（茶学专业论文）茶用植物成分提取和品质鉴定.pdf

答辩委员会主席： 盛造婴究虽主圄盔些型堂院苤吐婴究压 委员1 ： 庄丑高教援浙江态堂巫境生姿遂堂院 委员2 ： 陵蹇硒究员生国壅些抖堂院莶吐硒宜压 委员3 ： 医垂堡教援逝江太堂动物型堂堂院 委员4 ： 梁旦苤数援逝江太堂苤吐硒究压 答辩日期： c o m p o u n d se x t r a c t i o na n dq u a r l i t yi d e n t i f i c a t i o no f b e v e r a g ep l a n t s a u t h o r ss i g n a t u r e ： s 邋q i 坠g ! 星i s u p e r v i s o r ss i g n a t u r e ：l ! 趔q 迫曼煦坠g e x t e r n a li 沁v i e w e r s ：鱼! 卫q 望y 堡q 旦曼 e x a m i n i n gc o m m i t t e ec h a i r p e r s o n ： p r o f c h e n gh a o t e ar e s e a r c hi n s t i t u t e , c h i n e s ea c a d e m yo f a g r i c u l t u r a ls c i e n c e s e x a m i n i n gc o m m i t t e em e m b e r s ： c o m m i t t e e m a nl ：p r o f l us h e n g a o c o l l e g eo fe n v i r o n m e n t i 塑鱼! 堑墨q 旦! 鱼曼，圣h 曼ii i 塑g 堕望i y 星! 墨丑y c o m m i t t e e m a n 2 ：p r o f c h e nl i a n g t e ar e s e a r c hi n s t i t u t e , c h i n e s ea c a d e m yo f a g r i c u l t u r a ls c i e n c e s c o m m i t t e e m a n 3 ：p r o f c h e ny u y i n c o l l e g eo fa n i m a l s 璺i 曼壁殳曼墨，圣h 自i 垒n g 堕n i y 曼曼塾y c o m m i t t e e m a n 4 ：p r o f l l 蝌gy u e r o n g 1 e ar e s e a r c hi n s t i t u t e , z h e i i a n gu n i v e r s i t y d a t eo fo r a ld e f e n e e ： 2 010 6 5 致谢 时光如梭，转眼三年的学习生活印将结束值此论文完成之际，首先向尊敬 的导师梁月荣教授表示衷心的感谢和诚挚的敬意 三年来，导师敏锐的思维、严谨的治学态度、渊博的学识，果断干练的作风、 诚挚谦虚的品格和和宽以待人的处世风范，永远值得我学习和效仿，尤其是本论 文从选题、实验方案确定、实验具体开展到最后论文的完成，无不凝聚着导师的 大量心血。多年来，导师还在生活方面给予了我诸多父亲般的关怀和爱护，使我 在感激之余常常感到心有不安，虽然马上走入社会独立工作，我知道，走的出这 个校园，却永远走不出老师的视线，我将在工作中更加努力，不辜负恩师的期望。 感谢陆建良副教授，从实验设计到实验的具体开展以及数据处理方面都得到 了陆老师的悉心指导和热情帮助。在我攻读博士期间在生活上给予了大量的鼓 励，致以最诚挚的谢意。感谢郑新强副教授，在实验过程中，郑老师也会给我鼓 励和分析做人的道理，郑老师敬业的精神和严谨的科研作风值得我去学习。 在此也向茶学系的刘祖生教授、杨贤强教授、龚淑英教授、何普明教授、王 校常教授、汤一副教授、须海荣副教授，骆耀平副教授，王岳飞副教授，赵东老 师、钱利生老师、顾志蕾老师、朱晓玲老师、谢建勇老师等诸多老师们长期以来 对我的关心和帮助，表示由衷的感谢。 同时感谢实验室各位共同生活成长的同学，叶倩博士、杜颖颖博士、叶俭慧 博士、林晨博士、吴亮宇博士、董俊杰博士、董占波博士、马士成博士、许靖逸 博士、金晶硕士、陈好硕士、吴命燕硕士范方媛硕士和舒华硕士。感谢他们在研 究上给我的帮助和启发，信心上的鼓励和生活中的帮助。本系的其他众多研究生 同学在我的学习和研究中给予很多帮助，在此一并感谢。 最后，谨以此文献给我挚爱的双亲，他们在背后的默默支持是我前进的动力， 而立之年尽孝甚微，心中甚感愧疚在此，祝愿他们身体健康，心情愉快! 感谢 的我的妻子夏泰凤博士在生活中的理解和关心，在我最无助的时候，一直默默的 支持我，谨以此文献给她以及即将出生的孩子。 谨以此文献给长期以来所有关心我的人! 孙庆磊 二零一零年五月于华家池畔 浙江大学研究生学位论文独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的 研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发 表或撰写过的研究成果，也不包含为获得逝姿态鲎或其他教育机构的学位或 证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文 中作了明确的说明并表示谢意。 