（应用化学专业论文）银杏黄酮苷在吸附树脂上的吸附、解吸行为研究.pdf

西川大学颟圭学位论文 银杏黄酮蓄农暇附树脂t 豹吸耐、解吸行为研究 应用化学专业 研究生腥玲华指导老师李晖 摘要：本文利阕极性和结构不阕的吸驸树脂，对银杏黄戮营在吸附树h 旨上豹吸 瓣、解啜行兔遴行了院较系统豹基磷理论磺究。 选取五种极性和物理结构不同的吸附树脂，采用静态吸附法，研究了银杏 黄酮苷在不同吸附树脂上的吸附平衡速度、吸附量、勰吸率以及p h 、温度对吸 瓣戆影穗嚣浚魏，( 1 ) 器联l 耱爨对锾鸯黄藜萤懿裁瓣容量大，l 、关系整： d t 4 0 a d 1 4 0 蒙酰胺 a d s 一1 7 a d s 一7 。利用乙醇溶液解吸时，解吸率的大小关系 鼹：d 1 4 0 a d 1 4 0 a d s 一1 7 a d s 一7 聚酰胺；( 2 ) 本文通过在1 5 4 0 范围内 的硒究首次发现，银杏黄酮耱在不同极性树鼹上的吸醛过程都应是吸熟过程， 滋菠适当舞态鸯耧予啜辩。( 3 ) 菲极往褥麓和中穰往瓣虢受温度、p h 影晌不大， 极性树脂受温度、p h 影响鼎著，且在一定p h 即在p h 3 6 范围内，随着p h 增加，吸附爨增大；在1 5 4 0 范围内，温度升高吸附量显著增加。 稳蘧红努光谱法寂魄袭嚣努据鼓寒，黠耱l 冀证学缤校( 主要是絮缝霾) 窥 物理结构( 孔径、比表面积、孔容等) 滋行表征，重点探讨了银杏黄酮替在不 同树脂上的吸附、解吸机理，同时分析了锻杏黄酮瞢谯不同的吸附树脂上吸附 警餐速度、吸附璧、掰吸率的差异及p h 、滠度辩吸附影响差异的原因，其结果 液瞪：( 1 ) j 缀毪、中稷性辩脂主要吸附黄舔营的疏永部位， 乍竭力主要是范 德华力，因此银杏黄酮苷在此两类树脂上容易被解吸，吸附能力受漱度、p h 影 响甚小；( 2 ) 极性树脂以氢键吸附为主，因此其吸附能力受p h 、温度影响显著； ( 3 ) 在零漫秘p 珏5 条撵下，狡醛穗嚣魄表嚣积熬霪鍪毪运运越逡瓣器鹣褒 极性，比表面积越大，吸附平衡加快，吸附能力越强；而当吸附温度较高、溶 液p h 较高时，树脂的极性作用优势突驻，占主导作用。 同辩，动拳吸辫法的磅究中，也获褥了窥静态法磺究一致的绩聚。梯度洗 四川大学颟士学位论文 脱研究中发现：( 1 ) 在不同树脂上被吸附的大部分黄酮苷能被5 0 的乙醇溶液 熊吸下来，磷且产品中黄酮营含量较高，但含量差舅嬲显，具有搬程功能匿豹 褥脂表现崮好的选择性，黄酮营含量最离；( 2 ) 树藤的琵径起着簿选的俸蘑， 微孔的存在有利于产品中戳酮苷含量的提高。 本研究结果表明，银杏黄酮苷在树脂上的吸附是与树脂的极性、比表面积 鞫魏径密瓷臻关。溶滚瀑度、p 珏象 孛豹改变对辍瞧褥蓦影璃不赘显，悉霹援 性树脂影响露箸，这对实际生产中根据树脂选用吸附分离条件具有踅要指导意 义。而且不同极性的树脂备具有相应的优势，极性树脂选择性好，处理后得到 麴镊杏黄嚣餐含量裹，毽吸聪窖量窝收搴远不如其有褒沈表趸积的嚣极蛙挺艨。 所以，在实际生产中可校据需要遴行树滕和相应煎溶液条件选择或不同极性拇 脂的组合选择。 另外，利用d t 4 0 吸酣树脂对银杏黄嗣瞢进行吸辫寸，5 0 乙醇溶液解吸，解 设滚经蓬浓缎、沉淀获褥了锻杏黄蘸蛰禽薰鳕7 5 懿产赫，狡搴梵2 0 3 篱。 关键词：银杏黄酮苷吸附树脂静态吸附动态暇附吸附解吸行为 转川大学硕士学位论义 s t u d i e so nt h ea d s o r p t i o na n dd e s o r p t i o na c t i o n so f g i n k g o f l a v o n o lg l y c o s i d e so na d s o r b e n t m a j o ra p p l i e dc h e m i s t r y p o s t g r a d u a t ez h u a n gl i n g h u a t u t o rl ih u i a b s t r a c t ：m o r es y s t e m i ca n db a s a la c a d e m i cs t u d i e sh a v eb e e nc a r r i e dt h r o u g h w h i c hi sa b o u tt h ea d s o r p t i o na n dd e s o r p t i o na c t i o n so f g i n k g of l a v o n a lg l y c o s i d e s o nd i f f e r e n tp o l a r i t ya n ds t r u c t u r ea d s o r b e n t f i v ea d s o r b e n t sw i t hd i f f e r e n tp o l a r i t ya n ds t r u c t u r eh a v eb e e ns e l e c t e d n l e e q u i t i b r i u m s p e e d ，a d s o r p t i o nc a p a c i t y , d e s o r p t i o n r a t i oo f g i n k g o f l a v o n o l g l y c o s i d e so nt h e s ea d s o r b e n t sa sw e l la st h ei n f l u e n c eo fp ha n dt e m p e r a t u r ew e r e s t u d i e di nt h ew a yo f s t a t i ca d s o r p t i o n r e s u l t si n d i c a t e ：( 1 ) t h er e l a t i o no f a d s o r p f i o n c a p a c i t y o ft h e s ea d s o r b e n t s s h o w i n g f o r g i n k g o f l a v o n o l g l y c o s i d e s i s d 1 4 0 a d 1 4 0 p o l y a m i n e a d s - 1 7 a d s 一7 ：t h er e l a t i o n o fd e s o r p t i o nr a t i oi s d 1 4 0 a d 1 4 0 a d s 一1 7 a d s 一7 p o l y a m i n e ；( 2 ) i tw a sf i r s t l y f o u n dt h a tt h e p r o c e s s o f t h e8 d s o r n i o n o f g i n k g of l a v o n o lg l y c o s i d e s o nd i f f e r e n ta d s o r b e n t si s ae n d o t h e r m i cp r o c e s s 妇锄酶s t u d yi n1 5 4 0 e a d s o r p t i o no ft h ef l a v o n o l g l y c o s i d e so nn o n - p o l a ra n dm i d d l ep o l a ra d s o r b e n t sa r ei n f l u e n c e dm u c h l e s st h a n p o l a ra d s o r b e n t sb yp h a n dt e m p e r a t u r e ；t h ea d s o r p t i o nc a p a c i t yo f p o l a ra d s o r b e n t s i n c r e a s eg r e a t l ya c c o r d i n gt ot h er a i s i n go f p ha n d t e m p e r a t u r e ； t h em e c h a n i s m so ft h ea d s o r p t i o na n dd e s o r p t i o no f g i n k g of l a v o n a lg l y c o s i d e s o nd i f f e r e n ta d s o r b e n t sw e r ed i s c u s s e d ，a n dr e a s o n sw h yd i f f e r e n ta d s o r b c n ms h o w d i f f e r e n c ef o rf l a v o n a l g l y c o s i d e si n t h ee q u i l i b r i u m s p e e d ，a d s o r p t i o nc a p a c i t y , d e s o r p t i o nr a t i o a sw e l la st h e i n f l u e n c i n gd e g r e e o fp ha n dt e m p e r a t u r ew e r e a n a l y z e d ，b ys t u d i e so fs t r u c t u r e s ( f u n c t i o ng r o u p ，p o r ed i a m e t e r , s u r f a c ea r e ae t c ) u s i n gi r - s p e c t r aa n ds u r f a c ea r e am e n s u r a t i o n 。