2 5 ( 2 ) ：16 5 l7 4 7n i c o l s o ng l , n a w aa , t o hye ta 1 t u m o rm e t a s t a s i s - a s s o c i a t e dh u m a nm t a lg e n ea n d i t s m t a lp r o t e i np r o d u c t ：r o l ei ne p i t h e l i a lc a n c e rc e l li n v a s i o np r o l i f e r a t i o na n dn u c l e a r r e g m a t i o n j c l i ne x pm e t a s t a s i s ，2 0 0 3 , 2 0 ( 1 ) ：1 9 - 2 4 8m a z u m d a ra ，w a n gr u i a n ，s a n d i pk , e ta 1 t r a n s c r i p t i o n a lr e p r e s s i o no fo e s t r o g e nr e c e p t o r b y m e t a s t a s i s a s s o c i a t e dp r o t e i n1c o r e p r e s s o r j n a t u r e c e l lb i o l o g y , 2 0 01 ，3 ( 1 ) ：3 0 9y a hc ，w a n gh ，t o hy , e ta l r e p r e s s i o no f9 2 - k d at y p e i vc o l l a g e n a s ee x p r e s s i o nb ym t a l i s 功甜i a t e dt h r o u g hd i r e c ti n t e r a c t i o n sw i t ht h ep r o m o t e rv i aam e c h a n i s m ，w h i c h i sb o t h d e p e n d e n to na n di n d e p e n to f h i s t o n ed e a c e t y l a t i o n j jb i o lc h e m , 2 0 0 3 ，2 7 8 ( 4 ) ：2 3 0 9 1 0k 删r ，w a n gr a ，b a g h e r iy a r m a n d e m e r g i n gr o l e so fm t a lf a m i l ym e m b e r si nh u m a n c a n c e r s j s e m i no n c o l ，2 0 0 3 ，3 0 ( 5s u p p l l 6 ) ：3 0 11h o f e rm d ，m e i l k ea ，g e n z ef , e ta 1 e x p r e s s i o no f m t a ip r o m o t e s m o t i l i t ya n di n v a s i v e n e s so f p a n c 1p a n c r e a t i cc a r c i n o m ac e l l s j b rj c a n c e r , 2 0 0 4 ，9 0 ( 2 ) ：4 5 5 1 2 i g u c h ih ，i m u r ag t o hy o g a t aye x p r e s s i o no fm t a l ，am e t a s t a s i s a s s o c i a t e dg e n ew i t h 1 3 h i s t o n ed e a c e t y t a s ea c t i v i t yi np a n c r e a t i cc a n c e r i n tjo n c 0 1 2 0 0 0 ，16 ：1211 1 21 4 1 3 m i y a k el 【，y o s h i z u m it i m u r ase la e x p r e s s i o no fh y p o x i a - i n d u c m l ef a c t o r - 1 a l p h a , h s t o n ed e a c e t y l a