（无机化学专业论文）共振瑞利散射法在生物碱和磺胺类药物中的分析应用.pdf

摘要共振瑞利散射法在生物碱和磺胺类药物中的分析应用无机化学专业硕士研究生宋彦琪指导教师胡小莉教授摘要生物碱和磺胺类药物无论是在数量上还是在药用性质方面，都具有其独特的地位。本文主要以苦参碱( m a t ) 、氧化苦参碱( o x y ) 、硫酸阿托品( a s ) 、丁溴东莨菪碱( h b b ) 和磺胺二甲嘧啶( s m 2 ) 为研究对象，研究、发展和建立简便快速的测定生物碱类和磺胺类药物的共振瑞利散射( r e s o n a n c er a y l e i g hs c a t t e r i n g ，r r s ) 、二级散射( s e c o n d o r d e rs c a t t e r i n g ，s o s ) 和倍频散射( f r e q u e n c yd o u b l i n gs c a t t e r i n g ，f d s l 方法，并将这些方法运用于生物制剂和天然药物的检测中。研究体系如下：1 共振瑞利散射和共振非线性散射光谱法测定苦参中的苦参碱和氧化苦参碱在0 1m o f l ( p h1 0 ) 的h c l 介质中，1 2 钨磷酸( t p ) 和苦参碱( m a t ) 、氧化苦参碱( o x y ) 结合形成离子缔合物，引起共振瑞利散射( r r s ) 、二级散射( s o s )和倍频散射( f d s ) 显著增强，并产生新的r r s ，s o s 和f d s 光谱。最大r r s ，s o s 和f d s 峰分别位于3 7 0n l n ，6 7 0n m 和3 9 3n l n ，散射强度在一定范围内与m a t和o x y 的浓度成正比，据此建立测定m a t 和o x y 的新方法。本方法具有较高的灵敏度，检出限在3 3 4 0 8n g m l 范围内。考察了体系的r r s 、s o s 、f d s 和吸收光谱特征，优化了适宜的测定条件，实验了常见共存物质的影响，表明该方法具有良好的选择性，可用于苦参中m a t 和o x y 的测定，结果满意。对离子缔合反应机理和r r s 增强的原因进行了讨论。2 共振瑞利散射法测定硫酸阿托品眼膏中的硫酸阿托品在p h 范围为3 5 的h a c - n a a c 缓冲溶液中，建立了简便快速的测定硫酸阿托品眼膏中硫酸阿托品( a s ) 含量的共振瑞利散射( r r s ) 方法。1 3 与a s 反应形成离子缔合物，导致共振瑞利散射强度的增强。最大散射峰6 3 4n n l 处，a s 浓度在一西南大学硕士学位论文定范围内与散射增强程度成良好线性关系，据此提出测定a s 的新方法。检出限( 3 0 )为6 5n g m l 。考察了体系的光谱特征、适宜的反应条件和共存物质的影响。方法具有良好的选择性，可用于硫酸阿托品眼膏中a s 的测定。3 共振瑞利散射法测定丁溴东莨菪碱胶囊中丁溴东莨菪碱的含量在p h5 0 的条件下，建立了简便快速的测定丁溴东莨菪碱( h b b ) 的共振瑞利散射( r r s ) 方法。1 3 。与h b b 反应形成离子缔合物，导致共振瑞利散射强度的增强，最大散射峰位于6 2 3n l n 处，h b b 浓度在一定范围内与散射增强程度成良好线性关系，据此提出测定h b b 的新方法。本法具有较高灵敏度，其检出限为5 7r i g m e ，可用于胶囊中h b b 含量的测定。4 二卤代荧光素叫蜒+ 共振瑞利散射法测定丁溴东莨菪碱在p h4 2 5 6h a c n a a c 缓冲溶液的条件下，丁溴东莨菪碱( h b b ) 与a g + 和二卤代荧光素染料( 二氯荧光素d c f ，二溴荧光素d b f 和二碘荧光素d i f ) 反应形成离子缔合物，导致共振瑞利散射强度的增强，最大散射峰分别位于3 2 2n l t l ( d c f ) 、3 2 0n n ( d b f ) 、3 3 5n l nf d i f ) 处。h b b 浓度在一定范围内与散射增强程度成良好线性关系，据此提出测定h b b 的新方法。考察了体系的光谱特征、适宜的反应条件和共存物质的影响。方法用于胶囊中h b b 的测定，结果与文献一致。文中对离子缔合反应机理和r r s 增强的原因进行了讨论。5 高锰酸钾共振瑞利散射法测定磺胺二甲嘧啶在0 2m o l lh 2 s 0 4 介质中，磺胺二甲嘧啶( s m 2 ) 和k m n 0 4 在加热条件下发生氧化还原反应生成m n 0 2 微粒，导致共振瑞利散射增强，并产生新的散射峰。其最大散射波长位于5 9 5n l l 附近，散射强度在一定范围内与s m 2 的浓度成正比，据此建立了测定s m 2 的r r s 新方法。本方法具有较高的灵敏度，检出限为8 6n g m l 。实验优化了测定条件，考察了共存物质的影响，表明方法具有良好的选择性，用于片剂中s m 2 的测定，结果满意。