i tw a sf o u n do u tt h a t ：( 1 ) f l a v o n 羹 g l y c o s i d e sa r ee l u t e dm o r ee a s i l yo nt h en o n - p o l a ra n dm i d d l ep o l a ra d s o r b e n t st h a n o np o l a ra d s o r b e n t sa n d1 i r l ei n f l u e n c e db yp ha n dt e m p e r a t u r e ，b e c a u s et h e ya r e m a i n l ya d s o r b e db yt h e i rh y d r o p h o b i cp a r t s ( 2 ) g r e a tc h a n g e so f t h ea d s o r p t i o n c a p a c i t yo fp o l a ra d s o r b e n t sf o l l o w i n gt op ha n dt e m p e r a t u r ea r ed u et op l e n t i f u l 秘川丈学顿 二学位论文 h y d r o g e nb o n d i n ga d s o r p t i o n ( 3 ) a c c o r d i n g t o g i n k g o f l a v o n a l g l y c o s i d e s ，t h e s u r f a c ea r e ao f p o l y m e r a d s o r b e n ti su s u a l l yn a u c hm o r ei m p o r t a n tt h a nt h ep o l a r i t y , a n dn o n - p o l a ra d s o r b e n tw i 饿h i g hs u r f a c ea r e as h o w sg o o da d s o r p t i o n c a p a c i t y e s p e c i a l l y w h e ni th a s p h e n y l ，b u tt h ep o l a r i t y o fa d s o r b e n t sb e c o m et h em o s t i m p o r t a n t e f f e c tw h i l e r a i s i n go f p h a n d t e m p e r a t u r e o nt h eo t h e rh a n d ，a c c o r d a n tr e s u l t si ns o m e a s p e c t sh a v eb e e ng o | t e ni nd y n a m i c e x p e r i m e n t i tw a sf o u n do u ti ng r a d i e n te t u t i o nt h a t ：( 1 ) m o s to fg i n k g of l a v o n a l g l y c o s i d e s c a nb ee l u t e d b y5 0 e t h a n o ls o l u t i o n f r o m p o l y m e ra d s o r b e n t s ； a d s o r b e n t sw i t hp o l a rf u n c t i o n a lg r o u ph a v eb e t t e rs e l e c t i v i t yf o rf l a v o n a lg l y c o s i d e s ， s ot h ec o n t e n to fi ti sh i g h e rt h a nn o n p o l a ra n dm i d d l ep o l a ra d s o r b e n t s ( 2 ) p o r e d i a m e t e rh a s p u r i f i c a t o r yf u n c t i o na n dm i c r o - p o r e sa r ei nf a v o ro f i n c r e a s i n gc o n t e n t o f f l a v o n a lg l y c o s i d e s t h i sp a p e rr e v e a l st h a tt h e r ea 托c l o s er e l a t i o n sb e t w e e na d s o r p t i o no ff l a v o n a l g l y c o s i d e sa n dt h ep o l a r i t y , s u r f a c ea r e aa sw e l la sp o r ed i a m e t e ro fa d s o r b e n t d i f f e r e n tp o l a ra d s o r b e n t sr e s p e c t i v e l yh a v et h e i ro w n a d v a n t a g e st h a t a r es t a t e d a b o v e 。