儿童EBV感染及相关疾病的诊断讲.ppt

儿童EBV感染相关疾病及诊断,病毒室谢正德,人类疱疹病毒,BurkittslymphomainKenya,Epstein-Barrvirus(EBV)1964,discoveredfromBurkittslymphomatissuebyEpstein,Achong,andBarr1968,theetiologicagentforinfectiousmononucleosis1970,nasopharyngealcarcinoma1980,non-Hodgkinslymphoma,EBV,双链DNA病毒，疱疹病毒科，亚科，基因组Genome:172282bp，有环状和线性两种形式人群感染率高，我国35岁儿童95%已血清转化EBV原发感染在婴幼儿及学龄前儿童主要为亚临床感染，在青少年和成人致IM（国外）EBV与许多疾病相关,CircularformoftheEBVgenome(latentinfection),LinearformoftheEBVgenome(lyticinfection),EBV相关疾病,传染性单核细胞增多症（Infectiousmononucleosis，IM）慢性活动性EB病毒感染（ChronicactiveEBVinfection，CAEBV）EB病毒相关性嗜血细胞综合征（EBV-associatedhemophagocyticsyndrome,EBVAHS),EBV相关疾病,伴性淋巴增殖综合征（X-linkedlymphoproliferativesyndrom）鼻咽癌（Nasopharyngealcarcinoma）Burkitts淋巴瘤（Burkittslymphoma）何奇金淋巴瘤（Hodgkinslymphoma）,Asymptomaticinfection,Symptomaticinfection（IM),PrimaryEBVInfection,Latentinfection,EBV-relatedotherdiseases,Cohen,JINEnglJMed343:481-492,2019,ModelofEBVinfectioninhumans,传染性单核细胞增多症（Infectiousmononucleosis，IM）,IM,IM,嗜异白细胞阳性：EBV,嗜异白细胞阴性：EBVCMVRubHHV6Adv,EBV-IM的临床表现,发热：约1周，严重者2周或更久，幼儿可不明显淋巴结肿大：任何淋巴结，颈部最易受累咽炎：50有渗出物，25上腭有瘀点脾肿大：病程23周，50出现肝炎：肿大1015，而GPT升高80皮疹：红斑、斑丘疹或麻疹样疹，50可有眼睑浮肿,EBV-IM的临床表现,其它：1.间质性肺炎2.CNS:脑炎、格林巴利综合征等3.心肌炎4.血液系统：溶血性贫血、再障、粒细胞减少5.肾炎6.关节炎7.胰腺炎,IM的诊断,IM的拟诊：临床表现（发热+渗出性咽峡炎+淋巴结肿大、脾肿大）+异型淋巴细胞升高（10）,EBV-IM的诊断,嗜异白细胞凝集抗体特异性EBV抗原的抗体检测:衣壳抗原（CA）IgM荧光定量PCR检测外周血中EBV-DNA,嗜异白细胞抗体,IgM抗体IM病人的血清在经吸收几内亚猪肾抗原后引起山羊红细胞的凝集第12周出现，持续约6个月；小于5岁者，很可能阴性,外周血中EBV-DNA检测,普通PCR荧光定量PCR：荧光定量PCR检测EBV-DNA（血清、血浆、全血、外周血单核细胞），急性期（病程10天内）敏感性和特异性100,衣壳抗原（CA）IgM,一般情况下：一周左右升高，持续存在48周，类风湿因子和IgG抗体可致结果假阳性临床要注意以下情况：1、有的病人抗EB病毒CA-IgM产生延迟2、少部分病人感染EBV后，CA-IgM持续阴性3、也有的病人CA-IgM持续几个月阳性,抗体亲合力检测,机体在受到病原体入侵时首先产生低亲合力抗体，随感染的继续和进展，抗体亲合力升高。因此，低亲合力抗体的检出提示原发性急性感染。原发EBV感染，100的病人在第一个月内可检测到抗EB病毒CA-IgG低亲合力抗体,原发性EBV感染后的免疫抗体反应,IM,EBV抗体四项,VCA-IgGVCA-IgMEA-IgGNA-IgGVCA-IgG亲合力,Cervicallymphadenopathy,Cervicallymphadenopathy,Hepatosplenomegaly,Eyelidedema,Palatalpetechiae,Atypicallymphocytes,慢性活动性EBV感染,CAEBVischaracterizedbysevere,chronicorrecurrentinfectiousmononucleosis-likesymptomsafteraprimaryEBVinfection,andhasahighmorbidityandmortalityfromhepaticfailure,lymphoma,sepsis,orhemophagocyticsyndrome.1.Unusualpatternofanti-EBVantibodies(highlevelsofIgGanti-VCAandEA,absenceofanti-EBNA)HighEBVviralloadinperipheralbloodClonalexpansionofEBV-infectedTcellsandNKcells,HistoricalmilestonesofCAEBV,1948,Issacs:prolongedfever,malaise,lymphadenopathy,hepatosplenomegaly1975,Horwitzetal:suchclinicalmanifestationswithmildlyormoderatelyhighorpositiveIgGagainstVCAandEA1982,Tobietal:similaratypicalillnessassociatedwithserologicalevidenceofpersistentEBVinfection,HistoricalmilestonesofCAEBV,1984,Duboisetal:criteriaforsuchcasestermedchronicmononucleosissyndrome:(1)disablingfatigueandmalaise;(2)low-gradeafternoonfever;(3)variableothernonspecificsymptoms:myalgias,sorethroat,depression,lasting6monthsorlonger,withEBVserologiesof(1)VCA-IgG160,(2)EA-IgG5,(3)postiveanti-EBNA,(4)absentVCA-IgM,(5)absentPaul-Bunnellheterophilantibody.,发病机制,EBV感染的T细胞或NK细胞克隆性增殖存在的问题：1.