学位论文作者签名：签字日期：2 0 1 0 年6 月7 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解逝鎏盘堂有权保留并向国家有关部门或机 构送交本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权逝姿态堂 可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影 印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。 ( 保密的学位论文在解密后适用本授权书) 学位论文作者签名： 导师签名： 签字日期：2 0 1 0 年6 月7 日签字日期：2 0 1 0 年6 月 目录 术语与略语表i 图表索引i i 摘要i v a b s tr a c t 、f i 第一章文献综述和选题思路1 1 1 超临界流体2 1 2 超临界c o ：的性质4 1 3 超临界流体萃取4 1 3 1 超临界萃取的特点5 1 3 2 影响超临界流体提取效率的因素7 1 3 2 1 温度7 1 3 2 2 压力7 1 3 2 3 萃取时间和萃取剂流量的影响7 1 3 2 4 被萃取物料的影响7 1 3 2 5 夹带剂8 1 4 超临界c o ：萃取在茶叶深加工中的应用8 1 4 1 超临界c o ：萃取在茶多酚提取上的应用9 1 4 2 超临界流体萃取在提取咖啡碱的应用9 1 4 3 超临界c o ：萃取在提取香气物质上的应用11 1 4 4 超临界c o ：萃取在茶籽油提取上的应用1 2 1 5 菊花和菊米研究概况1 2 1 5 1 黄酮类化合物的生物活性13 1 5 1 1 抗氧化清除自由基作用13 1 5 1 2 抗心血管疾病1 4 1 5 1 3 杀菌、抗病毒作用1 4 1 5 2 挥发油的生物活性1 4 1 5 2 1 抗菌作用1 4 1 5 2 2 解热作用1 5 1 5 2 3 抑制突变1 5 1 6 本研究的目的、意义及主要内容1 5 1 6 1 研究目的与意义1 5 1 6 2 本文研究内容1 6 第二章超临界二氧化碳脱除绿茶咖啡因研究1 8 2 1 材料与方法1 9 2 1 1 材料1 9 2 1 2 方法1 9 2 1 2 1 不同夹带剂筛选实验1 9 2 1 2 2 正交试验2 0 2 1 2 3h p l c 分析2 0 2 1 2 4 数据分析方法2 0 2 2 结果与分析2 0 2 2 1 不同夹带剂对咖啡因和儿茶素类的影响2 0 2 2 2 不同萃取因素对咖啡因脱除效果的影响2 1 2 2 3 超临界c o ：脱除咖啡因条件优化2 1 2 3 讨论：2 2 2 4 小结23 第三章超临界二氧化碳提取茶多酚研究3 0 3 1 材料与方法3 0 3 1 1 材料3 0 3 1 2 方法3 1 3 1 2 1 超临界c o ：提取茶多酚3 1 3 1 2 2 溶剂法提取茶多酚3 1 3 1 2 3h p l c 分析条件3 1 3 1 2 4 数据分析方法3 1 3 2 结果与分析3 1 3 2 1 不同夹带剂对儿茶素类的影响3 1 3 2 2 不同时间对儿茶素类的影响3 2 3 2 3 夹带剂用量对儿茶素类的影响3 2 3 2 4 温度、压力和茶叶颗粒度对儿茶素类的影响3 2 3 3 小结3 3 第四章不同方法提取茶叶挥发性化合物比较研究3 8 4 1 材料与方法3 9 4 1 1 材料3 9 4 1 2 方法3 9 4 1 2 1s f e 法制备香精油3 9 4 1 2 2s p m e 法制备香精油3 9 4 1 2 3s d e 法制备香精油3 9 4 1 2 4 香精油组分分析3 9 4 1 2 5 香精油组分定性和定量方法4 0 4 1 2 6 数据分析4 0 4 2 结果与分析4 0 4 2 1 正交试验条件的优化4 0 4 2 2 不同提取方法挥发性化合物化学成分分析4 0 4 3 讨论。4 1 第五章超临界二氧化碳萃取茶籽油研究4 9 5 1 材料与方法4 9 5 1 1 材料4 9 5 1 2 方法5 0 5 1 2 1 实验设计5 0 5 1 2 2 超临界c o ：萃取茶籽油5 0 5 1 2 3 有机溶剂萃取法5 0 5 1 2 4 茶籽油品质分析方法5 0 5 1 2 5 数据分析方法5 0 5 2 结果与分析5 0 5 2 1 萃取压力5 0 5 。