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(农业昆虫与害虫防治专业论文)牛耳枫活性成分研究.pdf.pdf 免费下载
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文档简介
牛耳枫活性成分研究 摘要 广西大学陈丽丽和唐文伟对牛耳枫d a p h n i p h y l l u mc a l y c i n u mb e n t h 生物活性的 前期测定结果表明,牛耳枫茎叶甲醇粗提物对褐飞虱n i l a p a r v a t al u g e n ss t i l l 长翅型 雌成虫和雄成虫的触杀活性较好,对小菜蛾p l u t e l l ax y l o s t e l l al 幼虫也有很好的拒 食活性,值得进一步研究。本研究进一步对牛耳枫的生物活性成分进行研究,所得结 果如下: l 、牛耳枫的果实和叶粉碎样,以甲醇在室温下冷浸提取,提取液过滤、浓缩后 分别得到果实甲醇粗提物和叶甲醇粗提物。牛耳枫果实甲醇粗提物和叶甲醇粗提物用 去离子水饱和悬浮,依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,各萃取段分别浓缩 后得到果实石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物,以及叶石油醚萃取物、 乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物。 2 、采用毛细管微量点滴法,分别测定牛耳枫果实和叶的甲醇粗提物、石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和水层对褐飞虱长翅型成虫的触杀活性。结果表明,牛耳枫果 实粗提物对褐飞虱表现出很好的触杀活性,在1 0 g 头的剂量下, 2 4h 和4 8h 死亡 率分别达到8 7 7 8 和9 0 9 9 ,但牛耳枫叶粗提物对褐飞虱的触杀活性较低;牛耳枫 果实石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和水层对褐飞虱均有较好的触杀活性,其中牛耳 枫果实的乙酸乙酯萃取物的活性最好,在1 0 g 头的剂量下,2 4h 和4 8h 死亡率分别 达到7 4 6 8 和8 1 3 3 ,但牛耳枫叶石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和水层对褐飞虱 的触杀活性较低。 3 、以生长速率法,分别测定牛耳枫果实和叶的甲醇粗提物、石油醚萃取物和乙 酸乙酯萃取物对水稻纹枯病菌、番茄白绢病菌和香蕉枯萎病菌菌丝生长抑制活性。牛 耳枫果实和叶粗提物对3 种病原菌菌丝生长抑制活性较低,在2 0 0 0m g l 浓度下,抑 菌率均低于5 0 ,但牛耳枫果实和叶的乙酸乙酯萃取物对3 种病原菌菌丝生长有较 好的抑制活性,在2 0 0 0m g l 浓度下,牛耳枫果实乙酸乙酯萃取物对3 种病原菌菌丝 生长抑制率分别达到1 0 0 ,6 6 4 3 和8 4 4 9 ;牛耳枫叶的乙酸乙酯萃取物对3 种病原 菌菌丝生长抑制率分别达到6 8 7 0 ,5 9 0 9 和5 8 3 5 。生物测定结果表明,牛耳枫的 抑菌活性部位是果实和叶的乙酸乙酯萃取层。 4 、采用硅胶柱层析、大孔吸附树脂柱层析、凝胶柱层析和溶剂重结晶等方法对 牛耳枫生物活性部位一果实和叶的乙酸乙酯萃取层进行分离、纯化,共分离出1 6 个 化合物,通过波谱方法鉴定化合物的化学结构。从果实的乙酸乙酯层分离出1 2 个化 合物,其中1 0 个化合物的结构鉴定为对甲氧基苯甲酸( n 1 ) 、对羟基苯甲醛( n 2 ) 、 5 ,7 一二羟基色原酮( n 3 ) 、对羟基苯甲酸( n 6 ) 、反式对羟基肉桂酸( n 7 ) 、5 ,7 ,4 三羟基3 甲氧基黄酮( n 8 ) 、山柰酚( n 9 ) 、伊胡萝b 苷( n 1 0 ) 、木犀草素( n 1 1 ) 、 3 ,4 一二羟基苯甲酸( n 1 2 ) 。从叶的乙酸乙酯层分离出4 个化合物,其中2 个化合物的 结构鉴定为槲皮素( n 1 3 ) 和反式对甲氧基肉桂酸( n 1 6 ) 。 5 、测定化合物5 ,7 二羟基色原酮、对羟基苯甲酸、反式对羟基肉桂酸、山柰酚 和木犀草素对褐飞虱长翅型雌成虫的触杀活性。结果表明,这5 个化合物对褐飞虱长 翅型雌成虫的触杀活性较低,在1 0 斗头的浓度下,2 4h 和4 8h 死亡率均低于5 0 。 6 、测定对甲氧基苯甲酸、对羟基苯甲醛、5 ,7 一二羟基色原酮、对羟基苯甲酸、反 式对羟基肉桂酸、5 ,7 4 三羟基一3 甲氧基黄酮、山柰酚、木犀草素、3 ,4 二羟基苯甲 酸和槲皮素等1 0 个化合物,对水稻纹枯病菌、番茄白绢病菌和香蕉枯萎病菌3 种病 原菌菌丝生长抑制活性。其中,5 ,7 ,4 一三羟基一3 一甲氧基黄酮对水稻纹枯病菌、番茄白 绢病菌和香蕉枯萎病菌3 种病原菌均有较好的抑菌活性,e c 5 0 值分别为8 7 6 1 4 6 , l1 9 8 4 1 2 和1 0 3 2 0 5 6m g l ,其抑菌毒力低于对照药剂多菌灵,分别是多菌灵的0 0 3 9 , 0 0 8 1 和0 0 1 6 倍;山柰酚对水稻纹枯病菌和番茄白绢病菌也有一定的抑菌活性,e c 5 0 值分别为9 2 2 6 6 7 和1 4 9 6 2 9 2m g l ,其抑菌毒力低于对照药剂多菌灵,分别是多菌 灵的0 0 3 7 和0 0 6 5 倍。 