内分泌系统和代谢动物模型.ppt

第十章内分泌系统和代谢性疾病动物模型,2019/12/10,吉林大学药学院,2,内分泌系统（endocrinesystem）1.内分泌腺器官（甲状腺、甲状旁腺、肾上腺、垂体、松果体）。2.内分泌组织（如胰岛、卵泡、黄体等）。3.散在于各系统或组织内的内分泌细胞（APUD细胞)。内分泌细胞的分泌物称激素（hormone）。,2019/12/10,吉林大学药学院,3,内分泌系统的作用示意图,2019/12/10,吉林大学药学院,4,当各种原因引起内分泌腺激素分泌不足时，由于下丘脑垂体靶器官之间的调节机制，通常可使体内激素水平保持在正常范围。当超过机体调节能力或调节机制异常时,机体激素水平失衡，激素分泌增多或减少，导致功能亢进或减退，使相应的靶组织或器官增生、肥大或萎缩。*不少内分泌系统和代谢性疾病目前为止尚无理想的动物模型。,第一节甲状腺疾病动物模型,2019/12/10,吉林大学药学院,6,甲状腺素的生理作用刺激细胞氧的消耗和物质的利用促进机体新陈代谢（消耗）促进组织分化、生长和发育成熟,2019/12/10,吉林大学药学院,7,甲状腺基本结构,甲状腺滤泡滤泡上皮：功能活跃时，上皮细胞增高呈低柱状，腔内胶质减少；反之，胶质增多上皮细胞扁平滤泡旁细胞胶质：甲状腺球蛋白,2019/12/10,吉林大学药学院,8,常见哺乳动物甲状腺组织结构,犬,人,大鼠,兔,小鼠,2019/12/10,吉林大学药学院,9,甲状腺素合成过程,合成甲状腺球蛋白,从血中摄取I-并将之活化,T3、T4,甲状腺球蛋白酪氨酸残基碘化、贮存,2019/12/10,吉林大学药学院,10,甲状腺的反馈调节,2019/12/10,吉林大学药学院,11,单纯性甲状腺肿甲状腺功能减退症模型甲状腺功能亢进模型,一、单纯性甲状腺肿,又称弥漫性非毒性甲状腺肿（diffusenontoxicgoiter）；因常为地方性分布，又名地方性甲状腺肿（endemicgoiter）。,2019/12/10,吉林大学药学院,13,2019/12/10,吉林大学药学院,14,症状一般无症状，后期可有颈部压迫感和吞咽困难等。后期多伴有甲状腺功能低下。,2019/12/10,吉林大学药学院,15,病理改变,根据发生、发展过程和病变特点，可分为三个时期：增生期胶质贮存期结节期,2019/12/10,吉林大学药学院,16,增生期病理改变,肉眼弥漫、对称性中度肿大，表面光滑。镜下滤泡上皮增生成立方或低柱状,伴小滤泡和小假乳头形成，胶质少，间质充血。,2019/12/10,吉林大学药学院,17,2019/12/10,吉林大学药学院,18,胶质贮存期病理改变,肉眼弥漫、对称性显著肿大，表面光滑，切面半透明胶冻状。镜下大部分滤泡上皮复旧变扁平，滤泡腔高度扩大，含大量胶质。,2019/12/10,吉林大学药学院,19,2019/12/10,吉林大学药学院,20,结节期病理改变,肉眼不对称结节状肿大，结节大小不一，切面可有出血、坏死、囊性变、钙化、疤痕等。镜下部分滤泡上皮呈柱状或乳头状增生，小滤泡形成；部分上皮复旧或萎缩，胶质堆积；间质纤维组织增生、间隔包绕形成大小不一的结节状病灶。,2019/12/10,吉林大学药学院,21,2019/12/10,吉林大学药学院,22,1.碘摄入不足2.碘及甲状腺素相对缺乏3.阻碍甲状腺合成物质4.