布鲁氏菌病.ppt

布鲁氏菌病（Brucellosis),人畜共患的慢性传染病，各种动物临床表现不完全一致，常见于牛、羊、猪等家畜（马例外，一般均为隐性感染，为血检阳性），并由它们传给人和其它家畜。主要侵害生殖系统，致怀孕母畜流产，公畜发生睾丸炎，附睾炎。,病原,主要三种：羊布鲁氏菌：1887年，英军医生Bruce在马尔他岛，从死于当时称为“地中海热”的病人的脾脏中分离出此菌，故这种菌又称马尔他布鲁氏菌（Br.melitensis）。牛布鲁氏菌：1897年，丹麦医生Bang发现了致牛流产布鲁氏菌，又称班活氏菌，又称流产布鲁氏菌（Brucellaabortus）。猪布鲁氏菌：1914年，美国的Traum发现了致猪流产布鲁氏菌。,革兰氏阴性小杆菌，无鞭毛，无芽胞，刚分离的毒力强的细菌（光滑型）有荚膜。染色时，该菌对染料吸收较慢，故使用两种染料。柯兹罗夫斯基染色：火焰固定：（1）2%沙黄，酒精灯加热，但不能煮沸，维持1.52分钟，洗去沙黄。（2）1%孔雀绿复染0.5分钟。红色菌为布鲁氏菌，而蓝色的则为杂菌。,培养要求,比一般细菌苛刻，牛肝汤琼脂，再加些血，葡萄糖及马铃薯浸出液，羊、牛布鲁氏菌初次培养，需放在510%CO2环境中。菌落小，凸起，边缘齐，光滑型菌落发蓝绿色荧光，菌落透明，时间长变不透明，变灰绿色，抵抗力较弱，6030分钟，651015分钟灭活。,较强，在土壤中可存活24-40日，干燥的胎膜中甚至存活更长时间，咸肉中40日，羊毛中1.5-4月，但对湿热和消毒剂较敏感。,抵抗力,流行病学,易感动物：牛、羊、猪，其次马、鹿、骆驼。人亦易感，家禽较少感染。成年动物易感性比幼年动物高，易发病，母畜比公畜高，人可感染牛、猪、羊、犬四型布鲁氏菌，其中以羊型菌对人的毒力最强，有全身性病变，可发生波浪热。传染来源：除发病动物，野生偶蹄兽、啮齿类可成为本病的传染来源。,传播途径：主要通过消化道感染，其次皮肤、粘膜伤口，生殖道。呼吸道较少感染。布鲁氏菌侵袭力很强，可从完整皮肤粘膜侵入（除此，钩端螺旋体病是另一例子）。流行规律：通常为地方流行性。在牛和羊开始时仅出现一批血清学阳性的家畜，然后有少数母牛和母羊发生流产，其后就陆续有大批母牛和母羊发生流产，在新发病的畜群流产率可达全部孕畜的50%以上。在猪，开始时仅少数公猪发生睾丸炎，接着大批母猪发生流产。多数母畜只发生一次流产，而二次流产的较少；在老疫区，发生流产的较少，但子宫炎、乳房炎、关节炎，局部脓肿、胎衣不下，久配不妊者较多。,发病机理,1、布氏菌通过各种途径侵入机体；2、局部增殖后，沿淋巴管达局部淋巴结；3、进一步则侵入血流，构成菌血症；4、病菌在全身各组织器官，尤其是网状内皮系统（肝、脾、淋、骨髓），形成多发性病灶；5、病菌到达妊娠的子宫、胎盘、导致纤维素性、化脓性、坏死性胎盘炎和子宫内膜炎、不孕症；6、病菌经胎盘侵入胎儿和胎衣组织，致使胎儿败血症和死亡、坏死组织机化、胎衣不下；7、在公畜，病菌感染睾丸，引起睾丸炎。,症状,发病动物，有些体温升高，也有些不升高（如牛）。部分眼结膜发炎，腱鞘炎，滑液囊炎。怀孕母畜流产，牛怀孕68月，羊怀孕后34月，猪怀孕后13月，流产前23天，母畜不安，阴道水肿，阴道流出分泌物，流产的胎儿有死胎，快到产期流产胎儿可能是弱胎，产后12天死亡，不死亡者，长期带菌，易死亡。流产后，胎盘常常滞留不下，长时间流恶露，由于胎盘滞留而导致子宫及其附近器官的急性和慢性炎症。,布氏杆菌病木乃伊胎儿（四月龄）,布氏杆菌病流产胎儿（7月龄），皮下水肿,母猪子宫内死胎,布氏杆菌病流产胎盘，水肿及子叶出血、坏死,病变,子宫绒毛膜的间隙中有污灰色或黄色无气味的胶样渗出物。绒毛膜的绒毛有坏死病灶，表面覆以黄色的坏死物。胎儿的病变主要为败血症的病变。浆膜和粘膜有出血点和出血斑，皮下结缔组织发生浆液出血性炎症。流产之后常继发子宫炎。这是由于胎盘滞留不下，化脓性细菌趁机侵入而引起的。