（渔业资源专业论文）黄鮟鱇（lophius+litulon）形态特征及其遗传学研究.pdf

黄艘觫( l o p h i u sl i t u l o n ) 形态特征及其遗传学研究 摘要 本文以黄鲛鲸( l o p h i u sl i t u l o n ) 为研究对象，利用形态学观察、生物学测定、 同工酶分析方法对黄海和日本海2 个黄觖鲸群体进行了研究，利用线粒体d n a 序列分析对5 种鲅鲸目鱼类的系统关系进行了初步探讨，以期为黄鲛鲸的种质资 源合理开发和利用提供基础理论依据。同时填补了我国有关黄鲅藤种质资源研究 的空白，对鱼类的多样性保护也具有重要意义。论文主要研究结果如下： 一、采用形态学方法对黄海和日本海2 个黄艘觫群体进行了形态观察及常规 生物学测定，描述了其形态特征，并对2 个群体的形态进行了比较研究。结果表 明：黄海和日本海黄觖鲸群体计数性状中除第二背鳍鳍条数平均值表现出一定的 差异，胸鳍鳍条数平均值、腹鳍鳍条数平均值、臀鳍鳍条数平均值、尾鳍鳍条数 平均值和脊椎骨数平均值均没有明显差异；两者在体长臀鳍基长、头长，眼径指 标未表现出显著差异，其余可量性状比如体长头长、体长体宽、体长，尾柄长、 头长吻长、眼间距朋艮径和尾柄长，尾柄高均表现出了显著差异。 二、采用水平淀粉凝胶电泳技术分别分析了黄海和日本海黄鲅鲸的遗传结构 及其遗传多样性。结果表明，对黄海黄鲛觫肝脏和肌肉两种组织的a a t 、g p i 、 s o d 、g 3 p d h 、i d h p 、l d h 、m d h 和a d h8 种酶进行了遗传学分析，共记录了8 个 基因位点，其中汀、朋，、6 和铝剃共4 个基因位点呈多态，其多态座 位比例为0 。5 ，平均观测杂合度和预期杂合度分别为0 0 2 7 和0 0 2 6 ，平均有效 等位基因数为1 0 2 8 ，遗传偏离指数均大于零：对日本海黄鲅鲸肝脏和肌肉两种 组织的s o d 、g 3 p d h 、i d h p 、l d h 、m d h 和a d h6 种酶进行了遗传学分析，没有出 现多态位点。黄海和日本海黄被镰群体间的遗传距离为0 0 0 0 4 6 ，两者的遗传多 样性水平较低，群体间没有明显的遗传分化。 三、利用p c r 技术对5 种觖觫目鱼类的线粒体d n ac o i 基因片段进行了扩增和 序列测定。结果表明，在c o i 基因片段中，存在碱基的插入或缺失。从核苷酸组 成分析的结果可以看出，t 、c 、a 、g 四种碱基的含量在不同种间变化不大，在三 个蛋白质编码基因片段的鸟嘌呤( g ) 含量普遍比较低( 8 小时) 。 ( 2 ) 烘箱内取出后凉至室温：加入r n a s e ( 4 p g 弘l ) 6 u l ，终浓度0 0 4 肛g 此， 4 0 烘箱内孵育1 小时。 ( 3 ) 烘箱内取出后凉至室温：加6 0 0 此( p h8 o ) 平衡酚，温和颠倒混匀至乳 浊( 1 0 r a i n ) 。离心( 1 2 0 0 0 9 ，1 0 m i n ) ，小心吸取上清至另一干净离心管。 ( 4 ) 加等体积苯酚：氯仿：异戊醇( 2 5 ：2 4 ：1 ) ，颠倒混匀( 1 0 m i n ) 。离 心( 1 2 0 0 0 9 ，1 0 m i n ) ，小心吸取上清至另一干净离心管。 ( 5 ) 加等体积氯仿：异戊醇( 2 4 ：1 ) ，颠倒混匀( 1 0 m i n ) ，离心( 1 2 0 0 0 9 ， 1 0 m i n ) ，小心吸取上清至另一干净离心管。加入2 5 倍体积的预冷纯酒精， 颠倒混匀，- 2 0 c 存放2 0 m i n 。 ( 6 ) 离心( 1 2 0 0 0 9 ，1 0 m i n ) 产生白色沉淀，轻柔倒去酒精，再加入3 0 0 p l7 5 的预冷酒精，缓慢颠倒洗涤d n a 沉淀，再离心( 1 2 0 0 0 9 ，1 0 r a i n ) ，弃酒精。 ( 7 ) 重复步骤6 ( 注：不要将d n a 沉淀倒掉) 。 ( 8 ) 将离心管倒扣于卫生纸上风干约1 5 m i n ( 视管中乙醇残留量多少适当调 整干燥时间) ，直到无酒精挂壁；溶解于3 0 5 0 此灭菌d d h , 0 中，置4 0 c 冰箱待用。 4 1 2 2p c r 扩增 4 1 2 2 1 扩增引物 m t d n ac o i 基因片段扩增使用的引物为( i n o u ee ta 1 ，2 0 0 1 ) ： l 5 9 5 6 一c o i ：5 一c a ca 从g a ca t tg g ca c cc t 一3 h 6 5 5 8 - c o i ：5 - c c tc c tg c ag g gt c a 从g 从一3 4 1 2 2 2 反应体系 p c r 反应体系总体积为5 0 山，其中包括1 2 5 单位的t a qd n a 聚合酶( t a k a r a c o ，大连。