碘摄入过多,-,甲状腺素分泌不足,TSH分泌增多,-,甲状腺滤泡上皮增生，摄碘功能加强,-,甲状腺球蛋白不能被碘化,堆积在滤泡,甲状腺肿大,发病机制,（一）他巴唑(甲巯咪唑)诱发甲状腺肿,2019/12/10,吉林大学药学院,24,*造模机制,甲状腺的功能受脑垂体前叶分泌的促甲状腺素（TSH）调节，而TSH的释放与体内甲状腺素的水平有关。当动物给予他巴唑、硫氧嘧啶等药物时，阻止甲状腺内酪氨酸碘化，抑制了甲状腺素（T4）的生物合成，体内甲状腺素含量减少，反馈刺激垂体前叶分泌大量TSH，使甲状腺肥大增生。,2019/12/10,吉林大学药学院,25,实验动物,雌性Wistar大鼠，体重80100g。,2019/12/10,吉林大学药学院,26,操作步骤,1.饮用含0.5mg%他巴唑（Tapazole，甲巯咪唑）的水溶液，共喂养90d。2.观察甲状腺重量和组织学、甲状腺碘含量、甲状腺过氧化酶活性及垂体甲状腺功能。,2019/12/10,吉林大学药学院,27,*结果,1.甲状腺绝对重量和相对重量（甲状腺重量/体重）明显增加。2.甲状腺滤泡弥漫性增生,多为胚胎性小滤泡。滤泡上皮细胞多为柱状，并有乳头状增生突入滤泡腔内，滤泡腔内缺乏胶质，有些滤泡呈细胞团，无滤泡腔。,2019/12/10,吉林大学药学院,28,2019/12/10,吉林大学药学院,29,3.甲状腺碘含量明显低于对照组。4.甲状腺过氧化酶活性高于对照组。5.血清T4、游离T4降低，TSH水平升高。,（二）丙基硫氧嘧啶诱发甲状腺肿,2019/12/10,吉林大学药学院,31,原理：同他巴唑。特点：腹腔注射（1mg/100g）给药，周期短，四周即可。,2019/12/10,吉林大学药学院,32,（三）缺碘性甲状腺肿模型,2019/12/10,吉林大学药学院,33,造模原理,缺碘甲状腺素分泌不足TSH分泌增多甲状腺滤泡上皮增生，胶质堆积甲状腺肿大,2019/12/10,吉林大学药学院,34,实验动物,体重50100gWistar大鼠。,2019/12/10,吉林大学药学院,35,用地方性甲状腺肿病区粮食配制的饲料喂饲动物，饮蒸馏水。饲料配方：小麦粉30%，玉米粉60%，红薯干粉10%。（饲料含碘量0.043g/kg)。大鼠正常碘日需要量约为0.15mg/kg，每只约30g；人一天需60g。,实验步骤,2019/12/10,吉林大学药学院,36,结果,3个月后可出现甲状腺肿。血清中总T4、FT4浓度降低，而总三碘甲状腺原氨酸（T3）、游离T3和TSH水平升高。,2019/12/10,吉林大学药学院,37,模型特点,本方法可用于复制缺碘性甲状腺肿和甲状腺功能减退大鼠模型，*适合于人类地方性甲状腺肿的研究。,2019/12/10,吉林大学药学院,38,（四）高氯酸钠诱发甲状腺肿模型,2019/12/10,吉林大学药学院,39,造模原理,碘是甲状腺合成甲状腺素的重要原料。大鼠饮用含高氯酸钠的饮水后可能由于高氯酸钠与碘离子竞争结合甲状腺上皮细胞的钠碘转运体*，使甲状腺摄碘功能障碍，影响了甲状腺素的生物合成，诱发甲状腺肿及甲状腺功能减退。,2019/12/10,吉林大学药学院,40,操作方法,大鼠饮用含8g/L高氯酸钠的自来水，对照组饮用自来水，共3个月。实验期间喂饲大鼠标准颗粒饲料/低碘饲料。,2019/12/10,吉林大学药学院,41,结果,造模成功的动物血清T3、T4含量明显低于对照组，血清TSH水平较对照组增高；甲状腺充血、肿大，甲状腺组织含碘量明显低于对照组。并表现出明显的甲状腺功能低下症状（生长发育严重障碍，体重明显减轻，呆滞，行动迟缓，反应迟钝，对拍击声无反应）。