,化脓性子宫内膜炎,子宫充血,在病情严重的病例可出现关节炎、腱鞘炎和滑液囊炎，还可引起关节周围炎。最常发病的关节为腕关节、肘关节和股关节。到病的后期，则因结缔组织的广泛增生，使关节变形。公畜患布鲁氏菌病，可发生化脓坏死性睾丸炎和附睾炎。睾丸显著肿大。猪：病理变化与牛、羊略有不同。流产后子宫的粘膜很少发生化脓卡他性病变，但常有许多由针头到大麻子大的小结节。结节的中央含有脓性或干酪样物质。,布氏杆菌病一侧睾丸硬肿，切面实质坏死，失去原型（1），周围反应带（2），其他组织（3）全为纤维，分不清界限。淋巴结不肿，对侧睾丸尚完整,布氏杆菌病公牛坏死性睾丸炎，实质化脓灶（1），鞘膜囊积多量渗出物（2）,睾丸萎缩,关节肿胀,诊断临诊症状、病变，不能作为诊断依据，有很多病原可致类似症状疾病。牛：弯杆菌病、钩端螺旋体病羊：沙门氏菌病、衣原体病猪：乙型脑炎、弓形体病、猪瘟,诊断重点应放在微生物学与免疫学诊断上：采样：（1）最好采集整个胎儿，或单取其胃（肠），要扎紧。（2）母畜胎衣、子宫分泌物、乳汁，局部脓肿液。细菌学检查：取母畜胎衣，绒毛叶水肿液，流产胎儿的胃内容物及有病变的肝、脾、淋巴结，涂片，或进行细菌培养，发现本菌即可确诊。,免疫学诊断,（）凝集试验：最为常用，感染1周即产生凝集抗体，一般流产后1-2周达最高，经半年开始下降，可持续2-4年，具体方法上又分为试管法和平板法；（）牛全乳环状试验：适宜于对牛群的初筛，取鲜牛奶1ml于小刻度管中，加环状反应抗原0.5ml,混匀于371h后观察结果,乳柱不显色,而乳脂环显色时为阳性,反之为阴性；,（）补反:出现稍迟(感染1-2周产生补反抗体),敏感性比凝集反应高,持续时间也较长,当凝集反应为可疑或阴性时,补反仍为阳性,但操作术式较复杂,只能作为辅助诊断；（）变态反应:仅用于山羊和绵羊的布病诊断,出现迟,持续1-2年。,防制,我国目前控制牛布病有三种方法：（1）、不作检疫与隔离，仅使用菌苗作预防接种，适用于缺乏隔离条件下的牧场，此方法简单易行，可减少或防止流产发生，但未清除病畜（传染源），有少数免疫力不强的牛仍会感染发病。,（2）定期检疫、隔离、淘汰病畜，建立健康牛群。当畜群发病率不高和经济条件下许可，采用检疫淘汰的方法，在有隔离条件和病牛较多的地方，单独隔离饲养，所产犊牛吃消毒乳，并经多次检疫为阴性，即可培育成健康畜群（不接种菌苗）。（3）结合检疫和隔离或淘汰措施，使用布氏菌苗作免疫接种，与上述方法基本相同，不同的是，留在原群的阴性牛和犊牛要接种菌苗,公共卫生,人与患病动物或病料接触，经消化道、皮肤、粘膜、生殖道感染。感染牛的布鲁氏菌无自觉症状，但血液中存在抗体；感染猪的布鲁氏菌，症状轻，关节炎、肌肉疼痛，疲劳，局部炎症；感染羊的布鲁氏菌，症状重，发生波浪热，痛苦，下午发热，第二天早晨大出汗，神智清楚，可活动，出汗后，关节、肌肉疼，肝脾肿胀，男性可发生睾丸炎，女性可流产、神经炎。,青霉素，链霉素共同治疗，疗程42天，有的能治愈，有的不能治愈，胞内寄生。人也可预防接种，现有Ba-19菌苗。,动物试验,最易感动物为豚鼠，只有在1:5以下，接种两只豚鼠，腹腔或皮下接种1020天后，心脏采血作血清凝集试验，如滴度在1:5以上，可判阳性，阴性豚鼠继续培养，4周后采血做血清凝集试验，然后扑杀，无细菌分离出，只要有一只豚鼠的滴度在1:5以上，可诊断为布鲁氏菌病。,1、血清凝集试验,操作简便、应用广泛。a)试管凝集试验我国生产的布鲁氏菌凝集抗原，是按联合国世界卫生组织和粮农组织布鲁氏菌病专家委员会规定的标准标定的，其应用液（即抗原原液1:20稀释液）对国际标准布鲁氏菌阳性血清的凝集价恰为:1000二个加号。而国际血清每毫升恰含凝集素1000个IU，我国抗原进行检验所获得的凝集价正好等于凝集素单位数。故可用凝集价来表示被检血清所含的凝集素单位。