（基础兽医学专业论文）交感神经对小鼠早期胚胎发育影响及作用机制的研究.pdf

摘要 在哺乳动物精卵结合形成合子至发育成熟、分娩过程中，约有4 0 6 0 的胚胎发生死 亡，其中早期胚胎死亡占6 7 。早期胚胎死亡不仅对畜牧业养殖造成极大的经济损失，而且对 妊娠妇女造成严重的身体和心理伤害，甚至引发社会问题。报道认为约有7 0 的早期胚胎丢失 是“神经一免疫一内分泌”网络紊乱造成的，但对其具体的作用机制还不清楚。本实验旨在从交 感神经的角度揭示神经对妊娠的调控机制，为全面揭示神经一内分泌一免疫网络调控妊娠发生 和发展的作用机理提供基础资料。为此，采用昆明白小鼠腹腔注射不同剂量的交感神经阻断剂6 - - o h d a ( 0 m g k g 体重、5 0 m g k g 体重、1 0 0 m g k g 体重) ，建立合适的交感神经损毁动物模型； 然后利用光镜组织学技术、组织化学技术、免疫组织化学技术、e l i s a 和细胞培养技术，检测 了交感神经对妊娠早期胚胎发育的影响、子宫内膜的组织学变化、子宫局部的免疫细胞、全身 细胞免疫和体液免疫的变化，以及外周血清性激素水平的影响。主要研究结果如下： 1 昆明白小鼠腹腔连续注射交感神经损毁剂6 - o h d a ( 1 0 0 m g k g 体重) 5d ，可以有效损 毁外周交感神经。 2 交感神经损毁后，对发情周期有一定的影响，但是对排卵没有明显的影响。主要降低胚 胎的着床数，胚胎着床率减少约6 4 4 ，而且阻滞妊娠早期胚胎的发育。 3 交感神经损毁后，妊娠早期子宫内膜腺体发育不良，血管匮乏。 4 交感神经抑制着床期肥大细胞的数量和组织胺的释放。交感神经损毁后妊娠早期子宫内 肥大细胞数量在着床期明显升高( p 0 0 1 ) ，子宫组织中组织胺含量明显升高( e 3 除外) 。 5 交感神经损毁后妊娠早期子宫c d 8 + t 细胞明显增加，尤其在着床期( e 5 ) 升高了1 0 倍，妊娠早期子宫组织中细胞因子i l 一2 含量升高，尤其e 5 升高最明显，达3 6 倍，但是c d 4 + t 细胞和细胞因子m - 4 升高不明显，导致c d 4 + c d 8 + 比值下降，i l 一2 i l 4 比值升高，破坏了 c d 4 + c d 8 + 和i l 2 i l - 4 之间的平衡。 6 交感神经损毁后脾脏中t 、b 淋巴细胞增殖能力下降；但是腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞 能力增强。 7 交感神经损毁后，妊娠早期外周血清中雌二醇浓度在着床前( e 3 ) 升高明显，着床期下 降；血清中孕酮浓度着床前升高，着床后降低。 结论：交感神经不仅通过促进子宫组织结构的发育以适应妊娠发生、发展需要，而且选择 性抑制子宫局部的免疫细胞数量和活性，调控辅助性t 淋巴细胞因子的分泌平衡；另一方面， 交感神经通过调控妊娠早期外周血性激素的生理水平，从而维持妊娠的发生，促进妊娠早期胚 胎的发育。 关键词：交感神经，昆明小鼠，妊娠早期，胚胎发育 a bs t r a c t i nt h ep r o c e s sf r o ms p e r m - e g gf u s i o nt of e t a ld e l i v e r yo fm a m m a l i a n ，4 0 - 6 0 o fe m b r y o sw i l l d i e d ，a n de v e n6 7 e m b r y o n i cl o s so c c u r e dd u r i n ge a r l ye m b r y od e v e l o p m e n t e a r l ye m b r y o n i c d e a t hr e s u l t si nn o to n l yg r e a te c o n o m i cc a s u a l t yt os t o c kf a r m i n g ，b u ta l s os e r i o u sp h y s i o l o g i c a la n d p s y c h o l o g i c a lh a r mt oa b o r t i v ew o m e n ，f u r t h e rs o c i a lp r o b l e m st og o v e m m e n t b u t s of a r , r e a s o n s o f7 0 o ft h o s em a yb er e s u l t e df r o mt h ed i s o r d e ro fn e u r o - i m m u n e e n d o c r i n en e t w o r k ，a n dt h e s p e c i f i cm e c h a n i s mi ss t i l lu n c l e a r t h eo b j e c t i v eo ft h ep r e s e n ts t u d yw a s t oi n v e s t i g a t et h ee f f e c t m e c h a n i s mo fs y m p a t h e