2 2 萃取温度5 1 5 2 3 原料颗粒度5 2 5 2 4 萃取时间5 3 5 2 5 不同品种对出油率的影响5 4 5 2 6 正交试验结果分析5 4 5 2 7 茶籽油品质分析5 5 5 3 小结5 5 第六章菊花和菊米生化成分和香精油的比较研究5 9 6 1 材料与方法5 9 6 1 1 材料处理5 9 6 1 1 1 浸提液制备5 9 6 1 1 2s d e 法香精油制备5 9 6 1 2 分析方法6 0 6 1 2 1 黄酮类组分分析6 0 6 1 2 2 香精油组分分析6 0 6 1 2 3 数据分析6 0 6 2 结果与分析6 0 6 2 1 黄酮类组分分析6 0 6 2 2 菊米和菊花挥发性香精油组分分析6 1 6 3 小结6 2 参考文献7 3 c c g e c e c g e g c e g c g g c g c g m p a c a f r h m g g m l n m l l p h r p m v w s f e h p l c g c - m s 术语与略语表 c a t e c h i n c a t e c h i ng a l l a t e e p i c a t e c h i n e p i c a t e c h i ng a l l a t e e p i g a l l o c a t e c h i n e p i g a l i o c a t e c h i ng a l l a t e g a li o c a t e c h i n g a l l o c a t e c h i ng a l l a t e m i l l i o np a s c a l c a f f e i n e h o u r m i l l i g r a m g r a m m i n u t e m i l l i l i t e r l i l i t e r h y d r o g e n - i o nc o n c e n t r a t i o n r o t a t i o np e rm i n u t e v o l u m e w e i g h t s u p e r c r i t i c a lf l u i de x t r a c t i o n 儿茶素 儿茶素没食子酸酯 表儿茶素 表儿茶素没食子酸酯 表没食子儿茶素 表没食子儿茶素没食子酸酯 没食子儿茶素 没食子儿茶素没食子酸酯 兆帕 咖啡因 ” 小时 毫克 克 分钟 毫升 升 酸碱度 转每分 体积 重量 超临界流体萃取 h i g h - p e r f o r m a n c el i q u i dc h r o m a t o g r a p h y 高效液相色谱 g a sc h r o m a t o g r a p h ya n dm a s ss p e c t r o m e t r y气相色谱质谱联用仪 图表索引 图1 1 纯流体的压力一温度图 表1 1常见超临界流体萃取溶剂的流体临界性质 图1 2 二氧化碳的相图 表1 2 超临界流体与气体和液体性质比较 表2 1 四因素三水平正交试验表 表2 2 不同夹带剂对脱咖啡因茶叶咖啡因和儿茶素含量的影响 表2 3 实验儿茶素类化学成分含量 表2 4 实验方差分析表 表2 5 因素和水平归组均数 图2 1 对照样和脱咖啡因茶样的h p l c 图谱 图2 2 咖啡因和e g c g 的分子结构图 表3 1 不同夹带剂对儿茶素类的影响o 表3 2 提取时间对儿茶素类的影响 表3 3 夹带剂用量对儿茶素类盯影响 表3 4 提取温度对儿茶素类的影响 表3 5 提取压力对儿茶素类的影响 表3 6 颗粒度大小对儿茶素类的影响 表3 7 脱咖啡因茶儿茶素化学成分结果 图3 1 对照茶样h p l c 图谱 图3 2 脱咖啡因茶叶h p l c 图谱 表4 1 正交试验因素水平表 表4 2 茶叶挥发性化合物正交试验结果表 表4 3 验证最优条件下的提取率 表4 4 不同提取方法茶叶挥发性香精油组分相对含量 i l 2 3 4 5 ” ” 拍 ” 勰 ” ” ” 弘 铊 铊 铊 ” 表4 5 不同提取方法香精油检出化合物种类和含量 4 7 图4 1s d e 法茶叶挥发性化合物c c m s 总离子流图谱 4 7 图4 2s c - c o ：法茶叶挥发性化合物g c m s 总离子流图谱 4 8 图4 3s p m e 法茶叶挥发性化合物g c m s 总离子流图谱 4 8 图5 1 不同压力对茶耔油提取率的影响 5 1 图5 2 不同温度对茶籽油提取率的影响 5 2 图5 3 物料颗粒度对茶籽油提取率的影响 5 3 图5 4 不同时间对茶籽油提取率的影响 5 3 图5 5 不同茶籽品种对茶籽油提取率的影响 5 4 表5 1 各因素间方差分析表 5 7 表5 2 因素和水平归组均数表 5 7 表5 3 超临界c o ：萃取对出油率的影响 5 8 表5 4 验证最优条件下的提取率 5 8 表5 5 超临界c o ：萃取荼油的品质指标比较 5 8 表6 1 菊米和菊花黄酮类组分分析结果 6 3 图6 1 菊米黄酮类h p l c 图谱 6 4 图6 2 菊花黄酮类h p l c 图谱 6 4 图6 3 菊米挥发性香精油c c m s 总离子流图谱 6 5 图6 4 菊花挥发性香精油g c m s 总离子流图谱 6 5 表6 2 菊米和菊花各类香精油检出种类和含量 6 6 表6 3 菊米挥发性香精油组分相对含量 6 7 表6 4 菊花挥发性香精油组分相对含量 7 0 i i i 摘要 超临界二氧化碳萃取是近年来新发展起来的提取技术，在植物功能性成分提取 上显示出较强的优越性，广泛应用于食品和医药工业。