肠道杆菌.ppt

吾尔麦提汗微生物学教研室,肠道杆菌Enterobacteriaceae,.,目的要求,1、掌握：肠道杆菌的共性；大肠杆菌、志贺菌属、沙门菌属的致病因素、所致疾病；肥达氏反应的原理及结果分析。2、熟悉：大肠杆菌、志贺菌属、沙门菌属的常见生化反应、标本采集及注意事项、微生物学检查；大肠杆菌在卫生细菌学检查中的意义；变形杆菌的生物学特性、致病性、外斐氏反应。,.,肠杆菌科细菌是一群生物性状相似的革兰氏阴性杆菌，常寄居于人和动物肠道内，也存在与土壤、水和腐物中。肠杆菌科细菌易于培养，繁殖快。有些种如大肠杆菌是研究遗传学和分子生物学的重要材料。种类繁多，至少有30多菌属，120以上的菌种。其中有正常菌群，也有外源性致病菌，大多数属于正常菌群。,.,与医学有关的肠道杆菌,.,5,共同特性,1、G-，杆菌，无芽胞，多数有鞭毛、菌毛，少数有荚膜。2、营养要求低，普通平板上生长良好。3、生化反应活泼鉴别肠道致病菌与非致病菌乳糖发酵试验肠道致病菌阴性，不分解乳糖肠道非致病菌阳性，分解乳糖,.,6,共同特性,荚膜或包膜(K)抗原,4、抗原构造：复杂。（1）O抗原：菌体抗原，为胞壁脂多糖，100数小时不被破坏。为S-R型变异。（2）H抗原：存在于鞭毛中的蛋白质，不耐热，6030min破坏。菌体抗原外露，为HO变异。（3）K抗原（荚膜抗原）：位于O抗原外，多糖类物质，阻抑O凝集。（4）共同抗原（ECA）：存在于肠杆菌科细菌表面，为氨基糖聚合物。,.,第一节埃希菌属Escherich,埃希菌属包括5个种，临床最常见的是大肠埃希菌。大肠埃希菌俗称大肠杆菌，大多数菌株是人类和动物肠道正常菌群。,.,形态与染色：为革兰阴性短杆菌，1.03.0m0.40.7m。多数有周鞭毛，能运动。有菌毛、荚膜及微荚膜，无芽孢。培养特性：兼性厌氧菌，营养要求不高，在普通营养肉汤中呈浑浊生长。普通营养琼脂上呈灰白色的光滑型菌落。血琼脂平板上，少数菌株产生溶血环。SS培养基上多数不生长，少数生长者因分解乳糖呈红色，与志贺杆菌，沙门菌等致病菌易于区别。抗原结构：有O,H和K三种抗原。,生物学形状,.,生物学形状,1.能发酵葡萄糖等多种糖类，产酸产气。2.典型大肠杆菌IMViC试验为吲哚试验甲基红试验VP实验枸橼酸盐利用试验,3.硫化氢实验阴性。4.尿素分解实验阴性。,.,吲哚试验,（）,（+）,色氨酸,吲哚（靛基质）,玫瑰吲哚（红色）,+二甲基氨基苯甲醛,大肠杆菌，变形杆菌，霍乱弧菌,产气杆菌,.,甲基红试验,葡萄糖,丙酮酸,乙酰甲基甲醇,pH值5.4,（）,（+）,（指示剂红色）,（指示剂黄色）,.,VP试验,葡萄糖,丙酮酸,乙酰甲基甲醇,二乙酰,红色,OH-,+含胍基化合物,（）,（+）,.,枸橼酸盐利用试验,（+）,（）,枸橼酸盐（碳源）,碳酸盐,铵盐（氮源）,氨,培养基变为碱性,蓝色,.,致病性,致病物质粘附因子：是菌毛，能使细菌紧密粘附在泌尿道和肠道的细胞上，避免因排尿时尿液的冲洗和肠道的蠕动等原因而被排出体外。内毒素：主要引起高热、休克等。外毒素：大肠杆菌能产多种的外毒素，包括志贺毒素,耐热肠毒素,不耐热肠毒素等。,.,所致疾病肠道外感染：包括泌尿生殖道、胆囊、腹腔以及血流，主要由正常菌群条件致病，大肠埃希菌是导致此类感染的常见病原菌。如尿道炎、膀胱炎、肾盂肾炎、腹膜炎、胆囊炎、婴儿和老年人败血症及新生儿脑膜炎等。引起泌尿道感染的大肠埃希菌多来于结肠，污染尿道后，上行至膀胱、肾脏和前列腺，引起上行性感染。女性尿道短而宽，故尿道感染比男人多见。,.,肠产毒型大肠埃希菌（ETEC）：是5岁以下儿童和旅游者腹泻的主要病原菌。污染的水源在疾病传播中有重要的作用。临床症状为从轻度腹泻至霍乱样腹泻（水样泻）。致病物质是肠毒素和粘附素（菌毛）。,腹泻某些血清型可引起人类腹泻，主要由致病性大肠杆菌和条件致病性大肠杆菌引起。根据其致病机制不同，主要有5种类型。,.,肠致病型大肠埃希菌（EPEC）：主要引起婴儿腹泻，严重可致死。