,国际兽疫局在重新修订的国际动物卫生法规（1982）中对进出口动物的布鲁氏菌病检疫作了新规定，即所有进出口牛，不论繁殖或饲养用，凡未接种过布鲁氏菌苗的，血清凝集价必须少于30国际单位/ml才认为是阴性。我国1952年的规定是，牛的血清凝集价1:100（即100IU/ml）判为阳性，1:50（即50IU/ml)判为可疑。,最近几年对城市奶牛和进出口牛的布鲁氏菌检疫则严格按照国际兽疫局（1982）规定的标准进行，即未接种过布鲁氏菌苗的牛，血清凝集价必须少于30IU/ml才认为阴性，36月龄时接种过布鲁氏菌苗的牛，凝集价必须少于80IU/ml方认为阴性。,对未出现过布鲁氏菌病的场，凝集出现阳性，则隔34周重检，如血清凝集（素）价未上升，则宣布该场为布鲁氏菌病检验为“”。如重检时血清凝集价上升，除隔离、消毒外，仍作分离培养，有待于进一步确诊。过去发生过布鲁氏菌病的场，作凝集试验，如1:100，则定为“+”，如1:50+，34周检查出阳性，则予以淘汰。,试管凝集试验，可出现非特异性反应：I）假阴性原因:检查时，动物处于潜伏期；幼年畜，细菌在局部淋巴结，活动受限制，抗体滴度低。母畜怀孕后期，母源抗体随血液循环至乳腺排出。布鲁氏菌病慢性，长期刺激，动物对抗原不敏感，故抗体滴度不高。,II）假阳性动物感染巴氏、土抗、弯杆菌、大肠杆菌的某些群等G菌，与布鲁氏菌有类属抗原，抗体滴度一般在阳性及格，重检，可能下降，再检，最多维持原来水平。,b)平板凝集试验在平板凝集试验中，抗原0.03ml。0.08ml血清量的反应相当于试管法中的1:25血清稀释液的反应，0.04ml相当于1:50，0.02ml相当于1:100，0.01ml相当于1:200。在0.02ml量中的凝集反应判为阳性，在0.04ml中出现反应的判为可疑。,近年来我国对牛、猪的检疫，已改为按国际兽疫局规定的标准（1982）进行判定，即血清凝集价少于30国际单位/ml者判为阴性。,2、全乳环状试验,加1滴经苏木紫（或四氮唑红色）染色的环乳抗原，振荡放37水浴箱1小时，观察，如出现红色（四氮唑）蓝色（苏木紫）则为“+”。,影响因素：奶酸度，酸度高，不反应。观察迟，假阳性出现。抗原太浓，敏感度降低，太淡，敏感度又偏高。,3、补体结合试验,补体结合试验，操作复杂。牛感染布鲁氏菌，通常在1020天出现补体结合反应。（1）接种19号菌苗的牛，凝集反应消失较晚（注射后9个月尚未完全消失），补体结合反应消失较早（注射后3个月变为阴性或可疑）。（2）自然感染的牛与此不同，凝集反应与补体结合反应经常相伴出现。,4、变态反应,羊、猪：布鲁氏菌水解素，经被检动物尾根皮内注射，或肘关节皮肤较薄部位注射，24、48小时观察，有无发热，肿胀而判断。部分病牛康复后，相当长时期内仍保持阳性变态反应，因此根据变态反应实行防制措施时，将有一部分已康复的牛被当作病牛处理。,防制,1、清洁地区，抓好饲养管理，坚持自繁自养。引进家畜，隔离2个月，并进行2次检疫。确认健康后，方能合群。受威胁地区，除采取上述措施，应与发病地区划分草地，水塘，定期检疫，可疑动物隔离。,2、免疫接种,牛、绵羊可注射19号苗（活菌苗）国外报告，19号苗对牛引起的免疫力，可保持10年。19号苗对山羊免疫效力有限，猪无免疫效力。猪种布鲁氏菌2号活菌苗（S2），兽药监察所研制成功。适用于牛、羊、猪都可作口服免疫。牛免疫期1年、绵羊1.5年、山羊、猪1年。,哈尔滨兽医研究所研究成功的羊种布鲁氏菌M5号菌苗。适用于牛、羊。气雾或注射免疫。接种后产生的凝集素消失较快。羊种布鲁氏Rev.1号苗最大优点是产生的免疫力保护时间长，但由于本苗毒力强，对制苗人员，防疫人员和孕畜不安全，在我国尚未试用。,3、疫区,疫区定期检疫，一年二次，阳性动物隔离，治疗或淘汰，阴性动物则继续饲养，但对它们一年两次连续检疫，如无阳性和可疑病例，则为健康群。注意疫区消毒，杀虫和灭鼠。注意母畜产前消毒，分娩要在产房（专用）。,病畜处理：布鲁氏菌病（或检疫阳性），应淘汰，对人危害较大，价值较高的动物，可隔