t i cn e r v es y s t e m ( s n s ) o ne m b r y o si m p l a n t a t i o na n de a r l yf e t a ld e v e l o p m e n t t h e s ed a t aw i l lh e l pt oe l u c i d a t et h er o l em e c h a n i s mo fn e u r o i m m u n e e n d o c r i n en e t w o r ko nt h e p r e g n a n c yo fm a m m a l i a n t h e r e f o r e ，t ob u i l dap r o p e ra n i m a lm o d e l ，t h ea d u l tk u n - m i n gm i c ew e r e t r e a t e db yi n t r a p e r i t o n e a li n j e c t i o no fv a r i o u sd o s e s6 - o h d a ( 0m g k gb o d yw e i g h t , 5 0 m g k gb e d y w e i g h t ，10 0m g k gb o d yw e i g h t ) ，w h i c hw i l ll e s i o nt h es y m p a t h e t i cn e r v e a f t e rv a r i o u sd o s e s 6 - o h d at r e a t e d ，t h en u m b e ro fe m b r y o si m p l a n t a t i o n ，a n dt h es i z eo fe m b r y o sd e v e l o p m e n tw e r e o b s e r v e db yd i s s e c t i o n ，a n dt h em o r p h o l o g i c a lc h a n g e so fe n d o m e t r i u m ，t h en u m b e ro fi m m u n o c y t e s a n dt h ec o n c e n t r a t i o no fc y t o k i n e si nl o c a lu t e r u s ，t h el e v e l so fs e xs t e r o i dh o r m o n ei ns e r u md u r i n g e a r l yp r e g n a n c y , a n dt h ep r o l i f e r a t i o no fba n dtl y m p h o c y t e sw e r ei n v e s t i g a t e db ym e a n so f i m m u n o h i s t o c h e m i s t r y , h i s t o c h e m i s t r y , e l i s a ，r a d i o i m m u n o a s s a ya n d c e l lc u l t u r e t h er e s u l t s w e r ed e m o n s t r a t e da sf o l l o w s ： 1 t h ep e r i p h e r a ls y m p a t h e t i cn e r v e sw e r ec o m p l e t e l yd e s t r u c t e di nt h em i c eb yt h e6 - o h d a ， l e s i o nr e a g e n to ft h es y m p a t h e t i cn e r v e s ，i n j e c t e di n t r a p e r i t o n e a lo fd o s e10 0 m g k gb wl a s tf o r5 d a y s 2 a f t e rd e s t r u c t i o no ft h es y m p a t h e t i cn e r v e s ，t h es e x u a lc y c l ew a sd i s t u r b e d , b u tt h eo v u l a t i o n w a ss i m i l a rt on o r m a l h o w e v e r ，t h en u m b e ro fi m p l a n t e de m b r y o sw a so n l y6 4 4 o ft h a to f c o n t r o lm i c ea te 7 ，a n dt h es i z eo fe a r l ye m b r y o sw a sd e c r e a s e d ，w h e nt h ep r e g n a n c ym i c ep r e t r e a t e d w i t h6 一o h d