关键词：共振瑞利散射：二级散射；倍频散射；苦参碱；氧化苦参碱；硫酸阿托品：丁溴东茛菪碱；磺胺二甲嘧啶i ia b s t r a c ta n a l y t i c a la p p l i c a t i o n so fr e s o n a n c er a y l e i g hs c a t t e r i n gs p e c t r ai na l k a l o i d sa n ds u l f o n a m i d e ss p e c i a l t y ：i n o r g a n i cc h e m i s t r ya u t h o r ：s o n gy a n q it u t o r ：p r o f h ux i a o l ia b s t r a c ta l k a l o i d sa n ds u l f o n a m i d e s ，w h e t h e ri nq u a n t i t yo ri nt h em e d i c i n a lp r o p e r t i e s ，h a v eu n i q u ep o s i t i o n n e wr r s ，s o sa n df d sm e t h o d sf o rt h ed e t e r m i n a t i o no fm a t r i n e ，o x y m a t r i n e ，a t r o p i n es u l p h a t e ，h y o s c i n eb u t y l b r o m i d ea n ds u l f a d i m i d i n eh a v eb e e ne s t a b l i s h e da n dd e v e l o p e d i tc a nb eu s e di nt h ed e t e r m i n a t i o no ft r a c ed r u g si nt h en a t u r a lm e d i c i n ea n dt h ep h a r m a c e u t i c a lp r e p a r a t i o n m a i ni n v e s t i g a t e ds y s t e m sa r el i s t e da sf o l l o w ：1 d e t e r m i n a t i o no fm a t r i n ea n do x y m a t r i n ei nr a d i xs o p h o r a ef l a v e s c e n t i sb yr e s o n a n c er a y l e i g hs c a t t e r i n ga n dr e s o n a n c en o n l i n e a rs c a t t e r i n gs p e c t r ai i l0 1m o l l ( p h1 0 ) h c lm e d i u m ，1 2 - t u n g s t o p h o s p h o r i ca c i d ( t p ) r e a c t e d 讲mm a t r i n e ( m a t ) a n do x y m a t r i n e ( o x y ) t of o r ma ni o n - a s s o c i a t i o nc o m p l e x a sar e s u l t ，t h en e ws p e c t r ao fr e s o n a n c er a y l e i g hs c a t t e r i n g ( r r s ) ，s e c o n d o r d e rs c a t t e r i n g ( s o s ) ，a n df r e q u e n c yd o u b l i n gs c a t t e r i n g ( f d s ) a p p e a r e da n dt h e i ri n t e n s i t i e sw e r ee n h a n c e dg r e a t l y t h em a x i m u mw a v e l e n g t h so fr r s ，s o sa n df d sw e r el o c a t e da t3 7 0n r n , 6 7 0n n la n d3 9 3n m ，a n dt h es c a t t e r i n gi n t e n s i t i e sw e r ep r o p o r t i o n a lt ot h ec o n c e n t r a t i o no fm a ta n do x yi nc e r t a i nr a n g e s b a s e do nt h i s ，n e wm e t h o d sf o rt h ed e t e r m i n a t i o no fm a ta n do x yh a v eb e e ne s t a b l i s h e d t h ed e t e c t i o nl i m i t s ( 3 0 ) o ft h e s em e t h o d sw e r ei nt h er a n g eo f3 6 - - 2 8 2n g r n l t h er r s ，s o s ，a n df d sc h a r a c t e r i s t i c s ，a b s o