7 、采用m t t 比色法,测定对甲氧基苯甲酸、对羟基苯甲醛、5 ,7 二羟基色原酮、 对羟基苯甲酸、对羟基肉桂酸、5 ,7 ,4 三羟基3 甲氧基黄酮、山柰酚、木犀草素、3 ,4 一 二羟基苯甲酸和槲皮素等1 0 个化合物,对粉纹夜蛾h i 5 细胞增殖抑制活性。1 0 个化合 物中,木犀草素对h i 5 细胞的增殖抑制活性最高,e c s o 值达到11 2 5 8 9m g l ,其细胞 毒力略低于对照药剂印楝素a ,是印楝素a 的0 8 2 倍。 关键词:牛耳枫;杀虫活性;抑菌活性;细胞毒性;黄酮类化合物 h s t u d i e so nt h eb i o a c t i v ec o m p o u n d so f d a p h n i p h y l l u mc a l y c i n u mb e n t h l ij i n g j i n g ( c o l l e g eo fa g r i c u l t u r e ,g u a n g x iu n i v e r s i t y , n a n n i n g5 3 0 0 0 4 ,c h i n a ) a b s t r a c t t h ep r e v i o u sr e s e a r c hd i s c o v e r e dt h a tt h ec r u d em e t h a n o le x t r a c to fs t e m sa n dl e a v e s o fd a p h n i p h y r l l u mc a b ,c i n u mb e n t h h a sh i g hc o n t a c ta c t i v i t ya g a i n s tt h em a c r o p t e r o u so f n 1 u g e n s a n dh i g ha n t i f e e d a n ta c t i v i t ya g a i n s tp x y l o s t e l l a i no r d e rt of i n db i o a c t i v e c o m p o u n d sf r o md c a l y c i n u m ,t h ef u r t h e rr e s e a r c hw e r ec a r d e do u t ,t h er e s u l t sw e r ea s f o l l o w i n g : 1 t h ef r u i t sa n dl e a v e so fd c a l y c i n u mw e r ee x t r a c t e dw i t hm e t h a n 0 1 t h ec r u d e m e t h a n o le x t r a c to ff r u i t sa n dl e a v e sw a ss u s p e n d e di nd i s t i l l e dw a t e r ,a n dw a s s u c c e s s i v e l y e x t r a c t e dw i t h p e t r o l e u me t h e r ,e t h y l a c e t a t ea n dn b u t a n o l ,t o g e t p e t r o l e u m e t h e r s o l u b l e ,e t o a c s o l u b l e ,n b u t a n o l s o l u b l eo f f r u i t sa n dp e t r o l e u m e t h e r - s o l u b l e ,e t o a c - s o l u b l e ,n b u t a n o l s o l u b l eo fl e a v e s 2 t h ec r u d em e t h a d o le x t r a c t sa n di t ss o l v e n te x t r a c t so ff r u i t sa n dl e a v e sw e r et e s t e d v i at o p i c a la p p l i c a t i o nf o rt h e i ri n s e c t i c i d a la c t i v i t ya g a i n s tt h ef e m a l em a c r o p t e r o u so fn 。 