中国) ；反应体系中各组分的终浓度为：2 0 0 r i m 的正向引物及反向引 物，2 0 0 心4 的每种d n t p ，1 0 m mt r i s - h c lp h8 3 ，5 0 m mk c l 和1 5 m mm g c l 2 。 黄鲅觫( l o p h i u , rl i m l o n ) 形态特征及其遗传学臻究 基因组d n a 约为2 0 n g 。每组p c r 均设阴性对照用来检测是否存在污染。 4 1 2 2 3p c r 循环参数 基因组p c r 在b i o m c t r a 热循环仪上进行，反应条件为：9 4 = c 预变性3 m i n ， 然后进行4 0 个循环反应，每个热循环包括9 4 1 2 变性4 5 s ，5 0 c 退火4 5 s ，7 2 延伸4 5 s ，最后7 2 延伸l o m i n 。 4 1 2 2 4p c r 产物的回收与纯化 p c r 产物用1 5 的琼脂糖凝胶进行电泳检测。每个样品取2 此检测， 对于 扩增效果良好的样品进行回收。回收时制备1 5 的琼脂糖凝胶( s e ap l a q u e f m c b i o p r o d u c t s ，u s a ) ，将p c r 产物进行电泳( 1 0 0 v 电压电泳l 小时左右) ，然后 用小量胶回收纯化试剂盒( 上海华舜生物工程有限公司，w 5 2 1 2 ) 进行回收和纯 化。具体操作过程如下： ( 1 ) 紫外透射仪割下含目的d n a 条带的琼脂糖块( 尽可能多地去掉不含d n a 的 琼脂块) ，放入1 5 m l 离心管中。 ( 2 ) 按每1 0 0m g 琼脂糖加入3 0 0 p ls 1 液的比例加入s l 液，置5 0 c 温浴3 0 m i n ， 使琼脂糖完全融化。每5m i n 颠倒混匀一次。 ( 3 ) 当目的片段 5 0 0 b p 时，省略此步 ( 4 ) 将融化的琼脂糖溶液移入吸附柱，1 0 0 0 0 9 离心3 0 s 。倒掉收集管中的液体， 再将吸附柱放入收集管中。 ( 5 ) 向吸附柱中加入5 0 0 此w i 液，静置l m i n 后，1 0 0 0 0 9 离心1 5 s 。倒掉收集 管中液体，将吸附柱放入收集管。 ( 6 ) 重复步骤( 5 ) ，1 0 0 0 0 9 离心i m i n 。 ( 7 ) 将吸附柱放入干净的1 5 m l 离心管中，在吸附膜中央加入3 0 此t i ( 2 m m t r i s ) 液，静置1 r a i n 后，1 2 0 0 0 9 离心i m i n 。将i 5 m l 离心管( d n a ) 储存于一2 0 0 c 待用。 4 1 2 3 目的片段的序列测定 取适量纯化产物作为测序反应的模板，测序反应采用与p c r 反应一致的引 物，每个片段进行双向测序以确保序列的可靠性。d n a 模板( 纯化后p c r 产物) 黄鲅蠊( l o p h i u sl i t u l o n ) 形态特征及其遗传学研究 2 旺( 约2 0 5 0 n g ) ；引物l 此( 3 p l i i o l u 1 ) ：b i g d y e d n as e q u e n c i n gk i t2 皿 ( p ea b i 公司的b i g d y e “t e r m i n a t o rc y c l es e q u e n c i n gk i t ( p e r k i n - e l m e r ) ) 。 反应总体积5 止。 9 6 c 变性l o s e c ，5 0 退火5 s e e ，6 0 度延伸4 m i n ，循环2 5 次，然后4 c 保 温。所有p c r 均在p e 9 7 0 0 热循环仪上进行。测序反应产物的纯化步骤具体如下： ( 1 ) 测序反应结束后，据测序反应体系按照测序反应混合物：7 5 异丙醇= 1 ：4 的比例加入7 5 异丙醇，涡旋混匀，避光静置2 0 m i n 。 ( 2 ) 2 7 5 0 9 离心3 0 r a i n ，将9 6 孔板倒置于吸水纸上，5 0 9 离心l m i n 。 ( 3 ) 据测序反应体系按照测序反应混合物：7 5 异丙醇= i ：8 的比例加入7 5 异丙醇，2 7 5 0 9 离心l o m i n 。 ( 4 ) 将9 6 孔板倒置于吸水纸上，5 0 9 离心i m i n 。 ( 5 ) 加入2 5 3 0 皿去离子水溶解，瞬时离心，于a b l 3 7 0 0 测序仪测序 4 1 2 4 序列分析 对所得序列用d n as t a r 软件包的e d i t s e q 、s e q m a n 、m e g a l i g n 等程序 ( d n a s t a a ri n c ，1 9 9 6 ) 进行排序( a l i g n m e n t ) ，并结合人工校正。