r p t i o ns p e c t r u mc h a r a c t e r i s t i c sa n do p t i m u mr e a c t i o nc o n d i t i o n so ft h e s es y s t e m sw e r ed i s c u s s e d e f f e c t so fc o e x i s t e n ts u b s t a n c e sw e r et e s t e d ，a n dt h er e s u l t sd e m o n s t r a t e dt h a tt h em e t h o d sh a dg o o ds e l e c t i v i t y i th a sb e e na p p l i e dt ot h ed e t e r m i n a t i o no fm a ta n do x yi ns a m p l e so fr a d i xs o p h o r a ef l a v e s c e n t i sw i t hs a t i s f a c t o r yr e s u l t t h er e a c t i o nm e c h a n i s ma n dr e a s o n so fr r se n h a n c e m e n tw e r ed i s c u s s e d 2 d e t e r m i n a t i o no fa t r o p i n es u l p h a t ei na t r o p i n es u l p h a t ee y eo i n t m e n tb yi i i西南大学硕七学位论文r e s o n a n c er a y l e i g hs c a t t e r i n gt e c h n i q u ei np h3 叫5h a c - n a a eb u f f e rm e d i u m ，ar e s o n a n c er a y l e i g hs c a t t e r i n gm e t h o dw a sd e v e l o p e df o rt h ed e t e r m i n a t i o no fa t r o p i n es u l p h a t e ( a s ) 1 3 r e a c t e dw i t ha st of o r ma ni o n a s s o c i a t i o nc o m p l e x a sar e s u l t ，t h en e ws p e c t r ao fr e s o n a n c er a y l e i g hs c a t t e r i n g ( r r s ) a p p e a r e da n dt h ei n t e n s i t i e sw e r ee n h a n c e dg r e a t l y t h em a x i m u mw a v e l e n g t ho fr r sw a sl o c a t e da t6 3 4n l n t h es c a t t e r i n gi n t e n s i t i e sw e r ep r o p o r t i o n a lt ot h ec o n c e n t r a t i o no fa s t h ed e t e c t i o nl i m i t ( 3 0 ) w a s6 5n e g m l t h es p e c t r ac h a r a c t e r i s t i c s ，t h eo p t i m u mr e a c t i o nc o n d i t i o n sa n di n f l u e n c i n gf a c t o r sh a v eb e e nd i s c u s s e d t h em e t h o dw a ss e l e c t i v e i th a sb e e na p p l i e dt ot h ed e t e r m i n a t i o no fa si na t r o p i n es u l p h a t ee y eo i n t m e n t 、析ms a t i s f y i n gr e s u l t s 3 d e t e r m i n a t i o no fh y o s c i n eb u t y l b r o m i d ei nh y o s c i n eb u t y 7 l b r o m i d ec a p s u l e sb yr e s o n a n c er a y l e i g hs c a t t e r i n gt e c h n i q u ei np h5 0m e d i u m ，ar e s o n a n c er a y l e i g hs c a t t e r i n gm e t h o dw a sd e v e l o p e df o rt h ed e t e r m i n a t i o no fh y o s c i n eb u t y l b r o m i d e ( h b b ) 1 3 。