l u g e n s t h eb i o a s s a yr e v e a l e dt h a tt h ec r u d em e t h a n o lf r u i t se x t r a c to fd c a l y c i n u mh a d h i g hc o n t a c ta c t i v i t ya g a i n s tt h ef e m a l em a c r o p t e r o u so fn 1 u g e n sa tac o n c e n t r a t i o no f10 - t g f e m a l e ,w i t ht h ec o r r e c t i o nm o r t a l i t i e sa f t e r2 4ha n d4 8ho f8 7 7 8a n d9 0 9 9 , r e s p e c t i v e l y b u tt h ec r u d em e t h a n o ll e a v e se x t r a c to fd c a l y c i n u ms h o w e dl o wc o n t a c t a c t i v i t ya g a i n s t t h ef e m a l e m a c r o p t e r o u s o f l l u g e n s t h ee t o a c s o l u b l e p e t r o l e u m e t h e r s o l u b l ea n dh 2 0 - s o l u b l eo ff r u i t sa l lh a dh i g hc o n t a c ta c t i v i t ya g a i n s t t h ef e m a l em a c r o p t e r o u so f l u g e n sa tac o n c e n t r a t i o no f10g g f e m a l e ;t h ea c t i v i t yo f e t o a c s o l u b l ew a st h eh i g h e s t ,i t sc o r r e c t i o nm o r t a l i t i e sa f t e r2 4ha n d4 8h ,w e r e7 4 6 8 a n d8 1 3 3 ,r e s p e c t i v e l y 3 t h ec r u d em e t h a n o le x t r a c t sa n di t ss o l v e n te x t r a c t so ff r u i t sa n dl e a v e sw e r et e s t e d i i i v i a t h em e t h o do fg r o w t hr a t e si n l a b o r a t o r y f o rt h e i rf u n g i c i d a la c t i v i t ya g a i n s t r h i z o c t o n i as o l a n ik u h n 。s c l e r o t i u mr o l f s i is a c c a n df u s a r i u mo x y s p o r u mf s p c u b e n s e ( e es m i t h ) s n y d e ra n dh a n s e n t h eb i o a s s a yr e v e a l e dt h a t ,b o t ht h ec r u d em e t h a n o l e x t r a c t so ft h ef r u i t sa n dl e a v e sh a dl o wf u n g i c i d a la c t i v i t ya g a i n s tt h et h r e ep l a n t p a t h o g e n sa tt h ec o n c e n t r a t i o no f2 0 0 0m g l ,w i t ht h ei n h i b i t i o nr a t e sb e l o w5 0 b u t t h e e t o a c s o l u b l eo ff r u i t sa n dl e a v e ss h o w e dh i g hf u n g i c i d a la c t i v i t ya g a i n s tt h et h r e ep l a n t p a t h o g e n sa tt h ec o n c e n t r a t i o no f2 0 0 0m g l ,t h ei n h i b i t i o nr a t e sf o re t o a c s o l u b l eo f f r u i t sa g a i n s tt h et h r e ep a t h o g e n sw e r e10 0 ,6 6 4 3a n d8 4 4 9 ,r e s p e c t i v e l y ;t h ei n h i b i t i o n r a t e sf o re t o a c s o l u b l eo fl e a v e sa g a i n s tt h et h r e ep a t h o g e n sw e r e6 8 7 0 ,5 9 0 9a n d 5 8 3 5 ,r e s p e c t i v e l y ,s u g g e s