t h e n p r o p e r a d s o r b e n ta n dc o r r e s p o n d i n gc o n d i t i o n so r c o m b i n i n g o f d i f f e r e n ta d s o r b e n t ss h o u l db ec h o s e no n p r a c t i c a l n e e d s a d d i t i o n a l l y , t h ep r o d u c t i o nh a v i n g7 5p e r c e n t so f g i n k g of l a v o n a lg l y c o s i d e sw a s o b t a i n e dt h r o u g h s i m p l ec o n d e n s a t i o na n dp r e c i p i t a t i o no f d e s o r p t i o ns o l u t i o nw h i c h w a s g o t t e nb yd e s o r p t i o nf r o md 1 4 0 a d s o r b e n t 。 k e y w o r d s ：g i n k g o f l a v o n a l g l y c o s i d e s ；a d s o r b e n t ；s t a t i ca d s o r p t i o n ；d y n a m i c a d s o r p t i o n ；a d s o r p t i o na n dd e s o r p t i o na c t i o n s 四川大学硕士学位论文 l 前言 随着医药卫生技术、生物技术、化学及生命科学的发展和人们对健康标准 的不断提高，新药物的研究与开发已逐渐成为生命科学领域内重点关注的热点。 由于化学合成药物的局限性，世界各国的医学、药学、化学及生物学家都致力 于从天然产物中寻求新的、高效、安全、无毒副作用或毒副作用小的药物，从 而掀起了天然药物研究的热潮。 我们现在使用的很多药品都直接或问接地来自于天然产物，虽然有些传统 的天然药物被合成品代替，但最近几年，新的天然药物却在研究和治疗上取得 了新的地位。从事天然产物研究的科学家们一致认为目前天然产物形成了正在 应用的或发展中的大量药物的基础。1 9 8 4 1 9 9 5 年，被f d a 批准生产的新药经 统计：6 4 种新抗菌药中，7 8 来自于天然产物或其半成品：3 1 种抗癌新药中， 6 1 来自于天然产物，抗高血压新药中，4 8 是以天然药物为模型合成的【1 1 。 天然药物来源于植物、动物、虫类、鱼类、菌类等，但最主要的来源是植 物。目前为止，已知道的有治疗价值的植物有7 0 0 0 余种。 人们已经从药用植物中提取了许多具有独特药效的活性成分。例如，从红 豆杉树皮中提取抗癌药物紫杉醇；从三尖杉属植物中分离出具有抗肿瘤活性的 三尖杉酯碱；从黄芩，大豆中提取抗肿瘤的黄芩黄酮和大豆异黄酮；从天花粉 中分离得到天花粉素等。这些提取的有效成分经药效、毒理、l 临床等一系列研 究，已经成为纯化化学成分类的新药，为人类健康事业的发展作出了巨大贡献。 我国是一个药用植物资源非常丰富的国家，而且中草药的使用在我国已有 2 0 0 0 多年的历史。关于中草药的药理、药效、制备及使用方法等方面的著作早 已有之，如神农本草经本草纲目等，都是我国传统医药的经典，因此积 极开发我国丰富的药用植物资源，对宏扬我国的传统医药文化、促进人类的健 康，推进经济的发展都有着非常重要的意义。 银杏树是银杏科、银杏属植物，它的近缘植物均于第四纪冰川时期绝灭， 因此成为一科一属的特殊植物。它的生命很强，可活至上千年。国内正式鉴定 树龄的古银杏，最高为3 3 0 0 年，素有活化石之称。银杏集食用、药用、材用、 绿化环境为一体，被誉为“东方的圣者，堪称中国的国树”。早在4 千年前我们 的祖先就发现了银杏果仁的药用价值，其功效最早记载于神农本草经，具有 润肺、平喘、止咳等作用。但直到2 0 世纪6 0 年代，德国w i l l a m a rs c h a w a b e 首 四川丈学疆士学位论文 次从银杏叶中获得银杏提取物( e g b 7 6 1 ) ，并用于治疗心脑血管和神经系统疾 瘸，发现具有鼗著的疗效飚凭明显的毒副 乍用之后，潮内外才开始关注银杏时 芬爝价值酶歼笈，秩两攘怒了银杏时研究静蒸潮。谗多国家特裘爨疆方发这国 家相继对银杏叶的化学成分和药理作用进行了不断深入的研究，并融经开发出 蕊品、保健品、化妆品等多达上百种。据报道【2 j 银杏提取物( e g b 域g b e ) 成 荧黢澜最锤镑瓣徐毽品，纛荧藿氇是最受欢逮豹聂耱绦毽晶之一，缀套爨裁年 销售额在1 9 9 6 年已突破1 0 亿美元。我国缀然是最大的银杏咔生产因，拥有世 界7 0 以上的银杏资源。但是在银杏叶的研究开发利用上还落后于一些发达国 家。丸十年代以矮，嚣内逐濒出现了银奔制裁生产窝，僵存在产晶艨基不离， 收率低，秘霞不充分等阍禳。 另外，银密叶资源的可樽生性强，成长两至三年的银杏树，即可每年进行 采摘，不会存在象抗癌新药紫杉醇药源缺慧的问题。( 紫杉醇是从成长缓慢的红 鼹彩耱疫孛提取翡，每公厅予耱瘦哭麓爨淑5 0 1 0 0 m g 紫衫醇) 。 