利用 i e g a 软件计算序列间的遗传距离、核昔酸的百分含量、变异情况，并构建系统树( k u m a r e t 吐，2 0 0 4 ) 。 4 2 结果 4 2 1 序列特性及碱基组成 所有个体经p c r 扩增得到目的片段( 图4 1 ) ，经序列比对分析，除去两 端引物序列后的扩增的c o l 基因片段序列长度为5 3 b p ( 图4 2 ) ，其碱基组成 见表4 2 。黄鲅艨t 、c 、a 、g 碱基平均含量分别为2 9 3 、2 9 3 、2 1 7 9 6 和1 9 7 ： 斑点海蝠鱼为3 0 1 、2 7 o 、2 4 0 9 6 和1 8 9 ；鞭冠鱼为2 7 8 、2 9 9 9 6 、2 2 5 和1 9 蹦； c h a u n a xs p 1 为2 9 7 9 6 、2 9 5 、2 3 2 和1 7 6 ；c h a u n a xs p 2 为2 9 4 、2 9 8 、2 2 6 和1 8 1 。 黄技鲸( l o p h i u sl i t u l o n ) 形态特征及其遗传学研究 图4 1c 0 1 基因片段p c r 扩增结果 d n am a r k e r ( d l 2 0 0 0 ) ；l ：黄触鲧；2 ：斑点海蝠鱼；3 ：鞭冠鱼： 4 ：c h a u n a xs p h5 ：c h a u n a x s p 2 ；n ：空白对照 f i g 4 1 p c ra m p l i f i c a t i o nr e s u l to fc o lg e n ef r a g m e n t m ：d n am a r k e r ( d l 2 0 0 0 ) ：1 ：l o p h i u sl i t u l o n ；2 ：m a l t h o p s i st i a r e l l a ； 3 ：h i m a n t o l o p h u s g r o n l a n d i c u s t 4 ：c h a u n a xs p 1 ：5 ：c h a u n a xs p 2 ； n ：b l a n kc o m p a r i s o n 从表4 2 中可以看出，t 、c 、a 、g 四种碱基的含量在不同种间变化不大， 在三个蛋白质编码基因片段的鸟嘌呤( g ) 含量普遍比较低( 2 0 ) ，最低的鸟 嘌呤含量为单棘蹙鱼科、单棘蹙鱼属中的c h a u n a xs p 1 为1 7 6 。g 卜c 含量都小 于5 0 。也就是说，a + t 含量稍高于g + c 含量。在c o i 基因片段所有的碱基序 列中，存在5 个碱基插入，缺失位点，其中黄觖镰、斑点海蝠鱼和c 胁埘甜s p 1 碱基插入，缺失( 1 个碱基) 位于位点2 8 6 ；鞭冠鱼碱基插x 缺失( 1 个碱基) 分 别位于位点2 8 6 和5 0 6 。5 种鲅觫目鱼类序列间共检测到约有1 6 9 个变异位点。 黄艘辣( l o p h i l i t u l o n ) 形态特征及其遗传学研究 表4 25 种觖鲸目鱼类c o i 基因片段的碱基组成( ) t a b l e 4 2b a s ec o m p o s i t i o no f c o i g e n ef r a g m e n t sf o rf i v el o p h i i f o r m e sf i s h e s 厶l i t u l 0 1 1 l z t i a r e l a h - g r o n l a n d i c u $ c b a u n a xs p 1 c h a u n a zs p 2 ln t u l 0 1 1 j i 【t i a r e l l a i l g r o n l a n d i c u s c h a u n a xs p 1 c h a u n a zs p 2 厶l i t u l o n 丘t i a r e l i n i t g r o n a n d i c t l 8 c h a u n a xs p 1 c h a u n a xs p 2 l j i t u l 0 1 1 i g t i a r o l l a f t g r o n l a n d l c u s c h a 删m rs p ，1 c h a u n a xs p 2 从gc c tg c tc a t0 c ga g cc g a 栅c a gc c a c cc g gc 6 ct c tc t ta c , gg 6 a t c a a g g t t a t t a t a a t t t a t a a t t g c g ao c a tt t t 从t g tc tc 6 tc a cg g ca c at g cmc g tg t 从tt t t t g c t a c g c c c a t t a g c t a g a t 了h 0 l & g t a c c t c m t a ta g tt t6 c ct tt t m tc g ga g gt t tc g gg 从竹g t t 从tc c c c a a a 。