t i n gt h a tt h ef u n g i c i d a la c t i v i t yi n g r e d i e n t sw e r em a i n l y c o n t a i n e di nt h ee t o a c s o l u b l eo ff r u i t sa n dl e a v e s 4 s i x t e e nc o m p o u n d sw e r ei s o l a t e df r o me t o a c - s o l u b l eo ff r u i t sa n dl e a v e so fd c a l y c i n u mw i t hs i l i c ag e lc o l u m nc h r o m a t o g r a p h y ,m a c r o p o r o u sa d s o r p t i v er e s i n sc o l u m n c h r o m a t o g r a p h y ,s e p h a d e xl h 一2 0c o l u m nc h r o m a t o g r a p h ya n ds o l v e n tr e c r y s t a l l i z a t i o n t h e i rs t r u c t u r e sw e r ei d e n t i f i e db ys p e c t r u ma n a l y s i s ( 1hn m r ,1 3 cn m r ) t w e l v e c o m p o u n d so ft h a tw e r ei s o l a t e df r o me t o a c - s o l u b l eo ff r u i t s ,t e no f t h e i rs t r u c t u r e sw e r e i d e n t i f i e da s p m e t h o x y b e n z o i ca c i d ( n 1 ) ,p h y d r o x y b e n z a l d e h y d e ( n 2 ) , 5 ,7 一d i h y d r o x y c h r o m o n e ( n 3 ) ,p h y d r o x y b e n z o i ca c i d ( n 6 ) ,t r a n s - p h y d r o x y l c i n n a m i ca c i d ( n 7 ) ,5 , 7 ,47 一t r i h y d r o x y 一3 m e t h o x y f l a v o n e ( n s ) ,k a e m p f e r o l ( n 9 ) ,f l - d a u c o s t e r o l ( n i o ) , l u t e o l i n ( n il ) a n d3 , 4 一d i h y d r o x y b e n z o i ca c i d ( n 1 2 ) f o u rc o m p o u n d sw e r ei s o l a t e d f r o me t o a c s o l u b l eo fl e a v e s ,t w oo ft h e i rs t r u c t u r e sw e r ei d e n t i f i e da sq u e r c e t i n ( n 1 3 ) a n dt r a n s - p m e t h o x y c i n n a m i ca c i d ( n 1 6 ) 5 t h ei n s e c t i c i d a la c t i v i t yo ff i v ec o m p o u n d sw e r et e s t e dv i at o p i c a la p p l i c a t i o nf o r t h e i ri n s e c t i c i d a la c t i v i t ya g a i n s tt h ef e m a l em a c r o p t e r o u so fn 1 u g e n s t h ec o m p o u n d s t e s t e dw e r e5 , 7 一d i h y d r o x y c h r o m o n e ,p h y d r o x y b e n z o i ca c i d ,t r a n s - p h y d r o x y l c i n n a m i c a c i d ,k a e m p f e r o la n dl u t e o l i n t h eb i o a s s a yr e v e a l e dt h a tt h ef i v ec o m p o u n d sh a dl o w c o n t a c ta c t i v i t ya tt h ec o n c e n t r a t i o no f1 0 t g f e m a l e ,t h e i rc o r r e c t i o nm o r t a l i t i e sa f t e r2 4h a n d4 8hw e r eb e l o w5 0 6 t h ef u n g i c i d a la c t i v i t yo ft e nc o m p o u n d sw e r et e s t e dv i at h em e t h o do f g r o w t hr a t e si nl a b o r a t o r yf o rt h e i rf u n g i c i d a la c t i v i t ya g a i n s tr s o l a n i 。