本课题研究了超临界二氧化 碳提取在绿茶脱咖啡因、在茶叶茶多酚，挥发性化合物以及茶籽油提取中的应用， 同时对菊米和菊花进行了初步研究。 夹带剂，茶样颗粒度大小、萃取温度和萃取时间四个因素对绿茶咖啡因有显著 影响，在超临界二氧化碳萃取脱除绿茶咖啡因时，采用水和5 0 , 的酒精作为夹带剂 时会造成大量儿茶素类损失，它们不适合用于绿茶脱咖啡因。用无水乙醇作为夹带 剂，咖啡因明显被脱除。各因素影响顺序为颗粒度大i x 温度 夹带剂体积 时间， 经过优化筛选，绿茶脱咖啡因的最佳条件为：1 0 克茶叶颗粒度大小为0 2 - 0 61 1 1 1 1 1 的茶样，加入夹带剂无水酒精体积为1 5 毫升，在温度8 0 c 、压力3 0m p a 、二氧化 碳流量为1 5lm i n q 的条件下提取1 2 0 m i n 。在此条件下，分别有7 0 2 的咖啡因和 6 2 的儿茶素类被脱除。 用超临界c o ：萃取技术提取绿茶中的茶多酚，采用水做夹带剂，研究了压力、温 度、时间、颗粒度大小、夹带剂用量等条件对茶多酚提取的影响。结果表明，最适 宜茶多酚提取的条件为：1o 克颗粒度大小为o 2 - 0 6m m 的茶样进行超临界c o ：萃取， 加入4 0 毫升水作为夹带剂，在温度8 0 c 、压力4 0m p a 的条件下提取3 h 。超临界二氧 化碳提取茶多酚并没有比热水提取法显示出明显优越性，所以本研究提出先采取超 临界c o ：萃取技术脱除咖啡因，然后用热水提取法获得高纯度茶多酚。 通过压力、温度，时间三因素三水平正交试验确定了茶叶挥发性化合物的超临 界二氧化碳萃取最佳条件为萃取温度为5 0 c 、压力为2 0 m p a 、萃取时间为9 0 m i n ， 茶叶挥发油得率达到2 8 5 m g g 并比较了超临界c o ：萃取与同时蒸馏法和固相微萃 取法对茶叶香气化学成分的影响，结果表明：超临界c o ：萃取得到的萃取物中分离 鉴定出4 1 种化合物，主要成分为棕榈酸、硬脂酸、植醇和肉豆蔻酸等；s d e 法提取 香精油中分离鉴定出4 9 种化合物，主要组分和超临界萃取法相近，两种方法提取 的挥发性化合物中有3 8 种相同组分；s p m e 法中分离鉴定出3 9 种化合物，主要组分 为芳樟醇、o 【一法尼烯，3 ，7 一二甲基一1 ，5 ，7 一辛三烯一3 一醇，d 一紫罗酮等。三种提 取方法得到的挥发性化合物中含有2 8 种相同的化合物。 研究了超临界二氧化碳萃取技术在提取茶籽油中的应用，超临界c o ：萃取的优化 i v 工艺条件为：萃取压力4 0 m p a 、萃取温度4 5 、萃取时间12 0 m i n 、原料颗粒度大小 0 2 5 - 0 3 8 m m ，在此条件下茶耔油得率为2 9 3 4 m g g ，超临界二氧化碳萃取所得茶叶 籽油的品质较优，是具有发展前景的提取茶籽油的方法 对菊花和菊米的主要功能成分挥发油和黄酮类进行研究结果表明：菊米挥发 油主要为醋酸马鞭草烯酯、茼蒿素、大根香叶烯、新丁香三环烯、桉叶油醇等；菊 花挥发油主要成分为d 一萑草烯、喇叭烯氧化物等。菊花的黄酮组分中主要是木犀 草素一葡萄糖苷和槲皮苷等物质，而菊米黄酮类主要为槲皮苷、杨梅素和木犀草素一 葡萄糖苷等，它们具有不同的生理功能可能与所含黄酮类不同有关 关键词：茶；菊米：菊花：超临界二氧化碳萃取：绿茶：儿茶素类；茶多酚； 咖啡因；挥发性化合物；茶籽油：黄酮类；正交试验 v a b s t r a c t s u p e r c r i t i c a lf l u i d e x t r a c t i o ni san e w l yd e v e l o p e dt e c h n o l o g y , w h i c hs h o w s e x c e l l e n tp r o p e r t i e si ne x t r a c t i o no ff u n c t i o n a lc o m p o n e n t so fm e d i c i n a lp l a n t sa n ds p i c e s i t i sw i d e l yu s e di nf o o da n dm e d i c i n ei n d u s t r i e s s u p e r c r i t i c a lc 0 2 ( f c - c 0 2 ) e x t r a c t i o n w a su s e di nd e c a f f e i n a t i o no f g r e e nt e aa n de x t r a c t i o no ft e ac a t e c h i n s ，t e as e e do i la n d v o l a t i l e c o m p o u n d so ft e a ，c h r y s a n t h e m u mi n d i c u mf l o w e ra n dc h r y s a n t h e m u m m o r i f o l i u mf l o w e ri nt h ep r e s e n tp a p e r c o s