不产生肠毒素，无侵袭力，只是在十二指肠、空场上的粘膜表面大量繁殖，粘附于微绒毛，使其被破坏，导致腹泻。肠侵袭型大肠埃希菌（EIEC）：较少见，主要侵犯较大儿童和大人，所致疾病很像细菌痢，腹泻呈脓血便。此类大肠杆菌不产生毒素，它能侵入肠粘膜上皮细胞并在其中大量繁殖，导致组织破坏和炎症反应。,.,肠出血型大肠埃希菌（EHEC）：为出血性结肠炎和溶血性尿毒综合征的病原体。致病因子有菌毛和志贺样毒素。临床特征为严重的腹痛、痉挛，反复出血性腹泻，伴发热、呕吐等。严重者可发展为急性肾衰竭。1996年日本大阪流行，感染一万人以上，死亡11人，5岁以下儿童易感染。肠集聚型大肠埃希菌（EAggEC）：引起儿童持续性腹泻，脱水，偶尔有血便。不侵袭细胞，可产生肠集聚耐热毒素和粘附素。,.,19,三、微生物学检查,1、肠外感染：标本采集：中段尿、血液、脓液、脑脊液。直接涂片：涂片革兰染色镜检分离培养鉴定：标本肉汤血平板IMViC试验(+-)2、肠内感染粪便或排泄物鉴别培养基鉴定肠毒素及血清型检查,.,防止原则,不吃生的或加热不彻底的牛奶、肉等动物性食品。不吃不干净的水果、蔬菜。剩余饭菜食用前要彻底加热。防止食品生熟交叉污染。养成良好的个人卫生习惯,饭前便后洗手。食品加工、生产企业特别是餐饮业应严格保证食品加工、运输及销售的安全性。尿路插管和膀胱检查应严格无菌操作。尿路感染者应多喝水，增加尿量。我国卫生标准规定，在每升饮水中的大肠杆菌属不得超过3个，每100ml汽水、果汁中的大肠杆菌数不得超过5个。,.,第二节志贺菌属shigella,志贺菌属（Shigella）是人类细菌性痢疾的病原菌。细菌性痢疾是一种消化道传播型疾病，主要流行于发展中国家。,.,形态与染色：革兰阴性短小杆菌，长23m宽0.50.7m，无荚膜，无芽胞，无鞭毛，有菌毛。培养特性：需氧或兼性厌氧，液体培养基中呈浑浊生长，在普通琼脂平板和SS培养基上形成直径2mm左右的中等大小、半透明的光滑型菌落，宋内志贺菌可形成扁平、粗糙的菌落。抗原结构：志贺菌属主要有O抗原而无H抗原，个别菌型及新分离菌株有K抗原。O抗原是分类的依据，借此将志贺菌属分为4群（种）。,生物学形状,.,痢疾志贺菌,福氏志贺菌,鲍氏志贺菌,宋内志贺菌,.,致病性,致病因子菌毛：菌毛粘附于肠粘膜上皮细胞，诱导细胞内吞。内毒素：破坏肠粘膜，增加肠壁通透性，导致腹痛，腹泻，粘液脓血便。外毒素：即志贺毒素，其具有三种生物活性，即肠毒素性，细胞毒性和神经毒性。,.,所致疾病细菌性痢疾-菌痢传染源：病人、带菌者。传染途径：粪-口。1.急性菌痢：起病急，常有发热、腹痛、腹泻次数由10多次增至数十次。由水样腹泻转变成粘液脓血便。2.中毒性菌痢：多见于儿童，死亡率很高。3.慢性菌痢：急性菌痢治疗不彻底，病程超过2个月，反复发作。传染源为病人和带菌者，经粪口传播。,.,26,三、微生物学检查,标本取脓血粘便，新鲜，不与尿混合，立即送检选择或鉴别培养基生化反应鉴定血清学鉴定。急性中毒型菌痢取肛门拭子。,.,防治原则,应采取以切断传播途径为主的综合措施。1.控制传染源：隔离治疗病人，消化道隔离至临床症状消失、粪便培养2次阴性。2.切断传播途径：三管一灭（饮食，饮水，卫生，防蝇灭蝇）。3.保护易感者：口服痢疾活菌苗，如F2a型“依链株”。,.,第三节沙门菌属salmonella,沙门菌属是一群寄生在人类和动物肠道中的革兰氏阴性杆菌。沙门氏菌属有的专对人类致病，有的只对动物致病，也有对人和动物都致病。感染沙门氏菌的人或带菌者的粪便污染食品，可使人发生食物中毒。据统计在世界各国的种类细菌性食物中毒中，沙门氏菌引起的食物中毒常列榜首。我国内陆地区也以沙门氏菌为首位。,.,形态染色：直杆菌，0.51m2.04.0m。革兰氏阴性。通常运动(周生鞭毛)。培养特性：兼性厌氧。菌落直径一般24mm。营养要求不高，普通培可生长。抵抗力：沙门氏菌在水中能存活2-3周，粪便中可活1-2个月。