sr o l f s i i l v a n df o x y s p o r u mt s p c u b e n s e t h ec o m p o u n d st e s t e dw e r ep m e t h o x y b e n z o i ca c i d ,p h y d r o x y b e n z a l d e h y d e ,5 , 7 一d i h y d r o x y c h r o m o n e ,p h y d r o x y b e n z o i ca c i d ,t r a n s - p h y d r o x y l c i n n a m i ca c i d ,5 , 7 ,4 一t r i h y d r o x y 一3 一m e t h o x y f l a v o n e ,k a e m p f e r o l ,l u t e o l i n ,3 , 4 一 d i h y d r o x y b e n z o i ca c i d a n dq u e r c e t i n t h eb i o a s s a yr e v e a l e dt h a t ,5 , 7 ,4 一t r i h y d r o x y - 37 一 m e t h o x y f l a v o n eh a dh i g hi n h i b i t i n ge f f e c ta g a i n s tt h et h r e ep a t h o g e n s ,w i t he c s 0v a l - u ea g a i n s tt h et h r e ep a t h o g e n so f8 7 6 1 4 6 ,11 9 8 4 1 2a n d1 0 3 2 0 5 6m g l ,r e s p e c t i v e l y ,w e r e0 0 3 9 ,0 0 8 1a n d0 016t i m e sl o w e rt h a nc a r b e n d a z i m ;k a e m p f e r o la l s oh - a dh i g hi n h i b i t i n ge f f e c ta g a i n s tr s o l a n ia n d & r o l f s i i t h ee c s 0v a l u ef o rt h i sc o m p o u n da g a i n s tt h e t h e t w op a t h o g e n sw e r e9 2 2 6 6 7a n d1 4 9 6 2 9 2m g l ,r e s p e c t i v - e l y ,w e r e0 0 3 7 a n d0 0 6 5t i m e sl o w e rt h a nc a r b e n d a z i m 7 t h ec y t o t o x i c i t yo ft e nc o m p o u n d sa g a i n s th i 一5 c e l l sw e r et e s t e dv i am t t c o l o r i m e t r i c a s s a y t h ec o m p o u n d s t e s t e dw e r e p m e t h o x y b e n z o i c a c i d , p - h y d r o x y b e n z a l d e h y d e ,5 , 7 一d i h y d r o x y c h r o m o n e ,p - h y d r o x y b e n z o i c a c i d , t r a n s - p h y d r o x y l c i n n a m i ca c i d ,5 , 7 ,4 一t r i h y d r o x y - 3 - m e t h o x y f l a v o n e ,k a e m p f e r o l ,l u t e o l i n , 3 , 4 - d i h y d r o x y b e n z o i ca c i da n dq u e r c e t i n t h eb i o a s s a yr e v e m e dt h a t t h ea c t i v i t yo f l u t e o l i nw a st h eh i g h e s t ,t h ee c s ov a l u ef o rt h i sc o m p o u