r e a c t e dw i t hh b bt of o r ma ni o n a s s o c i a t i o nc o m p l e x a sar e s u l t ，t h en e ws p e c t r ao fr e s o n a n c er a y l e i g hs c a t t e r i n g( r r s ) a p p e a r e da n dt h ei n t e n s i t i e sw e r ee n h a n c e dg r e a t l y t h em a x i m u mw a v e l e n g t ho fr r sw a sl o c a t e da t6 2 3n n l t h es c a t t e r i n gi n t e n s i t i e sw e r ep r o p o r t i o n a lt ot h ec o n c e n t r a t i o no fh b b t h ed e t e c t i o nl i m i t ( 3 0 ) w a s5 7n 幽n l t h es p e c t r ac h a r a c t e r i s t i c s ，t h eo p t i m u mr e a c t i o n c o n d i t i o n sa n di n f l u e n c n gf a c t o r sh a db e e nd i s c u s s e d t h em e t h o di ss e l e c t i v e i th a sb e e na p p l i e dt ot h ed e t e r m i n a t i o no fh b bi nc a p s u l e sw i t hs a t i s f y i n gr e s u l t s 4 d e t e r m i n a t i o no fh y o s c m eb u t y l b r o m i d ew i t ha g + a n dd i h a l o g e n a t e df l u o r e s c e i nd y e si nc a p s u l e sb yr e s o n a n c er a y l e i g hs c a t t e r i n gt e c h n i q u ei np h4 2 5 6h a c n a ab u f f e rs o l u t i o n , h y o s c i n eb u t y l b r o m i d e ( h b b ) r e a c t sw i t ha g + a n dd i h a l o g e n a t e df l u o r e s c e i nd y e ss u c ha sd i c h l o r o f l u o r e s c e i n ( d c f ) ，d i b r o m o f l u o r e s c e i n ( d b f ) a n dd i i o d o f l u o r e s c e i n ( d i f ) t of o r mai o n a s s o c i a t i o nc o m p l e x t h i sr e s u l t e di nt h es i g n i f i c a n te n h a n c e m e n to fr r si n t e n s i t y t h em a x i m u mw a v e l e n g t h so fr r sw e r el o c a t e da t3 2 2u m ( d c f ) ，3 2 0n n l ( d b f ) a n d3 3 5n n l ( d i f ) ，r e s p e c t i v e l y t h es c a t t e r i n gi n t e n s i t i e sw e r ep r o p o r t i o n a lt ot h ec o n c e n t r a t i o no fh b b b a s e do nt h e s e ，n e wm e t h o d sf o rt h ed e t e r m i n a t i o no fh b bh a v eb e e ne s t a b l i s h e d t h es p e c t r ac h a r a c t e r i s t i c s ，t h eo p t i m u mr e a c t i o nc o n d i t i o n sa n di n f l u e n c i n gf a c t o r sh a v eb e e nd i s c u s s e d i th a sb e e na p p l i e dt ot h ed e t e r m i n a t i o no fh