s e1 ，a n dm e t a s t a s i s a s s o c i a t e dp r o t e i n1i n p a n c r e a t i cc a r c i n o m a ： c o r r e l a t i o nw i t hp o o rp r o g n o s i sw i t hp o s s i b l er e g u l a t i o n p a n c r e a s 2 0 0 8 ) ，3 6 ：e l - e 9 1 4j a a k k o l ap , m o l ed i l t i a ny m ，e la t a r g e t i n go fh i f - a l p h at ot h ey o nh i p p e l - l i n d a u u b i q u i t y l a t o nc o m p l e xb y0 2 - m g u l a t e dp r o l y l h y d r o x y l a t i o n 川s c i e n c e ，2 0 0 1 ，2 9 2 ( 0 5 5 16 ) ：4 6 8 7 2 1 5 w e n g e rr i - i c e l l u l a ra d a p t a t i o nt oh y p o x i a ：0 2 - s e n s i n gp r o t e 血h y d r o x y l a s e s ，h y p o x i a - i n d u c i b l e t r a n s c r i p t i o nf a c t o r s ，a n d0 2 - r e g u l a t e dg e n ee x p r e s s i o n 【j 】f a s e b j , 2 0 0 2 ，1 6 ( 1 0 ) ：11 51 6 2 16b f i c h l e rp r e b e rh a ，b f i c h l e rm ，e la lh y p o x i a - i n d u c i b l ef a c t o r1 r e g u l a t e sv a s c u l a r e n d o t h e l i a lg r o w t hf a c t o r e x p r e s s i o n i nh u m a np a n c r e a t i cc a n c f f r 阴p a n c r e a s ， 2 0 0 3 ，2 6 ( 1 ) ：5 6 - 6 4 17k u r o k a w at , m i y a m o t om ，k a t o i l 甜a l o v e r e x p r e s s i o n o fh y p o x i a - i n d u c i b l e - f a c t o r1 a l p h a ( h i f la l p h a ) i no e s o p h a g e a ls q u a m o u sc e l lc a r c i n o m ac o r r e l a t e sw i t hl y m p hn o d e m e t a s t a s i sa n dp a t h o l o g i cs t a g e 【j 】b rjc a n c e r , 2 0 0 3 ，8 9 ( 6 ) ：1 0 4 2 - 7 1 8 裘正军，蒋奕，胡文慧。h i f - i a 、v e g f 在胰腺癌组织中的表达及其与血管新生的关系 叨t u m o r ，2 0 0 5 ，2 5 ( 2 ) ：1 5 5 1 5 7 。 1 9y o oy g ，k o n gg ，l e em o m e t a s t a s i s a s s o c i a t e d p r o t e i n 1e n h a n c e s s t a b i l i t yo f h y p o x i a - i n d u c i b l ef a c t o r o l a l p h ap r o t e i nb yr e c r u i t i n gh i s t o n ed c a c e t y l a s ei e m b o 【j 】2 0 0 6 ， 2 5 ：1 2 3 l 1 2 4 l 2 0 h a