a 3 a f t e rd e s t r u c t i o no fs y m p a t h e t i cn e r v e s ，t h ee n d o m e t r i u mg l a n d sa n dv e s s e l sd e v e l o p e dp o o r i nu t e r u so fm i c ed u r i n ge a r l yp r e g n a n c y 4 t h es y m p a t h e t i cn e r v s e sh a di n h i b i t e dt ot h en u m b e ro fm a s tc e l l sa n ds e c r e t i o no f h i s t a m i n ed u r i n gi m p l a n t a t i o n d e s t r u c t i o no ft h es y m p a t h e t i cn e r v e sr e s u l t e di ni n c r e a s eo fm a s t c e l la f t e re 3 ，a n dc o n c e n t r a t i o no f h i s t a m i n ei nu t e r u st i s s u ei n c r e a s e da te 1 一e 9 ( b u td e c r e a s ea te 3 ) i i 5 i nu t e r i n et i s s u eo f6 一o h d a - t r e a t e dm i c e ，t h en u m b e ro fc d 8 + tc e l l si nu t e r u sd u n n ge a r l y 9 十 r 、 ， 、 _ 、 p r e g n a n c yi n c r e a s e dt e n f o l da n dp r o d u c t i o no fi l 一2i n c r e a s e d3 6f o l da te 5 h o w e v e r ，n oo b v i o u s n u m b e rc h a n g e si nt h ec d 4 + tc e l l sa n di l 一4w e r eo b s e r v e d t h u s ，t h ec d 4 + c d 8 + tc e l l sr a t i o s i g n i f i c a n t l yd e c r e a s e d ，w h i l et h ei l 一2 i l 一4r a t i os i g n i f i c a n t l yi n c r e a s e d 6 a f t e rd e s t r u c t i o no ft h e s y m p a t h e t i cn e r v e s ，b o t ho ft h ep r o l i f e r a t i o n o fba n dt l y m p h o c y t e sd e c r e a s e d ，b u tp h a g o c y t o s i so fm a c r o p h a g e si n c r e a s e d 7 w i t hd e s t r u c t i o no ft h es y m p a t h e t i cn e r v e s ，t h es e r u mc o n c e n t r a t i o no f17 1 3 一e s t r a d i o l s i g n i f i c a n t l yi n c r e a s e da tp r e i m p l a n t a t i o n ( e 3 ) ，b u td e c r e a s e da ti m p l a n t a t i o n ( e 5 ) a tt h es a m et i m e ， t h es e r u mc o n c e n t r a t i o no fp r o g e s t e r o n ew a ss i g n i f i c a n t l yi n c r e a s e dd u r i n ge 1 一e 5 ，b u tt h e nd e c r e a s e d d u r i n ge 7 - e 9 i nc o n c l u s i o n ，o nt h eo n eh a n d ，t h es y m p a t h e t i cn e r v e sc o u l dp r o m p tt h ed e v e l o p m e n to fu t e r u s w a l la n dt oa d a p tt op h y s i o l o g i c a lf u n c t i o n sd u r i n gp r e g n a n c y o nt h eo t h e rh a n d ，t h es y m p a t h e t i c n e r v e sc