b bi nc a p s u l e sa n dt h ei va b s t r a c tr e s u l t sw e r ei ng o o da g r e e m e n tw i t ht h o s eo b t a i n e db yt h el i t e r a t u r em e t h o d s 5 d e t e r m i n a t i o no fs u l f a d i m i d i n ew i t hp o t a s s i u mp e r m a n g a n a t eb yr e s o n a n c er a y l e i g hs c a t t e r i n gt e c h n i q u ei n0 2 0m o l lh 2 s 0 4m e d i u m , ar e d o xr e a c t i o nt o o kp l a c eb e t w e e ns u l f a d i m i d i n e( s m 9a n dp o t a s s i u mp e r m a n g a n a t et of o r mm n 0 2p a r t i c l e sb yh e a t i n g a sar e s u l t ，t h en e ws p e c t r ao fr e s o n a n c er a y l e i g hs c a t t e r i n ga p p e a r e da n dt h e i ri n t e n s i t i e sw e r ee n h a n c e dg r e a t l y t h em a x i m u mp e a ko fr r sw a sl o c a t e da t5 9 5n m , a n dt h es c a t t e r i n gi n t e n s i t i e sw e r ep r o p o r t i o n a lt ot h ec o n c e n t r a t i o no fs m 2 b a s e d0 ni t ，an e wm e t h o df o rt h ed e t e r m i n a t i o no fs m 2h a sb e e ne s t a b l i s h e d t h ed e t e c t i o nl i m i t ( 3 g ) w a s8 6n g m l e f f e c t so fc o e x i s t e n ts u b s t a n c e sw e r et e s t e d ，a n dt h er e s u l t sd e m o n s t r a t e dt h a tt h i sm e t h o dh a dg o o ds e l e c t i v i t y i th a sb e e na p p l i e dt ot h ed e t e r m i n a t i o no fs m 2i nt a b l e tw i t hs a t i s f a c t o r yr e s u l t s k e y w o r d s ：r e s o r m i i c er a y l e i g hs c a t t e r i n g ；s e c o n d o r d e rs c a t t e r i n g ；f r e q u e n c yd o u b l i n gs c a t t e r i n g ；m a t r i n e ；o x y m a t r i n e ；a t r o p i n es u l p h a t e ；h y o s c i n eb u t y l b r o m i d e ；s u l f a d i m i d i n ev独创性声明学位论文题目：基拯盟型邀魁洼查生堑毯狸堕壁粪垫堑主鲍佥堑麈周本人提交的学位论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。论文中引用他人已经发表或出版过的研究成果，文中已加了特别标注。对本研究及学位论文撰写曾做出贡献的老师、朋友、同仁在文中作了明确说明并表示衷心感谢。，- ，l学位论文作者：嬲硼、签字日期：功加年，月7 1 0 日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解西南大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权西南大学研究生院( 筹) 可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。( 保密的学位论文在解密后适用本授权书，本论文：口不保密，口保密期限至年月止)。学位论文作者签名：康事破导师签名：铅+ 荔、)签字日期：，口年r 月f 日签字日期：沙f o 年，月2f 日第1 章绪论第1 节苦参碱和氧化苦参碱的性质、应用及主要分析方法第l 章绪论生物碱是生物体内含氮有机化合物的总称，多数是从植物中提取出来的，只有极少数是存在于动物器官中的。