g t ，c g 。t 。 。g 。 c a a g g a c g c g t c k a a g c g g g t k ，c t c a a c 6 c g g g c t 。 t c rg a tg a tc g gg g co o ca g at a ta g cmt c ct c gt a ta mc mt a ta a g c c t a c a c ，a a t c g c a t g a c t c c t c a c ，t c c t a a t c a c a t c 黄鲅蠓( l o p h i u sl i t u l o n ) 形态特征及其遗传学研究 厶l i t u l 0 1 1 擞t i a r e l l a t l g r o n l a n d i c u s c h a u n a xs p 1 c h a l l n a xs p z 厶l i t u l o n 卫t i a r e l l a 且g r o m a n d i c u s c h a u n a xs p 1 c h a u n a xs p 2 1 i t u l o n 苴t i a r o l 如 且g r o m a n d i c u s c h a u n a xs p 1 c h a u n a xs o 2 厶l i t u l o n 丘t i a r o l a t 1 g r o m a n d i c u s c h a u n a xs p 1 f , 7 u n a xs p 2 厶l i t u l 0 1 1 卫t i a r e l l a 且g r o n l a n 以c 1 1 5 c h a u n a xs p l c h a l m a xs p 2 c t tc t gg c tg c tc c co c cc _ r ct t tc c tt c tg c tt t tg g cc t ct t cg g gg g t t t a t a g t c g a c c t t t a 、t ，c t c c t t c a t a c g 。c 。c 。e c 。c t 。c c t a c g c c g c c t c t t g aa g cg g ga g ca g gc a c g gg t g 从ca 6 1 g a ，c a ， g l c a c t c c t c g c t c c t c g c 一t ta c cc c cc c ct gc a gg c a 一t ，c - c - c t c a t et c gc c ca c gc a gg g gc 四g 订g & c ct a a 口at i f ft c tc c ct t c 矗t c t t a t t t a c a t t a t c t a 竹a t t c c t a t a 。t t a 。t t c t a gc c gg g gt c tc c tc g t t ct t gg g g0 3 m c tt c t c ac 从c 从t t a a ， a c c t t t c a g a c c c ，t t a a a c t t a g c l t t t aa t t 从从cc c c0 g gc c at c tc c ca g ta c ca m , c c0 c ct tt t gt a t t c g t c g g g t c g c g a t g a t g c c c c a 1 6 g a t g c c c c ，l i t u l 0 1 1g a gc t gt t ct a gt c c a gc a g l tt g ct c ct ”o c tt a cc c g t a ct t 6c t g 彪t i n r e l 妇 a t t t t c c t g c c t c i l g r o n l a n d i c 淞g t c c t 6 a t g c c i t c c g g c - c c h a u n a xs p 1g c t a t c 。c c t t g c t 。 