因此，基予以上的原因，本论文选取了银杏叶作为研究对象，对银杏叶有 效成分提取进行了基础理论研究，为银杏时药物的进一步开发，提简产品质量 提供霹靠懿理论事芨擐秘参考。 银杏时的翡用性具有一定的独特憔，巢些有效成分迄今尚未发现存在子其 他任何植物中。现将银杏叶的主要化学成分、药理作用以及有效成分的提取分 离方法作一综述。 1 1 银杏叶的主要化学成分 1 + 1 1 银杏黄酮类“” 锻套跨中熬黄酮类纯会物( f l a v o n i o d s ) 茸势为荧骥、双黄酮秘j l 茶素等三 粪化合物，共3 6 种，主要黻营的形式存禚，是银杏叶的主要药理成分之一，含 墩较高，在银浴叶中的含量随季节和地理变化较大( 0 2 2 7 ) 。 1 。1 。1 。1 铱杏黄酮：镶杏黄蘸豹饕元有7 耱，帮掇受素( q u e r e e t i n ) 出 奈綮( k a e m p f e r 0 1 ) 、异鼠李豢( i s o r h a n m e t i n ) 、杨梅皮索( m y r i c e t i n ) 、洋芹素 ( a p i g e n i n ) 、术犀草素( 1 u t e o l i n ) 、三粒小麦觜酮( t r i e e t i n ) ，前三种是其主要成分。 镟銮酵及冀提取穆( g b e ) 豹菝量控裁巾童三要棱测这兰耱黄黎萤元熬含量，其 露j 雏文学联+ ：学位谂支 结构如下所示 r ll b 幽祭豢 |辩 擞痰豢o h 珏 辩甄举索o c i - t 势子式 e 棚 o ( b e ”鞋l a 0 e 6 h n o 焚鞭萤未癸蠢：津筹綮孕蔫萄禧蛰，本潭攀寨。一饕鏊耱替，糖瓣震素_ 3 葡 餐糖替毒鼠窜糖蜚，3 学基杨耩瘦豢，3 葡萄耱一6 一最攀耱蛰，槲瘦素3 簸 夺耱蛰，槲波素3 。麓萄耱赞，槲皮索。一靛孪糖矗，葡萄糠替，槲艘素。3 葡萄辍 矗鬣攀耱蓊，爨受豢3 m 镶骜糖2 ，6 二藏李耱骜，出祭索o 。簸李瓣2 。篱骜蕤曹， 出奈豢* 3 * 麓鹭糖6 ，藏零糖营，由奈索- 3 * 蔼鹫糠，二鬣牵耱，舅鬣李素3 * 葡萄糖谤，搀鼠李索，3 硼鹚糖一6 二鼠攀糖蒋，辨蔽攀素3 獭萄糖2 ，6 二鼠誉 糖赘。舞鹜糖基上遥连按露褒桂蕺基，筵5 耱：檄浚素1 3 飘零麟矗( 6 对羟萋* 菠宴0 搂菠酝 蘩麓耱营， 垂紊素1 3 - 鼠零棼* 2 一瓣羟菱。爱戴凝疫熬) 麓毯 耱替，橼瘦繁3 鬣枣耱+ 羚( 6 ，对羟萋+ 葳戴。援蔽簸。麓饕赣) ，7 - 麓黼耱瞢，撇残 索3 。鼠孪糖，2 ( 6 。对葡黼糖氧基反试惟皮酰) * 黼萄糖营，山条繁一3 一鼠李糖 。2 ( 6 对麓毯糖氧基反式靠e 受醮) 蔼凝糖管。麓寒逐渐又发现了一些瓶的银鸯 黄醺1 5 l ，使镦杏背中的絷麓秘类不断煺黧。 1 t 1 2 双黄粼：镶套时中黔载黄戮爨魏蹲铃子黄黎母搜遴避c - c 糖 浆套嚣戏懿一类镶鸯貔，一共6 稀，辩锻密豢( g i n k g e t i n ) 、雾壤杏豢 ( i s o g e n k g e t i n ) 、禚箍移溅黄醚( a m e n t o f l a v o n e ) 、去甲银香取黄凝( b i l o b e t i a ) 、 5 甲裁蒸蠹甲银鸯双黄嗣( 5 一m e t h o x y b i l o b e t i n ) ，如下所暴： 3 四 大学硕、i 学位论空 r l 银杏素 c h 3 薯壤奁素 c h 3 穗花杉取黄剽 h 去甲银杏双黄酮c 金钱松双黄酮吣 5 。牮氧基去学羧鸯霞羹黎a 3 r 3 h 翻3 h h c h 3 珏 r 吐 h h h h h o a h 1 1 1 3 儿茶索类：银杏叶中的儿茶索类化合物有6 种，l i l u k 茶索( c a t e c h i n ) 、 袭j l 茶素( e p i c a t e c h i n ) 、没食孑酸凡茶索( g a u o c a t e c h i n ) 、表没食予骏，l 茶索 ( e p i g a l l o c a t e c h i n ) 、4 ，8 ”一儿茶索没食子j b 茶素( 4 ，8 ”一 c a t e c h i n g a l l o c a t e c h i n ) 和4 ，8 ”一没食子儿茶綮没食子儿茶索( 4 ，8 ” 一g a l l o c a t e c h i n g a l l o c a t e c h i n ) 。 1 1 2 银杏内酯 银杏内酯也是银杏叶中一类重要的活性成分，在锻杏叶中的含擞变化也较 大( o 。艇1 1 ) 。镶杏蠹貉共嘉六秘：基栗蠹貉嚣嚣( b i l o b a l i d e ) 、镊鸯疼囊 a ( g a ) 、银香内髂b ( g b ) 、锻杏内酯c ( g o 、银杏内醑m ( g m ) 、锻鸯内酯j ( g j ) ( g i n k g o l i d ea 、g i n k g o l i d eb 、g i n k g o l i d ec 、g i n k g o l i d em 、g i n k g o l i d ej ) 。自 聚内酯是r 。