,2019/12/10,吉林大学药学院,42,模型评价,本实验采用动物饮用高氯酸钠的方法造成严重缺碘、甲状腺肿大及功能减低，方法简单易行。,二、甲状腺功能减退症,2019/12/10,吉林大学药学院,44,甲状腺功能减退症病因,甲状腺实质性病变：如外科切除甲状腺或放射线损伤甲状腺素合成障碍：长期缺碘或抗甲状腺药物治疗等垂体或下丘脑病变,2019/12/10,吉林大学药学院,45,甲状腺功能低下分类,克汀病幼年型甲减成年型甲减（粘液水肿）,2019/12/10,吉林大学药学院,46,克汀病（呆小症）,新生儿或幼儿时期甲状腺功能低下的表现，多见于地方性甲状腺肿病区。主要表现：大脑发育不全，智力低下,形似侏儒，颜貌愚钝，骨形成及成熟障碍。,2019/12/10,吉林大学药学院,47,2019/12/10,吉林大学药学院,48,粘液水肿,少年及成年人甲状腺功能低下的表现。病变特点：基础代谢率降低造成各器官功能降低，组织间隙中大量氨基多糖沉积而引起粘液水肿。临床表现：起初为怕冷、嗜睡、女性月经不规则，以后逐渐发展为动作、说话及思维减慢，出现粘液水肿。,2019/12/10,吉林大学药学院,49,克汀病模型-1（药物诱导）,实验动物：体重25g以上的小鼠雄雌比1:3。实验方法：确定妊娠后,从孕15天起改用含0.2%甲基硫氧嘧啶的饲料饲养，每窝保留6只仔鼠,仔鼠出生后第40天起改用普通饲料。?可否改用病区粮食喂饲,2019/12/10,吉林大学药学院,50,克汀病模型-2（手术切除）,实验动物：妊娠绵羊。实验方法：将妊娠107天以内胎羊的甲状腺切除。另一只胎羊进行假手术作为对照。待母羊足月分娩后观察羔羊的体格发育和行为能力。,2019/12/10,吉林大学药学院,51,甲状腺功能亢进简称甲亢（hyperthyroidism）,2019/12/10,吉林大学药学院,52,甲亢,系指由多种病因导致甲状腺激素分泌过多，引起以神经、循环、消化等系统兴奋性增高和代谢亢进为主要表现的一种临床综合征（甲状腺毒症）。好发于30-40岁，女性发病率高于男性的4倍以上。,2019/12/10,吉林大学药学院,53,甲亢的临床表现,甲状腺肿大。代谢增高、心悸、多汗、多食、消瘦。约1/3有突眼，又称突眼性甲状腺肿。,2019/12/10,吉林大学药学院,54,甲亢的病因和发病机制,遗传精神自身免疫相关甲亢病人血中球蛋白增高，并有多种抗甲状腺抗体，如甲状腺刺激抗体（作用于TSH受体），且常与其他自身免疫性疾病并存。,2019/12/10,吉林大学药学院,55,甲亢的病理变化,肉眼甲状腺弥漫对称增大，表面软且光滑，切面灰红呈分叶，间质少。,2019/12/10,吉林大学药学院,56,病理变化,光镜以滤泡增生为主要特征。滤泡大小不等，以小型居多。上皮增生呈高柱状，滤泡腔内胶质稀薄，周边胶质出现大小不一的上皮细胞吸收空泡。间质血管丰富、充血，淋巴细胞增生,甲亢动物模型,2019/12/10,吉林大学药学院,58,大鼠，体重100-250g。,实验动物,2019/12/10,吉林大学药学院,59,实验方法,1将L-三碘甲状腺原氨酸（L-T3）溶于生理盐水，每日腹腔注射50g/100g体重，连续注射7d以上。2将甲状腺激素（T4）溶于生理盐水，每日腹腔注射250g/100g体重，连续注射18d。3每天饮用0.0012%T4的水溶液，连续18d，可导致甲状腺功能亢进。4将干甲状腺激素片(160mg每鼠每日)混悬于饮水中，使大鼠自由饮完后再给普通饮用水，造模1周后开始给予受试药治疗。