如何感染T细胞或NK细胞2.如何引起临床症状,EBV-infectedcellsinJapanesepatientswithCAEBV,临床表现,发热：间断性发热淋巴结肿大肝脾肿大间质性肺炎贫血肝炎眼葡萄膜炎,DiagnosticcriteriaofCAEBV,I.Severeillnessofgreaterthan6monthsdurationthat:1.BeganasprimaryEBVinfectionOR2.IsassociatedwithgrosslyabnormalEBVantibodytiters(IgGtoVCA1:5,120;antibodytoEA1:640;orantibodytoEBNA1:2),AND,(StrausS.E.),ReproducedfromStrausS.E.(1988,J.Infect.Dis.157:405_/412),CAEBV,CEBV:persistentIM-likeillnesswithrelativelygoodprognosis,SCEBV:ratherseveremanifestationwithgenerallypoorprognosis,DiagnosticcriteriaofacasedefinitionforSCAEBV,ReproducedfromOkanoM.,etal.(1991,Clin.Microbiol.Rev.4:129_/135),(OkanoM),ReviseofCriteriaofCAEBV,2019,Kimuraetal.extremelyhighantibodytitersagainstEBV-replicativeantigensarenotabsolutelynecessary,butdemonstratedsignificantlyincreasedcirculatingEBV-DNARevisedvirologicalcriteria:eitherorbothextrmelyagainstEBV-repicativeantigensand/orincreasedgenomecopiesintissues.,伴性淋巴增殖综合征（X-linkedlymphoproliferativesyndrom）,历史,1975年，Purtilo等发现一个家系中，18个男性有6个人出现良性或恶性淋巴细胞增生和组织细胞增加等征候，取名Duncan病2019年，缺陷基因被确定：SH2D1A/DHSPorSAP(SLAM-associatedprotein）,Called“Duncansdisease”afterthefamilyname,SH2D1A,编码含128个氨基酸的蛋白质-SAP(signalinglymphocyticactivationmoleculeSLAM-associatedprotein),表达于活化的T和NK细胞表面，通过与SLAM及其他免疫球蛋白超家族如2B4等结合，参与信号传递，调节CTL的功能，如产生IFN-gamma的能力,临床表现,家族史，仅见男性发病年龄从6个月22岁（原发性EBV感染后）IM样症状：发热、咽峡炎、淋巴结和肝脾肿大、异型淋巴细胞增加免疫球蛋白异常：无球蛋白血症、多克隆性高球蛋白血症高IgM的免疫不全症患者血清中EBV抗体阴性,临床分型,A型：属于急性致死性IM,多发病4周后死亡，占55B型：同时有急性致死性IM和恶性淋巴瘤，占15C型：EBV感染后免疫机能不全、低球蛋白血症、骨髓增生低下、EBV抗体能力产生低下，占15D型：无明显EBV感染表现而发生的恶性淋巴瘤，占15,诊断标准（Hamilton）,6个月至22岁男性有2个以上下述表现型1.增殖性改变（1）有致死性或慢性IM（2）有B免疫母细胞性淋巴肉瘤（3）有非何杰金氏淋巴瘤（4）IM继发高IgM免疫不全症2.非增生性改变（1）粒细胞缺乏症或再生障碍性贫血（2）球蛋白异常：获得性无或低球蛋白血症3.先天异常（1）心血管系（2）中枢神经系,诊断标准,在母系直系亲属中有2人以上具备上述表现型者，可诊断本征本征男性的B淋巴细胞体外感染EBV后，能自发的发育增殖；患者的唾液可使脐带血中的淋巴细胞发生形态改变；患者血清中缺乏EBV抗体,鉴别诊断,CAEBV:chronicactiveEBVinfectionGLPD:granularlymphoproliferativedisorderALPS:autoimmunelymphoproliferativesyndrome,基因诊断,amonoclonalantibody,termedKST-3,againsttheXLPgeneproduct,SAP.UsingaflowcytometricassayusingKST-3,Shinozaki,K.etal.Int.Immunol.14(10):1215-23,2019.,ThepatientexhibitedmarkedlydeficientSAPexpression,normal,porband,mother,father,小结,1、EBV感染与许多临床疾病相关，应引起临床医师的高度重视和警惕2、临床诊断EBV感染要注意几个问题：（1）是否感染EBV?（2）感染的时期如何？（3）是否活动感染？与本次临床表现是否有关？,临床检测结果的分析,1.IgM阳性只能是近期感染的一个指标，而并不一定是急性期感染，更不能说某病原IgM阳性就是病原。通常IgM会持续46周或更长，如风疹、CMV等早期妊娠感染或先天性感染的儿童，特异性IgM可能持续达1年或更长时间。,2.人类疱疹病毒如CMV、EBV等在儿童有一个血清阳性转化的问题，即隐性感染，同样