t m a j o r 于1 9 6 7 年和w e i n g e s k ，1 9 6 9 年分裹褥到的1 3 j ，属倍半萜 魂鬻。g a 、g b 、g c 、g m 、g j 曳二藉内蘸化会耱。1 9 6 7 霉m a k a n i s h ，k 、硅 m a m y 锄a 和o k a b ek 1 6 1 镣人分离和确定了g a 、g b 、g c 、g m 的结构，1 9 8 7 年德国的w e i n g e s 小组分离得到g 】。锻杏内酯为刚饿笼状的立体结构，均具 蠢天然产物中第见懿教丁蒸。锾杏内酯豹分子结稳热下掰示： 4 p籼磐 髟 肘吣h h h吼珏 四川大学硕士学位论文 g i n k g o l i d ea g i n k g o l i d eb g i n k g o l i d ec g i n k g o l i d em g i n k g o l i d ej b i l o b a l i d e 1 1 3 有机酸类m 。1 银杏叶中含有脂肪酸、羟基酸、莽草酸、氨基酸及6 羟基犬尿喹啉酸( 6 h k a ) ( 6 - h y d r o x y k y n u r e n i ca c i d ) 等。其中6 一h k a 是广普中枢神经氨基酸拮 抗剂，能降低脑缺氧，是银杏叶提取物中一种比较重要的生物活性成分。 1 3 4 酚酸、烷基酚及烷基酚酸类啪 银杏叶中酚酸类( p h e n o l i ca c i d s ) 主要有7 种，即原儿茶酸( p r o t o c a t e e h u i c a c i d ) 、p - 羟基苯酸( p h y d r o c y b e n z o i ca c i d ) 、香草酸( v a n i l l i ca c i d ) 、咖啡酸( c a f f e i c a c i d ) 、p - 香豆酸( p - c o u m a r i ca c i d ) 、阿魏酸( f e r u l i ca c i d ) 、绿原酸( c h l o r o g c n i c 。 烷基酚及烷基酚酸属于长链苯酚类化合物，目前所说的银杏酸主要指这类 化合物，其中有白果酸( g i n k g o l i ca c i d ) 、氢化白果酸( h y d r o g i n k g o l i ca c i d ) 、银杏 酚( b i l o b 0 1 ) 、白果酚( g i n k 9 0 1 ) 。这些成分可能是银杏叶提取物中毒副作用成分。 另外4 一甲氧基吡哆醇( 4 o m c t h m y l p y r i d o x i n e ，m p n ) 是白果的主要毒性成 分【9 j ，也存在于银杏叶中。 1 1 5 其他成分 银杏叶中还含有一种类酯化合物聚异戊烯醇( p o l y p r e n o l s ) 【1 0 l ，这类化 合物广泛存在于哺乳动物的肝脏、胰脏和肾脏等器官中，对维持肝功能，促进 ；h h 叫伽州：h 叫叫叫hf艮叫叫叫h 州 四川丈学颟士学位论文 造血功能起着重要作用，是一类值得引起重视的生物活性成分。银杏叶中挥发 憋袋分撂掇道f n t 毒六十多转，主要寿十六酸、雪松藏、6 ，l o ，1 4 一三翠基- 2 一十五酮、 邻苯二甲酸丁醇异丁醇= 酯等。此外，银杏时中含脊多种营养成分：蛋自质、 多糖、维生索c 、胡萝b 潦、维生索e 及矿质元素铸。 。2 锿鸯盼攫取物的蓊灌作用 中国药典2 0 0 0 版收载，银杏叶味甘、苦涩平，归心肺缀；功能主治： 敛肺、平喘、活血化瘀、止痛，用于肺虚咳喘，冠心病、心绞痛、高血脂。银 餐疆取耪豹活牲痰分，麦骚是黄酮戴炎秘镊杏内熬类。在旗痰一t 锻杏提取貔圭 疆用于预防、治疗高血脂、心脏病、心肌梗塞等疾瘸；在欧美被广泛地用予掇 高记忆力，预防和治疗老年痴呆症“3 。 ，2 。1 清豫翻邃蓦、装氧像粒作霭 许多疾瘸如衰老、突变、肿瘤、变态反应、动脉粥样、硬化蹲都与自由藻 有关。研究淡明银杏提取物具有清除自由基和抗脂质过氧化的作用f l s 在不周 笈痤系绞中麓入不霹浓凌g b e ，毒搜o h 转走菲囊囊熬产凌，宅貔瀵滁薅竭方式 与尿酸的抗岛由基作用相似”“”3 。g b e 述可对柔眈黧与肝微粒体p - 4 5 0 温育产 生的自由基柯抑制作用，减少脂质过飘化物丙二醛m d a 的产生，抑制c u 2 + 介辱 入低密度脂缀自氧化修饰“。兰翘等“”研究表明银农时提取液对肢体缺血再灌 注损伤嚣髓藤宥傈护佟麓，缺矗再灌滚损伤主要筏褥灌注辩謇自麓过量导致媵 结构脂质过飘化和膜通避性增高等原因造成集体损伤加重。银杏叶提取物也能 消除氧化氮瞄。1 。韩京艳等”研究表明，银杏提取物的抗氧作用的童要活性成分 蹩镊套惑荑嗣，镶杏蠹戆哭毒褒较裹浓发越方有一定戆撬氧潘链。 1 2 2 改善心脑血管循环、对脑及其它缒织缺血的保护 据有关报道“，从镊奔时中提取爨熬黄酮类化食物翔于骡鼠瘸体心赃灌流， 疆号；莛嚣菝巍管扩张，弗瓣大鼠君黢纛管又扩张豫瘸。大裁量秘躲注辩，轭使 豚鼠及家兔的血压降低，使大鼠血压辍度升高。银沓叶的乙醇提敬物母液( 含 黄酮类物质) 对兔耳血的扩张作用不明照，但能对抗肾上腺所致的血管收缩， 势量瑶盘警扩张，盘滚囊豢萋溪热。