o l v e n t , p a r t i c l es i z eo ft e a ，e x t r a c t i o nt e m p e r a t u r ea n de x t r a c t i o nt i m eh a d s i g n i f i c a n te f f e c to nd e c a f f e i n a t i o no fg r e e nt e a w h e nw a t e ra n da q u e o u se t h a n o l s o l u t i o nw e r eu s e da sc o s o l v e n t sd u r i n gd e c a f f e i n a t i o no fg r e e nt e a ，ah i g hp e r c e n t a g eo f c a t e c h i n sw a sr e m o v e d i ts u g g e s t st h a tw a t e ra n da q u e o u se t h a n o lw e r en o ts u i t a b l e c o s o l v e n t su s e di nd e c a f f e i n a t i o no fg r e e nt e a w h e np u r ee t h a n o lw a su s e da sc o s o l v e n t ， c a f f e i n ew a ss p e c i f i c a l l ye x t r a c t e df r o mg r e e nt e a o r t h o g o n a la r r a yd e s i g nt e s t ss h o w e d t h a tt h ee f f e c t so ft h ea b o v ef o u rf a c t o r sf o l l o w e dt h es e q u e n c eo fp a r t i c l es i z e e x t r a c t i o nt e m p e r a t u r e e t h a n o le o s o l v e n tv o l u m e e x t r a c t i o nt i m e t h eo p t i m a l p r o t o c o lf o rg r e e nt e ad e c a f f e i n a t i o nw a ss c r e e n e da s10go f0 2 - 0 6m mp a r t i c l es i z e g r e e nt e ab e i n ge x t r a c t e du s i n g15m le t h a n o lc o s o l v e n ta t8 0o cf o r12 0m i na ts c - c 0 2 f l o wr a t e1 5l r a i na n dp r e s s u r e3 0 m p a i nt h i sc a s e ，7 0 2 c a f f e i n ew a sr e m o v e d ，w i t h 9 3 8 c a t e c h i n sb e i n gr e m a i n e di nt h ed e c a f f e i n a t e dg r e e nt e a w h e nt h ed e c a f f e i n a t e dg r e e nt e aw a su s e da sm a t e r i a lt op r e p a r ec a t e c h i n s ，w a t e r c o u l db eu s e da sc o s o l v e n t t h ei n f l u e n c e so fe x t r a c t i n gp r e s s u r e ，e x t r a c t i n gt e m p e r a t u r e ， e x t r a c t i n gt i m e ，p a r t i c l es i z eo ft e aa n dc o s o l v e n tv o l u m eo ne x t r a c t i o no fc a t e c h i n sw a s i n v e s t i g a t e d t h eo p t i m a le x t r a c t i o nc o n d i t i o n sw e r ea sf o l l o w s ：10g0 2 - 0 6m mp a r t i c l e s i z et e ab e i n ge x t r a c t e du s i n g4 0m lw a t e rc o s o l v e n t ，f o r3ha t8 0 0 ca n d4 0m p a h o w e v e r , t h i sm e t h o dh a dn