,2019/12/10,吉林大学药学院,60,实验结果,血中T3、T4水平升高，TSH降低，甲状腺重量减轻?。代谢指标升高,耗氧、体温、体重、饮水；肝脏DNA、RNA含量等；尿羟脯氨酸、尿素氮等,2019/12/10,吉林大学药学院,61,模型评价,*此模型可用于甲状腺功能亢进治疗学的研究，对病因和发病机制研究的帮助不大。,糖尿病（diabetesmellitus）,2019/12/10,吉林大学药学院,63,糖尿病是由于胰岛素缺乏或靶细胞对胰岛素敏感性降低而引起的代谢障碍，其主要特点是高血糖、糖尿,久病可引起多系统损害。是全球性常见病和多发病，患者占世界人口的3%。,2019/12/10,吉林大学药学院,64,糖尿病的临床特点是多饮、多尿、多食和体重减少（三多一少）。并发症包括酮症酸中毒、肢体坏疽、多发性神经炎、失明和肾功能衰竭等。,2019/12/10,吉林大学药学院,65,胰岛素依赖型（I型）非胰岛素依赖型（II型）特异性糖尿病妊娠糖尿病,糖尿病的分型,胰岛的正常结构,2019/12/10,吉林大学药学院,67,四种胰岛细胞,2019/12/10,吉林大学药学院,68,四种胰岛细胞,()细胞：占胰岛总细胞数的68%，分泌胰岛素,2019/12/10,吉林大学药学院,69,四种胰岛细胞,(A)细胞：占20%，分泌高血糖素，诱导激活肝磷酸化酶，使肝糖原分解,2019/12/10,吉林大学药学院,70,四种胰岛细胞,(D)细胞：占10%，分泌生长激素释放抑制因子，抑制细胞和细胞的功能,2019/12/10,吉林大学药学院,71,四种胰岛细胞,PP细胞：占2%,分散存在于胰岛和胰腺其他部位，分泌影响胃肠功能的多肽。,2019/12/10,吉林大学药学院,72,胰岛素的分泌与合成,胰岛素的合成和分泌主要受血糖水平的调节。此外，血液氨基酸和脂肪酸水平与血糖有协同刺激作用。长时间低水平释放，维持正常血糖基础水平。进食后短暂、快速高水平释放。,2019/12/10,吉林大学药学院,73,胰岛素对靶细胞的作用,胰岛素连接到胰岛素a受体，使受体磷酸化；从而导致一系列反应，包括蛋白质和DNA合成；合成代谢途径激活及分解代谢途径封闭。,2019/12/10,吉林大学药学院,74,胰岛素对靶细胞的作用,体内唯一的降血糖激素：促进组织细胞对葡萄糖的摄取和利用加速糖原的合成和抑制糖原的异生促进合成脂肪和蛋白质,2019/12/10,吉林大学药学院,75,糖尿病时胰岛的病理变化,I型早期为非特异性炎，继而胰岛B细胞颗粒脱失、空泡变性、坏死、消失，胰岛变小，数目减少，纤维组织增生、玻变。II型早期病变不明显，后期B细胞减少，常见胰岛淀粉样变性。,2019/12/10,吉林大学药学院,76,糖尿病动物模型制备,2019/12/10,吉林大学药学院,78,模型种类,复制糖尿病动物模型的方法很多，如胰腺切除、激素、损伤下丘脑、给予病毒、食物诱发和化学物质等，其中以最后一种模型使用较多。此外，还有自发性糖尿病动物模型（如BB大鼠、NOD小鼠、ob/ob小鼠、db/db小鼠等）。,一、1型糖尿病模型,2019/12/10,吉林大学药学院,80,*（一）链脲佐菌素（streptozotocin，STZ）诱发糖尿病模型,2019/12/10,吉林大学药学院,81,*造模原理,链脲佐菌素结构中的亚硝基脲具有细胞毒作用，去氧葡萄糖部分使之易于进入胰岛B细胞。STZ通过自由基（过氧化物和羟基）选择性损伤胰岛B细胞，从而造成胰岛素缺乏，诱发动物糖尿病。