n da g a i n s th i 一5c e l l sw a s11 2 5 8 9 m g l ,w a so 8 2t i m e sl o w e rt h a na z a d i r a c h t i n k e yw o r d s :d a p h n i p h y l l u mc a l y c i n u mb e n t h ;i n s e c t i c i d a la c t i v i t y ;f u n g i c i d a l a c t i v i t y ;c y t o t o x i c i t y ;f l a v o n o i d v 缩略词及中英文对照 d c a & c i n u m d a p h n i p h y l l u mc a l y c i n u mb e n t h n 1 u g e n s r s o l a n i s r o l f s i i n i l a p a r v a t al u g e n ss t i l l r h i z o c t o n i as o l a n fk i i h n s c l e r o t i u mr o l f s i is a c c e o x y s p o r u mf s p c u b e n s e 牛耳枫 褐飞虱 水稻纹枯病菌 番茄白绢病菌 f u s a r i u mo x y s p o r u mf s p c u b e n s e ( e es m i t h ) s n y d e ra n dh a n s e n 香蕉枯萎病菌 e t o a c m e o h d m s o t l c n m r m t t e t h y la c e t a t e m e t h a n o l d i m e t h y ls u l p h o x i d e t h i nl a y e rc h r o m a t o g r a p h y n u c l e a rm a g n e t i cr e s o n a n c e m i c r o c u l t u r et e t r a z o l i u m v i 乙酸乙酯 甲醇 二甲基亚砜 薄层色谱 核磁共振谱 m t t 比色法 承诺书 广西大学 学位论文原创性声明 本人郑重声明:所呈交的学位论文是本人在导师的指导下完成的,研究工作所取 得的成果和相关知识产权属广西大学所有。除已注明部分外,论文中不包含其他人已 经发表过的研究成果,也不包含本人为获得其它学位而使用过的内容。对本文的研究 工作提供过重要帮助的个人和集体,均已在论文中明确说明并致谢。本人完全意识到 本声明的法律后果由本人承担。 作者签名:疹乳日期:2 0 护夕年易月谚日 学位论文版权使用授权书 本人完全了解广西大学关于收集、保存、使用学位论文的规定,即:本人保证不 以其它单位为第一署名单位发表或使用本论文的研究内容;按照学校要求提交学位论 文的印刷本和电子版本;学校有权保存学位论文的印刷本和电子版,并提供目录检索 与阅览服务;学校可以采用影印、缩印、数字化或其它复制手段保存论文;在不以赢 利为目的的前提下,学校可以公布论文的部分或全部内容。 本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。 本学位论文属于: 口保密,在年解密后适用本授权书。坏保密。 学位论文全文电子版提交后: 晌意在校园网上发布,供校内师生和与学校有共享协议的单位浏览。 作者签名:丛 导师签名:重盔呈羔 日期: 日期: 牛耳枫活性成分研究 一j l l - - j - 1 刖舌 1 1 植物源农药研究的意义 早在公元前4 7 0 年,在有机合成农药问世之前,希腊人就丌始使用橄榄树叶的提 取液防治枯萎病,人类最早使用的农药,有不少就是从植物中提取出来的。2 0 世纪 4 0 年代,有机合成杀虫剂问世以后,由于其具有高效、广谱、快速等特点,逐渐代 替植物源农药,得到广泛应用,在植物保护中发挥了巨大作用,促进了农业的快速发 展,在防治卫生害虫和保证人类健康方面也发挥了重要的作用,给人类带来了巨大的 经济效益。同时,传统化学农药长期不合理使用及其固有缺点,引起的“3 r ”问题 已经成为化学防治所面临的最严峻的问题。随着社会和经济的发展,人们对生活环境 安全越来越重视,对农产品和食品的需求也j 下由追求数量向追求质量效益方向转变, 为了人类生存和发展,人们越来越重视研究开发“环境和谐农药”,尤以生物成分为 对象,寻找生物源农药( 源于植物、动物、微生物等) 研究倍受关注( 王桂清等,2 0 0 6 ) 。 近年来,绿色食品、有机食品在世界范围内迅速发展。欧洲、美国、同本等发达 国家和地区有机农业和有机食品的生产和加工得到了迅速的发展。目前,国内的有机 农产品需求呈现强烈增长,中国将会成为欧盟、美国和日本之后第四大有机食品消费 市场。国内外市场对无公害农产品的需求量日益增大,对农药的要求也越来越高,对 生物源农药尤其是植物源农药的需求量也越来越大。全世界生物农药产量每年以 1 0 - 一2 0 的速度递增,商品登记的生物农药产品已超过百种,西方发达国家要求生 物农药的用量在近年内逐步达到6 0 ,我国计划到2 0 1 5 年,生物农药使用量占到农 药总量的5 0 ( 徐汉虹等,2 0 0 3 ;陆自强等,2 0 0 4 ) 。