随着其种类的不断发现，它们的结构和药理作用得到进一步的研究和了解，并合理地开发成为医用药物。目前，常见的生物碱类药物有盐酸麻黄碱、硫酸阿托品、丁溴东莨菪碱、硫酸奎宁、盐酸吗啡、盐酸可待因、硝酸士的宁、利血平及氧化苦参碱等；它们的药效作用较为广泛，涉及治疗慢性低血压，荨麻疹和血管神经性水肿等过敏反应，有机磷农药中毒，恶性疟，急性锐痛，高血压等。磺胺类药物在1 9 3 5 年公开了首次使用的临床结果后，引起了世界范围的极大兴趣。磺胺类药物能抑制多种革兰氏阳性球菌、杆菌，革兰氏阴性球菌、杆菌和过滤性病毒等。然而由于其作用原理和副作用，使这类药物在临床上应用受到了限制。但现在仍有较多此类药物在使用，例如磺胺醋酰钠、磺胺嘧啶、磺胺二甲嘧啶及磺胺甲恶唑等。随着药物学科的发展，发展和建立简便快速的测定生物碱和磺胺类药物的方法不仅有助于了解和监测药物制剂和天然药物有效成分的含量，而且对进。步研究它们的生物活性及临床应用( 药代动力学)具有一定意义，也是当前药物化学研究领域里的重要课题之一。本文主要以苦参碱( m a t ) 、氧化苦参碱( o x y ) 、硫酸阿托品( a s ) 、丁溴东莨菪碱( h b b ) 和磺胺二甲嘧啶( s m 2 ) 为研究对象，研究、发展和建立简便快速的测定上述药物的共振瑞利散射( r e s o n a n c er a y l e i g hs c a r e r i n g ，r r s ) 、二级散射( s e c o n d o r d e rs c a r e d n g ，s o s ) 和倍频散射( f r e q u e n c yd o u b l i n gs c a t t e r i n g ，f d s ) 方法，并将这些方法运用于生物制剂和天然药物的检测中。第1 节苦参碱和氧化苦参碱的性质、应用及主要分析方法1 苦参碱和氧化苦参碱的性质及应用苦参碱( m a t r i n e ，m a t ) 和氧化苦参碱( o x y m a t r i n e ，o x y ) 是一类独特的生物碱一喹里西啶生物碱，也称羽扇生物碱( t e t r a c y c l o q u i n o l i z i n d i n ea l k a l o i d s ) ，是苦豆子、苦参、广豆根等豆科植物中生物碱的主要成份。二者在一定条件下可以转化。苦参碱和氧化苦参碱的结构示意图如下：西南大学硕士学位论文苦参碱( m a t f i n e ，m a t )c 1 5 h 2 4 n 2 0o氧化苦参碱( o x y m a t r i n e ，o x y )c l s h 2 4 n 2 0 2苦参碱和氧化苦参碱的药理作用主要有：( 1 ) 抗炎作用：研究发现苦参碱和氧化苦参碱均可调节小鼠及大鼠腹腔肥大细胞组织胺释放，可有效抑常1 j i g e 及其特异性抗原引起的肥大细胞释放组织胺、白三烯等介质，临床上可用于治疗荨麻疹、湿疹、急性肾炎、鼻炎及皮炎【1 】。( 2 ) 抗肝炎病毒及肝损伤作用：苦参碱和氧化苦参碱可抑制h b v 病毒的复制，还对感染后免疫系统具有双向调节作用，减轻肝损伤程度，并对各种肝损伤有一定的保护作用，临床采用苦参碱或氧化苦参碱注射液治疗后获得满意疗效1 2 ，3 1 。( 3 ) 抗纤维化作用：有研究结果表明，苦参碱和氧化苦参碱在抗肝纤维化、抗皮肤纤维化、抗肾小球硬化和肾间质纤维化等方面有较强活性 4 j ，在治疗慢性肝炎和肝纤维化等方面得到了广泛的应用【5 1 。( 4 ) 抗肿瘤作用：苦参碱和氧化苦参碱能有效地抑制肿瘤细胞的增殖与转移，同时促进肿瘤的凋亡并诱导分化，提高患者机体免疫力1 6 。( 5 ) 抗心律失常作用：苦参碱和氧化苦参碱对心脏具有负性频率、负性自律性和延长有效不应期作用，可以对抗乌头碱引起的心律失常，推测其可作为类抗心律失常药物【7 1 。( 6 ) 抗寄生虫作用：苦参型生物总碱对阿米巴原虫、贾滴虫均有杀灭作用，但目前对其杀灭寄生虫的机理尚不明确l 引。2 苦参碱和氧化苦参碱的主要分析方法苦参碱和氧化苦参碱药效多，应用广泛。目前有较多测定苦参碱和氧化苦参碱的方法。其中主要有分光光度法【9 】、荧光法【l o 】、薄层扫描法【1 1 】、毛细管电泳法 1 2 - 1 5 、高效液相色谱法【1 d 2 1 】和联用技术【2 2 - 2 7 1 。2 1 分光光度法花拉等【9 j 运用分光光度法测定了旺拉嘎一3 汤中苦参碱和氧化苦参碱的含量。实验通过加入0 0 1 2 5 溴麝香草酚兰溶液和氯仿进行萃取后，测定氯仿层的吸光度，绘制标准曲线，计算回归方程。实验步骤较为繁琐，回收率为9 2 4 - 9 8 8 。2 2 荧光法2第1 章绪论第1 节苦参碱和氧化苦参碱的性质、应用及主要分析方法置皇曼曼量量量皇鼍曼曼鼍量皇曼曼皇曼皇曼量曼量量曼皇蔓皇皇iii _ _ iiiiiii 曼曼皇曼皇皇曼皇曼曼曼曼曼皇量量量曼皇曼量曼舅舅曼曼量庞志功等【1 0 】用丙二酸和醋酸酐缩合自制的乙酸( p 二羧基a 甲基) 乙烯酯荧光试剂测定苦参碱和氧化苦参碱。其线性范围为2 x 1 0 9 8 1 0 缶g m l ，最低检测线苦参碱为1 a x l o 。1 1g m l ，氧化苦参碱为4 5 x 1 0 d 1g m l 。对苦参和广豆根中苦参碱和氧化苦参碱的含量进行了测定，并讨论了猝灭机理。