os i g n i f i c a n ta d v a n t a g eo v e rm e t h o do fh o tw a t e re x t r a c t i o n i t i sr e c o m m e n d e dt h a tg r e e nt e aw a sd e c a f f e i n a t e db ys c c 0 2e x t r a c t i o na n dt h e n e x t r a c t e di nh o tw a t e rs oa st op r e p a r ed e c a f f e i n a t e dc a t e c h i n s o r t h o g o n a la r r a yd e s i g nw i t hf a c t o r so fe x t r a c t i o nt e m p e r a t u r e ，e x t r a c t i o np r e s s u r e a n de x t r a c t i o nt i m es h o w e dt h a to p t i m u mc o n d i t i o n sf o rs c - c 0 2e x t r a c t i o no fv o l a t i l e s f r o mg r e e nt e aw e r ea sf o l l o w s ：e x t r a c t i o nt e m p e r a t u r e5 0 0 c ，e x t r a c t i o nt i m e9 0 m i n ， p r e s s u r e2 0m p a i nt h i sc a s e ，t h ey i e l do ff l a v o rc o m p o n e n t sw a s2 8 5gp e ro n ek g g r e e nt e a t h ec o m p o s i t i o no ft h ev o l a t i l e sw e r ec o m p a r e dw i t ht h o s ee x t r a c t e db y s i m u l t a n e o u sd i s t i l l a t i o ne x t r a c t i o n ( s d e ) a n ds o l i dp h a s em i c r oe x t r a c t i o n ( s p m e ) g a s c h r o m a t o g r a p h ya n dm a s ss p e c t r o m e t r y ( g c m s ) s h o w e dt h a t4 1 c o m p o u n d sw e r e v 1 i d e n t i f i e di nv o l a t i l e se x t r a c t e db ys c c 0 2 ，w i t ha b u n d a n tc o m p o n e n t sn - h e x a d e c a n o i c a c i d ，o c t a d e c a n o i ca c i d ，p h y t o la n dt e t r a d e c a n o i ca c i d 4 9c o m p o u n d sw e r ei d e n t i f i e di n v o l a t i l e se x t r a c t e db ys d e ，s i m i l a ra st h a to fs c c 0 2 3 9c o m p o n e n t sw e r ei d e n t i f i e di n v o l a t il e se x t r a c t e d b ys p m e ， i nw h i c ht h ea b u n d a n t c o m p o n e n t s w e r e 3 ，7 - d i m e t h y l - 1 ，6 - o c t a d i e n 一3 - o l ，3 一b u t e n 一2 一o n e ，4 - ( 2 ，6 ，6 - t r i m e t h y l - 1 一c y c l o h e x e n 1 - y 1 ) - a l p h a - f a m e s e n e ，a n d3 , 7 - d i m e t h y l - 1 ，5 ，7 - o c t a t r i e n 3 0 1 2 8c o m p o u n d sw e r es i m u l t a n e o u s l y d e t e c t e di nt h et h r e ev o l a t i l ee x t r a c t s s c c 0 2e x t r a c t i o nw a su s e di ne x t r a c t i o no fo i l 疔o mt e as e e d so fd