生物源农药的市场前景广阔。 由于有机食品、无公害食品在世界范围内快速发展,以及害虫再猖獗、害虫抗药 性和农药残留等问题日趋严重,一些国家相继制定有关法律法规,限制和禁止一些高 毒高残留农药的生产和使用。我国加入w t o 以后,为了我国农业可持续发展,国家 农业部、国家发改委、国家工商总局、国家质检总局发布的联合公告( 第6 3 2 号) : 自2 0 0 7 年1 月1 曰起,全面禁止使用甲胺磷、对硫磷、甲基对硫磷、久效磷和磷胺 5 种高毒有机磷农药的生产、流通和使用。在过去十多年里,欧洲各国都先后不同程 度地减少了常规农药的用量,其2 0 0 0 年农药使用量比2 0 世纪8 0 年代的平均水平减 少了5 0 。2 0 世纪末,在不减少作物产量的前提下,美国减少了3 5 化学农药用量。 韩国农林部宣布,在2 0 1 0 年前将化肥和化学农药的使用量减少至目前的5 0 。韩国 1 9 9 9 年的农药使用量为2 2 万吨,到2 0 0 4 年,化肥和农药的使用量将分别减少到 6 1 4 万吨和1 5 万吨( 徐汉虹等,2 0 0 3 ) 。植物源农药的开发和利用也因此再度成为 研究热点。 总之,农药仍是2 1 世纪保证农业高效发展的重要物资。未来,农药将向高安全性、 高选择性、高效、经济、使用方便的方向发展,而对人畜安全、与环境相容性好的植 物源农药j 下是符合这一发展趋势的理想药剂。植物源农药与传统化学农药相比,具有 安全间隔期短、不产生药害、不宜产生抗药性、对环境友好和对人畜安全等优点,且 植物性农药原料丰富较易得,成本低廉( 徐汉虹等,2 0 0 2 ) 。我国植物资源非常丰富, 约有3 万多种高等植物,其中近1 0 0 0 种植物具有杀虫或者抑菌活性,发展植物源农药 的条件得天独厚,具有巨大的开发潜力和广阔的发展前景( 王小艺,2 0 0 0 ) 。植物源 农药弥补了传统化学农药的缺点,能保证农产品高产优质,满足人类对农产品的需求, 因而具有非常广阔的市场。植物源农药的开发,特别是植物性杀虫剂和杀菌剂的研究 与开发具有极其重要的意义。 1 2 植物源农药研究开发现状 1 2 1 植物源农药的植物资源 1 2 1 1 楝科 楝科m e l i a c e a e ,双子叶植物纲蔷薇亚纲一个较大的科,全球共有5 0 属,约5 5 0 种,属常绿或落叶的乔木或灌木,主要分布于热带及亚热带地区,其中印楝、苦楝和 川楝是楝科中主要的杀虫植物。楝科植物中的次生物质具有杀虫、杀菌、杀线虫等多 种生物活性( 彭黎旭,2 0 0 1 ) 。 ( 1 ) 印楝 印楝a z a d i r a c h t ai n d i c a ,楝科印楝属乔木。印楝能防治超过4 0 0 种农林、畜牧 仓储和卫生害虫,对鳞翅目、鞘翅目及双翅目害虫有特效。1 9 6 8 年,b u t t e r w o r t h 和 m o r g a n 从印楝树种子中分离出的印楝素( a z a d i r a c h t i n ) ,稍后确定了印楝素的化学结 构。印楝素a 可以明显抑制粉纹夜蛾h i 一5 细胞增殖,破坏其骨架结构,降低细胞内还 原性谷胱甘肽( g s h ) 含量( 李文欧等,2 0 0 8 ) 。印楝素b 具有最强的昆虫生长调节 作用( 荣晓东等,2 0 0 0 ) 。从印楝种仁中分离出的s a l a n n i n 对辣椒疫霉病病原菌和番木 瓜炭疽病病原菌有显著的抑制效果( 林靖凌等,2 0 0 8 ) 。印楝种核粗提物对叶蝉 2 j a c o b i e l l af a c i a l i s 有高效的驱避作用。印楝油对褐飞虱n i l a p a r v a t al u g e n 、白背飞 虱s o a t e l l a f u r c i f e r a 等水稻害虫具有拒食、驱避和抑制生长发育的作用( 赵冬香等, 2 0 0 0 ) 。目前,已成功研制出多个印楝素产品,如美国开发的m a r g o s a n o 、n e e m g u a r d , 德国开发n e e m a z a l ,中国o 3 印楝素乳油等。 ( 2 ) 苦楝 苦楝m e l i aa z e d a r a c h ,楝科楝属落叶乔木。苦楝树皮和苦楝果实的乙醇粗提物 在1 0 0m g k g 浓度下,对松材线虫的校j 下死亡率超过9 6 ( 巨云为等,2 0 0 2 ) 。苦楝 果实的乙醇粗提物对3 龄卫矛蠹幼虫具有明显忌避和拒食作用,其l d 5 0 值为2 6 8 3 3 m g m ( 王元兰等,2 0 0 6 ) 。赵博光等( 2 0 0 2 ) 研究发现苦楝果粗提物对桑天牛产卵 和对其卵孵化均有显著影响。苦楝种仁粗提物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽 孢杆菌等细菌具有明显的抑菌活性,尤其对枯草芽孢杆菌抑菌效果最理想( 翟兴礼等, 2 0 0 6 ;马玉翔等,2 0 0 4 ) 。 ( 3 ) 川i 楝 川楝m e l i at o o s e n d a n ,印楝和苦楝的近源种。川楝素是从川楝中提取出的一种 四环三萜化合物。杨东升等( 2 0 0 2 ) 研究发现川楝素可以抑制家蝇生长发育和生殖能 力,使其种群增长降低。