2 3 薄层扫描法布日额等【l l 】利用薄层扫描法测定了苦参中苦参碱和氧化苦参碱的含量。展开剂为苯：丙酮：醋酸乙酯：浓氨试液( 2 ：3 ：4 ：o 2 ) 和氯仿：甲醇：浓氨试液( 1 0 ：1 2 ：o 2 ) ，苦参碱和氧化苦参碱在0 5 0 0 - 2 5 0 0r a g m e 内线性关系良好，回收率为9 6 7 91 0 1 2 3 。2 4 毛细管电泳法c h e n g t l 2 】等结合流动注射发展了一种分离和测定苦豆碱、槐定碱、苦参碱和氧化苦参碱的毛细管电泳方法。缓冲溶液是用2m o l lh c i 调至p h8 8 0 的5 0m m o l l硼酸溶液。该方法能在2m i n 内分离基线，并在2 1 5a n l 进行紫外检测。苦参碱和氧化苦参碱的线性范围分别是5 - 1 0 0 0 肛g m l 和1 0 1 0 0 0p g m l ，检出限分别是2 2 3i l g m l 和3 11p g m l d i i l g 等【1 3 】建立了一种测定山豆根中生物碱含量的高效毛细管电泳法。包括苦参碱和氧化苦参碱的七种生物碱能在1 5m i n 中得到分离，运行缓冲液为含有1 羟丙基p 环糊精和3 3 异丙醇的5 0m m 磷酸盐缓冲液( p h2 5 ) ，运行电压为2 5k v ，毛细管温度为2 5 ，检测波长为2 0 0n r n 。苦参碱和氧化苦参碱的线性范围分别为5 6 0 8 9 6 0p g m l 和2 4 0 0 、, 3 8 4 0 0i t g m l ，回收率分别为9 9 7 和1 0 2 4 。w a n g 等1 4 】运用毛细管电泳测定氧化苦参碱和苦参碱。实验条件为：2 0m l v l 甲酸钠溶液( h c o o n a ，用氨调整p h 值至1 0 7 0 ) 作为样品溶液，3r a i n1 4m b a r 进样，4 0m m 甲酸缓冲( h c o o h - h c o o n a ，p h2 6 0 ) 作为堆叠缓冲，7m i n1 4m b a r 注射堆叠缓冲，1 0 0 m mh c o o h - h c o o n a ( p h4 8 0 ) 作为分离缓冲液，毛细管长7 3c m( 有效长度6 4e m ) ，电压为2 1k v ，波长为2 1 0n m 。氧化苦参碱和苦参碱的线性范围分别是1 3 0 - 6 5 0 0p g m l 和0 8 2 0 0p g m l ，检出限分别为0 2 6 “g m l 和0 1 9p g m l 。实验可用于大鼠血浆中氧化苦参碱和苦参碱的测定，有助于研究其药代动力学。c h e n 等【1 5 】建立了定量测定苦参碱和氧化苦参碱的毛细管电泳方法。当实验条件为3s5 0m b a r 时进样，在2 5k v 外加电压和含7 0m m 醋酸铵、7 0 ( v v ) 乙酸和1 0 ( v v ) 乙腈的甲醇溶液中分离两种物质。苦参碱和氧化苦参碱的线性范围均为1 0 - - - 2 5 0i ，t g m l ，检出限分别是4i - t g m l 和o 5i - t g m l 。2 5 高效液相色谱法3西南大学硕士学位论文马长华等【1 6 j 建立了用高效液相色谱法同时测定山豆根药材中苦参碱和氧化苦参碱含量。实验用氨基键合柱，以乙腈无水乙醇水( 8 0 ：1 0 ：1 0 ，磷酸调p h = 2 0 ) 为流动相，检测波长为2 2 0 姗。苦参碱和氧化苦参碱的线性范围分别为o 2 2 5r t e g m l和0 4 4 5 “幽n l ，其加样回收率分别为1 0 0 2 和9 8 6 。苏静州等【1 7 1 采用h p l c 法测定复方石韦片中苦参碱、氧化苦参碱的含量。实验的色谱条件为：i n s e r t s i lo d s 3 ( 4 6m m x 2 5 0m r l ，5 色谱柱，乙腈0 0 2 5m o l l磷酸( 4 ：9 6 ，用三乙胺调p n 至3 o ) 的流动相，1m l m i n 的体积流量，柱温为室温，检测波长为2 2 0n m 。苦参碱在0 2 1 6 - - 1 0 8p g ，氧化苦参碱在o 1 6 o 8 0 嵋范围内与峰面积呈良好的线性关系。苦参碱和氧化苦参碱的平均回收率分别为9 9 8 7 和1 0 0 6 7 。田娟等【1 8 】建立了高效液相色谱法同时测定复方苦参注射液中苦参碱、槐定碱和氧化苦参碱的的方法。实验使用a l l t i m aa m i n o 色谱柱( 4 6m m x 2 5 0m m ，5 “m ) ，流动相为乙腈3 磷酸溶液无水乙醇( 8 0 ：1 0 ：1 0 ) ，流速为1 0m l m i n ，检测波长2 2 0n m ，柱温3 0 。测定氧化苦参碱和苦参碱的线性范围分别为0 3 7 2 - 4 4 6 4 昭和0 0 5 0 - 4 ) 6 0 5 嵋，回收率氧化苦参碱为1 0 0 2 ，苦参碱为9 9 5 。黄铭铸等【1 9 】利用e l i t eh y p e r s i l ( 4 6m m x 2 5 0i m n ，5p m ) 色谱柱测定了苦参凝胶中苦参碱与氧化苦参碱的含量。流动相为乙腈无水乙醇3 磷酸溶液( 8 2 ：1 0 ：8 ) ，2 2 0n m 的检测波长，柱温为3 5 。