o u l ds e l e c t i v e l yi n h i b i t et h en u m b e ro fi m m u n o c y t e sa n dm o d u l a t et h el e v e lo ft h e l p e rt y p e c y t o k i n e s a d d i t i o n a l l y , t om a i n t a i np r e g n a n c ya n dd e v e l o po fe a r l ye m b r y o s ，t h es y m p a t h e t i c n e r v e sh a dar o l ei na d j u s t i n gt h el e v e lo fs e r u ms e xs t e r o i dd u r i n ge a r l yp r e g n a n c y k e y w o r d s ：s y m p a t h e t i cn e r v e ，k u n m i n gm i c e ，e a r l yp r e g n a n c y , e m b r y o n i cd e v e l o p m e n t i i i 英文缩写英文全称 a c h a c h r b a l t c a c g r p c s f c t m c c o n a e d l a e m e p i e x f s h g a i t h a h p a h p g h p t h r i f n i l a c e t y l c h o l i n e 缩略词表 a c e t y l c h o l i n er e c e p t o r 中文全称 乙酰胆碱 乙酰胆碱受体。 b r o n c h u s a s s o c i a t e dl y m p h o i dt i s s u e支气管相关淋巴组织 c a t e c h o l a m i n e 儿茶酚胺 c a l i c i t o n i ng e n er e l a t e dp e p t i d e 降钙素基因相关肽 c o l o n ys t i m u l a t i n gf a c t o r c o n n e c t i v et i s s u em a s tc e l l c o n c a n a v a l i n ea 集落刺激因子 结缔组织型肥大细胞 刀豆素a e t h y l e n e d i a m i n et e t r a a c e t i ca c i d 乙二胺四乙酸 e m i t t a n c ew a v e e p i n e p h r i n e e x c i t a t i o nw a v e f o l l i c l es t i m u l a t i n gh o r m o n e 发射波 肾上腺素 激发波 促卵泡激素 g u ta s s o c i a t e dl y m p h o i dt i s s u e 肠相关淋巴样组织 h i s t a m i n e 组织胺 h y p o t h a l a m u sp i t u i t a r ya d r e n a l 下丘脑一垂体一肾上腺 h y p o t h a l a m u sp i t u i t a r yg o n a d 下丘脑一垂体一l 生腺 h y p o t h a l a m u sp i t u i t a r yt h y m u s 下丘脑一垂体一胸腺 h i s t a m i n er e c e p t o r i n t e r f e r o n i n t e r l e u k i n 组织胺受体 干扰素 白细胞介素 v i i l h l h r h l p s m c m c m o n e n e i n k o p a r i a r s a s i s n s s p g s r e t d 硼h t n f t g f - 3 t h v i p 6 o h d a v i i i l u t e i n i z i n gh o r m o n e 促黄体激素 l e u t e i n i z i n gh o r m o n er e l e a s i n gh o r m o n e 促黄体激素释放激素 l i p o p o l y s a c c h a r i d e 脂多糖 m a s tc e l l m u c o s am a s tc e l l m a e r o p h a g e n o r e p i n e p h r i n e n e u r o e n d o c r i n e - i m m u n e n a t u r a lk i l l e rc e l l o - p h t h a l d i a l d e h y d e r a d i oi m m u n o a s s a y 肥大细胞 黏膜型肥大细胞 巨噬细胞 去甲肾上腺素 神经内分泌一免疫 自然杀伤细胞 邻苯二甲醛 放射免疫分析法 