m a t s u t , r i k i m a r ut , y a m a s h i t ay , e la 1 t h er o l eo fm t a lg e n ee x p r e - s s i o ni nh u m a n h e p a t o c e l l u l a rc a r c i n o m a j o n c o lr e p ，2 0 0 3 ，1 0 ( 3 ) ：5 9 9 - 6 0 4 21m o o nw s ，c h a n gkt a r n a w s k ia s o v e r e x p r e s s i o no fm e t a s t a t i ct u m o ra n t i g e n1i n h e p a t o c e l l u l a rc a r c i n o m a ：r e l a t i o n s h i pt ov a s c u l a ri n v a s i o na n de s t r o g e nr e c e p t o r - a l p h a h u m p a t h o l ，2 0 0 4 ，3 5 ：4 2 4 - 4 2 9 1 4 综述 m t a l 与肿瘤转移的研究进展 恶性肿瘤已成为当前威胁人类健康的首要疾病之一。侵袭和转移是导致各种 恶性肿瘤患者死亡的根本原因，是一个极其复杂、涉及肿瘤与宿主之间相互作用 的多步骤的过程，包括瘤细胞从原发肿瘤脱落，进入细胞外基质与脉管内，直至 在远端适宜组织中克隆生长，受许多相关基因的调控。近年来，已相继克隆出许 多与肿瘤转移相关基因，包括n m 2 3 ，m t s 1 ，w d n m l ，w d n m 2 ，延长因子 l a ( e l o n g a t i o nf a c t o rl a ) ，s t r o m e l y s i n 3 和p g m 2 1 。其中t o h 等【1 刁从鼠人乳腺癌转 移系统中筛选克隆出的m t a l m t a l ( m e t a s t a s i s a s s o c i a t e dg e n el ，肿瘤转移相关基 因1 ) 日渐得到人们的重视。 1m t a l 蛋白的结构 1 9 9 3 年p e n c i l 等【3 】利用相差杂交技术首次在鼠乳腺癌细胞株中分离出1 新的 乳腺癌转移相关基因，经部分测序证明其在g e b a n 刚e m b l 数据库没有同源性 核苷酸序列。1 9 9 4 年t o h 等【h2 】测定该基因的核苷酸序列及其蛋白产物的氨基酸 序列，命名为m t a l ，该基因全长为2 2 k b ，其e d n a 全长为2 7 5 6 b p 。利用s o u t h e r n 印迹法在高转移性乳腺癌细胞株中找到其对应的人类同源物m t a l 。m t a l 基因 编码一个含7 1 5 个氨基酸残基的蛋白质，分子质量为8 2 k d ，其氨基酸序列中含有 酪氨酸激酶、蛋白激酶c 和酪蛋白激酶2 的磷酸化位点【h3 一。在m t a l 蛋白羧 基端有一个富含脯氨酸的支链，第6 9 6 7 0 5 残基序列为l p p r p p p p a p ，与s r e 基 因s h 3 结构域x p x ) ( p p p f x p 或x p f p p ，完全配对f 5 】。s h 3 在信号转导通路中参 与蛋白- 蛋白间相互作用，并参与构成细胞骨架，且与信号转导通路中与浸润和转 移相关的基因有关【1 1 。m t a l 蛋白从第3 9 3 个残基开始含有一个g a t a 锌指结构 ( c y s x 2 一c y s - x 17 - c y 似2 - c y s ) ，从第2 51 个残基开始含有一个亮氨酸反折区和5 个s p x x 域，这些结构常见于基因调节蛋白和d n a 结合蛋白。此外，在m t a l 蛋 白中还含有一个s a n t 结构域，这种结构域与m y b 相关蛋白d n a 结构域相似【5 1 。 2 m t a l 蛋白的功能 1 5 m t a l 蛋白定位于细胞核内【6 】，被认为是n u r d ( n u c l e o s o m cr e m o d e l i n ga n d h i s t o n ed e a c e t y l a s e ，核小体重构及组蛋白脱乙酰基酶复合物) 的一个亚单位。