血小板.ppt

第三节血小板检查,一、血小板计数二、血小板形态检查,【定义】单位体积血液中血小板的数量。【功能】止血过程中的作用：主要与血管共同完成，包括粘附、聚集功能和释放反应等。凝血过程中的作用：主要依靠血小板的各种因子来完成，其中最重要的是血小板第3因子（PF3）。【参考值】(100.0300.0）109/L,一、血小板计数（Plateletcount，PLT/BPC）,【检测原理及方法学评价】,血细胞分析仪法,优点：重复性好，准确性高，能同时提供血小板多项指标，适于临床使用。缺点：仪器不能区分PLT与其他类似大小的物质，如：RBC碎片、WBC碎片、灰尘等杂物。因此，有时仍需目视法做校正，因而国外仍然将目视法（特别是相差显微镜法）作为参考方法。,方法学评价,目视计数法,目视显微镜计数法,普通显微镜法,相差显微镜法,直接法,间接法,破坏RBC,不破坏RBC,草酸铵法（首选）,许氏尿素法（次选）,复方碘稀释液,ACD保养液,生理盐水,用草酸铵稀释液，在相差显微镜下计数Plt：此法准确性高，Plt易识别。,方法学评价,目视计数法,草酸铵法（首选）,许氏尿素法（次选）,对RBC破坏力强，Plt形态清晰,应急时用,易长微生物，干扰Plt计数（已被淘汰）,由于不破坏RBC，RBC可掩盖Plt，影响Plt计数。,尿素易分解，有时不能完全溶解RBC,方法学评价,【质量保证】原则：避免血小板被激活、破坏，杂物污染。1.检测前（1）采血是否顺利：采血时血流不畅可导致血小板破坏，使血小板计数假性降低；（2）选用的抗凝剂是否合适：肝素抗凝不能用于血小板计数；EDTA-2K抗凝血标本取血后1h内结果不稳定，少数患者可引起血小板聚集；（3）储存时间是否适当：标本保存于室温，低温可激活血小板，储存时间过久可导致PLT计数偏低。,2.检测中：手工法检查稀释液，仪器法做质控；3.检测后：核准PLT的方法（1）血涂片染色镜检：正常8-15个/油镜视野，血小板大小、形态，异常的白、红细胞碎片；（2）参考方法核对：流式细胞仪方法（3）多次计数取平均值：同一份标本两次计数误差小于10%取平均值大于10%，做第三次计数，取2次相近结果的均值报告。,血小板计数（目视计数法）,原理：与白细胞计数基本相同。不同点：计数中央大方格内5个中方格的Plt数。,Plt计数,血小板计数（目视计数法）,国内最常用的血小板直接计数法:1、草酸铵溶血法（首选）2、复方尿素溶血法（次选）无论是自动血液细胞分析仪法或显微镜计数法，多以草酸铵溶血法作为参考方法，国内将其作为首选方法。,Plt计数,血小板计数（草酸铵溶血法）,操作：1、取20l血液加入o.38ml草酸铵稀释液中，混匀后，静止10min；2、将混悬液充入计数室，将计数室置于保湿平皿内静止1520min；3、在高倍显微镜(或在放大100倍位相显微镜)下精确计数中央大方格中5个中方格内的血小板数。,Plt计数,血小板计数（草酸铵溶血法）,注意事项：1全部器材和稀释液要特别清洁，血小板稀释液空白计数值应为0。2刺血一定要深(3mm)，血液应自然流出，避免挤压，动作要快，以防止血小板聚集。,Plt计数,血小板计数（草酸铵溶血法）,3必须充分混匀后，滴入计数池中，至少静止15min（Plt完全下沉），才能进行计数。并要求在采血后1h内计数完毕，否则PLT结果降低;4计数时光线要适中，不可太强，应随时旋转显微镜微调，注意与细胞碎屑、微生物、结晶等杂物鉴别。,Plt计数,1.生理性变化正常人Plt一天内可有610%的波动表现,临床意义,低高早晨下午春季冬季平原居民高原居民月经前月经后,【临床意义】,低高分娩后妊娠中晚期休息后运动后静脉血动脉血Cap血静脉血10%,临床意义,（1）Plt：,在临床上，除创伤外，Plt是引起出血的常见原因，当Plt50109/L时，可有出血症状，（20-50）109/L时，可有轻度出血或手术后出血；低于20109/L时，可有较严重的出血；低于5109/L时，可导致严重出血。常见的疾病有：生成障碍：如急性白血病、再障；破坏过多：如原发性血小板减少性紫癜（ITP）、脾亢、消耗增多：如DIC、血栓性血小板减少紫癜分布异常：如脾肿大、血液被稀释等先天性：如新生儿血小板减少症、巨大血小板综合征等,临床意义,2.