c h a u n e t xs p 2g c t a t c c c t t g c t 图4 25 种触镰目鱼类c o i 基因片段序列比较 f i 9 4 2s e q u e n c ea l i g n m e n to f p a r t i a lc o ig e n ef r a g m e n ti nt h ef i v el o p h i i f o r m e s s p e c l e s 4 2 25 种艘蠊目鱼类遗传足巨离 5 种触鲸目鱼类间的遗传距离见表4 3 ，可以看出这5 种触觫目鱼类中遗传距 g g g t t a g g 黄鼓鲸( l o p h i u sl i t u l o n ) 形态特征及其遗传学研究 离最大的是黄鲛鲸和单棘建鱼属c h a u n a xs p 2 ，为0 2 4 5 ；遗传距离最小的是同 属于单棘蹙鱼科、单棘蹙鱼属的劭口枷戤s p 1 和c h a u n a xs p 2 。为o 0 1 8 。 表4 35 种鲅鲧目鱼类遗传距离 t a b 4 3 g e n e t i cd i s t a n c eo f f i v el o p h i i f o r m e sf i s h e s a ll i t u l o nb - mt i a r e l l a c - - h g r o n l a n d i c u s d - - - c h a u n a xs p 1e - - - c h a u n a xs p 2 4 2 3 系统进化树 采用m e g a 3 1 构建的5 种鲅鲸目鱼类的u p g m a 分子系统树，其拓扑结构见图 4 3 。 黝勰燃私2 鼢4 扯懈舡2 五翩k 矩踟缸确缸心 l 越山粥 图4 3 用k i m u r a 双参数模型构建的u p g m a 树 节点上的数值表示1 0 0 0 次重复抽样检查后得到的支持率 f i 9 4 3u n w e i g h t e dp a i r - g r o u pm e t h o du s i n ga r i t h m e t i ca v e r a g e st r e ec o n s t r u c t e d w i t hk i m u r a2 - p a r a m e t e rm o d e lf r o mc o l g e n es e q u e n c e s n u m b e r sa r o u n db r a n c h e sa r cp e r c e n t a g eo f b o o t s t r a pv a l u e sb y1 0 0 0r e p l i c a t e s 黄艘艨( l o p h i u sl i t u l o n ) 形态特征及其遗传学研究 4 3 讨论 本研究采用直接测序法，首次报道了6 种胺鲸目鱼类线粒体c o i 基因部分序 列的比较研究结果。结果表明，碱基含量在5 种艘艨目鱼类种间变化不大，四种 碱基在线粒体基因组中分布的不均性是动物线粒体基因组的共性( b r o w n ， 1 9 8 3 ；b r o w n ，1 9 8 5 ) 。f i l i p s k i ( 1 9 8 8 ) 研究指出基因中碱基组成的差异是由d n a 合成、修复和复制间的差异引起的，不同物种间碱基的不均衡程度也因此各不相 同。在所研究的5 种艘觫目鱼类c o i 基因片段序列中，鸟瞟呤( g ) 的含量低于 其他碱基，这与w o l s t e n h o l m e 研究得出的线粒体d n a 一个显著特点相同。5 种 胺鲸目鱼类a + t 含量均高于g + c 含量，这一结果与邵爱华等( 2 0 0 6 ) 在其他1 5 种鱼类c o i 基因中所观察得到的结果相同，表明c o l 基因片段在鱼类系统分析 中具有实用性和可比性。 利用c o l 基因片段计算的遗传距离所构建的分子系统进化树显示，属于单 棘蹙鱼科单棘蹙鱼属的c h a u n a xs p 1 和c h a u n a xs p 2 先聚在一起，再与蝙蝠鱼科 海蝠鱼属的斑点海蝠鱼聚在一起；然后再与鞭冠鱼科鞭冠鱼属的鞭冠鱼聚在一 起，最后才与觖觫科胺觫属黄触鲧聚类。这一结果与p i e t s c h ( 1 9 8 1 ，1 9 8 7 ) 和 b e r t e l s e n ( 1 9 8 4 ) 得出的结论一致，蝙蝠鱼科和单棘建鱼科的亲缘关系较近，而与 觖艨科的亲缘关系较远。本研究结果表明c o i 基因适合于艘艨日鱼类系统进化 关系的研究，为进一步研究觖鲸目鱼类的遗传变异、系统进化打下了基础。 黄皱鲸( z o p h i u s l i t u l o n ) 形态特征及其遗传学研究 5 结论 本文采用传统的形态学观察、生物学测定以及同工酶分析方法对黄海和日本 海2 个黄胺艨群体进行了研究。