s p o n t a n e o u sa b o r t i o n 反复性流产 s t i m u l a t i o ni n d e x刺激指数 s y m p a t h e t i cn e r v es y s t e m 交感神经系统 s u c r o s e p h o s p h a t e - g l y o x y l i ca c i d 蔗糖一磷酸一乙醛酸 s t e r o i dr e s p o n s ee l e m e n t 类固醇反应元件 d e l a y e dt y p eh y p e r s e n s i t i v i t ytl y m p h o c y t e 迟发型变态反应 r l l n o rn e c r o s i sf a c t o r肿瘤坏死因子 t r a n s f o r m i n gg r o w t hf a c t o r - 1 3 h e l p e rtc e l l v a s o a c t i v ep e p t i d ei n t e s t i n e 转化生长因子 辅助性t 细胞 血管活性肠肽 6 - h y d r o x y d o p a m i n e 6 一羟多巴胺 独创性声明 、， y 9 圣0 0 2 1 o 本入声明所呈交的论文是我个入在导师指导下避行的研究工作及取得的礤究 成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已 经发表或撰写过的骥究成聚，氇不包含为获褥中国农业大学或其它教育壤构的学位 或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文 中侔了织确豹说明并表示了谢意。 研究生签名：苗五兰 时间：y 昭年f 月，弓r 关于论文使用授权的说明 本人完全了解中国农业犬学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保 留送交论文豹复印传耱磁盘，允许论文被套阅襄绪蕤，珂以采用影印、缝球或拯搂 等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业大学可以用不同方式在不同媒体上 发表、传播学位论文的全部鲮部分内容。 ( 保密的学位论文在解密后应遵守此协议) 研究生签名：蓖毒兰 时间：w r 磊占月，3 日 导癖签名：l 驴躲移乏辩闫：厶。f 年g 月厂乒嗣 中国农业大学博士学位论文第一章前言 第一章前言 在哺乳动物精卵结合形成合子至发育成熟、分娩过程中，约有4 0 6 0 的胚胎会发 生死亡，其中早期胚胎死亡占6 7 。早期胚胎死亡( 早期胚胎丢失) 亦称隐性流产，因无 明显的流产症状而未受到应有的重视。在畜牧业生产中，早期胚胎死亡对奶牛养殖场造成 了极大的经济损失，已成为困扰奶牛生产的一个难题，据美国一项统计表明，仅此造成的 经济损失约高达1 4 亿美元( l a m b ，1 9 9 4 ；h a n s e n ，2 0 0 2 ) 。对人类的研究发现，女性不明原 因性反复流产非常严重，尤其是在经济发达、社会压力较大的西方社会，人群中胚胎着床 后的流产率高达3 0 ，而复发性流产( s p o n t a n e o u sa b o r t i o n ，r s a ) 是指与同一性伴侣连续 发生3 次或者3 次以上妊娠并流产者，其发病率占育龄夫妻总数的1 2 。究其发生原因， 除了染色体异常、胎儿畸型和母体内分泌紊乱等因素外，仍有7 0 的流产原因不明。生殖 免疫学观点认为，这些原因不明的流产属于免疫性流产( i m m u n o l o g i c a l l ym e d i a t e d a b o r t i o n ) 。胎儿作为半同种异体抗原却不被母体排斥，目前认为其主要原因是靠子宫局部 的免疫调节( b i l l i n g t o n ，2 0 0 3 ；j o l l i l ，2 0 0 5 ) 。自1 9 7 7 年b e s e d o v s k y 提出了“神经一免疫一内 分泌”网络学说以来，认为免疫系统接受神经系统调控( b e s e d o v s k y ，1 9 7 7 ) 。因而研究神 经系统在子宫免疫中所起的作用，用“神经一免疫一内分泌”网络的新理论进一步阐明胎儿 不被母体排斥的机理，一直是现今生殖生物学领域倍受关注的焦点。 1 神经一内分泌一免疫网络 神经系统、内分泌系统和免疫系统是机体内三大重要的系统，三大系统问互相作用， 互相调控，形成一个环路，共同维系着机体的正常发育和新陈代谢。神经系统通过其广泛 分布的外周神经突触及其递质、内分泌激素和神经源性细胞因子来参与免疫系统的调节， 而免疫系统通过免疫细胞产生的多种细胞因子和激素样物质反馈作用于神经系统( 金伯泉， 1 9 9 5 ) 。作为神经、免疫及内分泌系统的通用信息分子的各种递质、激素和细胞因子以及三 系统细胞表面具有接受这些分子语言的受体，共同构成了神经、免疫及内分泌系统间的回 路，构成复杂的网络。 