i f f e r e n tt e a c u l t i v a r s t h eo p t i m a lc o n d i t i o n sf o rs c c 0 2e x t r a c t i o no ft e as e e do i lw e r et h a td r yt e a s e e dw i t hp a r t i c l es i z e0 2 5 0 3 8 m mw a se x t r a c t e da t4 0m p aa n d4 5 0 cf o r12 0m i n t h e o i ly i e l dw a su pt o2 9 3 4g k g t h eq u a l i t yi n d i c a t o r so ft e as e e do i le x t r a c t e db ys c c 0 2 ， s u c ha so i lc o l o r , t u r b i d i t y , i o d i n ev a l u e ，a c i dv a l u ea n dp e r o x i d ei n d e x ，w e r eb e t t e rt h a n t h o s ee x t r a c t e db yo t h e r i ti sc o n s i d e r e dt h a ts c - c 0 2e x t r a c t i o ni sa p r o m i s i n gm e t h o d t o e x t r a c tt e as e e do i l v o l a t i l e sa n df l a v o n o i d si nc h r y s a n t h e m u mm o r i f o l i u mr a m a tf l o w e ra n d c h r y s a n t h e m u mi n d i c u mf l o w e rw e r ed e t e r m i n e db yr e s p e c t i v e l y t h em a j o r v o l a t i l e c o m p o u n d sw e r e2 , 6 ，6 一t r i m e t h y l - b i c y c l o 3 1 1 h e p t 一2 - e n 一4 - o l ， 2 一( 2 ，4 - h e x a d i y n y l i d e n e ) 一l ，6 一d i o x a s p i r o 4 4 n o n 一3 一e n e ，g e r m a c r e n ed ，仪一n e o c l o v e n e ， e u c a l y p t o li nc h r y s a n t h e m u mi n d i c u mf l o w e r i b - h u m u l e n ew a st h em o s ta b u n d a n t v o l a t il ea n dl e d e n eo x i d e - ( i ) t h en e x ta b u n d a n ti nc h r y s a n t h e m u mm o r i f o l i u mr a m a t f l o w e r t h ef l a v o n o i dc o m p o s i t i o n so fc h r y s a n t h e m u mi n d i c u mf l o w e ra n dc h r y s a n t h e m u m m o r i f o l i u mr a m a tf l o w e rw e r ec o m p a r e di ht h i ss t u d y l u t e o l i n 一7 一g l u c o s i d ea n d q u e r c i t r i nw e r et h em o s ta b u n d a n tf l a v o n o i d si nc h r y s a n t h e m u mm o r i f o l i u mr a m a t f l o w e r ，b u tq u e r c i t r i n ，m y r i c e t i na n dl u t e o l i n 7 - g l u c o s i d ew e r ea b u n d a n tf l a v o n o i d si n c h r y s a n t h e m u mi n d i c u mf l o w e r i ti sc o n s i d e r e dt h a tt h ed i f f e r e n c ei np h y s i o l o g i c a l f u n c t i o n so ft h et w of l o w e r sm i g h tb er e l a t e dt ot h e i rd i f f