李云寿等( 1 9 9 9 ) 的研究表明,川楝素可以明显抑制斜纹夜 蛾5 龄幼虫的取食行为。川楝果实粗提物对棉铃虫有很好的杀虫活性,对棉铃虫幼虫 血淋巴蛋白合成也有抑制活性( 李小平,2 0 0 3 ) 。 此外,楝科的其它植物也具有农药活性。曾宪儒等( 2 0 0 5 ) 对1 2 种广西野生楝科 植物的粗提物进行了对萝卜蚜的触杀活性筛选,发现在1 0m g n = l l 的浓度下,红楝子、 香椿、地黄连和老虎楝的粗提物对萝b 蚜有较高的触杀活性,2 4h 校正死亡率均超过 7 0 。提取自楝科k h a y a i v o r e n s i s 的柠檬苦素类似物:安哥拉紫檀酯和1 ,3 ,7 一三脱 乙酰基( k h i v o r i n ) 对灰葡萄孢b o t r y t i sc i n e r e ap e r s o o n 有较好防抑菌活性( 乔依编 译,2 0 0 5 ) 。 1 2 1 2 菊科 菊科c o m p o s i t a c ,双子叶植物的一大科,也是种子植物中种类最多的一科,全 球约1 0 0 0 属,2 0 0 0 0 - - 一3 0 0 0 0 种,主要分布于温带。李云寿等( 2 0 0 0 ) 研究了1 4 种菊科 植物粗提物对菜青虫的杀虫活性,结果表明,黄花蒿、青蒿、艾蒿、鱼眼草、小鱼眼 草、紫茎泽兰、万寿菊等7 种菊科植物甲醇和乙醇粗提物对菜青虫有较高的杀虫活性。 李玉平等( 2 0 0 3 ) 研究了2 5 种菊科植物粗提物对植物病原菌抑菌效果,发现大话金挖 耳、天明金、蓼子朴、猪毛蒿和旋覆花等5 种植物对番茄灰霉病菌b o t r y t i sc i r e r e ap e r s e t t r i s 、苹果炭疽病菌g l o m e r e l l ac i n g u l a t as c h r 和小麦白粉病菌e r y s i p h eg r a m i n i s d c 有较好抑菌活性,值得进一步研究开发。周丽娟等( 2 0 0 6 ) 人对菊科中具有杀菌 活性1 6 个属的植物进行总结发现,菊科杀菌植物主要集中在蓍属a c h i l l e a 、胜红蓟 属a g e r a t u m 、蒿属a r t e m i s i a 、天明精属c a r p e s i u m 和矢车菊属c e n t a u r e a 等5 个属中。郝双红等( 2 0 0 4 ) 研究了3 5 种菊科植物除草活性,结果表明,灰孢蒿、大刺 儿菜和大花金耳挖对油菜、黄瓜、小麦、高粱种子发芽和生长有较好抑制效果。万寿 菊t a g e t e se r e c t a 的粗提物对蚊蝇幼虫、线虫、鳞翅目害虫等多类害虫均表现出优良 的光活化毒杀活性( 王新国等,2 0 0 2 ) 。万寿菊根部粗提物对西瓜枯萎病菌、茄子枯 萎病、辣椒枯萎病、黄芪枯萎病的菌丝生长和孢子萌发均有明显的抑制活性( 李文英 等,2 0 0 2 ) 。 菊科植物在农药应用方面最成功的当属杀虫植物除虫菊c h r y s a n t h e m u m c i n e r a r i i f o l i u m 。以除虫菊中的天然有效成分一除虫菊素( p y r e t h r i n ) 为模板,仿生 合成研发出来的一系列拟除虫菊酯类杀虫剂,是一类比较理想的杀虫剂,杀虫毒力高, 杀虫谱广,对人畜安全( 李玉平等,2 0 0 3 ) 。 1 2 1 3 卫矛科 卫矛科c e l a s t r a c e a e 一般为较小乔木、灌木或藤本植物。全球8 8 属,1 3 0 0 余种, 主要分布于热带地区。李衍方等( 2 0 0 6 ) 研究发现苦皮藤c e i a s t r u sa n g u l a t u sm a x 对 许多农业害虫具有拒食、麻醉和毒杀活性。杨征敏等( 2 0 0 2 ) 研究表明苦皮藤乙醇粗 提物对玉米小斑病菌b i p o l a r i sm a y d i s 、玉米大斑病菌e x s e r o h i l u mm r c i c m 、节果 腐烂病菌v a l s am a l i 、番茄早疫病菌a l t e r n a r i as o l a n i 、番茄狄霉病菌b o t r y t i s c i n e r e a 、黄瓜霜霉病菌p s e u d o p e r n o s p o r ac u b e n s 括和小麦白粉病菌e r y s i p h e g r a m i n i s 等8 种重要的农作物病原菌均有明显抑菌活性。 雷公藤t r i p t e r y g i u mw i l f o r d i i 对叶菜类、果瓜类的多种害虫具有忌避、拒食、毒 杀、抑制生长发育及产卵忌避作用。雷公藤乙醇粗提物对4 龄卫矛尺蠖a b r a x a s m i r a n d ab u t l e r 有拒食毒杀活性( 王元兰等,2 0 0 4 ) 。雷公藤根皮粗提物对茭白二化螟 c h i o s u p p r e s s a l i s w a l k 幼虫有较强的拒食、内吸毒性、胃毒和生长发育抑制活性( 郑 许松等,2 0 0 3 ) 。
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