n u r d 复合物是一种具有染色质重构与组蛋白去乙酰化活性的多亚单位复合物阴。松散 的组蛋白与基因组d n a 的结合通常促进基因的复制，乙酰化则会中和组蛋白的阳 离子，减少基因组d n a 与组蛋白结合，影响基因的复制。组蛋白乙酰化能选择性 地使某些染色质区域的结构从紧密变得松散，开放某些基因的转录，增强其表达水 平，a t p 依赖的n u r d 的乙酰化与去乙酰化代表了胞核结构与功能调整的一般机 制。m t a l 蛋白能与组蛋白去乙酰化酶( h i s t o n ed e a e e t y l a s e s ，h d a c s ) 结合，募集 h d a c s 到目标基因的启动子区域，通过去除组蛋白的乙酰基来重塑染色质结构。 使其变得更加紧密而不利于转录【4 一，9 1 ，m t a l 通过此种功能直接或者间接作用于 某些抑制肿瘤浸润转移的基因，下调其转录，抑制其功能【引。m t a l 还可以显著改 变细胞角蛋白丝系统的组装及细胞骨架蛋白的定位，并使细胞获得更具有侵袭性 和转移性的表型【1 们。 3m t a l 基因的表达 t o h 等【1 2 】的研究发现m t a l m r n a 在小鼠的各种正常组织，包括心、肝、肺、肾 等中均有低水平表达，但在睾丸、脑、肝中则有较高水平的表达，说明m t a l 基因 可能在正常组织细胞中具有一定的生理功能，如细胞的增殖等【刀。已知m t a l 基 因在人类非肿瘤细胞和肿瘤细胞中都有表达，肿瘤细胞中表达水平显著高于非肿 瘤细胞。 4m t a l 与肿瘤 4 1 乳腺癌m t a l 与乳腺癌细胞的浸润和转移能力有关。应用n o r t h e r n 印 迹技术发现：正常组织中m t a l 基因表达量极低，但在高转移性乳腺癌细胞株 m t l n 3 中m t a l 基因m r n a 表达水平是无转移能力的m t c 4 细胞株的4 倍；与其 同源的人m t a l 基因在具有浸润性的l c c l 细胞株中m t a l 基因的表达水平是不 具有浸润性的m c f 7 细胞株的2 倍【】。乳腺癌细胞中过表达的m t a l 基因可能 通过合成m t a l 一c a k ( c y c l i n - d e p e n d e n tk i n a s e a c t i v a t i n g k i n a s e ，细胞周期蛋白依赖 性激酶激活激酶) 复合物的h d a c ，而抑制c a k 诱导的雌激素受体( e s t r o g e n 1 6 r e c e p t o r ，e r ) 的转激活功能，阻遏e r 介导的转录，这与乳腺癌的浸润有关【1 1 】。 m a r t i n 等【1 2 】运用免疫组化技术检测原发性乳腺癌中m t a l 蛋白的表达，发现m t a l 过表达的阴性淋巴结患者与阳性淋巴结患者复发风险相同。j a n g 等 1 3 】的研究发 现m t a l 过表达的乳腺癌患者有更高的病理分期和瘤内微血管密度，提示m t a l 与肿瘤细胞的浸润性和促新生血管生成有关。 4 2 消化道癌t o h 掣1 4 】的研究发现：m t a lm r n a 过表达的胃癌及结直肠 癌，肿瘤浸润深度更深，淋巴结转移率更高。徐华等【1 5 - 1 6 】的实验进一步证明这一结 果。说明m t a l 基因过表达与胃肠癌的浸润和转移有关，m t a lm r n a 的高表达 可作为估计胃癌和大肠癌恶性潜能的潜在指标。 4 3 食管癌运用r t - p c r 及免疫组化技术发现m t a l 蛋白过表达的食管癌 标本癌组织已浸润到食管壁，且具有明显的淋巴结转移，且病理分期较高，预后较 差。这说明m t a l 基因与食管癌的浸润、转移有关，且可能为食管癌恶性潜能的 及术后生存期的预测指标【1 7 1 。 4 4 胰腺癌i g u c h i 等【1 8 】用定量r t - p c r 检测1 3 个细胞株和2 3 例胰腺癌组 织中m t a l 基因的表达情况。在所有的细胞株中都发现m t a l m r n a 表达，其中 胰5 2 ( 1 2 2 3 ) 癌组织m t a l m r n a ( t n 三_ 1 ) 的过表达，且m t a l m r n 过表达的胰腺 癌患者出现淋巴结转移的几率更高。m i y a k e 等【1 9 】应用免疫组化技术检测3 9 例胰 腺癌标本中m t a i 的表达，发现m t a l 蛋白表达水平与患者的预后相关，但与临 床病理特性无关。