,2019/12/10,吉林大学药学院,82,实验动物,STZ可在大鼠、小鼠、犬和猴等动物引起糖尿病，较常用的实验动物为大鼠(180220g)和小鼠。,2019/12/10,吉林大学药学院,83,主要试剂,STZ，用冷的pH4.04.20.1mol/L的柠檬酸盐缓冲液配成2%的溶液（*现用现配）。,2019/12/10,吉林大学药学院,84,操作步骤,1.大鼠禁食1216h，不禁水。2.STZ50mg/kg体重，单次腹腔注射，对照组动物腹腔注射等体积0.1mol/L柠檬酸盐缓冲液。,2019/12/10,吉林大学药学院,85,3注射STZ后24h48h，尿糖试纸测尿糖，应在3+及以上，必要时切去尾尖取血测定血糖浓度。1周后糖尿病大鼠表现多饮、多食、多尿和体重明显减轻，再次测定尿糖，尿糖在3+及以上、血糖值16.67mmol/L者列入糖尿病动物。,2019/12/10,吉林大学药学院,86,造模方法,大鼠制备糖尿病模型以STZ50mg/kg体重，腹腔注射为适宜。,2019/12/10,吉林大学药学院,87,模型特点,此模型类似人类I型糖尿病，是目前国内外应用最多的糖尿病动物模型。,2019/12/10,吉林大学药学院,88,*注意事项,1、注射STZ后，血糖变化可分3个时相：*短暂高血糖相（注射STZ后14h）；*低血糖相（612h）；*稳定高血糖相（注射STZ后24h）。,2019/12/10,吉林大学药学院,89,短暂高血糖相B细胞急剧受损，分泌至血中的胰岛素明显下降。低血糖相受累B细胞将贮存的胰岛素突然释放入血。*为减少注射STZ后低血糖的危险，于STZ注射后4h或立即腹腔注射25%葡萄糖溶液2ml。稳定高血糖相B细胞受损，合成胰岛素减少。,2019/12/10,吉林大学药学院,90,注意事项,2、STZ常用的给药途径以静脉和腹腔注射最常用。,2019/12/10,吉林大学药学院,91,注意事项,3、STZ诱发糖尿病的剂量与动物种类、品系、年龄和性别有关。一般雄性、成年和体重大的大鼠成模率比较高。动物状态、性别亦应注意。,2019/12/10,吉林大学药学院,92,注意事项,4、STZ纯品为结晶粉状，在室温下和冷藏室内不稳定，须放置20或70长期保存。其水溶液应在pH4.0，低温保存，用前现配。一般用柠檬酸盐缓冲液配制成1%2%浓度，该溶液呈透明、微黄色。,2019/12/10,吉林大学药学院,93,注意事项,5.关于成模标准血糖值11.116.67mmol/L作为糖尿病大鼠空腹或非空腹的成模标准。因有的动物在糖尿病成模后有自发缓解现象，主张注射STZ后1周测定血糖，确定模型复制是否成功。,2019/12/10,吉林大学药学院,94,注意事项,6.降血糖药物具有刺激胰岛素分泌作用者，不宜选用STZ或下述四氧嘧啶诱发的高血糖动物模型，应在正常动物或自发性糖尿病动物进行研究。,2019/12/10,吉林大学药学院,95,注意事项,7.小鼠或大鼠在形成高血糖30d后，少数动物的高血糖有所缓解，这是由于动物的胰腺腺泡细胞增殖并转变为B细胞所致。,2019/12/10,吉林大学药学院,96,注意事项,8.对于血糖过高的动物可皮下注射长效胰岛素2U，使血糖控制在16.722.2mmol/L，维持体重，降低死亡率。,（三）四氧嘧啶诱发糖尿病模型,2019/12/10,吉林大学药学院,98,实验原理,同STZ致糖尿病。,2019/12/10,吉林大学药学院,99,实验动物,大鼠、小鼠、兔、犬、猫和猴等。