根据递质、激素和细胞因子的作用方式，三者之间的调节环路基本上可分为两大类型 ( 韩济生，1 9 9 9 ) ，一种为长轴的免疫一神经一内分泌网络相互作用，是指递质、激素刺激 免疫系统导致免疫源性介质的释放，后者再作用远处的神经内分泌组织，影响其功能，这 种反馈作用称为长环反馈( 1 0 n g l o o pf e e d b a c k ) 。已知该环路中，有很多相关的轴，如下丘 脑一垂体一肾上腺轴( h p a ) ，下丘脑一垂体一胸腺轴( h p t ) ，下丘脑一垂体一性腺轴 ( 肿g ) ，这些轴均可与免疫系统互相联系，并已证实，介导该环路相互作用的最重要的细 胞因子为i l 1 、i l 一6 、t n f 0 【和i f n 吖。另一种为局部相互作用，它是指免疫源性介质和神 经内分泌因子就在它们被释放的组织和器官内发生相互影响，称为短环反馈( s h o r t l o o p f e e d b a c k ) ，如旁分泌和自分泌。但是长轴作用最初也可自发生在局部，然后逐渐影响到远 处( 图1 - 1 ) 。 围1 1 神经一内分泌一免疫网络模式图( g i 自m o r a l e e ta l ，2 0 0 1 ) f i g 1 1a s c h e m a t i cd r a w i n gi l l u s t r a t e so f n e u r o e n d o c r i n e - - i m m u n e ( n e dn e t w o r k s l y m p h o k i n e s ：淋巴因子，l h r h ：促黄体激素释放激索，s e xs t e r o i d s ：性类固酵，t e s t i s ：睾丸，o v a r y ：卵巢， a d r e n a l ：骛上腙，s p l e e n ：辞，t h y m u s ：胸腺，l y m p h o c y t c s ：济巴细舱，b i o g e n i ca m i n e s ：生物骧，g l u e o c o r t i c o i d ：糖 皮质激素，l h ：促黄体激素，f s h ：促卵泡激素。 2 中国农业大学博士学位论文 第一章前言 2 交感神经与免疫 随着科学研究的深入，现在的研究发现，大脑和免疫系统之间“互相作用”，保持动态 的平衡，不仅仅局限于以“下丘脑一垂体”为中心的免疫环路中，交感神经系统( s n s ) 在 神经免疫中的作用也愈来愈受到重视。过去2 0 年的研究证明，去甲肾上腺素( n e ) 在淋 巴器官中作为神经递质行使神经调控的作用。而且，初级和次级淋巴器官均有广泛的交感 神经去甲。肾上腺素能神经分布( 图l 一2 ) 。当机体受到外源性或者内源性应激时，免疫器 官中的交感神经终末释放n e ，靶免疫细胞具有n e 受体表达，n e 与受体结合，产生局部 免疫细胞活性激活或者抑制作用，例如：肾上腺素影响淋巴细胞运输、循环和增殖，调控 细胞因子的产生以及不同淋巴细胞的作用活性。大量的交感神经末梢分布在骨髓、胸腺、 黏膜组织，具有造血作用。最近的证据表明n e 和肾上腺素，通过刺激p 2 一肾上腺素能受体 一c a m p 蛋白激酶a 通路抑制i 型前炎症细胞因子( 如：干扰素吖) 的产生和刺激i i 型抗 致炎因子( 如：i l 一1 0 ，转化生长因子b ) 的产生。通过这种机制，一方面，在整体上，内 源性儿茶酚胺可以选择性抑制t h l 反应和细胞免疫，诱导t h 2 引起的体液免疫。另一方面， 在某一局部反应，某一条件下，儿茶酚胺可能通过诱导1 ，t n f 一位，i l 8 前体的产生， 促进局部免疫反应。传统认为s n s 在免疫反应中的作用可能是：( 一) 全身反应：抑制t h l 反应，保护机体免受有害的前炎症细胞因子和有活性巨噬细胞产物的伤害；( 二) 局部反应： 通过诱导嗜中性粒细胞聚积，刺激特异的体液免疫反应，从而使得炎症反应局部化。 2 1 交感神经在淋巴器官和淋巴组织中的分布：非突触联系 交感神经节后肾上腺素能神经纤维、5 羟色胺能神经纤维和多巴胺能神经纤维等神经 元的轴突末梢有许多分支，在分支上有大量的结节状曲张体( v a r i c o s i t y ) ，曲张体内含有大 量的小泡，是递质释放的部位，曲张小体类似于突触小体，但它不与效应器细胞形成经典 的突触，而是处于效应器附近，因此称为非突触联系( 姚泰，2 0 0 2 ) 。 机体许多器官，例如心脏和胃肠道，均受到交感神经和副交感神经的双重支配。然而， 通常情况下只有一种神经起主导作用。淋巴器官和血管一样，主要有交感神经去甲肾上腺 素和交感神经神经肽- y ( n p y ) 分布。自从1 9 6 0 年，利用组织荧光方法证明了不同物种 的淋巴器官组织中去甲肾上腺素能神经纤维的存在( d a h l s t r 6 ma n dz e t t e r s t r 6 m ，1 9 6 5 ； z e t t e r s t r o me ta 1 ，1 9 7 3 ；r e i l l ye ta 1 ，1 9 7 6 ，1 9 7 9 ；g i r o ne ta 1 ，1 9 8 0 ；w i l l i a m sa n df e l t e n ，1 9 8 1 ； b u l l o c ha n dp o m e r a n t z ，1 9 8 4 ；f e l t e ne ta 1 ，1 9 8 5 ；k e n d a l le ta 1 ，1 9 8 8 ，1 9 9 1 ) 。