h o f e r 掣1 0 】通过建立m t a i 绿色荧光蛋白( e g f p m t a l ) 的胰腺 癌细胞株p a n c 1 发现e g f p m t a l 表达升高的同时伴有细胞运动及侵袭能力的 显著增强。e g f p m t a l 的表达对非底物依赖性的细胞生长无影响，但会减弱底物 依赖性细胞的增殖。此外，在e g f p m t a i 表达的细胞中细胞骨架相关蛋白如 i q g a p l 、角蛋白的定位发生了明显的改变，这种改变可使癌细胞黏附力降低，容 易发生转移。m t a l 的高表达可通过提高胰腺癌细胞侵袭、转移力，使细胞恶性 程度增加。 4 5 肝癌h a m a t u s 等f 2 0 】运用r t - p c r 技术检测了肝细胞癌患者手术标本中 m t a l 的表达情况，以肿瘤标本与瘤旁组织m t a lm r n a 的比值作为其表达高低 的指标，分析了m t a l 的表达与临床病理指标及预后间的关系，发现m t a l 的表 1 7 达水平与肝内播散及门静脉浸润并无相关性，但m t a i 高表达组的无瘤生存率却 明显低于低表达组。m o o n 等【2 1 】应用免疫组化技术发现m t a l 过表达与癌细胞的 生长和血管侵袭相关。r y u 等【2 2 】的研究显示m t a l 与肝细胞肝癌的血管侵袭、术 后复发及预后密切相关，尤其是在h b v 相关性肝细胞肝癌中。 4 6 其他肿瘤m t a i 还与很多其他恶性肿瘤的侵袭及转移相关。s a s a k i 等【2 3 】 研究证实非小细胞肺癌( n o n s m a l lc e l ll u n gc a i l c g l ，n s c l c ) 中m t a l 基因的表达与 n s c l c 的浸润和转移密切相关。y i 等【2 4 】的研究表明m t a lm r n a 表达与卵巢癌 淋巴结转移呈正相关关系，m t a im r n a 可能成为判断卵巢癌转移有价值的指标。 t a n g 等【2 5 】的研究发现伴颈淋巴结转移的声门上喉癌标本中的m t a lm r n a 的阳 性表达率显著高于无颈淋巴结转移的标本。说明m t a l 基因与颈淋巴结转移相关， 可作为一个早期诊断指标。h o f e r 等【2 6 】发现转移性前列腺癌标本中，m t a l 蛋白的 平均表达强度( 3 4 4 ) 和阳性表达率( 8 3 ) 明显较高；局限性前列腺癌和良性组织中 m t a l 蛋白的平均表达强度和阳性表达率较低( 分别为2 8 4 ；6 3 和1 5 4 ；2 5 ) 。 这说明m t a l 基因的表达与前列腺癌的演迸有关。等【2 7 1 运用r t - p c r 技术检测 骨肉瘤细胞株m g 6 3 的m t a l m r n a 的表达水平，分析其与骨肉瘤细胞转移的关 系，结果发现，高转移的骨肉瘤m g 6 3 细胞中m t a l 过表达，明显高于低转移的 m g 6 3 细胞，且具有高侵袭力。 5m t a l 与h i f - 1 仅的关系 h i f 1 a 是调节细胞内氧代谢的关键因子。在常氧条件下，h i f 1 a 被羟基化， 而与泛肽链接酶复合物的成分v 蛋白( p v h l ) 相结合，最终导致h i f 1 a 的泛肽 化而降解；在缺氧条件下，h i f 1 a 的羟基化被抑制，阻碍p v h l 与其结合，h i f 1 a 表达和活性增加 2 8 9 参与启动与肿瘤适应缺氧有关的多种基因的转录，如葡萄糖 转运蛋白、血管内皮生长因子、内皮素1 、转铁蛋白、酪氨酸羟化酶以及糖降解 酶等，维持肿瘤细胞的能量代谢、促进新生血管形成、促进肿瘤的增殖和转移眩9 , 3 0 3 。 在人类乳腺癌细胞中m t a l 过度表达增加了h i f 1 a 蛋白的转录活性和稳定性。 m t a l 也通过稳定h i f 1 a 蛋白增nf m 管生成 3 羽。这些发现表明m t a l 相关的 转移与h i f 1 a 诱导的肿瘤血管生成有密切相关性。 6 总结及展望 大量的研究表明m t a l 基因作为一种新的肿瘤转移相关基因，与许多肿瘤的 侵袭、转移密切相关，尽管其确切机制尚不十分清楚，但可能的机制包括( 1 ) h i f 1 a 脱乙酰基从而稳定，促进了瘤内血管的形成；( 2 ) p 5 3 脱乙酰基灭活，使细胞的凋亡 受抑制等。了解m t a l 的作用机制，从而利用其研究以m t