,2019/12/10,吉林大学药学院,100,实验试剂,四氧嘧啶，用注射用水或生理盐水新鲜配制成1%3%的溶液。,2019/12/10,吉林大学药学院,101,方案1：一次小剂量静脉注射,大鼠禁食12h后按四氧嘧啶3040mg/kg体重尾静脉或舌下静脉1次性注射。18h后出现持续性高血糖伴多饮、多尿等症状，随后血糖达16.67mmol/L以上，稳定2周后可作为糖尿病模型。特点：节省药物，成模率高，但技术要求高。,2019/12/10,吉林大学药学院,102,方案2：一次大剂量腹腔注射,大鼠禁食12h后，将新鲜配制的四氧嘧啶溶液按150200mg/kg体重1次腹腔注射，24h后血糖值16.67mmol/L，持续2周以上可选作糖尿病模型。特点：成模率尚可，但部分动物在三周内可自然缓解。,2019/12/10,吉林大学药学院,103,方案3：二次中剂量腹腔注射,大鼠禁食12h后，第1d将新鲜配制的四氧嘧啶溶液按120mg/kg体重腹腔注射，第2d大鼠禁食12h后再按100mg/kg体重腹腔注射。特点:成模率高，缓解率低，死亡率比腹腔注射200mg/kg体重明显降低。,2019/12/10,吉林大学药学院,104,方案4：小鼠大剂量腹腔注射,成年小鼠禁食12h后，将新鲜配制的四氧嘧啶溶液按200mg/kg体重1次腹腔注射，24h后血糖值16.67mmol/L，持续2周以上可选作糖尿病模型。,2019/12/10,吉林大学药学院,105,模型特点,1四氧嘧啶与STZ所致糖尿病的特征基本相同。血糖的变化也分为三个时相。2多种给药途径，最常用的是静脉注射。动物注射前应禁食，注射应在30S内完成，注射越快越容易引起糖尿病。3四氧嘧啶溶液pH7.0时须保存在4以下（半衰期3h）。此药久置可减效。,2019/12/10,吉林大学药学院,106,模型特点,4*但豚鼠对四氧嘧啶有抵抗作用。5.影响四氧嘧啶致病的因素包括动物种类、给药途径和速度、食物及营养状态等。6.自行缓解(小鼠大鼠)。,（四）自发性I型糖尿病模型,2019/12/10,吉林大学药学院,108,1.BBWistar大鼠（远交系）。2.日本盐野义研究所的原发性糖尿病小鼠。3.NOD小鼠典型的1型糖尿病动物模型，其发病机制可能与免疫介导的胰岛炎有关。,二、大鼠II型糖尿病模型,（一）小剂量STZ加高脂高糖饮食大鼠模型*,2019/12/10,吉林大学药学院,111,造模原理,给大鼠注射小剂量STZ，造成胰岛B细胞轻度损伤，使多数动物产生糖耐量异常，在此基础上给动物喂饲高热量食物，引起动物肥胖，同时伴有高血脂、高胰岛素血症及胰岛素抵抗。,2019/12/10,吉林大学药学院,112,操作方法,1大鼠静脉注射STZ2530mg/kg体重（配制和应用方法同前），23周后进行葡萄糖耐量试验。2选择口服葡萄糖耐量异常者，饲以高脂高糖半合成饲料。,2019/12/10,吉林大学药学院,113,结果,1模型的成模率约70%？。2模型组动物肥胖，体重明显高于正常对照组。3模型组糖耐量异常和血糖升高。4.模型组动物血清胰岛素增高（或正常）。,（二）高脂高糖饮食加小剂量STZ大鼠模型*,2019/12/10,吉林大学药学院,115,造模原理,先给动物喂饲高糖高脂食物，诱发胰岛素抵抗，再腹腔注射小剂量STZ，造成胰岛B细胞轻度损伤，诱发胰岛素代偿性分泌障碍，使动物产生高血糖。