渡黩经等嘲擐邀锻杏跨辩安验冬鬣映甄弱 6 四川大学硕士学位论文 防护作用，实验结果表明e g b 7 6 1 可明显延长双侧总动脉结扎导致急性脑缺血小 鼠的存活时间，显著降低小鼠脑缺血再灌注时脑组织谷光苷肽过氧化物酶和 n 矿k a t p 酶活性的抑制，预先给予e g b 可减轻海马缺血再灌注后的亚细胞结构 损伤。李胜等o ”报道银杏叶提取物能降低脑缺血区及血浆中的内皮素浓度，减 小脑梗塞范围和脑水肿体积。闵蜴等o “报道银杏酮酯能使冠状动脉结扎狗的心 肌缺血程度明显降低，心肌缺血范围缩小作用强度与剂量正相关，随剂量增加， 梗塞范围显著减少，能使正常心肌组织耗氧量产生剂量相关地下降，提示其可 能通过降低耗氧产生心肌保护作用。o y a m a ，y 等3 也研究表明银杏提取物对大 脑缺血的保护是因为银杏酮酯能降低氧化代谢。严丽荣。7 3 等通过临床观察认为 银杏叶提取物的用途可能是抑制血小板凝聚和扩张血管，由此扩张冠状动脉及 增加脑血管的供血，防止冠状动脉和脑血管的血栓形成，对心脑血管有良好的 保护作用。 1 2 3 血小板活化因子( p f ) 桔抗剂“”2 ” p a f 是迄今发现的最有效的血小板凝聚诱导剂，与许多疾病的发生发展有 着密切的关系。银杏内酯特别是银杏内酯b 可剂量依赖性地清除p a f 所引起的 血小板凝聚作用，从而防止血栓形成，而对由二磷酸酰苷、花生四烯酸、胶原、 肾上腺素诱导的血小板聚集无作用。大量活体实验证实了银杏内酯能阻止诸如 兔、鼠的血小板凝聚作用。 1 2 4 对中枢神经系统作用 银杏叶提取物能影响神经递质生物胺的摄入，高浓度的e g b 能抑制去甲肾 上腺素( n e ) 、多巴胺( d a ) 和5 一羟色胺( 5 - h t ) 进入大鼠脑内突触体丰富的 部位汹1 ；r a m a s s a m y 等啪1 研究证明e g b 在缓解羟色胺作用方面有双重作用，并 且发现黄酮苷提取部位和槲皮素为活性成分，萜内酯成分无关。银杏叶提取物 具有保护神经元损伤的作用。n i 等o o 研究了e g b 对氧化应激反应诱导的小脑神 经元细胞凋亡的影响，将神经元细胞暴露在羟自由基中，预先用e g b 处理的神 经元死亡率降低；陈维军等o ”研究表明银杏内酯有保护超大剂量谷氨酸、氰酸 盐引起的海马神经元损伤的作用，提高神经细胞生存率，而海马区m 一胆碱能系 统地兴奋是学习记忆和意识的基础。e g b 有恢复由衰老诱导的神经递质受体结 器疆丈学壤士学靛论交 合降低的作用，能有效治疗大脑皮质功能轻度障碍殿较重型老年痴呆。b a r 等” 以蜜慰剂对照粳盲稠醚钒的牾藤试验，译嵇了e g b 农治疗阿二次海默癞或多发 梗寨幢痴聚霾方嚣瓣跨效搜移安全憨，绐聚患者瓣粥半年或年e g b ，大多数 亵铡豹试熟鞠毒圭会霉鸯鄙鸯了臻显掇裹，瑟虽没蠢浚显豹蘩终瘸。 2 。5 蒸宅佟粥 锻杏叶提取物还其有消炎，灭菌的作用。“。银杏叶还具脊承融的功效。“， y o u n gj 等”“研究表明承搬性来自于锻杏内黪。此雒，银杏时攫取物还具有镁 黪挠坏盘羧竣登诱导魏褪遥鼷搂害8 8 ，鹾及流黪瘗戆终耀。 1 3 用于哭然产物分离制备的材料 天然产物分离提取麴方法很多，主罄浆用有机溶粼萃墩法朔德谱分离法， 爨j 霪一个多鬣纪静发藏，谯谱分意方法或麓了天然产携分离鹩最黧要懿手霰。 憝饕秘学技求的发羼，凝袋术、瑟设备兹不叛蹬瑗，纯学工 蕈畿探索出了谗多 耩密、准确翁、薪豹分离方法。分离乎段的改避，努离方法魏镧新，戒为分褥 工终蠹豹一个重要工 馨。矜离方法静磷究魄鼗疆蓦分离糖辩豹磷究嚣发，翔簸 亿锱、磋胶、以硅胶为麓艨豹键合裰、凝胶、离予交换树旨张大张树脂等。一 种新材料的成用，不仅铘以分离天然产物的新物质，而且可以用求分离过去凭 法分离的许多窳溶链的微爨成分。本繁就蠲予天然产秘努离豹耢誊尊佟一壤述。 1 3 + 1 硅股 色谱硅胶为一多空孔物质，由于破胶禚性质、机械强度、分离效果等方面 凝露鼗势，悉基徐藏，瓣藏在色谱分离巾被广泛雉疆嚣分亵毒季斟。可以终为掇 体t 耀予裁器键台霹定穰，褥键食露定鞠在识谱分离审起着十分熬瓣黔俸熏。麓 建羧穆天然产秘熬分离溪辩豹占了6 0 7 0 。毽由于穗荻豹络秘褥 垂，辍髑了 穗胶p h 傻髑范固，瀚潜融子硅驳垂鲁强驳戮褴使缀多纯含物豹蟓撼遑影响分离 缝菠及一些稼含耪被缣懿巍柱上不荔被浚麟，添魏，硅狡努蕊的缝度不藏，藏 不适用与工业化的要求。 ，3 + 2 蒸链镂 8 叫川_ 夫学硕l 学位论文 由氧化铝直接在高温下脱水而得。氧化铝带碱性，常用于植物中生物碱的 分离。由于氧化铝可与酮、醛、酯等化合物发生次级反应，因此，不适宜于上 述物质的分离。 1 33 活性炭 活性炭是分离水溶性物质的主要填料之一，对植物中的某些苷类、糖类及 氨基酸等成分具有一定的分离效果，可大量用于制备性分离且价格便宜。 1 3 4 离子交换树脂 离子交换树脂是一种不溶性的高分子化合物，其分子具有解离性离子交换 基团。选用不同的离子交换树脂可将植物中那些在水中具有一定溶解度的酸、 碱与两性成分分开如生物碱、有机酸类和酚类化合物、咖啡因等。离子交换树 脂还广泛用于分离生物分子如氨基酸、蛋白质、酶和多糖。 