同工酶分析的结果表明，黄海黄触鲸群体的遗传 多样性水平较低，与黄海群体相比日本海群体的遗传多样性水平更低。黄海群体 和日本海群体间的遗传距离显示了2 个群体间没有明显的遗传分化。而形态学分 析的结果表明，在所测量的1 4 项形态性状中有7 项形态性状在2 个群体间表现 出了差异性。黄鲅鲸黄海群体与日本海群体间的差异主要体现在外部形态上。黄 海与日本海间的隔离可能导致了黄海和日本海黄鲅鲸群体在外部形态上的差异。 本文还进一步利用了线粒体d n ac o i 基因片段序列分析技术对包括黄觖鲸 在内的5 种鲅鲸目鱼类的系统关系进行了初步探讨。结果表明，5 种鲅艨目鱼类中 共检测到约1 6 9 个核苷酸位点存在变异。遗传距离最大的在黄鲼鲸和c h a u n a xs p 2 之f 日7 h o 2 4 5 ；遗传距离最小的在c h a u n a xs p 1 和c h a u n a xs p 2 之f s q 为o 0 1 8 。利用 c o i 基因片段所构建的5 种觖艨目鱼类分子系统树显示与传统的形态分类完全相 符，表明c o i 基因片段适合鼓鲸目系统发育研究。 本文从形态学水平、蛋白质水平对黄觖鲸进行了分析，从分子水平对包括黄 鲅练在内的5 种鲅鲸目鱼类的系统关系进行了分析，研究的结果填补了国内外相 关研究领域的空白，对黄胺鲸种质资源的研究及其合理开发和利用提供了理论依 据。 黄皱蠊( l o p h i u sl i t u l o n ) 形态特征及其遗传学研究 参考文献 1 苏锦祥，李春生中国动物志硬骨鱼纲纯形目、海蛾鱼目、喉盘鱼目、皴鲸目北京： 科学出版社，2 0 0 2 3 5 0 2 陈锤白话鱼类学北京：海洋出版社，2 0 0 3 1 8 4 3 林龙山，郑元甲东海区黄觖鲸资源状况的初步探讨海洋渔业，2 0 0 4 2 6 ( 3 ) ：1 7 9 1 8 3 4 丁峰元，程家骅东海区夏、秋季大型水母分布区渔业资源特征分析海洋渔业， 2 0 0 5 2 7 ( 2 ) ：1 2 0 1 2 8 5 m a r kaf m e m a n ，h i m s h iy o k o y a m a , k a z u oo g a w a am i c r o s p o r i d i a np a r a s i t eo ft h eg e n u s s p r a g u e ai nt h en e r v o u s t i s s u e so f t h ej a p a n e s ea n g l e f i s hl o p h i u sl i t u l o n ，f o l i ap a r a s i t o l o g i c a p r a h a ：2 0 0 4 、，0 1 5 1 ：1 6 7 1 7 3 6 m i c h i oy ，m u n e h a r ut ，h i t o s h ie ，n a o h i k ot ，k o j it ，m i c h i y am ，s h u h e im r e p r o d u c t i v e c y c l e ，f e c u n d i t y , a n ds e a s o n a ld i s t r i b u t i o no f t h ea n g l e r f i s hl o p h i u sl i t u l o ni nt h ee a s tc h i n a a n dy e l l o ws e a s f i s h b u l l 2 0 0 1 。9 9 ：3 5 6 - 3 7 0 7 杨纪明渤海鱼类的食性和营养级研究现代渔业信息，2 0 0 1 1 6 ( 1 0 ) ：1 0 - 1 9 8 山田梅芳。田川藤，岸田周三，等束 于海黄海口) 女、学长崎：日本纸工印刷， 1 9 8 6 2 4 9 1 9 陈大刚黄渤海渔业生态学北京：海洋出版社，1 9 9 1 4 6 3 - 4 6 6 l o 梁振林海洋渔业资源生态检测技术，2 1 世纪初海洋监测高技术发展战略研讨会论文 集北京：海洋出版社，2 0 0 0 6 1 , 6 4 1 1 李明德鱼类分类学北京：海洋出版社1 9 9 8 ，1 4 0 1 4 1 1 2 y a m a d a , u l o p h i o m u ss e f f g e r u sa n dl o p h i v al i t u l o n i nf i s h e so f t h ee a s tc h i n as e aa n dt h e y e l l o ws e a s e i k a ir e g f i s h r e s l a b ，1 9 8 6 1 0 6 - 1 0 9 1 3 t o k i m u r a , m d i s t r i b u t i o no f p r i m a r yb o t t o m i i s h e si nt h ee a s tc h i n aa n dy e l l o ws e a sd u r i n g t h e w i n t e r o f l 9 9 1 s e i k a i b l o c k s o k o u o c h o s a k a n k y u k a i h o 1 9 9 2 3 ：1 5 , - , 1 9 1 4 程济生，俞连福黄、东海冬季底层鱼类群落结构及多样性变化水产学报，2 0 0 4 2 8 ( 1 ) ： 2 9 3 4 1 5 n o r s e ，e a ，m c m a n u s ，r e e c o l o g ya n dl i v i n gr e 嚣o u r c o sb i o l o g i c a ld i v e r s i t y i n ： e n v i r o n m e n tq u a l i t y1 9 8 0 e l e v e n t ha n n u a lr e p o r to f t h ec o u n c i lo ne n v i r o n m e n t a lq u a l i t y , w a s h i n g t o nd c 1 9 8 0 3 1 - - 8 0 1 6 王献溥生物多样性保护与利用的主要研究方向自然资源，1 9 9 4 ( 4 ) ：1 - 6 4 8 黄鲅辣( l o p h i u sl i t u l o n ) 形态特征及其遗传学研究 1 7 权洁霞，戴继勋海洋生物遗传多样性研究现状青岛海洋大学学报，1 9 9 9 2 9 ( 2 ) ： 2 3 8 2 8 8 1 8 季维智。宿兵遗传多样性研究原理与方法浙江：1 9 9 9 浙江科学出版社 1 9 罗静。杨君兴鱼类多样性的遗传基础动物学研究2 0 0 0 2 l ( 2 ) ：1 5 8 1 6 4 2 0 t h o m a s , c d w h a td or e a lp o p u l a t i o nd y n a m i c st e l ln su sa b o u tm i n i m u mv i a b l ep o p u l a t i o n s i z e ? c o n s e r v b i 0 1 1 9 9 0 4 ( 3 ) ：3 2 4 , - 3 2 7 2 1 g r a s s l e , j es p e c i e sd i v e r s i t yi nd e e p - s e ac o m m u n i t i e s t r e n d se c 0 1 e v 0 1 。1 9 8 9 4 ：1 2 - 1 5 2 2 g r a s s l e , j e m a c i o l e kn j d e e p - s e as p e c i e sr i c h n e s s ：r e g i o n a la n dl o c a ld i v e r s i t ye s t i m a t e s f r o m q u a n t i t a t i v e b o t t o ms a m p l e s a m e r n a t 。1 9 9 2 1 3 9 ：3 1 3 - 3 4 1 2 3 李思发长江重要鱼类生物多样性和保护研究上海：上海科学技术出版社。2 0 0 1 2 4 余先赏，周敦。李渝成，等中国淡水鱼类染色体北京：科学出版社，1 9 8 9 1 - - 9 2 s 王中仁植物等位酶分析北京：科学出版社，1 9 9 8 6 9 7 3 2 6 u t t e r , f a m ，gm i l n e r ，gs i a h l g e n e t i cp o l u a t i o ns t r u c t u r ec h i n o o k , t h f l o nj l lt h ep a c i f c n o r t h w e s t f s h b u g u & 。1 9 8 9 8 7 ：2 3 9 - 2 6 4 2 7 m e n e l l ，d j ，e c o l o g i c a lg e n e t i c s l o n d o n 1 9 8 1 2 8 尤锋。