苦参碱和氧化苦参碱的测定范围分别为9 9 8 4 - - 9 9 8 4 “g 和2 1 8 4 2 1 8 4 岭，平均回收率分别为9 9 2 和9 9 8 。尚飞等【2 0 】建立了同时测定复方沙棘籽油栓中苦参碱和氧化苦参碱含量的高效液相色谱法。采用c s 色谱柱，甲醇水三乙胺( 5 5 ：4 5 ：0 0 2 ) 的流动相，检测波长2 1 5n l n ，柱温5 0 ，流速为0 8m l m i n ，进样量1 0 此。苦参碱和氧化苦参碱的测定范围分别为0 0 5 - 4 ) 2 8 腭和o 3 9 1 9 6 烬，平均回收率分别为9 8 6 和9 8 3 。何建平等【2 l 】采用高效液相色谱法测定止痒消炎水中苦参碱和氧化苦参碱的总含量。实验选用色谱柱为氨基键合硅胶( 2 5 0m m x 4 6m i l ，5 ，流动相为乙腈无水乙醇3 0g l 磷酸溶液( 8 0 ：1 0 ：1 0 ) ，流速为1 0m l m i n ，检测波长为2 2 0n i n ，进样量2 0 此。苦参碱进样量在0 0 9 5 1 1 4 0 岭范围内具有良好的线性关系，平均回收率为9 9 2 ；氧化苦参碱进样量在0 2 3 4 2 8 0 8i t g 范围内具有良好的线性关系，平均回收率为9 9 8 。2 6 联用技术白小红等 2 2 l 利用自制的微萃取装置，建立了高效液相色谱法测定中药苦参、复方苦参注射液中氧化苦参碱和苦参碱含量的方法。实验选择异丙醇为萃取有机溶剂，2 0 0m l n a o h ( p h9 o ) 为供相，h c l0 h4 o ) 为接受相，萃取时间为3 0r a i n 。4第1 章绪论第1 节苦参碱和氧化苦参碱的性质、应用及主要分析方法萃取完成后，经高效液相色谱仪分析，测得氧化苦参碱和苦参碱线性范围分别为1 1 4 3 7m g l 和1 0 - - 4 3 3m g l ，检出限均为1 0m g l 。复方苦参注射液中氧化苦参碱和苦参碱的平均回收率分别为8 3 0 1 1 6 1 和1 0 8 8 1 1 7 8 ：苦参药材中氧化苦参碱的平均回收率为1 0 4 3o o , - - 1 1 4 7 。此方法有机溶剂用量少，可有效去除复杂机体的干扰。张蕾等【2 3 】建立同时测定大鼠血浆中苦参碱、氧化苦参碱和氧化槐果碱含量的h p l c m s 分析方法，并计算了3 种生物碱在大鼠体内的药代动力学参数。血浆样品经氯仿液液萃取后，以乙腈o 1 甲酸水溶液( 1 0 ：9 0 ) 为流动相，用c 1 8 色谱柱( 4 6m m x l 5 0m l l l ，5 分离检测。苦参碱和氧化苦参碱的线性范围分别为1 0 5 0 0 0n g m l 和2 1 0 0 0n e d m l ，回收率分别为8 9 1 毋3 5 和8 3 9 9 1 3 。w u 等【2 4 】运用液相色谱串联质谱研究了人血浆中氧化苦参碱以及代谢产物苦参碱的含量和药代动力学。实验条件为：c n 色谱柱( 2 5 0m m x 4 6n l n l ，5 斗m ) ，流动相为甲醇醋酸铵( 2 0m m o l l ，8 5 ：1 5 ，v v ) ，流速为1 0m l m i n 。线性范围为1 0 - , 4 0 0 0 0n g m l ，检出限分别为o 5n g m l ( 氧化苦参碱) 和o 2n g m l ( 苦参碱) 。j o n g 等【2 5 1 利用l c m s m s 测定了中药中苦参碱、氧化苦参碱、阿魏酸、芒果苷和甘草酸的含量。苦参碱、氧化苦参碱、阿魏酸、芒果苷和甘草酸等成分用甲醇水混合物( 7 ：3 ，v v ) 超声提取，离心后用7 0 甲醇定容，经0 2 2i t m 滤膜过滤后采用高效液相色谱法测量系统。苦参碱和氧化苦参碱的线性范围均在5 0 , - , 1 5 0 0n g m l 之间，检出限均为2 0n e d m l 。z h a n g 等 2 6 | 建立了一种用离子对高效液相色谱法测定中药制剂中黄芩、黄芩苷、汉黄芩素、氧化槐果碱、氧化苦参碱和苦参碱等有效成分含量的方法。实验运用c 1 8 柱，流动相为甲醇乙腈磷酸水溶液，流速为0 9m l m i n 。有效成分可以在3 5m i n 内得到完整分离，氧化苦参碱和苦参碱的线性范围分别是2 7 5 5 5 0r t g m l 和4 9 0 - 9 8 0j _ t g m l ，检出限分别是6 2n g m l 和5 7n e d m l ，回收率在9 3 8 1 0 2 1 之间。h o n g - - 等 2 7 1 使用微透析技术对大白鼠局部给予氧化苦参碱药物，然后再对血液中样品氧化苦参碱及其代谢产物苦参碱进行采集。通过l c m s m s 系统进行检测，流动相为甲醇酸铵溶液( p h5 0 ，7 0 ：3 0 ，v v ) ，流速为0 3m l m i n 。此方法的线性范围是o 5 1 0 0 0n g m l ，检出限为0 5n e d m l 。5第1 章绪论第2 节硫酸阿托品的性质、应用及主要分析方法第2 节硫酸阿托品的性质、应用及主要分析方法1 硫酸阿托品的性质及应用阿托品是从颠茄和其他茄科植物提取出的一种有毒的白色结晶状生物碱，临床主要用其硫酸盐。硫酸阿托品( a t r o p i n es u l p h a t e ，a s ) 为洳( 羟