1 3 5 凝胶 凝胶是具有许多空隙的网状结构的固体，有分子筛的性质。由于此填料在 分离过程中不会改变生物大分子敏感的三维结构，因此使用于生物大分子如蛋 白质、核酸等的分离。 1 3 6 聚酰胺 聚酰胺是通过酰胺基聚合成的类高分子化合物，分予中含有丰富的酰胺 基，可与酚类、酸类、酯类、硝基化合物形成氢键，使之与不能形成氢键的化 合物分离。由于聚酰胺分子中既有非极性的脂肪键，又有极性的酰胺基团，所 以，既可以作为反相固定相又可以作为正相固定相。除了能分离上述化合物外， 还可以分离萜类、甾体、生物碱及糖类。 1 3 7 吸附树脂【3 9 4 0 l 吸附树脂通常也被叫做大孔吸附树脂。是一类具有大孔结构的高分子吸附 剂，出现于6 0 年代，所谓大孔树脂仅仅相对于一般凝胶树脂而言。大孔吸附树 脂按照单体的基本结构可大致分为非极性、中极性、极性三类。吸附树脂在天 嚣蹦大学磺 掌证论文 然产物有效成分提取中的应用越来越彩，不过目前应用范围主要集中在皂苷、 黄酮、生物碱及其它具有定极性的成分1 4 1 “。大孔吸附树脂吸附容量大，稳 定牲离，哥有效建暖舔葵鸯不嚣蠢二学羧缓鹣各类耪瀵，往往弱瓣矮蠢分离秘浓 缩的双重功能。因此，越来越受到药物分离分析工作者的重视。可以预测，随 着新的大孔树脂的合成，大孔吸附树脂将成为天然产物有效成分分离的最主鼹 豹分离填瓣。 1 4 银杏黄酮类化合物的提取分离概况 目前市场上的银杏提取物主要分为三类：一是锻杏提取物g b e ，是指含多 耱镶杏活瞧袋分戆混合耱，鏊蓑嚣舔上公诀戆g b e 标准蹩s c h w a b e 公司郦1 掇 出的黄酮苷含量2 4 、锻杏内酯含爨6 、银杏酚敬5 p p m ；二是银杏内酯， 银杏内酯类种类少，是制取单一有效成分银杏新药的主要方向；三是银杏黄酮 类，以银杏焚酮营戆含爨为撩耩。几乎耩毒戆厂家郝是垂绕着如 霉提蔫黄骣癸 化合物和镶密内酯类的含爨来增强竞争力。 银杏黄酮营的初提方法主要有水没提法”“3 、肖机溶剂提取法。水浸提法 成本低，产品安全，无环境污染，但照该法浸出枣低，糖类和鞣质等水溶性杂 矮墙翻，侵g b e 豹迸一疹精翻霭难。蠢辘溶裁提取法楚重内乡 最鬻瘸静方法， 国内一般采用6 0 7 0 的乙醇水溶液回流萃取；国外主要采用6 0 的丙酮或乙醇 圊流提取。 进一步精铡主要有爨祭路线：液一波萃取法，吸瓣一洗驻法。滚滚萃取法程 国外已经有了很成熟的工装，国内也裔采用此方法的。国外专剃文献报道液一 液萃取法主骚有醇( 酮) 没提一卤代烃脱脂( 或硅藻土过滤) 一酮铵盐萃取法， 酮类提取一氨水沉淀一混合潮萃取法，酮炎提取一铅盐沉淀一酮类萃取，以及酮( 醇) 浸摇一丁酪擎苯萃取法。滚滚萃取遮舞往熹，g b el | 殳率熹，设餐麓攀，毽楚窃 在有机溶剂残留、成本较高，污染严爨和对人体、环境有一定影响等问题。 吸附一洗脱法相对液液萃取操作简单，溶剂损耗少，污染小。所用到的吸附 裁骞大魏吸瓣撼骚、硅羧“”、疆瞧炭3 、聚聚骧等，葵串鞋聚酸鼗樾籍窝丈魏 吸附树脂用于锻杏黄酮的提取研究为烹。v a nb e e k ，t a 等“”报道在用h p l c 分 离检测银杏内酯之前，用聚酰胺脱银沓黄酮类酚性化合物。王情红等3 将聚酰 胶涂装在硅藻上，用予锻杏黄酮熬分离嚣，利用分光光疫法测定，褥裂黄酮 四川大学硕七学位论文 1 5 本课题的研究意义、内容及主要方法 吸附树脂在中草药成分精制纯化中的应用逐年增加，呈现良好的发展趋 势。吸附树脂具有吸附选择性，吸附容量大，稳定性高特点，而且同时具有分 离和浓缩的双重功能。尽管吸附树脂已经用于多种中草药成分的精制和纯化， 但是，吸附树脂纯化技术应用于天然产物提取的时间相对较短，相关基础研究 较薄弱等原因，在实际应用中还存在一些问题，很少有人进行较系统的基础理 论研究。 另一方面银杏叶活性成分的提取是天然药物研究的一个热点，其中银杏黄 酮昔是银杏提取物的主要活性成分，而且含量丰富。那么选择以银杏黄酮苷为 对象，研究其在吸附树脂上的吸附解吸行为具有重要的实际意义。目前，吸附 树脂在银杏黄酮苷提取的许多研究中，通常要么是利用几种树脂进行简单的比 较，筛选出一种较好的树脂，而未见从理论上进行深入系统的分析研究；要么 是对一种树脂进行性能或工艺方面的研究。因此，本文选取应用于银杏黄酮苷 提取效果较好，结构具有代表性的五种树脂，对银杏黄酮苷的吸附解吸行为进 行了较为全面系统、基础的研究，讨论了银杏黄酮苷在具有不同化学和物理结 构的吸附树脂上的吸附解吸机理和吸附影响因素( 如温度、p h ) 。最终目的是为 了生产应用及解决实际问题，亦即本论文研究也就是从理论上指导银杏黄酮类 成分的分离提取，以便获得更好的产品，为进一步研究、合成适合于银杏黄酮 苷分离提纯的吸附树脂提供可靠的理论和实验结果。 若对银杏黄酮苷的吸附解吸行为进行系统的研究，就必须选取多种不同的 树脂才说服力强、结果可靠。但是影响吸附树脂分离提纯的因素甚多，即不仅 与树脂的化学物理结构有关，还与吸附解吸溶液、操作条件等有着密切关系， 不可能对每一种树脂都进行各项因素的考察，那么怎样合理地进行条件选择或 寻求简便合理的方法来研究是本课题的一个关键。本论文采用全面的静态吸附 解吸研究和现代分析技术，详细探讨了吸附解吸机理；再采用常规的色谱分离