利用对t h 、 d b h 特异性的免疫组织化学方法，更多研究证明了去甲肾上腺素能神经纤维在淋巴组织中 的分布( f e l t e na n do l s c h o w k a ，1 9 8 7 ，1 9 8 8 ；f i n ka n dw e i h e ，1 9 8 8 ；w e i h ee ta 1 ，1 9 9 l ；v i z ie t a 1 ，1 9 9 5 ；k u r ze ta i ，1 9 9 7 ) 。目前所研究的神经在淋巴器官中的分布主要是啮齿动物，人 的很少( f e l t e ne ta 1 ，1 9 8 5 ，1 9 8 8 ；w e i h ee ta 1 ，1 9 9 1 ) 。 图l - 2 交感神经系统与免疫系统关系模式图( 参考s t e i n m a n ，2 0 0 4 ) f i g1 - 2a s c h e m a t i cd r a w i n gi l l u s t r a t e so f r e l a t i o nb e t w e e ns y m p a t h e t i cn e r v o u s s y s t e ma n di m m u n i t ys y s t e m ( r e f e rf r o ms t e i n m a n ，2 0 0 4 ) l y m p hn o d e s ：淋巴结，t h y m u s ：胸腺，b o n em a l t o w ：骨髓，s p l e e n ：脾，s y m p a t h e t i cn e r v e ：交感神经，a f f e r e n t & e f f e r e n tv a g u sn e r v ea c t i v i t y ：传入传出迷走神经，tc e l l ：t 淋巴细胞，e p i n e p h r i n e ：去甲肾上腺素，a d r e n e r g i c r e c e p t o r ：肾上腺素受体，p a i nf i b e r ：痛觉纤维，c h o l i n e r g i cn e u r o n ：胆碱能神经元，s y m p a t h e t i cn e u r o n ：交感神经 元，h i s t a m i n e ：组织胺，h i r ：组织胺一型受体，h 2 r ：组织胺二型受体，v i p ：血管活性肠肽，s u b s t a n c ep ：p 物质， c g r p ：降钙素基因相关肽，a c h ：乙酰胆碱，a c h r ：乙酰胆碱受体。 4 中国农业大学博士学位论文第一章前言 2 1 1 胸腺 交感神经节后神经纤维随血管进入胸腺，分布在胸腺小体和间隔结缔组织；这些纤维 在胸腺被膜下皮质、皮质一髓质交界处形成膨大的神经丛，但在髓质很少( w i l l i a m sa n d f e l t e n ，1 9 8 1 ；f e l t e ne ta 1 ，1 9 8 5 ；k e n d a l la n d a i s h a w a f ，1 9 9 1 ；k r a n ze ta 1 ，1 9 9 7 ；c a v a l l o t t i e ta 1 ，1 9 9 9 ) 。大量神经分布于皮层的脉管系统周围，皮层外周的胸腺细胞处于发育期，还 未成熟，神经丛密度高；皮层中心，尤其是皮质髓质交界处，是胸腺细胞从胸腺迁移的重 要区域，也是神经丰富分布的区域，也多数在脉管周围。胸腺内肥大细胞的分布与去甲肾 上腺素能神经纤维的分布一致，肥大细胞通常在血管外周区域，积聚成片，可与n e 能神 经纤维发生直接联系( w i l l i a m sa n df e l t e n ，1 9 8 1 ) 。大多数免疫反应阳性神经均分布于脉管 周围。一些t h ，d b h 染色的纤维，在胸腺结缔组织间隔分布，分支到皮质和实质( v i ze t a 1 ，1 9 9 5 ) 。超微结构水平上，可见在胸腺细胞、肥大细胞、纤维原细胞和嗜曙红细胞附近 分布有去甲肾上腺素能静脉曲张体( n o v o t n ye ta 1 ，1 9 9 0 ；v i z ie ta 1 ，1 9 9 5 ) 。儿茶酚胺能神经 纤维也与胸腺上皮细胞发生紧密联系，胸腺上皮细胞与胸腺细胞、肥大细胞相似，也表达 肾上腺素受体一p ( v i z ie ta 1 ，1 9 9 5 ；k u r ze ta 1 ，1 9 9 7 ) 。在胸腺外周皮质，胸腺上皮细胞( t e c s ) 形成血一胸腺屏障，这些细胞可能是肾上腺分泌的。肾上腺素或血管周神经释放的n e 的靶 细胞。 2 1 2 脾脏 交感神经节后神经纤维占支配脾脏神经纤维的9 8 ( k l e i ne ta 1 ，19 8 2 ) 。去甲肾上腺 素能节后神经纤维分布主要起始于肠系膜前腹腔神经节，进入脾实质，其神经分布也局限 于结缔组织系统，包括被膜一小梁、血管周围和网状系统。首先在脾动脉周血管丛沿脉管 系统分布，在小梁丛沿小梁分布( w i l l i a m sa n df e l t e n ，1 9 8 1 ) ；然后随血管或者小梁进入到 白髓，继续沿中央动脉和其分支分布( 图1 3 ) 。