实验二 FeCl3中微量铁的测定.ppt

实验二FeCl3中微量铁的测定,目的,掌握使用分光光度计.掌握标准曲线法进行定量分析掌握分光光度法测定药物或水中铁含量的操作方法及原理.,原理,铁是药物和水中常见的一种杂质,含量大时易产生特殊气味,因此对药物和饮水中的铁要进行检查和测定.选择显色剂的基本原则亚铁离子与邻二氮菲生成稳定的橙红色配合物.Fe2+,应用此反应可测定铁,当铁以Fe3+离子形式存在于溶液中时,可预先用还原剂(盐酸羟胺或对苯二酚等)将其还原为Fe2+离子.及显色条件的选择显色时,溶液PH值应为29.若酸度过高(PH2）显色缓慢而色浅;若酸度过低,二价铁离子易水解.最大吸收波长为508nm,=11100.,仪器与试剂,(1)722型分光光度计(2)容量瓶(10ml，7个);(3)吸量管(2,1ml)(4)洗耳球(5)擦镜纸(6)标准铁溶液(20g/ml)(7)邻二氮菲0.1%水溶液(8)盐酸羟胺1%水溶液(用时配制)(9)HCA-NaAc缓冲溶液(10)FeCl3待测液,四.操作步骤,1.标准曲线的制作以标准溶液的浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制成A-C曲线即为标准曲线。,具体步骤：在6只10ml容量瓶中，用吸量管分别加入0.0,0.4,0.8,1.2,1.6,2.0ml铁标准溶液(硫酸铁铵每ml含Fe3+20g),分别加入0.2ml盐酸羟胺,0.4ml邻二氮菲,1.0mlHAc-NaAc缓冲溶液,用水稀释至刻度后摇匀,放置5min.用1cm比色皿,以0.0ml铁标液为试剂空白,在所选波长(508nm)下,测量各溶液的吸光度.以铁含量为横坐标,吸光度A为纵坐标,绘制标准曲线.,2.FeCl3样测定,以FeCl3为样品,准确吸取样1.00ml(或适量),置10ml容量瓶中.按上述制备标准曲线的方法配制溶液并测定吸光度,根据测得的吸光度求出FeCl3样中总铁量.据FeCl3样测得吸光度查出铁含量.,（1）在相同条件下测定样品溶液的吸光度，即可从标准曲线查出样品溶液中被除测组分的浓度，（2）将一系列标准溶液的浓度与相应的吸光度，进行线性回归，然后将样品溶液的吸光度引入回归方程，计算样品溶液中被测组分的浓度。由于线性回归法制备的标准曲线，比手绘法更客观，所以目前文献报到多采用此法。,标准曲线制备实例精密称取对照品1.110mg用甲醇溶解并定容至10ml，用移液管精密移取0.4ml,0.8ml，1.2ml，1.6ml，2.0ml，2.4ml分别定容于10ml容量瓶，以此为对照溶液，在268nm下测其吸收度，测定结果见表Table2,Table2LinearRelationshipofStandardMaterialNO.contentsofstandardAmaterial(mg/l)14.44000.09228.88000.187313.3200.277417.7600.365522.2000.458626.6400.553,对对照品的吸收度和浓度进行线性回归，得回归方程：A=0.02063C+0.0014=0.99993(A:吸收度，C:浓度)标准品在4.44026.640mg/L范围内A与C呈良好线性关系。以对照品溶液的浓度为横坐标，吸收度为纵坐标，绘制标准曲线，见Fig3。,以对照品浓度对吸收度作图，得直线，见Fig3,Fig5normalcurveofstandardmaterial,思考题,显色反应操作中,加入的各标准溶液与样品液的含酸量不同,对显色有无影响?据制备标准曲线测得的数据,判断本次实验得浓度与吸光度间的线性好不好,分析其原因.,注意事项,待测溶液装量应超过比色皿2/3，但也不能装得太满。实验过程中，注意不要将溶液撒入机器内部，如果发生上述情况，请及时清理干净。比色皿用后，请洗净后，用95%乙醇浸泡，长期不用，请擦干后，收好.,附：722型分光光度计使用方法,开机后需预热20分钟。波长设定需从短波向长波方向调整。调零