病理性变化,原发性：慢粒、真性RBC增多症、原发性血小板增多症反应性：急性化脓性感染、大出血、急性溶血、肿瘤等；其他：外科手术后、脾切除等。,2Plt：Plt400109/L,临床意义,二、血小板形态学检查,1血小板形态检验的重要性,2镜下血小板形态观察的内容,3血小板形态变化及意义（1）正常血小板形态（2）异常血小板形态大小异常形态变化聚集性和分布,.,Plt检查,1.血小板形态检验的重要性血小板的形态与功能密切相关。通过血小板形态的检验，对疾病的诊断、鉴别诊断以及发病机制的探讨，都有十分重要的意义。2.镜下血小板形态观察的内容先低倍镜选着色及分布良好的部位，转油镜检查。观察的内容：PLT数量、大小如何；PLT形态有无改变，胞质染色是否正常，颗粒有无、多少、粗细、分布情况，有无空泡等。且应估计正常和异常PLT的数量；血小板的分布情况；,形态学检查,形态学检查,3血小板形态变化及意义（1）正常血小板形态：圆形、椭圆形或略欠规则；胞质呈淡蓝或淡红色；中心部位有细小、分布均匀而相聚或分散于胞质中的紫红色颗粒；直径约1.5-3m；在血涂片上散在或成簇分布。,1大小异常：,形态变化及意义,生理情况下血小板大小不均，各型血小板所占的比例：正常：44%-49%小型：33-44%大型：8-16%巨大：0.7-2.0%小型PLT比大型PLT更富有聚集作用，故功能活跃。而大型或巨大型PLT常无粘附和聚集功能。,（2）异常血小板形态,正常血小板,直径1.53m，正常人约占44一49,大小改变,小血小板,平均直径1.5m，正常约占3344见于:再障、缺铁性贫血、ITP等,大小改变,大血小板,直径4-7m，正常约占816提示：骨髓造PLT功能旺盛，但有成熟障碍、破坏加速的表现；主要见于特发性血小板减少型紫癜（ITP）、血小板无力症、血管性假性血友病、继发性血小板增多、巨大血小板综合征、粒细胞白血病、MDS等,大小改变,巨型血小板,平均直径大于7m，正常约占0.72见于特发性血小板减少型紫癜（ITP）、血小板无力症、血管性假性血友病、继发性血小板增多、巨大血小板综合征、粒细胞白血病、MDS等,大小改变,2.血小板形态变化,成熟型血小板,幼稚型血小板,病理性幼稚型血小板,衰老型和病理刺激型血小板,无颗粒型血小板,形态变化及意义,成熟型血小板,呈圆形、椭圆形或不规则形，胞质向外伸出多个丝状树突，胞浆呈淡蓝色，含有许多紫红色颗粒。正常人约占90以上,形态改变,幼稚型血小板,正常占0.55见于急性失血之后及血小板无力症等。,页,形态改变,病理性幼稚型血小板,体积较大，呈圆形，胞膜无丝状“树突”伸出，胞质蓝色，颗粒缺乏，为未成熟巨核细胞所脱落；正常人见不到。：见于特发性和反应性血小板病。当骨髓巨核细胞增生时，尤其在特发性血小板减少性紫癜出现PLT减少危象和粒细胞性白血病时，可以见到大量蓝色和巨大的血小扳。,形态改变,病理性幼稚型血小板,慢性中性粒细胞性白血病,特发性血小板减少性紫癜,形态改变,衰老型和病理刺激型血小板,衰老型：增多常见于恶性贫血。病理刺激型：血小板直径2030m，形态多变，胞质蓝色或紫蓝色、颗粒多、大小相似；正常人偶见；增多常见于骨髓受到严重刺激、血小板无力症等。,形态改变,无颗粒型血小板,见于灰血小板综合症（提示骨髓纤维化）正常未见,正常,形态改变,血小板形态变化的意义,正常人也可见到少量形态不规则或畸形的血小板，但所占比值一般少于2。由于影响血小板形态的因素很多，各种改变又无特异性，因此只有异常血小板的比值超过10时才考虑它的临床意义。,形态改变,3.血小板聚集性和分布情况（非抗凝血）,血小板正常分布,血小板过度聚集,血小板散在分布,.,形态变化及意义,血小板卫星现象,血小板正常分布,功能正常的血小板因有树突相互粘附凝集在一起，常见35成群、成堆、成片出现，散在血小板极少见聚集与散在血小板之比为201。,分布情况,血小板过度聚集,在冠心病、原发性血小板增多症(ET)或继发性血小板增多症等病变时，PLT可4050个成群成堆出现，甚至超过100个，数百数千个PLT成群成堆成片聚集一起占满整个油镜视野。,分布情况,血小板过度聚集,血小板过度聚集出现，提示PLT功能异常，常引起局灶性或全身性的栓塞病理改变。,原发性血小板增多症,分布情况,血小板散在分布,在再障、特发性血小板减少性紫癜时，PLT粘附聚集减少。在血小板无力