去甲肾上腺素能神经元曲张体自神经丛呈 放射状分支到动脉外周淋巴鞘。脾中的去甲肾上腺素能神经纤维密度与中央动脉和动脉外 周淋巴鞘密度分布呈线性相关( w i l l i a m sa n df e l t e n ，1 9 8 1 ；f e l t e ne ta 1 ，1 9 8 5 ) 。在t 细胞依 赖区，交感神经纤维分布于淋巴细胞间；在边缘区和边缘窦也有丰富的n e 能神经分布， 同时也是淋巴细胞自血液进入淋巴组织的通道，具有巨噬细胞、b 细胞( f e l t e ne ta 1 ，1 9 8 5 ； f e l t e na n do l s c h o w k a ，1 9 8 7 ) 。红髓中神经纤维分布较分散，主要与小梁和周围组织的神经 丛相联系。滤泡中神经分布很少，主要包含b 细胞( w i l l i a m sa n df e l t e n ，1 9 8 1 ) 。 2 1 3 淋巴结和扁桃体 去甲肾上腺素能神经纤维与血管一起通过淋巴结门进入淋巴结，有的进入囊下神经丛， 有的穿过髓索伴随血管分布。这些纤维分布与髓质中的脉管系统和淋巴管相邻，继续沿小 导管进入实质部皮质和副皮质( f e l t e ne ta 1 ，1 9 8 4 ；f i n ka n dw e i h e ，1 9 8 8 ) 。在淋巴结内， 大部分神经纤维独立于血管分布在髓质和副皮质区( n o v o t n ya n dk l i c h e ，1 9 8 6 ) 。去甲肾上 孛匿农她大学博士学健论文第一章前言 腺紊能神经纤维分布在皮质( t 细胞富集区) 和副皮质区，而不分布在淋巴小结和生发中 心( b 细胞富集区) ( f e l t e ne ta l ，1 9 8 4 ) 。在人鏖桃体，去甲肾上艨素能神经终维沿脉镑系 统分布形成血管周神经丛，单一纤维分布在副小囊区。淋巴结上皮问和淋巴小结缺乏去甲 肾上腺索能神经纤维( y a m a s h i t ae ta 1 ，1 9 8 4 ；b e l l i n g e re ta 1 ，1 9 9 2 ) 。 图1 - 3 脾脏中交感神经的分布( 引自s t 舢b r h 2 0 0 4 ) f i gi - 3t h es y m p a t h e t i cn e p ei n n e r v a t i o no f s p l e e n s y r n p a t h c l i en e r v e ：交感神经，s p l e e n ：脾，c o r t i s o l ：考的松，m a c r o p h a g e ：巨噬细胞，v e i n ：静脉，a r t e r y ：动赫，a d r e n a l g l a n d ：肾上腺，a n t e r i o rp l t u l t a r 3 r ：垂体前叶，i m r a c c r e b r o v a n t r i c u l a r ：脑室内，i l * ，p ：自细胞介素- j p ，i l 一6 ：白细 匏舟索- 6 ，d 汴：肿癌坏死因予，l p s ：月旨多耱，a c t h ：健鹭黥皮痿激素，n a ：去甲瞥上藏素，c r f ：惺肾土 腺皮质激素调节因子。 6 中国农业大学博士学位论文 第一章前言 2 1 4 黏膜相关淋巴组织 黏膜组织中的神经网络分布很广泛( c o o k e ，1 9 8 6 ；b i e n e n s t o c ke ta 1 ，1 9 8 9 ) 。肠相关淋巴 组织( g a l t ) 和气管相关淋巴组织( b a l t ) 都受交感神经和肽能神经支配( f e l t e ne ta 1 ，1 9 8 5 ， w e i h ee ta 1 ，1 9 9 1 ) 。据不完全统计，胃肠道中的神经胞体数量和脊髓中的相等( f u r n e s sa n d c o s t a ，1 9 8 0 ) 。另外黏膜组织中也存在大量的神经肽物质，例如s p ，血管活性肠肽( v i p ) ， 生长激素抑制素( c o o k e ，1 9 8 6 ) 等。g a l t 中的p p 小结是肠道中淋巴小结聚集区，去甲 肾上腺素能神经元曲张体在其固有层穹隆处有丰富分支。在实质，神经纤维沿小导管和分 支随意分布在淋巴小结间，一般不与血管伴随( b e l l i n g e re ta 1 ，1 9 9 2 ) 。在淋巴集结t 细胞 区的神经分布中含有神经肽和交感神经递质n e 。值得注意的是，与其它淋巴组织一样，肠 道黏膜的肥大细胞紧邻上皮，这种分布不是随机的，而是为了选择性与进入的神经相联系 ( c o o k e ，1 9 8 6 ) 。一般认为鼻黏膜仅受到交感神经的支配，而不受副交感神经调控，交感神 经刺激可能上调下颌腺免疫球蛋白a 的分泌，但是交感神经和内源性c a s 调控黏膜免疫的 作用机制还不明确。实质上，黏膜免疫是一种倾向于t h 2 的反应( e r n s te ta 1 ，1 9 9 9 ) ，而 c a s 和肥大细胞产生的组织胺也介导t h 2 反应( e l e n k o ve ta 1 1 9 9 6 ，1 9