王可玲，相建海，徐成山东近海褐牙鲆自然与养殖群体生化遗传结构及其遗 传变异的比较分析海洋与湖沼，2 0 0 1 3 2 ( 5 ) ：5 1 2 5 1 8 2 9 o o f f , d j ，k g a l v i na n dh 勋峨o ta l ，i n d e n t i f i e a t i o no f p o l y m o r p h i cs i m p l es e q u e n c e r e p e a t si nt h eg e n o m eo f t h ez e b r a f s h ，g e n o m i c s ，1 9 9 2 1 4 ：2 0 0 2 0 2 3 0 l e e ，w j ，t d k o c h e r ，m i c r o s a t e l l i t ed n am a r k e r sf o rg e n e t i cm a p p i n gi no r e o c h r o m i s n i l o t i c u s ，j f i s h b i 0 1 ，1 9 9 6 4 9 ：1 6 9 - 1 7 1 3 l ，吕国庆，李思发鱼类线粒体d n a 多态研究和应用进展中国水产科学，1 9 9 8 5 ( 3 ) ： 9 4 1 0 3 3 2 b r o w n , j 。ra t b e c k e n b a c h ，m j s m i t h ，i n t r a s p e c i f i cd n as e q u e n c ev a r i a t i o ni nt h e m i t o e b o n d r i a lc o n t r o lr e g i o no f w h i t es t u r g e o n ( a c i p e n s e rt r a n s m o n t a n u s ) ，m 0 1 b i 0 1 e v 0 1 1 9 9 3 ，1 0 ：3 2 6 3 4 1 3 3 f e r r i s ，s d ，gs w h i r r , m i t c e h o n d r i a ld n a e v o l u t i o ni l lm i c e ，g e n e t i c , 1 9 8 3 1 0 5 ：6 8 1 7 2 1 3 4 a r i s e ，j v ，cj es h a p i r o ，sw - d a n i e l ，e ta 1 ，m i t o c h o n d r i a ld n ad i f f e r e n t i a t i o nd n f i n gt h e s p e c i a t i o n p r o c e s si n p e r o m u s c u s m o lb i 0 1 e v o l ，1 9 8 3 h3 8 5 6 3 5 吴清江，桂建芳。鱼类遗传育种工程上海：上海科学技术出版社( 第一版) ，1 9 9 9 4 9 黄艘鲸( l o p h i u sl i t u l o n ) 形态特征及其遗传学研究 5 1 1 6 2 3 6 a v i s e ，j c ，n c s a u n d e r s ，h y b r i d i z a t i o na n d i n t r o g m s s i o na m o n gs p e c i e s o f s u n f i s h ( l e p o m 妨： a n a l y s i sb ym i t o c h o n d r i a la n da u o z y m em a r k e r s ，g e n e t i c s , 1 9 8 4 1 0 8 ：2 3 7 2 5 5 3 7 p 自k s 鸭l h ，e ta 1 ，i st h es u b s p e c i e sc l a s s i f i c a t i o no f t h ef r e s h w a t e re e l s a n g u i l l aa u s t r a l i s a u s t r a l i sr i c h a r s o na n da n g u i l l aa u s t r a l i ss c h m i d t i ip h i l l i p p ss t i l lv a l i d ? m a rf r e s h r e s ，1 9 9 9 5 0 ( 3 ) ：2 6 1 2 6 3 3 8 n i e d d u ，m ，e ta 1 ，ac o m p a r a t i v ea n a l y s i so f e u r o p e a na n da m e r i c a ne e l 似a n g u i l l aa n da r o s t r a t a ) g a n o m i cd n a ：5 sr d n ap o l y m o r p h i s mp e r m i t st h ed i s t