,2019/12/10,吉林大学药学院,116,结果,1喂饲高糖高脂饲料4周后（注射STZ之前），大鼠体重明显增加，并出现高胰岛素血症、胰岛素抵抗、高脂血症和高血压。血糖升高，但未达到糖尿病标准。2注射STZ(30mg/kg一次或两次)后大鼠血糖不同程度升高，血胰岛素降至正常或偏低，其他异常继续存在。,（三）多次小剂量使用STZ大鼠模型*,（四）自发性2型糖尿病动物模型,2019/12/10,吉林大学药学院,119,NSY;kk;ob/ob;db/db;OLETF;GK;中国仓鼠。,2019/12/10,吉林大学药学院,120,2型糖尿病模型评价,*由于2型糖尿病的发病既有遗传因素的作用又有环境因素的影响，无论是自发性还是实验诱导性模型，均不能完全模拟人类2型糖尿病。,2019/12/10,吉林大学药学院,121,沙鼠,蒙古沙鼠,梳鼠等栖息于沙漠中啮齿类动物给予普通饲料也会出现高血糖、高血脂、高胰岛素血症。,2019/12/10,吉林大学药学院,122,三、糖尿病动物模型的观察指标,1血糖2糖耐量试验3果糖胺和糖化血红蛋白含量4糖原合成的测定5糖异生的测定6血胰岛素含量7血乳酸水平,2019/12/10,吉林大学药学院,123,葡萄糖耐量实验（glucosetolerancetest，GTT）,采集禁食动物血（0时）给予葡萄糖（或淀粉/蔗糖）测量给予糖后0、30、60和120min血糖含量,2019/12/10,吉林大学药学院,124,糖耐量实验,第三节胰岛素抵抗动物模型（insulinresistance，IR）,2019/12/10,吉林大学药学院,126,靶细胞对胰岛素不敏感即胰岛素抵抗继发的高胰岛素血症糖耐量减低,2型糖尿病,肥胖,脂代谢异常,高血压及冠心病等胰岛素抵抗综合征(X综合征),2019/12/10,吉林大学药学院,127,一、遗传型模型,Zucker肥胖大鼠出生4-5周即明显肥胖。高胰岛素血症、高脂血症、高糖皮质激素血症和IR血糖一般正常水平,自发形成稳定的IR状态，适用于发生机制研究,2019/12/10,吉林大学药学院,128,Wistar肥胖大鼠肥胖、高胰岛素血症、高甘油三脂血症雄性多高血糖胰岛素合成和分泌增加ob/ob显著肥胖、高血糖、高胰岛素血症和IR,2019/12/10,吉林大学药学院,129,db/db血浆胰岛素水平升高OLETF大鼠多食、肥胖、多饮、多尿30周龄时90%雄性大鼠发生糖尿病,2019/12/10,吉林大学药学院,130,二、喂养型,高脂膳食高糖膳食模型特点是可靠、稳定，价格低廉，适用于IR干预实验,2019/12/10,吉林大学药学院,131,三、药物型,多次、小剂量使用STZ也可复制出大鼠II型糖尿病模型，100%存在IR。很少使用。谷氨酸钠诱导肥胖性胰岛素抵抗动物模型。,2019/12/10,吉林大学药学院,132,四、胰岛素抵抗动物模型的观察指标,1胰岛素耐量2胰岛素敏感指数ISI1/（空腹血糖空腹胰岛素）ISIIn1/（空腹血糖空腹胰岛素）3糖化蛋白水平、糖原合成和糖异生的测定及血胰岛素含量测定4钳夹技术*,2019/12/10,吉林大学药学院,133,*正常血糖-高血浆胰岛素钳夹技术检测胰岛素敏感性,判断模型是否成功。,2019/12/10,吉林大学药学院,134,原理：输注胰岛素以维持血胰岛素在一个高水平线上，同时又输注葡萄糖以维持血糖在基础水平，由于输注的高胰岛素水平使血糖不断代谢，要维持血糖在原来的基础水平上须不断输注葡萄糖。当葡萄糖输注速率和代谢速率达到平衡时，此时的葡萄糖输注速率就等于体内各组织