对理化因素抵抗力较差，对一般消毒剂敏感。抗原：有O和H抗原，少数有Vi抗原。按照抗原组分异同，可分67种血清型（AZ)，每个血清型含一种或多种O抗原。,生物学性状,.,30,1、菌体抗原cellwallO（O抗原）脂多糖，稳定、耐热，特异性低，为沙门菌共有。2、鞭毛抗原flagellaH（H抗原）蛋白质，不稳定，不耐热，特异性高，可鉴别伤寒杆菌与副伤寒杆菌及副伤寒杆菌的分型。3、表面抗原capsularVi（Vi抗原）与毒性有关：抗吞噬作用，与致病性有关新分离菌才有,.,致病因子侵袭力：可能与该菌的特异O抗原或Vi抗原有关。细菌被吞噬细胞吞噬后不被消灭，在巨噬细胞中繁殖，由巨噬细胞携带至机体的深层部位。内毒素：可引起宿主发热、白细胞减少，大剂量时导致休克和中毒症状。肠毒素：个别产生肠毒素，其性质与肠产毒型大肠埃希菌（ETEC）类似。,致病性,.,1.肠热症：伤寒杆菌伤寒；甲、乙、丙型副伤寒杆菌副伤寒临床症状：持续高热、肝脾肿大、全身中毒症状、皮肤出现玫瑰疹。传染源：病人，带菌者传染途径：粪-口途径2.胃肠炎（食物中毒）：鼠伤寒杆菌，猪霍乱杆菌，肠炎杆菌等污染食物引起多为集体食物中毒细菌一般不入血潜伏期4-24h，呕吐，腹痛，腹泻，发热。,所致疾病,.,.,34,常由猪霍乱杆菌、丙型副伤寒、鼠伤寒及肠炎杆菌引起症状：进入血流-高热、寒战、厌食、贫血进入组织器官广泛感染，脑膜炎、骨髓炎、胆囊炎、肾盂肾炎、心内膜炎、,3、败血症,.,35,三、微生物学检查,病原菌检查：肠热症根据病程不同，取标本1W取血，1-3W取骨髓液，2W起粪便，3W起取尿液分离培养与鉴定血、骨髓液增菌SS培养基EMB鉴别培养基3724h无色半透明乳糖不发酵菌落双糖或三糖培养基生化反应玻片凝集试验,.,36,血清学诊断（肥达试验widaltest）,原理：已知抗原测未知抗体，定量凝集试验用已知的伤寒杆菌H抗原伤寒杆菌O抗原+患者血清甲、乙、丙型副伤寒杆菌H抗原定量凝集反应测定病人血清中相应抗体及其含量，以辅助诊断伤寒、副伤寒。（概念）,.,37,诊断标准：因为隐性感染者或接种过菌苗的正常人伤寒血清中一定量的抗体，所以肥达试验的凝集效价应超过正常范围才有诊断意义。,.,38,我国标准广州地区伤寒杆菌O1:801:160伤寒杆菌H1:1601:160甲型伤寒副杆菌H1:801:160乙型伤寒副杆菌H1:801:160,结果判断,若两次试验效价上升或超过4倍则更有意义,.,1消灭传染源。2切断传染途径。3提高机体抵抗力：主要指实施特异性预防，即注射伤寒、甲及乙型副伤寒三联菌苗，能提高人体对肠热症的免疫力，降低发病率。,防治原则,.,第四节其他杆菌属,一、变性杆菌属Proteus为革兰氏染色阴性、无芽胞、无荚膜、周身鞭毛、运动活泼、两端钝圆的小杆菌。菌体大小长0.40.6，宽1.03.0微米。兼性厌氧。致病因素有鞭毛、菌毛、内毒素、溶血毒素等。本属细菌中奇异变形杆菌proteusmirabilis引起的感染最为常见，其次是普通变形杆菌proteusvulgaris，为条件致病菌，在引起泌尿系统感染中这两种菌仅次于大肠埃希菌，医源性感染较多见，如留置导尿管、尿路堵塞、肠道细菌迁移等。,.,变性杆菌,.,外斐氏试验：变形杆菌X19、X2、Xk菌株与立克此体存在共同抗原，据此可用变形杆菌X19、X2、Xk菌株的菌体抗原作为已知抗原，与患者血清作凝集反应，以协助诊断立克此体感染性疾病，如斑疹伤寒等。,.,克雷伯氏菌属为直杆菌，直径0.31.0m，长0.66.0m。单个、成对或短链状排列。有荚膜。革兰氏阴性。不运动。兼性厌氧。生长在肉汁培养基上产生粘韧度不等的稍呈圆形有闪光的菌落。克雷伯菌属常见的是肺炎克雷伯菌，俗称肺炎杆菌。一般不致病，当宿主免疫力降低时，能引起呼吸道、泌尿道等感染，尤其易引起儿童肺炎，有时可导致严重的败血症、腹膜炎和脑膜炎等。常用头孢霉素治疗。,二、克雷伯菌属klebsie